DEPARTAMENTO DE QUÍMICA ANALÍTICA

CURSO 2021/2022

PRÁCTICAS DE
QUÍMICA ANALÍTICA
INSTRUMENTAL I

Profesores: Dra. Elisa I. Vereda Alonso

Dra. Luisa Mª Cabalin Robles
Dra. Mª del Mar López Guerrero
Dra. Irene Sánchez Trujillo
Dr. Francisco J. Fortes Román
 PRÁCTICA Nº 1

DETERMINACIÓN DE HIERRO EN CEMENTOS

Objetivo

Determinación de hierro en cementos mediante espectrometría de absorción

molecular UV-visible.

Fundamento
El principio de la espectroscopía de absorción ultravioleta−visible involucra la
absorción de radiación entre 160-780 nm, por una molécula, causando la promoción de un
electrón de un estado basal a un estado excitado. Esta absorción cumple la ley de Beer:
A= Ɛ·b·c donde: A= absorbancia
Ɛ= coeficiente de absortividad molar
c= concentración

Realización práctica

Instrumentos y materiales

Espectrómetro de absorción UV-vis (VARIAN)

Vaso de precipitado

Matraz aforado de 250 mL

Matraces aforados de 25 mL (7)

Placa calefactora

Reactivos y muestras

Ácido ascórbico

Disolución de 1,10-fenantrolina al 0,1 % en etanol

Disolución tampón ácido acético/acetato sódico de pH = 4,7

Disolución patrón de Fe (II) de 1.000 mg L -1

Cemento

Preparación del cemento para su análisis

Para el análisis de un cemento se pesan 0,5 g del mismo, se le añaden en un vaso de

precipitado 10 mL de agua y 5-10 mL de HCl concentrado, a continuación, se calienta con
agitación hasta disolución completa. Seguidamente, se deja evaporar la solución hasta
sequedad. Al residuo obtenido se le añaden 5 mL de HCl concentrado y 5-10 mL de agua, y

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se vuelve a llevar a sequedad. Se añade agua, se agita y hierve unos minutos y se filtra,
lavándose el filtro con agua caliente. +La disolución resultante y las aguas de lavado se
diluyen y enrasan en un matraz de 250 mL.

Curva de calibrado

En matraces de 25 mL, preparar patrones de Fe (II) que contengan 5 mL de 1,10

fenantrolina al 0,1 % en etanol, 5 mL de disolución reguladora acético-acetato de pH 4,7;
0,1g de ácido ascórbico y volúmenes variables de disolución patrón de Fe(II) de tal forma
que, al enrasar con agua destilada la concentración de Fe (II) en los patrones sea de 0,5; 1; 2;
3 y 4 ppm. Preparar una disolución blanco y medir la absorbancia de los patrones a la
longitud de onda del máximo de absorción del complejo.

Análisis del cemento

Tomar una alícuota de la disolución de cemento y añadir 5 mL de 1,10 fenantrolina

al 0,1 % en etanol, 5 mL de disolución reguladora acético-acetato de pH 4,7; 0,1 g de ácido
ascórbico y enrasar a 25 mL con agua destilada. Medir la absorbancia de esta muestra.

Cálculos

Construir una curva de calibrado con las absorbancias de los patrones, determinar la
concentración en ppm de Fe (II) en la muestra preparada de cemento y determinar el % de
Fe (II) en el cemento.

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 PRÁCTICA Nº 2

DETERMINACIÓN DE CATIONES EN AGUAS MINERALES

POR ESPECTROMETRÍA ATÓMICA

Objetivo

El objetivo de esta práctica consiste en la determinación de las concentraciones de

sodio, calcio y magnesio presentes en un agua mineral.

Fundamento teórico

En esta práctica se emplearán técnicas de espectrometría de absorción y emisión

atómica, basadas en la medida de la radiación electromagnética de una determinada longitud
de onda absorbida por los átomos para pasar electrones del estado fundamental al excitado, o
bien la radiación emitida cuando estos electrones regresan al estado fundamental. El sodio se
medirá por emisión y, el calcio y magnesio por absorción atómica.

La absorción o emisión de energía radiante es directamente proporcional a la

concentración de la sustancia absorbente o emisora. Por lo que se requiere la realización de
una curva de calibrado para cada uno de los elementos que vamos a determinar.
Las concentraciones habituales de especies iónicas mayoritarias en las aguas
naturales, como el agua de un rio o de un manantial, se muestran en la Tabla 1.

