Fitopatología

Area Biodiversidad Vegetal y Microbiana

Campo Experimental “Villarino”
Casilla de Correo Nº 14 - S2125ZAA
Zavalla - Santa Fe – Argentina
www.fcagr.unr.edu.ar – agro@unr.edu.ar
 JORNADAS DE PROTECCIÓN VEGETAL

Estrategias de Manejo sustentable de

Enfermedades
Docente: Profesora Rosanna Pioli
Dra. Or. Ciencias Biológicas. Esc. Grad. Fac. Cs. Bioquímicas y Farmacéuticas, UNR.
Investigador Cat. II (Máx. I) PNI. Ingeniera Agrónoma. Fac. Cs. Agrarias, UNR.
Profesor Adjunto, Cátedra Fitopatología, Carrera Ingeniería Agronómica.
Profesor A / Cargo Botánica Criptogámica, Lic. Recursos Naturales y Biodiversidad
Area Biodiversidad Vegetal y Microbiana: Responsable Titular del Laboratorio BioVyM

2014
De acuerdo a la Reunión Mundial sobre Alimentación 1996.
“La seguridad alimentaria ocurre o existe cuando toda la gente y de
manera sostenida en el tiempo tiene acceso a un alimento suficiente,
seguro y nutritivo para mantener una vida sana y activa”

Propuesta derivada de la presentación del Tema Calidad Sanitaria

Generar estrategias de producción de cultivos y semillas sustentables y
en armonía con la vida urbana, rural y la preservación del ambiente.

2014
 PLANTA SANA
es aquella que puede desarrollar sus funciones fisiológicas y
expresar su potencial genético
 LOS PATÓGENOS

Origen Biótico HONGOS

BACTERIAS
VIRUS

Origen Abiótico Factores externos

Climáticos edáficos
Stress hídrico
Anegamiento
Fitotoxicidad

Factores medio vegetal

Stress nutricional
Factores fisiológicos
 PRIMER PERCEPCIÓN
ENFERMEDAD
Resultante de la Interacción
Genotipo planta – Ambiente - Poblaciones microbianas

LA OBSERVACIÓN
Expresión de la planta
los síntomas

Hartman, Il.U
 Expresión del Patógeno Fúngico
peritecios acérvulas

Picnidios

Peritecios
 El Sistema planta-patógeno-ambiente
AMBIENTE
Macro Aéreo Edáfico FAVORABLE
MANEJO de SUELO y
Micro ambiente BIÓTICO-ABIÓTICO CULTIVO
vegetal

Tiempo Espacio

INTERACCIÓN
COMPATIBLE
ENFERMEDAD

PATÓGENO CULTIVO
LA OBSERVACIÓN PRIMARIA Sn y Sg
DIAGNÓSTICO

ESTUDIOS EPIDEMIOLÓGICOS

CUANTIFICACIÓN

SELECCIÓN de GENOTIPOS

ESTRATEGIAS CONTROL SUSTENTABLES

Ciclo de las relaciones hospedante-patógeno
Ciclo de la enfermedad

Supervivencia y Diseminación Se y Rt

Contacto y Penetración
Ciclo patogénico

Incubación
Infección
Latencia
Invasión y Colonización

Reproducción
DURACIÓN = 6, 15 a 45 días
Supervivencia y Diseminación
 HOSPEDANTE – Estados de desarrollo

FL R5

Foto EMBRAPA

PERÍODOS Vegetativo Reproductivo

Nº de granos Peso
RIESGO

La magnitud de las pérdidas depende de la etapa de desarrollo de cultivo

 CICLOS BIOLÓGICOS
FUENTES Y TIPO DE INÓCULO
BIOTROFOS
BIO HETEROTROFOS
RELACIÓN CICLOS - BIOLOGICOS DEL PATÓGENO
- DE ENFERMEDAD

symptoms

Penetration Fin Incubación

Host recognition

Host plant
signs

Gral. Fase asexual

Fin latencia

Fase sexual

Agrios, 2005

AMBIENTE – combinaciones Tº- Humedad

Progreso y Dinámica (nº de ciclos) de la Enfermedad
 EL PATÓGENO y LOS SIGNOS
- a. Macro esclerotos internos, de color
negro en tallos y también en vainas.
- b. Esclerotos en contaminación
concomitante con las semillas.
- c. Esclerotos (indicado por flecha)
produciendo apotecios.

