Producción de metabolitos de plantas con

aplicaciones en la industria alimentaria

utilizando microorganismos diseñados.

Reflejos
 Los metabolitos vegetales tienen numerosas aplicaciones en
la industria alimentaria .
 La mayoría de los metabolitos de plantas con aplicaciones alimentarias son (poli)
fenoles y terpenoides.
 Los microorganismos pueden ser diseñados para producir metabolitos de plantas.
 El suministro de precursores y la toxicidad del producto son limitaciones clave
durante la producción microbiana.

Los metabolitos secundarios de las plantas se usan ampliamente en las industrias

alimentarias actuales, por ejemplo, como agentes colorantes, agentes aromatizantes o
agentes texturizantes. En particular, los metabolitos con propiedades antioxidantes
encuentran aplicaciones como conservantes o agentes anti-pardeamiento. Hoy en día, la
extracción de material vegetal representa la fuente principal de estos metabolitos, pero el
progreso en el campo de la ingeniería metabólica también permitió la producción
microbiana de estos compuestos valiosos como una alternativa más económica y
ecológica. Este artículo de revisión presenta el estado actual de la ingeniería metabólica de
microorganismos para la producción de metabolitos vegetales con aplicaciones en las
industrias alimentarias. Nos centramos en los compuestos, que ya se utilizan en
aplicaciones alimentarias, discutimos las limitaciones actuales de la producción de
metabolitos de plantas microbianas
Introducción
Los aditivos alimentarios generalmente mejoran la calidad de los alimentos, modifican
la textura o estructura de los alimentos o aumentan la vida útil de los alimentos . La calidad,
así como la textura y la estructura están relacionadas con la impresión visual o el sabor,
mientras que una mayor vida útil se debe a la protección contra el deterioro o la
contaminación con microorganismos como hongos y bacterias . La mayoría de
los fitoquímicos con aplicaciones en las industrias alimentarias son
secundarias metabolitos, que no son esenciales para la planta de crecimiento y propagación,
pero permiten la interacción de la planta con su biótico y abiótico medio ambiente [1 ]. Las
funciones naturales de estos compuestos incluyen la protección contra la radiación UV , la
eliminación de radicales, la defensa contra bacterias fitopatógenas , hongos o virus , o la
atracción de polinizadores [2 ]. Características tales como las actividades antioxidantes
y antimicrobianas hacen que los metabolitos de las plantas sean interesantes para
aplicaciones alimentarias. Los metabolitos secundarios de las plantas se pueden agrupar en
tres clases principales, a saber , fenoles , terpenoides y alcaloides . Los compuestos de la
misma clase de metabolito secundario se sintetizan típicamente a partir del mismo conjunto
de precursoresProcedentes del metabolismo primario delcarbono. Los fenoles vegetales
(incluida la gran clase de polifenoles) se derivan de aminoácidos aromáticos, mientras que
los terpenoides se producen a partir de intermedios de la glucólisis (ya sea acetil-CoA o
piruvato / gliceraldehído-3-fosfato) [ 3]. Los alcaloides son una clase estructuralmente más
diversa deheterociclosN, que se derivan de los tres aminoácidos aromáticos o de glutamato ,
aspartato oglicina[4]. Dado que la mayoría de los compuestos derivados de plantas
relevantes para aplicaciones alimenticias son fenoles (por ejemplo, fenilpropanoides, ácidos
hidroxibenzoicos, flavonoides)., cumarinas y curcuminoides) o terpenoides ( por
ejemplo , monoterpenos , sesquiterpenos o diterpenos), nos centramos en estos y no
analizamos más los alcaloides . Un pequeño número de compuestos relevantes, que no se
pueden asignar a fenoles o terpenoides, son glucósidos , aminoácidos, proteínas o
vitaminas.