Tabla 1. Especies iónicas mayoritarias en agua natural de río

Rango de concentraciones en Cationes Aniones
agua natural de río (mg/L)
0-100 Ca2+, Na+ Cl-, SO4=, HCO3-
0-25 Mg2+, K+ NO3-
0-1 Otros iones metálicos PO43-, NO2-

En esta práctica se determinarán tres de los cuatro cationes mayoritarios: Ca 2+, Na+ y
Mg2+; y en la siguiente se determinarán tres de los cuatro aniones mayoritarios: Cl -, SO4= y
NO3-.

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Realización práctica

Instrumentos y materiales
 Espectrofotómetro de absorción atómica
 Matraces aforados
 Pipetas y micropipetas

Reactivos
 Disoluciones patrón de 1.000 µg ml-1 de Na, Ca y Mg.

Realización práctica
Curvas de calibrado: A partir de las disoluciones de 1.000 µg ml-1 de Na, Ca y Mg preparar
cuatro disoluciones patrones de los tres cationes juntos de concentraciones adecuadas para el
análisis del agua mineral.

Cálculos

Determinación de las concentraciones como media ± desviación estándar de Na, Ca y

Mg en el agua mineral a partir de las correspondientes curvas de calibrado.

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 PRÁCTICA Nº 3

DETERMINACIÓN DE ANIONES EN AGUAS MINERALES

POR CROMATOGRAFÍA IÓNICA

Objetivo

El objetivo de esta práctica consiste en la determinación de las concentraciones de

cloruros, nitratos y sulfatos presentes en un agua mineral.

Fundamento teórico
En la práctica anterior determinamos los cationes mayoritarios en un agua mineral,
abordaremos en esta práctica la determinación de los aniones. En una cromatografía iónica
típica la separación de los aniones se logra con una columna de cambio iónico con una base
de poliestireno, como eluyente se suele emplear tampón carbonato/bicarbonato sódico. La
detección se realiza midiendo los incrementos de conductividad que se producen cuando los
iones pasan a través del detector electroquímico. Para mejorar la sensibilidad de la
detección, se eliminan los iones del tampón del eluyente antes de su paso por el detector
intercambiando los iones Na+ del tampón por iones H+, así los aniones carbonato y
bicarbonato forman CO2 que tiene muy poca conductividad en disolución:

HCO3- + H+ → CO2 + H2O

CO3= + H+ → CO2 + H2O

El método más utilizado para conseguir esto es usar una micromembrana supresora
(Figura 1). El eluyente fluye entre dos membranas semipermeables a través de las cuales
sólo pueden pasar cationes, intercambiándose los iones Na + por H+ procedentes de un flujo
de H2SO4 que fluye en sentido contrario al flujo de eluyente.

El esquema básico de un cromatógrafo líquido para cromatografía iónica, se muestra,

junto con un cromatograma típico en la Figura 2.

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 Figura 1.

Figura 2. Esquema básico de un cromatógrafo iónico junto con un cromatograma típico

Realización práctica

Instrumentos y materiales
 Cromatógrafo iónico VERTEX ICS 90
 Matraces aforados
 Pipetas y micropipetas

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Reactivos
 Disoluciones patrón de 1.000 µg ml-1 de Cl-, SO4= y NO3-.

Realización práctica
Curvas de calibrado: A partir de las disoluciones de 1.000 µg ml-1 de Cl-, SO4= y NO3-
preparar cuatro disoluciones patrones de los tres aniones juntos de concentraciones
adecuadas para el análisis del agua mineral.

Cálculos

Determinación de las concentraciones como media ± desviación estándar de Cl-, SO4=

-
y NO3 en el agua mineral a partir de las correspondientes curvas de calibrado.

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 PRÁCTICA Nº 4

ESPECTROSCOPÍA DE ABSORCIÓN MOLECULAR IR:

IDENTIFICACIÓN Y ASIGNACIÓN DE BANDAS DE ÁCIDO
ACETILSALICÍLICO Y PARACETAMOL

Objetivo

Los principales objetivos de la práctica se centran en familiarizar al alumno con:

1. El fundamento de la espectroscopia de absorción molecular IR.

2. La obtención del espectro de absorción en el infrarrojo y asignación de bandas para el

ácido acetilsalicílico o para el paracetamol en estado sólido, preparando adecuadamente el
patrón puro.

3. La identificación del ácido acetilsalicílico a partir de las bandas características de

absorción en preparados analgésicos comerciales.

