MICROPROPAGACION

ACTIVIDAD 10
TENIENDO EN CUENTA EL MATERIAL DIDACTICO PRESENTE EN LA
PLATAFORMA, DESARROLLAR LAS SIGUIENTES ACTIVIDADES.
1.- ELABORE UNA SECUENCIA LOGICA SOBRE LAS ETAPAS DE LA
MICROPROPAGACION.
 Micropropagación
 Método de propagar plantas usando
partes muy pequeñas de ésta (explantos),
que se desarrollan en cultivos estériles (in
vitro).

 Se usa en la producción de especies

hortícolas, aromáticas, medicinales,
frutícolas, ornamentales y forestales.
• Ventajas Micropropagación / métodos convencionales
 Multiplicación acelerada del número de plantas,

 Menor tiempo de multiplicación,

 Producción permanente de material (no hay

estacionalidad),

 Mayor cantidad de plantas en una superficie pequeña (en

tiempos y costos económicamente viables),

 Mayor control sobre la sanidad del material propagado,

 Mayor Facilidad para el transporte del material in vitro,

Desventajas Micropropagación / métodos convencionales

 Instalaciones muy especializadas

 Personal especializado

 Contaminación

 Protocolos no estandarizados

 Menor tamaño de las plántulas

 Transición heterotrofía/autotrofía

 Costos: producción a gran escala

• El cultivo in vitro exige un control absoluto
del ambiente, tanto químico como físico,
en el que se sitúa al explanto.
– AMBIENTE QUÍMICO
Medio de Cultivo
pH
– AMBIENTE FÍSICO
Temperatura
Luz
 Etapas dentro del proceso de
micropropagación
− 0: Selección y Preparación de la planta madre.

− 1: Desinfección del material vegetal.

− 2: Introducción del material seleccionado in vitro.

− 3: Multiplicación de brotes.

− 4: Enraizamiento.

− 5: Aclimatación
 Etapa 0:
PREPARACIÓN DE LA PLANTA MADRE
• Se deben obtener explantos con un nivel nutricional y un
grado de desarrollo adecuado.

• Para esto es recomendable mantener a las plantas madre un

período de tiempo que puede ser entre unas semanas o
varios meses, en un invernadero, en condiciones sanitarias
óptimas, bajo condiciones controladas.
− Recomendable que crezca en invernadero o cámara de crecimiento

− Usar material homogéneo

− Elegir plantas vigorosas

− Promover nuevas brotaciones con podas severas

− En maceta con sustrato estéril

− Programa sanitario

−
• Las plantas madres influyen en la capacidad
regenerativa del explanto obtenido de ellas debido a:

Genotipo: Dicotiledóneas mejor que monocotiledóneas, y entre

ellas las Solanáceas y crucíferas son de muy fácil
regeneración.

Edad: Partes juveniles mejor que las adultas

Estado del órgano o tejido: Mejor no leñosos

Estado fisiológico: Partes vegetativas mejor que partes

generativas
Estado sanitario: Las más saludables y vigorosas son
mejores

Condiciones de crecimiento: diferente respuesta si crece en

campo que en invernadero

Tamaño del explanto: En general a mayor tamaño mayor

capacidad regenerativa
 Etapa 1:
DESINFECCIÓN DEL MATERIAL VEGETAL

 Se extraen los fragmentos de la planta madre a partir de los

cuales se obtendrán los explantos (yemas, trozos de hojas,
porciones de raíces, semillas, etc).

 Se hace una desinfección de los fragmentos, con soluciones

desinfectantes (etanol-hipoclorito de sodio), para eliminar
contaminantes externos y poder extraer los explantos.
• Se trabaja en cámaras de flujo laminar en condiciones
de asepsia para extraer los explantos a partir del
material vegetal.

• Estos explantos se introducen en un tubo de cultivo que

contenga un medio de iniciación para poder controlar la
sanidad y la viabilidad.
 Esquema de la etapa 1 del proceso de micropropagación

Fragmento

Explantos

Planta Segmentos uninodales

Madre
 Etapa 2:
INTRODUCCIÓN DEL MATERIAL IN VITRO

• Los explantos, se ponen en un medio de cultivo estéril.

• En 7 a 15 días, comienza el proceso de germinación o

regeneración de nuevos tejidos vegetales, iniciando el ciclo
de cultivo in vitro.
 Etapa 3:
MULTIPLICACIÓN DE LOS BROTES

• En esta fase los explantos originan brotes con varias hojas.

• En la base de cada hoja hay una yema que se desarrollará si

se pone en contacto con el medio de cultivo.

• Periódicamente estos nuevos brotes se deben subcultivar en

un nuevo medio, mediante divisiones y resiembras en
condiciones de asepsia.
Esquema del proceso de multiplicación de los brotes

Brote de Explanto

División del Brote

Siembra y resiembra de
brotes
 Etapa 4:
ELECCIÓN DE UN MEDIO DE ENRAIZAMIENTO DE LOS
EXPLANTOS
• Para enraizar los explantos se utilizan
principalmente dos métodos:
– Enraizamiento in vitro

– Enraizamiento ex vitro
Embrión Germinado
In Vitro
Enraizamiento
in vitro

Enraizamiento
ex vitro
• ENRAIZAMIENTO IN VITRO

• En la cámara de flujo laminar, se transfieren los

explantos a un medio que solo contenga auxinas.