Hoy en día, la mayoría de los metabolitos secundarios de las plantas se obtienen
por extracción directa de material vegetal. Esta estrategia solo es económicamente viable
para un número muy pequeño de compuestos derivados de plantas. La extracción de
material vegetal como una estrategia general para obtener acceso a estos compuestos es
generalmente un desafío porque las plantas a menudo contienen mezclas
complejas de metabolitos secundarios químicamente relacionados . Además, no todos los
compuestos deseados se producen en todo momento y en todos los tejidos de las plantas , y
las concentraciones de productos están sujetas a variaciones estacionales y geográficas. Por
el contrario , los microorganismos diseñados para la producción de metabolitos de plantas
representan una alternativa prometedora, ya que alcanzan altas tasas de crecimiento y
pueden cultivarse fácilmente en medios de cultivo baratos que producen altas
concentraciones de biomasa.
En este artículo de revisión describimos el estado actual de la ingeniería metabólica de
microorganismos para la producción de metabolitos de plantas con aplicaciones en las
industrias alimentarias. Nos centramos en los compuestos, que ya se utilizan en
aplicaciones alimentarias, discutimos las limitaciones actuales de la producción de
metabolitos microbianos de las plantas y delineamos estrategias sobre cómo estos desafíos
se pueden abordar en el futuro. En el contexto de las aplicaciones alimentarias, los
metabolitos secundarios de las plantas se pueden clasificar de dos maneras: primero, con
base en la misma área de aplicación o segundo, según la clase de compuestos naturales a
los que pertenecen. Dado que la estrategia de ingeniería metabólica durante eldesarrollo de
la cepa microbiana depende en gran medida de las respectivas moléculas precursoras, que
deben ser proporcionados por el metabolismo microbiano endógeno , organizamos el texto
de acuerdo con la última clasificación .
Compuestos fenólicos
Los fenoles derivados de plantas comprenden una gran familia de compuestos aromáticos
que van desde los ácidos benzoicos monocíclicos hidroxilados a los compuestos
policíclicos más complejos, como los estilbenos y los flavonoides [ 5 ] ( Figura 1 ). Los
aromáticos monocíclicos naturales, que se utilizan como agentes aromatizantes, incluyen,
por ejemplo, vainillina (4-hidroxi-3-metoxi-benzaldehído), benzaldehído y cetona
de frambuesa [4- (4-hidroxifenil) -2-butanona]. La vainillina, el agente aromatizante más
importante utilizado en todo el mundo, puede en principio extraerse de los frijoles de
la orquídea vainilla [ 6]. Sin embargo, la baja concentración de vainillina en el productor
natural hace que la extracción de vainillina a gran escala sea costosa. De hecho, menos del
1% de la vainillina producida globalmente se obtiene de la vainilla orquídea ( Vanilla
planifolia) hoy, mientras que la mayoría de la vainillina se produce
con microorganismos diseñados [ 6 ]. Por lo general, la vainillina se produce
por biotransformación del ácido ferúlico utilizando Escherichia coli , Pseudomonas
fluorescens o Streptomyces sannanensis como huéspedes de producción.. Para este fin, las
vías catabólicas microbianas para el ácido ferúlico que conducen a la vainillina a menudo
se explotan [ 7 , 8 ]. Alternativamente, se puede usar un proceso de cultivo combinado que
involucre Aspergillus niger y Pycnoporus cinnabarinus [ 9 , 10 , 11 , 12 ]. Cabe destacar
que el rendimiento de conversión de ácido ferúlico a vainillina más alto informado fue del
75% en Amycolatopsis sp. [ 13 , 14 ]. En contraste , la producción de vainillina a partir de
glucosa barata podría establecerse con éxito en Schizosaccharomyces
pombe ySaccharomyces cerevisiae [15• ]. En este estudio, la vía de shikimato formadora de
aminoácidos aromáticos naturales se reclutó para la producción del protocatequato
de precursor aromático , que luego se convirtió en vainillina por reduccióny posterior O-
metilación (Figura 1 ). Sin embargo, los títulos deproductos más bien bajos de 65 mg / L
(0,42 mM) y 45 mg / L (0,30 mM), respectivamente, prohíben cualquier aplicación a gran
escala de estas cepas. Curiosamente, la introducción de
una glicosiltransferasa deArabidopsis thaliana enS. cerevisiae, permitió la producción de
hasta 500 mg / L (1.59 mM) de vainillina β- D -glucósido, que tiene aplicaciones similares a
la de la vainillina pero resultó ser menos tóxico para el huésped microbiano [ 16 ]. En 2014,
se pudo demostrar que una sola enzima, la vanilina sintasa de V. planifolia , es capaz de
convertir el ácido ferúlico en vainillina [ 17 ]. Esta enzima es muy interesante para futuras
biotransformaciones microbianas del ácido ferúlico, ya que solo un genheterólogo necesita
expresarse funcionalmente.
