Crecimiento Bacteriano

Clase 8 y 9
MATERIAL PROPIEDAD DEUDLA.
AUTORIZADA SU UTILIZACIÓN SÓLO PARAFINES ACADÉMICOS.
 MEDIDAS DEL CRECIMIENTOMICROBIANO:

1. SE MIDE SIGUIENDO LOS CAMBIOS EN ELNUMERO DE CELULAS O EL

PESO DE LABIOMASACELULAR.
2. EXISTEN DIVERSOS METODOS :

– RECUENTO DIRECTO AL MICROSCOPIO (recuentototal)

– RECUENTO EN PLACAS (recuento células vivas)
– METODO DE LASDILUCIONES
– TURBIDIMETRIA
– NÚMERO MAS PROBABLE
RECUENTO TOTAL DE CÉLULAS:

CARACTERÍSTICAS:

1.-‐ES UNA MANERA RÁPIDA DE ESTIMAR EL NUMERO DE CELULAS

MICROBIANAS

2.-‐EL Número DE Células DE UNA POBLACION PUEDE MEDIRSE DIRECTAMENTE

AL MICROSCOPIO (RECUENTODIRECTO).

3.-‐SE PUEDEN UTILIZAR DOS TIPOS DE MUESTRAS:

SECAS LIQUIDAS
RECUENTO TOTAL DE CELULAS:
LIMITACIONES:
• LAS CELULAS PEQUEÑAS SON DIFICILES DE VER AL MICROSCOPIO YALGUNAS DE
ELLAS PROBABLEMENTE NO SECUENTAN.

• LAS CELULAS MUERTAS NO SE DISTINGUEN DE LAS VIVAS.

• SE REQUIERE TIEMPO Y HABILIDAD PARA CONSEGUIR Precisión PARA ESTE

METODO.

• SE REQUIERE UN MICROSCOPIO DE CONTRASTE DE FASES CUANDO LA MUESTRA

NO ESTATEÑIDA.

• ESTE METODO NO ES BUENO PARA UNA SUSPENSION DE BACTERIAS POCO DENSA.

RECUENTO EN PLACAS ( células viables)

• Células vivas son CAPACES DE FORMAR COLONIAS SOBRE LA

SUPERFICIE DE UN MEDIO SOLIDO.

• EXISTEN DOS FORMAS DE RECUENTO EN PLACA:

1. SIEMBRA EN SUPERFICIE (0,1 mL)

2. VERTIDO EN PLACA (1 mL)
Determinación de la viabilidad mediante la determinación de
unidad formadora de coloniaufc/mL células viables.
Limitaciones
1. Microorganismo

2. Condiciones de
cultivo

3. Diluciones

4. Varias replicas
MÉTODO DE LASDILUCIONES

• Células vivas son CAPACES DE FORMAR COLONIAS SOBRE LA

SUPERFICIE DE UN MEDIO SOLIDO.

• CONSIDERACIONES-‐LIMITACIONES

En los métodos anteriores el número de colonias que se forman en cada placa

no debe ser muy alto, para poder contar adecuadamente y tampoco muy
bajo para que el recuento tenga un significadoestadístico.

• la practica habitual es que el numero de colonias oscile entre 25 y 250 por

placa.

• para obtener un numero de colonias apropiado la muestra debe ser casi

siempre diluida dependiendo de su procedencia.

• normalmente es necesario realizar mas de una dilución, generalmente

seriadas en base 10.
MÉTODO DE LATURBIDEZ:
métodos espectrofotométricos

Espectrofotometría: capacidad de las particulas de absorber luz

MÉTODO NÚMERO MÁSPROBABLE (NMP)
1. Es eficiente.
2. Permite una estimación de densidades poblacionales especialmente cuando
una evaluación cuantitativa de células individuales no es factible.

¿En qué se basa?

En la determinación de presencia (+) o ausencia (-) en réplicas de diluciones
consecutivas de microorganismos presentes en muestras de suelo u otros
ambientes ( análisis de aguas)

Ventajas del NMP son:

(i) la capacidad de estimar tamaños poblacionales basados en atributos

relacionados a un proceso (selectividad). Ej: coliformes totales v/s fecales
(ii) provee una recuperación uniforme de las poblaciones microbianas
(iii) determina sólo organismos vivos y activos metabólicamente,
(iv) suele ser más rápido e igual de confiable que los métodos tradicionales de
esparcimiento en platos de cultivo, entre otros.
MATERIAL ACADÉMICO PROPIEDAD DE UDLA, ELABORADO POR LORENA
LEMUS GALLARDO