Ácido acetilsalicílico Paracetamol

Fundamento del método

Como se refleja en la figura de abajo, los átomos, tanto si están libres como si
forman parte de una molécula, pueden absorber (o emitir) fotones cambiando su estado
energético, lo que conduce a diferentes tipos de excitación dependiendo de la cantidad de
energía absorbida.

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La radiación correspondiente a la zona del Infrarrojo comprende longitudes de onda entre
7,8 x 10-5 cm y 7,8 x 10-2 cm (frecuencias entre 1014 y 1012 Hz). Este rango incluye las
regiones del infrarrojo cercano, medio y lejano.
IR cercano.- 12800 – 4000 cm-1
IR medio.- 4000 – 200 cm-1
IR lejano.- 200 – 10 cm-1
Trabajaremos en el margen : 4000 a 400 cm-1. La región de las frecuencias del IR medio
(~3600-1250 cm-1) se utiliza para identificar grupos funcionales comunes. Con la región de
la huella dactilar (~1200-600 cm-1) se identifican compuestos al comparar sus espectros.

Cada molécula, dependiendo de los átomos y enlaces que la forman, es capaz de

absorber fotones infrarrojos y aumentar la intensidad de sus movimientos. Los diferentes
grupos funcionales que existen dentro de la molécula absorben los fotones a diferentes
longitudes de onda. Así, cuando se barre con todas las longitudes de onda una molécula,
ciertas longitudes de onda serán absorbidas y otras no y pasarán a través de ella. Si se
registra el espectro infrarrojo, puede analizarse y compararse con otras absorciones
infrarrojas conocidas para determinados grupos funcionales. (ver Tabla 1)

El espectro infrarrojo de una molécula puede ser muy complejo, ya que aparecen
muchas bandas de absorción debidas a los diferentes movimientos que puede sufrir cada
átomo (una molécula no lineal tiene 3N-6 modos normales de vibración, siendo N el número
de átomos de la molécula). Cuando se analiza el espectro es importante estudiar cuatro
regiones diferentes, buscando la presencia o ausencia de determinadas bandas de absorción
específicas:
i) Por encima de 3000 cm-1
ii) Entre 3000 y 2000 cm-1
iii) Entre 2000 y1400 cm-1
iv) Por debajo de 1400 cm-1 (región de la “huella dactilar”)

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Realización práctica

Instrumentos y materiales

Espectrómetro FT-IR Perkin-Elmer

Balanza analítica de precisión

Vidrios de reloj

Mortero de ágata

Pastillero

Prensa hidráulica

Reactivos y muestras

KBr sólido

Ácido acetilsalicílico puro

Paracetamol puro

Muestras de analgésicos (comprimidos comerciales)

Preparación de la muestra
Mezclar 3 mg de ácido acetilsalicílico o paracetamol con 300 mg de KBr en mortero de

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ágata, homogeneizando bien durante 5 minutos (ambos deben estar bien secos en
pesasustancias colocados en el interior de un desecador). Prensar 5 minutos a 10 Tn, quitar
la presión lentamente y sacar la pastilla. Registrar el espectro IR.

Cálculos

Comparar las bandas características de absorción en la huella dactilar de los

productos puros con la de los preparados analgésicos comerciales.

Identificar las bandas características de los grupos funcionales en la zona del IR

medio. Para asignar los grupos funcionales usaremos tablas. No es necesario identificar
todos los picos que aparecen en el espectro, sólo los más significativos. Para ello,
marcaremos las 4 regiones del espectro de infrarrojo e iremos asignando bandas en cada una
de ellas.

1.- Región de tensión del hidrógeno: 3700 – 2700 cm -1.

C-H ; N-H ; O-H
2.- Región del triple enlace: 2700 – 1850 cm-1.
-C ≡ N ; -C ≡ C-
3.- Región del doble enlace: 2000 – 1300 cm-1.
C=C ; C=O
4.- Región de la “huella digital”: 1500 – 700 cm-1.
=C-H (flexión en el plano).
=C=C-H (flexión fuera del plano).