Figura 1 . Vías biosintéticas para fenoles derivados de plantas relevantes
para aplicaciones alimentarias .
El benzaldehído, un componente importante del aceite de almendra , es un importante
compuesto aromatizante para pasteles y otros productos horneados [ 18 ]. La producción de
0,79 g / L (7,5 mM) de benzaldehído podría lograrse en el hongo P. cinnabarinus a partir
de 1 - fenilalanina suplementada [ 19 ]. Con este fin, el aminoácido aromático se desaminó
primero en ácido fenilpropanoide cinámico. Posteriormente, las mismas enzimas relevantes
para convertir el ácido ferúlico en vainillina en este microorganismo se explotaron para
convertir el ácido cinámico en benzaldehído.
La vía biosintética que conduce a la cetona de la frambuesa [4- (4-hidroxifenil) butan-2-
ona] como compuesto de aroma primario en frambuesas, se reconstruyó en S. cerevisiae  ,
lo que permitió títulos de productos de hasta 7.5 mg / L (0.045 mM). )
del ácido p- coumáricosuplementado ( Figura 1 ) [ 20 ]. El ácido gálico ( ácido 3,4,5-
trihidroxibenzoico) representa el precursor de diferentes ésteres degalato (aditivos
alimentarios E310, E311, E312), que se utilizan como antioxidantes para proteger los
aceites y las grasas de la oxidación [ 21]. Ya en el año 2000, se logró la producción de 20
g / L (118 mM) de ácido gálico en E. coli mediante la desregulación de la vía del shikimate
y la oxidación de la vía intermedia del ácido 3-dehydroshikimic al ácido gálico [ 22 • ].
Los fenoles más complejos con aplicaciones alimentarias incluyen ésteres
fenilpropanoides, cumarinas , curcuminas y varios miembros de la gran familia de los
flavonoides, en particular las antocianinas . Se demostró la producción de antioxidantes
como el éster fenilpropanoide rosmarínico y la umbeliferona cumarina en E. coli mediante
la introducción funcional de las enzimas convertidoras de fenilpropanoide ácido
rosmarínico sintasa y  p- coumarato 6'-hidroxilasa, respectivamente [ 23 , 24]. Con cepas
diseñadas aún más para aumentar el suministro de precursores, se podrían obtener títulos de
producto de 130 mg / L (0,36 mM) de ácido rosmarínico y de 66 mg / L (0,41 mM) de
umbeliferona. La curcumina (E100) es un colorante y sabor amarillo natural producido
originalmente por la cúrcuma ( Curcuma longa ). Se sintetiza a través de la conjugación del
ácido ferúlico fenilpropanoide y una dicetida del ácido ferúlico catalizada por
curcuminoides sintasas. La introducción funcional de una curcuminoide sintasa
del arroz ( Oryza sativa ) en E. coli permitió la acumulación de 60 mg / L (0.16 mM) de
curcumina en el sobrenadante del cultivo [ 25 ].Neohesperidin dihydrochalcone (E959), una
chalcone rutinosilada que se encuentra en los cítricos , se utiliza como edulcorante natural
en bebidas , yogur y helados . Aunque este compuesto no fue producida en microbios
modificados hasta ahora, dihidrochalcona naringina, un compuesto muy similar que difiere
de neohesperidina dihidrochalcona solamente por un solo Ogrupo metil, podría ser
producido por un ingenieríaS. cerevisiaecepa [26 • ]. Con una cepa que expresa genes
heterólogos que codifican nueve enzimas, sepodría lograr una producciónde novode 12
mg / L (0.021 mM) de naringina dihidrocalcona.