Berlin D. Nelson
b ND Univ

apotecios

c escleroto
a Cristina Palacio
CICLO BIOLÓGICO de S. sclerotiorum

A Sustrato intermedio
colonizado
 Patógenos Hemi Biotrofos

ETAPA PARASÍTICA sobre el CULTIVO – Fase asexual

APS Tapari

R. Pioli

ETAPA SAPROFÍTICA – Fase sexual- teleomorfo

SUPERVIVENCIA RASTROJO
R. Pioli

VARIABILIDAD GENÉTICA SEMILLAS

HOSPEDANTES
INÓCULO PRIMARIO
R. Pioli
Control de las enfermedades y particularmente
las transmisibles a semillas

Prácticas culturales
Rotaciones Diseño Espaciamiento/Densidad de plantas **

Estrategias genéticas
Evaluación y detección de germoplasma resistente

Estrategias químicas
Bio fungicidas Producción de bio moléculas
Manejo y aplicación sustentables de las actuales
 Estrategias
Epidemiológicas - Culturales
ALGUNAS ESTRATEGIAS A SEGUIR

Conocer las fuentes de inóculo

Estimar Inóculo Potencial

Disminuir el Inóculo
 Patógenos Hemi Biotrofos

ETAPA PARASÍTICA sobre el CULTIVO – Fase asexual

APS Tapari

R. Pioli

ETAPA SAPROFÍTICA – Fase sexual- teleomorfo

SUPERVIVENCIA RASTROJO
R. Pioli

VARIABILIDAD GENÉTICA SEMILLAS

INÓCULO PRIMARIO HOSPEDANTES

R. Pioli
Introducción de Fuente de inóculo 1º
Hongos asociados a semillas
SÍNTOMAS EN SEMILLAS causados por EFC y OTROS

Muchas gracias
 Transmisión
Ciclo S Pl PM S Pl
 Importancia de la Asociación Patógeno / Semilla

Importancia Económica

c- La magnitud del daño puede ser evaluado en diferentes momentos o estadios

de desarrollo del cultivo, mediante monitoreos:

1- De emergencia- mortandad de plántulas en pre siembra, durante

y posterior a la emergencia.

2- Durante el cultivo, evaluando cuantitativa y cualitativamente las

pérdidas.

3- Durante el período de almacenamiento.

 Importancia Epifitiológica
La semilla contaminada o infestada
es la semilla que sólo transporta o acarrea los microorganismos
superficialmente

La semilla infectada
es aquella capaz de transmitir al patógeno a la plántula originada.
Esta interacción patógeno semillas puede generar distintos niveles de
daño:
- Daño actual o individual de la semilla de mala calidad.
- Daño potencial posterior a la siembra y sobre el futuro cultivo.
- La semilla infectada constituye un sustrato efectivo para la
supervivencia de los patógenos asegurándoles longevidad.
* La semilla actúa como vehículo de transmisión de patógenos
a distancia
1º Inóculo colonizador
* Representa la primera introducción y/o migración de nuevas
patologías desde lotes contaminados a lotes libres
 II- Infección y Mecanismos de transmisión de enfermedades
de semillas

II.a- Concepto de un Ciclo de Transmisión:

Se refiere al proceso de transferencia del patógeno y su posterior
establecimiento en la planta originada.
Desde la semilla a la planta originada
Desde la planta madre a sus semillas

Esta asociación semillas - planta madre – semillas – plántula

suele denominarse TRANSMISION
II.b- Importancia:
La transmisión por semillas es un proceso muy eficiente por dos aspectos:
En el momento de la siembra posibilita la distribución
homogénea del inóculo.
Favorece la infección precoz de la planta,
Coincide con los momentos de mayor susceptibilidad.
 Patógenos asociados a semillas
Momento de infección
Relación con Cultivo antecesor
 B. VIAS de PENETRACIÓN e INFECCIÓN
C. TEJIDOS COLONIZADOS: Semillas y/o Frutos