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 PRÁCTICA Nº 5

DETERMINACIÓN DE FLUORURO EN PASTA DE DIENTES

MEDIANTE EL EMPLEO DE UN ELECTRODO SELECTIVO

Introducción

Los electrodos selectivos de iones son, en realidad, electrodos indicadores selectivos

de características especiales, construidos con diversas membranas por lo que se les suele
llamar en determinados casos como “electrodos de membrana”. La denominación de
“selectivo” es objeto de controversias, porque también pueden considerarse selectivos los
electrodos de 1ª, 2ª y 3ª clase, sin embargo, por costumbre se extiende esta denominación de
los electrodos de membrana. Según las normas dictadas por la IUPAC, los electrodos
selectivos de iones son sensores electroquímicos cuyo potencial depende linealmente del
logaritmo de la actividad de un ión en disolución. El potencial de estos electrodos no se
establece mediante un proceso redox sino que tiene como principal origen la variación de
energía libre asociada con la transferencia de masa (por cambio iónico, adsorción, etc.) a
través de una membrana.
La medida de la concentración de un determinado ión en una disolución puede
sonseguirse:
a) Medida directa del potencial de un electrodo, de la cual se puede deducir la
concentración de ión activo.
b) Valoraciones potenciométricas, se miden los cambios de potencial a medida
que se va agregando una sustancia valorante, pudiéndose localizar el punto
final por la brusca variación de dicho potencial.
La modalidad a) de medida directa implica el trazado de una curva de calibrado que
es la representación del potencial de un electrodo (frente a uno de referencia) en función del
logaritmo de la actividad iónica de la especie considerada. En ordenadas se pone el potencial
creciente y en abscisa el log aA. Se dice que el electrodo tiene una respuesta nernstsiana (es
decir, cumple la ecuación de Nernst) cuando la representación E=f(log a A) es una línea recta
de pendiente 0,0591/ZA voltios.

Descripción del electrodo selectivo de F -

Este electrodo fue descrito en el año 1966 y es uno de los más usados y práctico de
los existentes en la actualidad. Su membrana es un cristal de LaF 3 impurificado con una sal
de europio para aumentar la resistividad. Presenta una respuesta nernstsiana en el intervalo
de concentraciones comprendido entre 10-1 a 10-6 M de fluoruro con una desviación entre
0,06 y 0,3 ppm. En la determinación de F - sólo interfiere el ión hidroxilo. El pH de la
disolución debe ser controlado cuidadosamente ya que en medio muy ácido se forma algo de
HF.
El fluoruro se añade a los productos dentífricos como preventivo de la caries. El
contenido, expresado como fluoruro de estaño, suele ser del orden de 0,4%. Las
interferencias debidas a diversos iones se evitan si la medida se lleva a cabo a un pH
comprendido entre 4 y 9. La adición de agentes complejantes evita la interferencia de los
iones metálicos que forman complejos con el ion fluoruro, tales como el hierro (III) y el

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aluminio (III). En consecuencia, todas las medidas de potencial se deben realizar en un
medio que asegure un pH y una fuerza iónica adecuados y la presencia de agentes quelantes:
esta disolución se denomina TISAB (Total Ionic Strength Adjustment Btiffer).

Realización práctica

Aparatos

pHmetro Crison.

Electrodo selectivo de F-

Reactivos y disoluciones

Fluoruro de sodio (R. A., NaF, peso molecular 41,988 g mol -1). Debe secarse
previamente en la estufa a 110 ºC durante dos horas (en estas condiciones, el fluoruro de
sodio se puede considerar patrón primario).

Cloruro de sodio (R. A.. NaCl, peso molecular 58.443 g mol -1).

Ácido acético concentrado (R. A.. CH3COOH. peso molecular 60 g mol-1, 100% (p/p),
1,05 g mol-1).

Acetato de sodio (R. A., NaCH3COO ∙ 3 H20, peso molecular 136,08 g mol-1).

Citrato de sodio (R. A., C6H5O7Na3·2 H20, peso molecular 294,12 g mol-1).

Nitrato de sodio (R. A., NaNO3, peso molecular 84,9947 g mol-1). Debe secarse en una
estufa a 110-120°C durante 1 hora aproximadamente.

Disolución patrón de fluoruro: de 1.000 mg l-1: se pesan, en una balanza analítica, del orden
de 2,2101 g de NaF, previamente secado, se introducen en un matraz aforado de 1.000 ml,
se disuelven y enrasan con agua desionizada. La disolución se debe guardar en un recipiente
de plástico.

Disolución TISAB: NaCl 1 mol l-1, ácido acético 0,25 mol l -1, acetato de sodio 0,75 mol l -1,
citrato de sodio 0,001 mol l-1. Para prepararla, se disuelven 58,443 g de cloruro de sodio,
102 g de acetato de sodio-agua (1/3) y 0,3 g de citrato de sodio en agua desionizada, se
añaden 17 ml de ácido acético concentrado y se diluye a 1 litro. Esta disolución proporciona
un pH aproximadamente igual a 5 y una fuerza iónica 1,75 mol l-1

Disolución de nitrato de sodio: 0,1 mol l-1: se pesan 0,85 g de nitrato de sodio previamente
secado, se introducen en un matraz aforado de 100 ml y se disuelven y enrasan con agua
desionizada. Esta disolución se utiliza para el electrodo de referencia.