Para la producción microbiana de antocianinas de plantas coloridas (E163), E. coli ha sido
diseñada extensivamente en los últimos 15 años [ 27 , 28 ]. Hasta hoy, se obtuvo el título
más alto de 350 mg / l de cianidina-3- O- glucósido (0,78 mM) en
una biotransformación de catequina [ 29 ]. Más recientemente, la producción de 10 mg / L
(0.023 mM) de pelargonidin-3 O -glucósido se logró mediante un policultivo de
cuatro cepas de E. coli diseñadas por ingeniería genética [ 30 •• ]. Corynebacterium
glutamicum y S. cerevisiaese utilizaron para la producción de varios
otros polifenoles vegetales , en particular estilbenos ( por ejemplo, resveratrol)
y flavonoides ( por ejemplo, quercetina) [ 31 • , 32 , 33 •• ]. La aplicación de
diferentes estrategias de ingeniería metabólica para la producción microbiana de estilbenos
importantes y otros flavonoides se ha revisado con más detalle recientemente [ 34 ].
Terpenoides
Los terpenoides (también conocidos como isoprenoides) son moléculasalifáticas o
aromáticas , que en la mayoría de los casos se forman
por ciclación de moléculas precursoras , que a su vez se derivan de la condensación de dos
a ocho unidades de isopreno (2-metil-1,3-butadieno). ) [ 35] (Figura
2 ). Las moléculas precursoras terpenoides proporcionadas por el metabolismo central
del carbono son acetil-CoA(vía mevalonato) o piruvato y gliceraldehído-3-fosfato (vía
fosfato de metileritritol, también conocida como vía no mevalonato) ( Figura 2) [36]. Los
monoterpenos (C 10 ), compuestos derivados de dos unidades de isopreno, se usan
típicamente como saborizantes y odorantes, por ejemplo, linalool (olor similar a la
lavándula), α-pineno (sabor de tipo leñoso), terpineol (sabor de tipo lila / conífera), mentol
(sabor tipo menta), timol (olor característico del tomillo) y carvacrol (sabor tipo
picante). Algunos de estos compuestos también tienen propiedades antimicrobianas o
antioxidantes [ 37 , 38 ].
igura 2 . Vías biosintéticas que conducen a terpenos derivados de plantas relevantes
para aplicaciones alimentarias . Abreviatura : PP: difosfato.
La producción microbiana de linalool se demostró en una cepa de levadura de vino de S.
cerevisiae . Después de la introducción funcional de una linalool sintasa de la flor
silvestre Clarkia breweri, la ceparecombinante acumuló 80 μg / L (0,52 μM) de linalool del
precursor de geranildifosfato suministrado por el metabolismo isoprenoide de
la levadura endógena [ 39 ]. En un estudio más reciente, se alcanzó un título de producto
comparable de 96 μg / l (0,62 μM) cuando el gen de linalool sintasa de Lavandula
angustifolia se expresó funcionalmente enS. cerevisiae [ 40 ]. Además, se explotaron E.
coli y C. glutamicum para la producción del α-pineno monoterpeno ( Figura 2 )
[ 41 • , 42 ]. En ambos organismos, se coexpresaron genes heterólogos que codifican una
geranil difosfato sintasa y una pineno sintasa. Durante el cultivo en agitación, se cultivó
la cepa de C. glutamicum diseñada hasta 0,18 mg / L (1,3 µM) de α-pineno acumulado en
el sobrenadante [ 41 • ], mientras que un título máximo del productode 5.4 mg / L (40 μM) y
970 mg / L (7.1 mM) de α-pineno podrían determinarse durante los cultivos de agitación en
el matraz y en el lote alimentado, respectivamente, utilizando una cepa de E. coli diseñada
en consecuencia [ 42 ]. La producción biotecnológica del sabor natural α-terpineol podría
realizarse en una configuración de biotransformación a partir de limoneno suplementado o
con β-pineno empleando levadura y hongoscomo Fusarium oxysporum y Penicillium
digitatum como organismos hospedadores [ 43 , 44 , 45]. Estos enfoques llevaron a títulos
generales de productos que oscilaron entre 1.8 y 4 g / L (12.1–26.0 mM). Siguiendo una
estrategia similar en E. coli  , el mentol se produjo a partir de pulegona o
mediante hidrólisis de acetato de mentilo [ 46 , 47 ].
