Ensayo rápido cuantitativo microfluidico para la detección de PCT

Uso Exclusivo para la Atencion Medica Profesional

INTRODUCCIÓN

La presencia de la procalcitonina (PCT) se incrementa durante la infección bacteriana sistémica y

sepsis. El biomarcador PCT ahora está siendo reconocida como una herramienta útil para el
proceso de diagnóstico de la infección bacteriana y sepsis. Se ha demostrado que la PCT puede
contribuir a la optimización de la terapia con antibióticos y controlar la duración del tratamiento.
PCT es la prohormona de la calcitonina. Considerando que la calcitonina se produce solamente en
las células C de la glándula tiroides como resultado de estímulo hormonal, PCT es secretada por
diferentes tipos de células de los numerosos órganos en respuesta a la estimulación
proinflamatoria, en particular la estimulación bacteriana. Dependiendo de los antecedentes clínicos,
una concentración de PCT por encima de 0,1 ng/ml puede indicar una infección bacteriana
clínicamente relevante, lo que requiere tratamiento con antibióticos. A una concentración de PCT>
0,5 ng/ml, un paciente debe ser considerado en riesgo de desarrollar sepsis grave o choque
séptico. La sepsis es una reacción excesiva del sistema inmunológico y el sistema de coagulación
a una infección. Un problema importante para los médicos es el diagnóstico y seguimiento de los
pacientes infectados. En pacientes con una infección bacteriana, se ha demostrado que la PCT
niveles aumentan. Para el diagnóstico, PCT es un marcador importante que permite la
diferenciación específica entre otras causas de reacciones inflamatorias y una infección bacteriana.
Por otra parte, la reabsorción de la infección séptica se acompaña de una disminución de la
concentración de PCT que devuelve a la normalidad con una vida media de 24 horas.

PRINCIPIO DE LA PRUEBA

El principio del ensayo combina un método de inmunoensayo sándwich de dos etapas con una
detección fluorescente final. La prueba mLabs® PCT se basa en la tecnología de inmunoensayo
fluorescente en un cartucho de microfluidos. La tecnología de inmunoensayo se basa en la
capacidad inherente de unirse a la estructura específica de una molécula. En el cartucho de
microfluidos mLabs® PCT, un par de anticuerpos se elige cuidadosamente de manera que tenga
excelente especificidad y sensibilidad para el PCT. El anticuerpo informador con un colorante
fluorescente unido es pre-recubierto en la zona de reacción del cartucho, mientras que el
anticuerpo de captura se inmoviliza en la zona de detección. A medida que la muestra fluye a
través, el analito PCT en los primeros encuentros de la muestra y se une al anticuerpo indicador. A
medida que la muestra continúa su flujo a través de la zona de detección, el anticuerpo de captura
se une al complejo PCT-reportero mediante la formación de una estructura de emparedado y se
mantiene en la zona de detección, mientras que el anticuerpo in formador sin PCT se elimina por
lavado. La señal fluorescente de la zona de detección es proporcional a la concentración de PCT
en la muestra.

MATERIALES SUMINISTRADOS

• 25 cartuchos de prueba
• 30 puntas de pipeta
• 1 mLabs® Drive de datos (USB-disco o tarjeta SIM)
• Instrucciones de uso

MUESTRAS Y ALMACENAMIENTO

Siempre use guantes de protección y batas de laboratorio adecuados al manipular muestras de los
pacientes, ya que pueden ser potencialmente infeccioso.

Todas las muestras deben ser considerados como potencialmente peligrosa y/o contaminada.

• Recoger muestras de sangre venosa utilizando tubos de recogida de Heparina de Litio.

• Asegúrese de que el tubo de recogida se llene completamente para mantener la correcta relación
anticoagulante sangre.

• Mezcle bien la muestra de sangre a través de una inversión suave del tubo (> 8 veces).

• Realizar la prueba de sangre dentro de los 60 minutos después de la toma de muestras.

• Refrigere las muestras de sangre total si la prueba no se puede realizar dentro de los 60 minutos
después de la recogida de muestras.

• No utilizar jeringas para recoger muestras de ensayo.

ESTABILIDAD DE LA MUESTRA

Las muestras de sangre son estables a temperatura ambiente durante un máximo de 6 horas.

ALMACENAMIENTO DEL EQUIPO DE PRUEBA

Refrigerar el kit de prueba de PCT a 2-8 °C inmediatamente después de recibirla.

Sólo retire el número de pruebas requeridas de refrigeración.

El kit de prueba de PCT es estable a 2-8 °C hasta su fecha de caducidad.

PROCEDIMIENTO DE PRUEBA

1. Preparación de muestras

• El cartucho de mLabs® PCT es sólo para ser utilizado junto con mLabs® Immunometer.

• Equilibrar el cartucho de prueba a temperatura ambiente (~ 20-30 minutos) antes de su uso.

• Mezclar bien la muestra de sangre total recogida mediante inversión suave del tubo
(~ 2-3 veces) antes de la prueba.

2. Preparación mLabs® ImmunoMeter

• Una sola mLabs® unidad de datos (USB-disco o tarjeta SIM) se proporciona junto con cada kit
de cartuchos. Ya sea un disco USB (U-disco) o una tarjeta de SIM puede ser utilizado.
• Para U-disco, por favor, insertarlo en el puerto USB en la parte trasera de la ImmunoMeter antes
de realizar la prueba. Para la tarjeta SIM, retire la tarjeta SIM del soporte e insertarla en el lector
SIM mientras el lector SIM está conectado al medidor.