Porciones
FRUTOS

DISTAL MEDIA PROXIMAL

SEMILLAS

INCIDENCIA DE LOS PATÓGENOS

en SEMILLAS y porciones de FRUTOS
ubicadas en posición P, M, D
Comunicaciones Biológicas, 2004; Fitopatología, 2000
2- Métodos Indirectos
en Medio de cultivo
PATOLOGÍAS EN SEMILLAS
Relación entre Incidencia de patógenos en semillas de soja, el poder germinativo,
y el % de semilla infectada y muerta (Pioli et al., 1997)
V.b- Tasas epidemiológicas - Secuencia de determinación

a- Tasa de Inóculo en Semilla

b- Densidad de Inóculo

c- Tasa de Transmisión

d- Tasa de aumento de inóculo

e- Tasa de Restablecimiento del Inóculo

f- Tasa de Reducción de la productividad

 Interacciones de Patógenos de ciclo
reproductivo asociados a frutos y
semillas de soja
con insectos
 INTERACCIONES PATÓGENOS de FIN DE CICLO
e INSECTOS
Congreso Mundial soja. Rev. INTA Oliveros

El daño patogénico en semillas está directamente relacionado al nivel de chinche / m2

- A mayor cantidad de chinches se observó una mayor incidencia de bacterias y

Fusarium asociados a la semilla de soja.

- Las semillas con daño severo causado por chinche presentaron mayor incidencia de
Phomopsis spp. y Alternaria spp.

- Cercospora kikuchii fue más frecuente en semilla sana y en ausencia de otros

patógenos.
Patógenos asociados a frutos y semillas
de especies arbóreas
potenciales Hospedantes secundarios
Patógenos en frutos y semillas de Especies forestales nativas
su relación con la viabilidad de semillas
 III.d- Factores que afectan los Resultados

El equipamiento: Puede acarrear problemas de contaminación y obstaculizar la

identificación o alterando los recuentos.
Técnicas auxiliares: Se relacionan fundamentalmente con las condiciones de limpieza
y asepsia.
El Número y Tamaño de la Muestra:
El Tamaño y representatividad de la muestra.
Los análisis deben ajustarse a las Normas Internacionales fijadas por ISTA.
Las condiciones y tiempo de almacenamiento de las muestras.
La semilla:
Considerar datos sobre temperatura y humedad de cosecha, acondicionamiento,
secado y almacenamiento.
Edad de la semilla y la posibilidad de supervivencia del patógeno.
El Patógeno:
Formas y etapas de supervivencia en patógenos biotrofos y hemi-biotrofos.
Momento de infección y su ubicación en la semilla.
 V.a- Patrones de Tolerancia

Factores que inciden en su determinación:

métodos de análisis de semillas utilizados
importancia económica de la especie
el destino geográfico: que se envíe a zonas que actualmente están libres,
pero donde las condiciones ambientales favorecen al patógeno.
factibilidad de control
determinación de la concentración del inóculo en las muestras de semilla y
en el suelo de los lotes de producción.

Los parámetros considerados para la fijación de Patrones de Tolerancia,

son la secuencia de una serie de determinaciones conocidas
como Tasas epidemiológicas
V.b- Tasas epidemiológicas - Secuencia de determinación

a- Tasa de Inóculo en Semilla

b- Densidad de Inóculo

c- Tasa de Transmisión

d- Tasa de aumento de inóculo

e- Tasa de Restablecimiento del Inóculo

f- Tasa de Reducción de la productividad

Fuentes de inóculo 1º ya establecidas
Hongos asociados a Rastrojo
 Evaluó el efecto de

Degradación del rastrojo y Evolución

de población patógena

Dos rotaciones M-S-T/S y T/S

Dos tipos de labranzas SD y LV
Factores climáticos (Tº-HR-Ppt)
Micota total y específica asociada

sobre el proceso de degradación del rastrojo de trigo

a través del tiempo.
Degradación anual del rastrojo de trigo
Período de 12 meses
 PERSPECTIVAS

