Universidad Autónoma de Baja California

Facultad de ciencias Químicas e Ingenierías 

Laboratorio de Bioquímica de los alimentos 

Practica #7 Determinación de carbohidratos totales
 Químico Industrial 

Integrantes:
Oscar Torres (01256558)
Alan Hernández (01216655)
Docente:
Espindola Ordoñez Michelle Aline
25 de Noviembre del 2021
Competencia
Establecer la metodología para la determinación de carbohidratos totales
contenidos en muestras de alimentos

Fundamento:
Los carbohidratos son biomoléculas que tienen una gran importancia en el campo
de la investigación de las ciencias de la vida y en la aplicación industrial derivada
de ello. De ahí, la importancia en su determinación y cuantificación. En la literatura
se han reportado diferentes métodos analíticos para la determinación de
carbohidratos, basados en la espectrofotometría, la cromatografía líquida de alta
resolución (HPLC), la refractometría, entre otras.

Todos los carbohidratos tanto oligosacáridos como polisacáridos pueden ser

determinados, pues bajo hidrólisis ácida producen monosacáridos. La adición de
algunos ácidos minerales a las soluciones acuosas de carbohidratos, como el
ácido sulfúrico al igual que el fosfórico y el clorhídrico, provoca la deshidratación
de los carbohidratos con la eliminación de tres moles de agua
Aparatos e instrumentos:

 Balanza analítica
 Agitador vortex

Materiales y reactivos:

 Recipiente para pesar

 Tubos de ensaye con rosca
 Pipeta volumétrica de 1 mL
 Pipeta graduada de 5ml
 Ácido sulfúrico 96%
 Sln de fenol al 5% p/v

Procedimiento para elaborar la curva de calibración estándar:

Preparar soluciones de glucosa de concentraciones 10, 30, 40, 50, 60, 80 y 100 ug/ml

Colocar los tubos de ensayo en una gradilla y etiquetarlos como 1, 2 y 3 para cada
solución y dos más etiquetados como blanco 1 y blanco 2

A los tres primeros tubos colocar 1ml de solución correspondiente y en los tubos de
blancos adicionar 1ml de agua

Adicionar 1ml de solución de fenol a cada tubo y agitar

Con la pipeta de 5 ml agregar 5ml de ácido sulfúrico

Agitar en el vortex y dejar reposar por 25 minutos

Leer la absorbancia a 488 nm una vez que lo tubos estén a temperatura ambiente y
registrar esos valores

Determinar la absorbancia promedio y restarla a la absorbancia del blanco

Procedimiento para el análisis de muestras:

Pesar entre 1 y 5 g de la muestra homogenizada considerando el contenido de azucares,

transferirlos a un matraz volumétrico de 1 L

Adicionar agua, poco a poco agitando con fuerza para favorecer que la muestra se
disperse lo mejor posible, una vez realizado esto afore y agite nuevamente

Si la solución esta turbia filtrar por gravedad una pequeña porción de la muestra (20 ml
aprox)

Seguir los pasos del 2 al 8 que se realizaron para elaborar la curva de calibración
estándar

La concentración de carbohidratos es determinada utilizando una curva patrón estándar

de referencia, preparada para el carbohidrato a ensayar

Resultados:

Tabla de datos para la curva

Longitud de onda: 488 nm

Concentració
n
0.01 0.03 0.04 0.05 0.06 0.08 0.1
Glucosa
mg/ml
Absorbancia -0.151 -0.046 0.062 0.205 0.025 0.544 1.197
La concentración de 0.06 se desprecia ya que el valor de la absorbancia es muy
baja

Resultado de la muestra:

Masa de la muestra: 5 gramos

Volumen de la muestra: 1 litro

Muestra Absorbancia Concentración Concentración

obtenida final
Tubo 1 3.059
Tubo 2 3.308
Tubo 3 3.308

Cuestionario:

1. ¿Cuáles alimentos contienen azucares reductores?

Los frutos con pepita, las denominadas pomas o pomos (manzanas, membrillos y
peras) también tienen glucosa y fructosa pero en este caso la proporción de
fructosa es mayor

2. Consulte que tipo de monosacáridos o disacáridos contienen el jugo de

fruta, la miel , la leche, el azúcar y azúcar flor
 3. ¿Por qué la sacarosa es un azúcar no reductor?

La razón por la que la sacarosa es una azúcar no reductora es que no tiene

ningún aldehído libre o un grupo ceto

4. Escriba la reacción entre glucosa y el reactivo de Tollens

5. Dibuja la estructura química de 2,4-Dinitrofenilhidrazina (2,4-DFH)

6. Escriba la reacción entre glucosa y 2,4-DFH

Referencias:

https://riplix.com/cuales-son-los-alimentos-que-contienen-azucares-
reductoreshttps://riplix.com/cuales-son-los-alimentos-que-contienen-azucares-
reductores

https://www.geniolandia.com/13166289/por-que-la-sacarosa-es-un-azucar-no-
reductora

https://www.quimicaorganica.org/aldehidos-y-cetonas/235-ensayo-de-la-24-
dinitrofenilhidrazina.html