• En la pantalla principal de la ImmunoMeter, como para el U-disco, pulse "unidades de datos">

"UDISK"; En cuanto a la tarjeta SIM, pulse "unidades de datos>" SIM ".
• Una vez que los datos se han cargado en el ImmunoMeter, la unidad de datos se puede quitar
para todas las mediciones posteriores relacionados.

• Guarde la unidad de datos en un lugar limpio y seco para su uso futuro.

3. Adición de la Muestra

• Retirar el cartucho de prueba de la bolsa y etiquete con la identificación del paciente en el frente
con un marcador permanente.

• Mediante la pipeta proporcionada, transferir 250 µl de la muestra en la entrada del cartucho,

gota a gota.

• No coloque la punta de la pipeta en la entrada durante la transferencia de la muestra en forma

de burbujas de aire pueden ser generados. Para el modo en el interior, permita por lo menos 2
(no más de 15 minutos) para la muestra debe interactuar con los reactivos en el cartucho antes
de la lectura. Para el modo fuera, conceder al menos 8 (no más de 15 minutos) para la muestra
de interactuar con los reactivos en el cartucho antes de leer.

4. Desarrollo de la prueba y lectura de los resultados

• Inserte el cartucho de prueba en el soporte del cartucho del mLabs® ImmunoMeter.

• Pulse "prueba del paciente" de la pantalla principal del ImmunoMeter.

• Seleccione el tipo de ensayo y la muestra.

• Pulse el botón "Inicio" para iniciar la prueba.

• Los resultados se mostrarán en la pantalla después de que la prueba se ha completado.

CARACTERÍSTICAS DE DESARROLLO

1. Sensibilidad analítica
PCT = 0.02 ng/ml

2. Rango de medición
PCT = 0.02 a 100 ng/ml

3. Cut -off
PCT = 0.5 ng/ml

INTERFERENCIA DE LA PRUEBA

Los siguientes factores se han encontrado para no afectar significativamente a los resultados del
ensayo:

-Hemolisis (Hemoglobina 347 umol/l)

-Lipemia (Triglicéridos, lípidos para equivalente 30g/l)
-Bilirrubina (574 umol/l)

Se observa que las muestras severamente hemolizadas deben ser evitadas. El hematocrito entre
30% y 55% no tiene significativo efecto sobre la recuperación de la PCT. No hay efecto gancho se
determinó para PCT concentraciones de 2.600 ng/mL.
VALORES ESPERADOS

En un estudio llevado a cabo con muestras de individuos aparentemente sanos, los valores del
percentil 95 estaban por debajo de 0.05 ng/ml. Se recomienda que cada laboratorio debe
establecer su propio rango de referencia.

LIMITACIONES

Inspeccione cuidadosamente la integridad de la bolsa de prueba mLabs® PCT antes de su uso. Si

se determina que la bolsa fue manipulada, es decir, desgarrada o pinchado, no proceda a utilizar el
cartucho de prueba. Póngase en contacto con el soporte técnico local inmediatamente.

El kit de prueba mLabs® PCT es estrictamente para uso in vitro solamente. Las instrucciones y los
procedimientos previstos en este inserto deben ser atendidas con atención.

El kit de ensayo mLabs® PCT no está destinado a ser utilizado como prueba absoluta de la
infección bacteriana y sepsis. Los resultados de ensayo obtenidos se deben consultar con el
médico, además de con otros resultados de la prueba.

Todos los elementos proporcionados en el kit de prueba son para aplicación de uso único y deben
desecharse adecuadamente después de su uso como muestras de prueba aplicadas pueden ser
potencialmente infeccioso.

REFERENCIAS

Dandona P. et al. Procalcitonin aumentan después de la inyección de endotoxina en sujetos

normales. Revista de Endocrinología Clínica y metabolism.1994. 79 (6): 1605-1608.
Cristo-Crain M. et al. Effect del tratamiento procalcitonina guiada sobre el uso de antibióticos y los
resultados en las infecciones del tracto respiratorio inferior: ensayo de intervención simple ciego
aleatorizado por grupos. Lanceta. 2004. 363 (9409): 600-607.
Muller B. et al., Precursores de calcitonina son fiables los marcadores de sepsis en la unidad de
cuidados intensivos médicos. medicina de cuidados críticos. 2000. 28 (4): 977-983.
Harbarth S. et al., Valor diagnóstico de la procalcitonina, la interleucina-6, y la interleucina-8 en
pacientes críticamente enfermos ingresados con sospecha de sepsis. medicina de cuidados
críticos. 2001. 164: 396-402.
American College of Chest Physicians / Society of Critical Care Medicine (1992). Las definiciones
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Luyt C. E. et al., La cinética de procalcitonina como marcador pronóstico de pheumonia asociada al
ventilador, revista Amerian de la medicina de cuidados respiratorios y crítica. 2005. 171 (1): 48-53
Brunkhorst F. M. et al. Cinética de la procalcitonina en la sepsis iatrogénica. medicina de cuidados
intensivos. 1998. 24: 888-892.
Símbolos Explicación
Diagnostico In vitro

Nombre y dirección del fabricante

Representante Autorizado Europeo

Marca CE

Limitación de Temperatura

Número de Lote

Fecha de Expiración

No reusar

Numero de Catalogo

Contenido suficiente para n pruebas

Precaución leer cuidadosamente.