Procedimiento

Se pesa una cantidad de dentífrico exactamente conocida y aproximadamente igual a 0,2 g,

se coloca en un vaso de precipitados de 200 ml y se añaden 50 ml de TISAB. Se hierve la
mezcla durante unos dos minutos, se enfría, se transfiere cuantitativamente a un matraz
aforado de 100 ml y se enrasa con agua desionizada.

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El calibrado se lleva a cabo mediante el método de la recta externa. En primer lugar, se
preparan dos disoluciones intermedias, de 50 y 100 µg ml -1 de fluoruro, para lo cual se
pipetean 5 y 10 ml, respectivamente, de la disolución patrón de 1.000 µg ml -1, se introducen
en sendos matraces aforados de 100 ml y se enrasan con agua desionizada.

Preparación de la recta de calibrado de fluoruros: En matraces de 100 ml y a partir de las

disoluciones de 50 y 100 µg ml-1 de fluoruro se prepararan patrones que contenga 1,0, 2,5,
5,0, 7,5 y 10,0 µg ml-1. Antes de enrasar los aforados es necesario añadir 50 ml de TISAB
en cada uno de ellos.

Finalmente, se mide el potencial de las disoluciones patrón y de la muestra, se representan

los valores de potencial frente al logaritmo de la concentración de fluoruro en los patrones y.
por interpolación, se calcula la concentración de fluoruro en la muestra.

Observaciones

• El electrodo de fluoruro se debe guardar seco y dentro del tubo protector. No es

recomendable dejarlo sumergido en la disolución TISAB.

• El electrodo de referencia se puede conservar sumergido en la disolución de nitrato de

sodio, que también se utiliza como electrolito interno. Para períodos prolongados de
almacenaje, es mejor guardarlo limpio, seco y debidamente protegido.

• Es recomendable aclarar con agua destilada, lo más rápidamente posible todo el material
de vidrio que haya estado en contacto con las disoluciones de fluoruro. Alternativamente, se
pueden utilizar vasos de precipitados y matraces aforados de plástico.

Cálculos

Representar la recta de calibrado y determinar la concentración de F - en la pasta de

dientes y sus límites de confianza.

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 PRÁCTICA Nº 6

DETERMINACIÓN DE QUININA EN TÓNICAS

Objetivo

Determinación de quinina en tónicas comerciales mediante fluorimetría.

Fundamento

La fluorescencia es uno de los fenómenos luminiscentes que tienen lugar con ciertos
átomos y moléculas capaces de absorber radiación de cierta longitud de onda para,
posteriormente, emitir radiación a una longitud de onda mayor. La fluorescencia permite
realizar determinaciones analíticas con mayor grado de selectividad y límites de detección
bastante más bajos que los métodos basados en absorción.

Realización práctica

Instrumentos y materiales

Fluorímetro

Matraz aforado de 250 mL

Matraz aforado de 100 mL

Matraces aforados de 50 mL

Pipetas graduadas

Reactivos y muestras

Ácido sulfúrico 0,05 M

Sulfato de quinina

Agua tónica

Preparación de la disolución patrón de quinina

Pesar 0,03g de sulfato de quinina dihidratado y disolverlos en ácido sulfúrico 0,05

M, enrasar con este ácido hasta 250 mL. Tomar 10 mL de esta disolución y llevarlos a 100
mL con ácido sulfúrico 0,05 M, la disolución así preparada contiene 100 ppm de quinina.

Curva de calibrado

En matraces de 50 mL, preparar patrones de tal forma que, al enrasar con ácido
sulfúrico 0,05 M la concentración de quinina en los mismos sea de 50, 100, 250, 500, 750 y
1.000 ppb de quinina. Realizar las medidas de fluorescencia y construir la curva de

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calibrado.
Determinación de quinina en agua tónica comerciales

Eliminar el CO2 contenido en la muestra mediante agitación. Cuando ya no se

observan burbujas tomar 1 mL de muestra y llevarlos hasta 100 mL, enrasando con ácido
sulfúrico 0,05 M. Medir la fluorescencia de esta muestra.

Cálculos

Determinación de la concentración de quinina en la tónica y expresar los resultados

como media ± desviación estándar de quinina.

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