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1. OBJETIVOS
- Familiarizar al aprendiz en el tratamiento adecuado de una muestra para análisis
microbiológico.
- Determinar las técnicas utilizadas en la prepacion de diluciones según el tipo de
alimento.
- Conocer y realizar los métodos de recuento más utilizados en microbiología de
alimentos.
- Identificar la manera correcta para reportar y registrar los resultados de los análisis
microbiológicos
2. FUNDAMENTO TEORICO
2.1. MUESTREO
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Se define muestreo como la operación consistente en separar un número determinado de
muestras de un lote, remesa, partida con el fin de obtener unos resultados analíticos fables.
El muestreo es necesario para saber si un lote de productos alimenticios cumple o no con las
normas microbiológicas legales establecidas para dichos productos o cuando cabe la posibilidad
de que existan microorganismos patógenos o sus toxinas distribuidas de formas escasa o irregular
en un alimento o conjunto de alimentos del mismo origen.
Para que le muestreo tenga utilidad estadísticas se debe realizar sobre un número apreciable de
unidades de un lote; el número de muestras destinadas a un análisis microbiológico esta en
relación con la precisión que se desea obtener en los resultados. Este númerose suele fijar
cuando se dispone de muchas unidades, sobre todo en forma de lote
Se sugiere que el muestreo de muestra corresponda con la raíz cuadrada del número total de
unidades constituyentes del lote. También, que teniendo en cuenta el volumen del lote se tome un
1% del total cuando el lote es grande y el 10% cuando es pequeño.
Estos sistemas, se aplican especialmente para lotes procedentes de industrias cuyo control se
desconoce si se trata de productos sometidos a un control regular. Es suficiente analizar 5 a 10
muestras de cada lote
Este método consiste en separar del lote un numero de muestras calculadas previamente,
utilizando la tabla del número al azar. Dicha tabla está integrada por columnas y filas de digito
obtenidos mediante cálculos estadísticos. (Ver tabla No.1 )
Ejemplo : si el lote está integrado por 100 unidades, su numeración se marca de 1ª 100,
correlativamente con un lápiz se señala un lugar cualquiera de la tabla de números al azar,
coincidiendo con un digito o proximidad y de acá se parte para la separación del número de
muestras así: marcamos la fila 15 y columna 10 , 11 y 12, encontramos la muestra 146 y
continuamos con las dos siguientes filas de la misma columna y tenemos 078 y 152, de esta
manera hemos seleccionado aleatoriamente las tres muestras.
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2.4. TRATAMIENTO DE MUESTRAS
Como la finalidad del muestreo es obtener una muestra representativa del alimento para su
análisis inmediato y conseguir resultados fiables sobre su estado higiénico – sanitario, es
necesario que el producto en el momento del análisis reuna las mismas condiciones
microbiológicas que tenga al ser muestreo, por esto se debe tener en cuenta lo siguiente:
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Original en una nevera entre 2°C Y 5 ° C
Una vez tomadas las muestras se empaquetan de forma adecuada según su naturaleza para
evitar su rotura o deterioro. Los paquetes se etiquetan y marcan de la siguiente manera:
Cuando las muestras sean restos de alimentos sospechosos de toxi –infección alimentaria, es
imprescindible remitir junto con ellas, un protocolo donde se incluyan los datos más precisos sobre
sintomatología de la enfermedad así como el estudio epidemiológico del casco.
Llegadas las muestras al laboratorio, es necesario seguir unos pasos dentro de la sistemática
analítica, que serán establecidos por el analista teniendo en cuenta la clase de alimento,
procedencia y fines del análisis. Estos pasos conducirán a unos resultados que deberán ser
interpretados adecuadamente por el microbiólogo.
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Cuando se trata de alimentos sólidos es necesario someterlos previamente a unas suspensión,
utilizando un diluyente estéril. Si el alimento es líquido, se agita en su envase original y se pasa
asépticamente a un recipiente estéril.
En general la muestra analítica debe estar constituida aproximadamente de 200 gr. Para la puesta
en marcha de las distintas determinaciones se utilizan 100 gr. El resto
Como no resulta fácil pesar al muestra con exactitud sin que se pueda evitar una excesiva
manipulación. La técnica más utilizada consiste en:
Ejemplo: si la suspensión madre debe tener un título 1 – 10, la cifra de pesada obtenida del
alimento se multiplica por nueve y el resultado de la multiplicación será el número de mililitros de
diluyente que hay que incorporar a la muestra para obtener dicha dilución.
Durante el triturado de la muestra se debe evitar la destrucción de los microorganismos por rotura
de su membrana o por un calentamiento excesivo. Además de una perfecta trituración de la
muestra es necesario obtener una muestra homogénea para lograr la distribución equilibrada de
los gérmenes y sus toxinas.
- Jarras que consisten en un envase de vidrio o acero provisto de una hélice que
funciona cuando se adaptan a un motor.
Tiene por objetivo efectuar dilucionesprogresivasde dicha muestra, para poder realizar recuentos
microbianos posteriores. Ver esquema NO . 2.
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3. MATERIALES
3.2. SOLUCIONES
- Agua de triptona con sal
- Solución de ringer ¼
- Agua de peptona tamponada
3.3. OTROS
- espátula
- cuchillos y tenedor de acero inoxidable
- tijeras
- pinzas
- agitar eléctrico
CONCLUSIONES
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¡Éxitos!
Autor
(es)
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