Los sesquiterpenos (C 15 ) son moléculas cíclicas derivadas del difosfato de farnesilo
precursor, que a su vez se obtiene de la condensación de tres unidades de isopreno. Los
sesquiterpenos relevantes para aplicaciones alimentarias son, por ejemplo, valenceno y
nootkatona. El valenceno es un compuesto aromático de los cítricos y sirve como un
precursor para la producción de nootkatone, el compuesto determinante del sabor en
la toronja [ 48 ]. C. glutamicum , que produce naturalmente la decaprenoxantina
isoprenoide C 50 , se diseñó para la producción de valenceno [ 49 ]. En experimentos
iniciales, expresión heteróloga.de un gen que codifica la valenceno sintasa de Citrus
sinensis no condujo a la producción de valenceno. Después de la eliminación de
la actividad preniltransferasa endógena de la competencia y aumentando el flujo hacia la
vía de fosfato de metileritritol que suministra isoprenoides, se obtuvieron 2,4 mg / l (0,011
mM) de valenceno utilizando una valenceno sintasa alternativa de Callitropsis
nootkatensis (Nootka cypress) [ 49 ]. La misma enzima también se introdujo
funcionalmente en una cepa de Rhodobacter sphaeroides , que coexpresó genes heterólogos
que codifican enzimas de la vía de mevalonato formador de farnesil difosfato [ 50]]. Esta
estrategia llevó a la producción de 352 mg / L (1.73 mM) de valenceno. La producción de
nootkatone se demostró en Pichia pastoris [ 51 ]. La cepa de producción expresó un gen que
codifica una hidroxi-metilglutaril-CoA reductasa truncada , la enzima limitante de la
velocidad de la vía del mevalonato, junto con un gen que codifica la C.
nootkatensis valenceno sintasa. Para la hidroxilación de valenceno, un
remnaspirodiene oxigenasa gen se expresó, además, y una endógena alcohol
deshidrogenasa era capaz de convertir el nootkatol resultante para nootkatona [ 51]. La cepa
final acumuló hasta 208 mg / L (0,95 mM) de nootkatone a partir de glucosa. En un
enfoque diferente, se analizaron seis microorganismos con respecto a una conversión
eficiente de valenceno a nootkatone [ 52 ]. En estos experimentos, Botryodiplodia
theobromae y Yarrowia lipolytica se identificaron como una alternativa microbiana
prometedora para la producción de nootkatona.
Diterpenos más complejos (C 20 ) derivados a partir de cuatro unidades de isopreno
incluyen ácido carnósico (E392) y el carnosol ( Figura 2 ), ambos de los cuales son potentes
antioxidantes y agentes anti-cáncer putativas que se encuentran en extractos de romero
[ 53 ]. La vía completa para la producción de carnosol fue aclarada y reconstruida en S.
cerevisiae [ 54 • ]. Los precursores de tetraterpeno (C 40 ) obtenidos de ocho moléculas de
isopreno dan lugar a carotenoides como el β-caroteno y el licopeno (E160d) ( Figura 2 ),
que se utilizan como colorantes naturales o antioxidantes [ 55 ]. Unel operón para
la biosíntesis de β-caroteno de la bacteria Pantoea agglomerans se expresó funcionalmente
en  E. coli , permitiendo principalmente la síntesis de β-caroteno en este microorganismo
[ 56 •• ]. Posteriormente, se moduló la actividad del metabolismo central del carbono (ciclo
del citrato, vía de fosfato de pentosa , síntesis de ATP) de la cepa huésped y se analizó
sistemáticamente el impacto en la síntesis de β-caroteno. Un fondo
genético optimizado finalmente permitió la producción de β-caroteno 2.1 g / L (3.9
mM). En s . CerevisiaeLa expresión de genes heterólogos que codifican enzimas de la vía
del β-caroteno en Xanthophyllomyces dendrorhous condujo a la producción de 5,9 mg
(0,011 mM) de β-caroteno por gramo de peso seco [ 57 ]. Recientemente se
revisaron estrategias de ingeniería metabólica muy similares que permiten la producción
microbiana de licopeno [ 58 ]. Digno de mención, el más altos registrados título de licopeno
de se pudo llegar a 1,44 g / L (2,7 mM) que emplea una ingeniería de E. coli cepa que
expresa genes de la bacteria Pantoea ananatis [ 59 ].