Estrategias de Control Cultural

y Químico
Efecto de Tratamientos Culturales y Químicos sobre
Patógenos asociados a Rastrojo

En cada Bloque T1-SD T2-LM T3- F1 T4- F2

Colonias y picnidios
de P. longicolla
 UFC – P. longicolla asociado a 2 tipos de residuos
de cosecha de soja
P. longicolla asociado al rastrojo de soja Tablas 1 y 2. Valores promedio de ufc de PL por
g rastrojo de soja, bajo 4 tratamientos diferentes
(ufc / g rastrojo)

Tabla 1: Trozos de tallo de mayor grosor Tabla 2: Trozos de ramificaciones finas

T1 SD T2 LM T3 F1 T4 F2 T1 SD T2 LM T3 F1 T4 F2

7489,5 a 4583,2 b 1952,2 c 11,0 c 14209,7 a 5525,8 b 426,5 c 3624,4 bc

Letras diferentes indican diferencias significativas entre los grupos, para Duncan con =0,05.
 RESULTADOS DE RENDIMIENTO
en SD Te, LMTe, SD F1 y SD F2

Rendimiento (kg/ha) en parcelas de Soja

con 4 Tratamientos del Rastrojo
TeSD, TeLM, F1SD, F2SD
Rendimiento kg ha

4200,0 a a a
4000,0
3800,0 b*
4082 3979 4032
3600,0
3616
3400,0
3200,0
1 2 3 4
Tratamientos
 Los resultados indicaron:
a) La población patogénica asociada al rastrojo decreció de
manera significativa en aquellas parcelas sometidas a alguna
alternativa de control,

sea cultural (T2-Labranza Mínima)

o químicas (T3-FA y T4-FB)

b) Propuesta sugerida para la aplicación de químicos: es en

estadios vegetativos tempranos del cultivo
para protección de plántulas y
tratamiento de la fuente de inóculo primario: rastrojos
(Backman 1985; FCA 2003-2007).
Control de las enfermedades y particularmente
las transmisibles a semillas

Prácticas culturales
Rotaciones Diseño Espaciamiento/Densidad de plantas

Estrategias genéticas **
Evaluación y detección de germoplasma resistente

Estrategias químicas
Bio fungicidas Producción de bio moléculas
Manejo y aplicación sustentables de las actuales
Estrategias genéticas: Caracterización de
interacciones P-P
Inoculación y selección
 Estudio de respuestas fisiológicas de defensa vegetal
inducidas por hongos foliares en cultivos de soja y trigo

Beccacece Stella; Galli Nora; Giuntoli Gustavo; Uboldi Luciana;

Zanotti Eric; Pioli Rosanna.
Objetivos:
Detectar el incremento/disminución de algunos compuestos
vegetales isoflavonoides, proteinas totales y actividad de enzimas
peroxidasas, inducidos en respuesta a la inoculación natural de
patógenos foliares.

Identificar cuál/cuáles podrían ser utilizados como moléculas

antifúngicas endógenas en soja y otras especies (trigo).

Difundir estas nuevas alternativas o herramientas bio-químicas

naturales para minimizar el riesgo de enfermedades de cultivo.
 Apical

Basal

S: H. Sanas In: H. Inferctadas Sf: 2 Secciones

Foliares
 Proteinas Totales frente a MOR

mg.PT / ml.Ec
44 b
41
38

35 a
32
29
1 2
H. Sanas H. Infectadas

Fig. 3b : Comparaci ó n de valores medios

de mg PT / ml Ec en hojas Sanas e
Infectadas

41
a
mg PT / ml Ec

39

37
b
35

33

31
1 2
Sf . Apical Sf . Basal

Fig. 4 : Comparaci ó n de valores medios de

mg PT / ml Ec en 2 secciones foliares ( Sf ).
 µmoles prod / min.mg

18
a
µmoles prod / min.mg

16
a

µmoles prod / min.mg

16 15
a
de enz
de enz

de enz
14
14 b
13
12
12

10
11
1 2
1 2
H. Sanas H. Infectadas
Sec. apicales Sec. basales
Fig. 5: Comparación de valores medios de µmoles Fig. 6: Comparación de valores medios de µmoles prod / min.mg
prod / min.mg de enz.,peroxidasa en Hojas Sanas e de enz., peroxidasa entre las secciones apicales y basales de la
Infectadas lámina.