• Este método permite más flexibilidad para escoger

los brotes, ya que éstos obtienen del medio de
cultivo la fuente de energía para enraizar, y por
tanto no es necesario que tengan las hojas muy
bien desarrolladas para realizar la fotosíntesis.
• ENRAIZAMIENTO EX VITRO
• Los explantos se transfirieren a un sustrato
limpio, que puede ser una mezcla de turba con
perlita o vermiculita.

• El medio de enraizamiento debe estar libre de

patógenos y los brotes deben tener las hojas bien
desarrolladas, ya que deben realizar fotosíntesis,
para tener energía para enraizar y desarrollarse.
• Los explantos se plantan en contenedores
cubiertos por un plástico, para mantener la
humedad relativa elevada, y hacerlos enraizar
en el laboratorio, o dentro de un invernadero
en un área sombreada y con "mist-system".
fase de enraizado ex vitro.
Fotografía de un cultivo en la fase de enraizado ex vitro.
 Etapa V:
ACLIMATACIÓN DE LOS EXPLANTOS ENRAIZADOS

• Los explantos son muy sensibles a los cambios

ambientales, por lo que el éxito o el fracaso de todo
el proceso depende de la aclimatación.

• Los explantos enraizados in vitro están poco

adaptados a crecer en invernadero porque sus
estomas no son completamente funcionales, además
de la falta de una cutícula con cera bien desarrollada
para evitar la perdida de agua.
• Los explantos deben ser aclimatados a las condiciones
de humedad del invernadero disminuyendo en forma
progresiva la humedad relativa y aumentando
progresivamente la intensidad de luz.

• Estos explantos se llevan a contenedores cubierto con

un plástico para mantener una lata humedad relativa.

• Para trasplantar, se elige un sustrato suelto, poroso,

con mezcla de arena y turba, para lograr un desarrollo
y crecimiento rápido de raíces.
Aclimatación en contenedores cubierto con plástico
• Se debe controlar la humedad, para mantener
un ambiente húmedo a nivel del sustrato.

• A los 15 días del trasplante, se puede

comenzar a levantar la cobertura de nylon en
las horas de menor calor.
Planta entera
Microtúnel

Esquema del proceso de aclimatación ex vitro

• Los cambios deben ser muy graduales para
minimizar el estrés y tener mayor tasa de
sobrevivencia, ya que las condiciones del
cultivo in vitro, genera cambios en algunos
aspectos anatómicos y fisiológicos de las
plantas como estomas no completamente
funcionales, y falta de cutícula con cera bien
desarrollada para evitar perdida de agua.
Comparación de las características de una
planta in vitro respecto a una planta in vivo
Planta In vitro Planta In vivo
No realiza fotosíntesis Realiza fotosíntesis

Crecimiento en condiciones Crecimiento en condiciones no

controladas controladas

Crecimiento en condiciones de Exposición a patógenos y

asepsia gérmenes del ambiente

Alta humedad relativa Humedad relativa variable

Estomas no funcionales Estomas funcionales

Ausencia de pelos radiculares Presencia de pelos radiculares

Ausencia de cera en la cutícula Presencia de cera en la cutícula

 Propagación in vitro de vid variedad Red Globe

Explante de yema axilar Brotes de vid que muestran Plántula de vid aclimatada al
mostrando nuevos brotes las raíces inducidas por el sustrato en condiciones de
en la axila de cada hoja, ácido indolacético invernadero, funcionando su
60 días después de su actividad autótrofa
cultivo in vitro
2.- ¿DESDE EL PUNTO DE VISTA DE LA AGRONOMIA, PORQUE ES
IMPORTANTE PRACTICAR LA CLONACION EN LOS CULTIVOS? SUSTENTE
SU RESPUESTA.
 Estas técnicas pueden ser utilizadas como una
herramienta para la producción rápida y masiva de
plantas, para la producción de material de propagación
libre de enfermedades y plagas.

 uno de los propósitos que se ha buscado en las plantas es

conservar características deseadas y volver un poco
predecibles los cultivos, para así tener control sobre la
producción agrícola. Una de las formas de garantizar esta
uniformidad es a través de la clonación de plantas a
través de cualquiera de las técnicas antes descritas.

 Sin embargo, el uso de la clonación de plantas en los

campos de cultivo trae sus riesgos, uno de ellos es el
asociado a la pérdida de diversidad.
El hombre ha comprendido el alcance de estos procesos
de clonación sacando provecho de ellos, logrando
importantes avances al desarrollo de la agricultura, sin
embargo, debe tomar algunas medidas que permitan el
mantenimiento de la agro biodiversidad (diversidad de las
especies cultivadas), garantizando la coexistencia de la
agricultura y la diversidad.