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1 ANALISIS DE RESULTADOS

En esta sección se presentan los resultados de todas las experiencias


llevadas a cabo y un análisis de cada resultado.

1.1 CONCENTRACIÓN INICIAL Y CURVA DE CRECIMIENTO

1.1.1 Calibración del Espectrofotómetro


Los datos de absorbancia para las diferentes concentraciones son mostrados en la siguiente
tabla:

Factor Absorbancia

Cepa inicial 1,538


1N1 1,077
1N2 0,923
1N3 0,769
1N4 0,616
1N5 0,462
1N6 0,308
1N7 0,161
1N8 0,016
1N9 0,006
H2O + azúcar 0,000

Tabla 7: Datos de Absorbancia vs. Concentración

Para encontrar la curva de calibración de la absorbancia frente a la


concentración de la muestra se grafican estos datos, excluyendo los
valores para la cepa inicial. Se grafica el log 10[C] en función de la
absorbancia. Donde C es concentración.
Figura 17: Grafica log10(c) vs. Absorbancia

Estos datos se ajustan a una línea de tendencia para encontrar una


ecuación que describa el comportamiento de la concentración en
función de la absorbancia.

Figura 18: linea de tendencia, Grafica log10(c) vs. Absorbancia

La ecuación que describe como varía la absorbancia con la


concentración de la levadura estudiada es:
Esta ecuación será de ayuda para determinar la concentración de una
solución desconocida conociendo su absorbancia.

1.1.2 Curva de Crecimiento

Los datos obtenidos del espectrofotómetro para el crecimiento poblacional son los siguientes:

Tiempo Absorbancia
0 0,045
1 0,064
2 0,098
3 0,131
4 0,145
5 0,156
6 0,19
7 0,214
8 0,247
9 0,276
10 0,308
11 0,331
12 0,358
13 0,388
14 0,418
15 0,446
16 0,481
17 0,511
18 0,544
19 0,561
20 0,562
Tabla 8: Datos de Absorbancia con respecto al tiempo

A partir de estos datos experimentales, y con la ecuación determinada


en la calibración del espectrofotómetro se determina la concentración
con respecto al tiempo.

Como se desea observar la curva de crecimiento de la levadura en estas


condiciones, se realiza la gráfica log C vs. t y se obtiene la grafica
deseada.

De la curva de calibración:

Para un t=6 horas, tenemos una concentración de:

C = 3,3239E-05
De esta forma se realizan todos los cálculos respectivos para obtener los datos de la siguiente
tabla:

Tiempo Absorbancia logC C


0 0,045 -8,039416 9,13238E-09
1 0,064 -7,9072672 1,23803E-08
2 0,098 -7,6707904 2,13407E-08
3 0,131 -7,4412688 3,62019E-08
4 0,145 -7,343896 4,53006E-08
5 0,156 -7,2673888 5,4027E-08
6 0,19 -7,030912 9,31297E-08
7 0,214 -6,8639872 1,36777E-07
8 0,247 -6,6344656 2,32025E-07
9 0,276 -6,4327648 3,69177E-07
10 0,308 -6,2101984 6,16313E-07
11 0,331 -6,0502288 8,90782E-07
12 0,358 -5,8624384 1,37266E-06
13 0,388 -5,6537824 2,21931E-06
14 0,418 -5,4451264 3,58817E-06
15 0,446 -5,2503808 5,61848E-06
16 0,481 -5,0069488 9,84127E-06
17 0,511 -4,7982928 1,59114E-05
18 0,544 -4,5687712 2,69916E-05
19 0,561 -4,4505328 3,54378E-05
20 0,562 -4,4435776 3,60099E-05
Tabla 9: Calculo de la concentración para los diferentes tiempos

Hay que resaltar que los datos de concentración de la tabla 9 están en


función de los factores de la curva de calibración.
Figura 19: Curva de crecimiento celular

En la figura 19 se observa que al iniciar con la toma de datos estos


parten de la etapa o fase exponencial, esto es debido al tiempo que el
grupo dejó que la levadura se adaptara al medio cultivo, se observa
claramente la fase exponencial y la fase estacionara máxima. La curva
no sigue a otras fases debido a que la densidad lumínica de la
Saccharomyces Cerevisiae sólo nos permite tomar mediciones hasta que
la transmitancia tome un valor de 6% 1, según la literatura después de
este valor de transmitancia no son confiables los datos tomados.

1.1.3 Determinación de los Parámetros Cinéticos


Los parámetros a determinar en este estudio fueron μx velocidad
específica de crecimiento (h-1), y el tiempo de duplicación (h). Ahora
bien, para determinar estos parámetros cinéticos se parte del balance
de materia:

Donde; V permanece constante entonces.

Se despeja y se integra, obteniendo:


1
Otterstedt, K. Larsson, C. Bill, R. Stahlberg, A. Boles, E. Hohmann, S y Gustafsson, L. 2004.
Switching the mode of metabolism in the yeast Saccharomyces Cerevisiae. European Molecular
Biology Organization. Vol 5.
De esta forma se obtiene una línea recta en la que y= m*x donde m = µ.

Para este caso solo se toman los valores de la etapa exponencial de la hora 0
hasta la hora 11.5 (tabla 10), posteriormente se graficó la concentración en
función del tiempo y con base en esto se estableció la ecuación de la línea de
tendencia.

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