Los apocarotenoides son compuestos de tipo terpeno, que se producen por la escisión
oxidativa de los carotenoides ( Figura 2 ) [ 60 ]. La β-ionona, característica del aroma de las
violetas, es un importante agente saborizante producido en una escala de 8,000 toneladas
por año [ 61 ]. Seintrodujo funcionalmente una dioxigenasa de β-caroteno de Petunia x
hybrida en unacepa de S. cerevisiae productora de β-caroteno, que permite la producción
de 5 mg / L (0,03 mM) de β-ionona [ 62 ]. De manera similar, la introducción heteróloga de
una dioxigenasa de escisión de zeaxantina de Crocus junto con una aldehído
deshidrogenasadeSynechocystis sp. El PCC6803 en unacepa deS. cerevisiaeproductora de
zeaxantinadio lugar a la síntesis de crocetina , uno de los componentes colorantes del
azafrán, en títulos de producto final de 1.2 mg / L (0.004 mM) [63 ]. Hasta 600 mg / L (2.1
mM) de la retina , el aldehído del retinol(vitamina A), se produjo a partir de una mezcla de
glucosa, glicerol y arabinosa enE. coli deingenieríadespués de una optimización extensa
delas condicionesde fermentación [64].

Otros compuestos
Los compuestos derivados de plantas adicionales, que no pertenecen a una de las tres clases
principales de metabolitos secundarios de las plantas , también encuentran numerosas
aplicaciones en las industriasalimentarias . Estos metabolitos vegetales incluyen
aminoácidos no proteogénicos, proteínas, vitaminas y derivados de ácidos grasos ( Figura
3 ). La γ-decalactona (4-decanolida) es el principal compuesto volátil que se encuentra en
los melocotones y se usa como agente saborizante, por ejemplo, en bebidas [ 65 ]. Esta
lactona natural es un derivado de ácido graso producido típicamente a partir del ácido
ricinoleico.o ricinoleato de metilo, los componentes principales del aceite de ricino , que
utilizan levaduras comoY. lipolytica,S. cerevisiae o Pichia etchelsii[66]. Durante
lasbiotransformaciones , la maquinaria de oxidación β peroxisomal endógena de
las cepas huésped se contrata para acortar la cadena de ácido ricinoleico a γ-decalactona, lo
que también condujo a la acumulación de varios productos secundarios no deseados
[ 67]. Por lo tanto, la ingeniería de cepas se centró en disminuir la formación de productos
secundarios al alterar la actividad de lamaquinaria deoxidación β para mejorar los
rendimientos de los productos [68]. En condiciones de cultivo optimizadas, se produjeron
6,8 g / L (40 mM) de γ-decalactona a partir de aceite de ricino crudo en Y. lipolytica [ 69 ],
mientras que la levadura Lindnera saturnus produjo 5,8 g / L (34 mM) de γ-decalactona a
partir de glicerol crudo [ 70 • ].
Figura 3 . Rutas biosintéticas que conducen a otros compuestos derivados de plantas con
aplicaciones en industrias alimentarias .
El aminoácido no proteogénico L- teanina (γ-glutamiletilamida), responsable
del sabor ' umami ' del té (verde), se produce naturalmente por condensación
de L- glutamato con etilamina (obtenida de la descarboxilación de L- alanina) [ 71 ]. La
producción in vitro de  L- teanina a partir de L -glutamato y etilamina con rendimientos
máximos de más del 90% podría demostrarse con éxito utilizando γ-glutamiltranspeptidasas
bacterianas purificadas de diversos organismos [ 72 , 73 , 74 ]. En una E. colicepa que
sobreexpresa el gen ggt de la γ-glutamiltranspeptidasa nativa , se logró un rendimiento de
conversión del 95% a partir del γ-metil éster de ácido glutámico suplementado y la
etilamina [ 75 ].