CONCLUSIONES
El contenido de Proteínas Totales se incrementó en las hojas con síntomas de la enfermedad MOR respecto a las hojas
asintomáticas; y coincide con las respuestas previamente evaluadas sobre hojas expuestas a otras patologías (Beccacece y col., 2009).
La Actividad Peroxidasa, sin embargo, fue inducida y se manifestó diferencialmente en hojas, que aun habiendo estado expuestas al
mismo ambiente y patógeno C. sojina, no mostraron síntomas de MOR.
Si bien frente a esta enfermedad, la AP fue similar en secciones Apicales y Basales, en evaluaciones previas, la distribución de PT y
AP fue heterogénea en la lámina foliar.
En próximos estudios se realizarán proteinogramas en extractos de genotipos con respuesta diferencial a la exposición al patógeno a
fin de identificar otras proteínas potencialmente inducidas durante la interacción G. max – C. sojina.
 PRÁCTICAS DE MANEJO DE LA ENFERMEDAD

a. Disminuir el inóculo inicial Disminuir la tasa

b.
y tasa constante epidémica
Enfermedad Enfermedad

d.p.i.
d.p.i.

c
Disminuir el tiempo
Enfermedad de exposición a. y c. ESTRATEGIAS CULTURALES
•
• a. y b. ESTRATEGIAS QUÍMICAS
•
a. y b. ESTRATEGIAS GENÉTICAS
•
•
d.p.i. Vanderplank, 1963
Control de las enfermedades y particularmente
las transmisibles a semillas

Prácticas culturales
Rotaciones Diseño Espaciamiento/Densidad de plantas

Estrategias genéticas
Evaluación y detección de germoplasma resistente

Estrategias químicas
Bio fungicidas Producción de bio moléculas **
Manejo y aplicación sustentables de las actuales
Control de las enfermedades fúngicas
Estrategias químicas - Exógenas

Fungicidas vía pulverización

sobre los órganos
exógenos aéreos
 Estructuras de los antifúngicos comerciales más comunes
N N

Estrobirulinas Azoxistrobin
O O

C O C O
C C CH3
N
O H
H3C

O
Benzimidazoles H
N
Carbendazim
OCH3
NH

CH3

H2C CH2

Triazoles Cl CH N Penconazol
H2C N
N
Cl
QUÍMICOS NATURALES
 Estrategias genéticas - endógenas
Bio fungicidas – Prod. Químicos Metabolómicas

N
O

OCH3

OCH3

R1

R2 N
H

R3 H3C

Respuesta endógena N
H

R1

O
HO

de la planta
R2 N
CH CH
CH3
H3C C
N R3 R4
CH3 N
H2C CH2
N
H3C R1
Cl CH N

H2C N
N
Cl R2 N

R3

H3C

H N
 Los patógenos fueron aislados y
cultivados en condiciones
adecuadas para promover la
fructificación

APGA
 Gel de poliacrilamida

Cebador: OP-AA01 Cebador: OP-AA06

EtOH

Bioensayo

Extractos
(EET)
Dilución en agar
 Incubación a 28 ºC ( 48 - 72 h)

250 125 100 62,5 50 25 12,5 6,25 3,12 1,56 

CIM: concentración inhibitoria mínima

Selección de compuestos naturales anti-fúngicos

Fungicidas endógenos
Los compuestos más activos fueron las chalconas,
particularmente activos frente a
P. longicolla, C. truncatum, F. graminearum y N.
oryzae.

Las flavanonas y el éster derivado del ácido

cafeico mostraron buena actividad frente a
P. longicolla y N. oryzae.
Gracias