L de ácido ascórbico (vitamina C), una vitamina consumido tradicionalmente
con frutas y verduras , también se produce en la escala de más de 100.000 toneladas por
año y se añade a alimentos, bebidas y productos farmacéuticos [ 76 ]. Producción
biotecnológica de L ácido ascórbico se inicia desde D -sorbitol o sorbosa , que se oxida
primero a 2-ceto L ácido -gulonic por Gluconobacter oxydans o vulgare
Ketogulonicigenium , respectivamente y luego se convierte químicamente a L de ácido
ascórbico.
Aunque los edulcorantes artificiales son de importancia comercial, sus colgantes naturales
aumentan su participación en el mercado de manera continua debido a que los clientes
cambian de mentalidad hacia alimentos bajos en calorías y contra ingredientes
sintéticos. Las proteínas de sabor dulce intenso como las taumatinas (E957), la monelina y
la brazzeína se aplican como aditivos naturales en los dulcespara diabéticos, por ejemplo,
en el chocolate o las gomas de mascar [77]. La taumatina II (una de las seis proteínas en la
mezcla natural de taumatinas) se sintetizó encepas de Aspergillus awamori deficientes en
proteasa, así como en Bacillus subtilis.por expresión de un gen detaumatina II optimizado
por codones y subsiguiente secreción de proteínas [ 78 , 79 , 80 ]. Se siguieron estrategias
similares para la producción de proteínas y la secreción para establecer la producción de
monelina en B. subtilis , S. cerevisiae , E. coli y Candida utilis [ 81 , 82 , 83 ,84 ]. La
brazeína, que muestra una mayor estabilidad térmica y estabilidad del pH en comparación
con las taumatinas y la monelina, se produjo, por ejemplo, en Lactococcus lactis., P.
pastoris y Kluyveromyces lactis [ 85 , 86 ]. Se obtuvieron concentraciones de 1.5 a 410
mg / l de brazzein activo. Además de los glucósidos de taumatina y esteviol como
edulcorantes, los alcoholes de azúcar ( por ejemplo,  eritritol y xilitol), y los azúcares
no digeribles como la isomaltulosa son cada vez más importantes. Así, se han desarrollado
procesos fermentativos más sostenibles además de las síntesis químicas
[ 87 , 88 , 89 , 90 ]. Además de la aplicación como edulcorantes, azúcares o más
precisamente Los oligosacáridos pueden encontrar otras aplicaciones en las industrias
alimentarias debido a sus propiedades modificadoras de la textura y modificadores de la
viscosidad, o propiedades prebióticas en el caso de los sacáridos de la leche humana [91].
Conclusiones y perspectivas.
En los últimos años, predominantemente E. coli y S. cerevisiae se han diseñado para la
síntesis de productos naturales de plantas paraaplicaciones alimentarias ( Tabla 1 ). Esto no
es sorprendente cuando se considera la larga historia de estos organismos bien estudiados
en biotecnología industrial y la disponibilidad de un gran número de herramientas
moleculares para su manipulación genética . Sin embargo, más recientemente,
otros microorganismos demostraron ser plataformas valiosas para la síntesis de dichos
compuestos. En particular, bacterias tales como  C. glutamicum y Pseudomonas.sp., ambos
caracterizados por una robustez pronunciada contra los compuestos aromáticos ,
representan organismos prometedores, por ejemplo, para la producción de compuestos
derivados de la vía del shikimate [ 31 • , 92 , 93 , 94 ]. C. glutamicum es también un
organismo adecuado para la producción de terpenoides, ya que naturalmente produce el
C 50carotenoide decaprenoxanthin y por lo tanto alberga las vías requeridas para la síntesis
de isoprenoides [ 95 ]. Además, las bacterias fototróficascomo las cianobacterias y las α-
proteobacterias púrpuras del géneroSynechocystis y Rhodobacter , que producen y
acumulan intrínsecamente altas cantidades de carotenoides como fotopigmentos , podrían
lograr una importancia creciente como hospedantes alternativos para la producción
sostenible de terpenos derivados de plantas en un futuro próximo [ 96,97 • ].