Procedimiento en la

Determinación de hierro

Composición de Reactivos:
Método a usar ferene (agente
quelante)  Reactivo A: Sol. de ácido
cítrico 200 mM, ácido
ascórbico 34 mM, tiourea
100 mM y tensioactivo.
 Reactivo B: Sol. de
Muestra de suero o plasma
ferene.
heparinizado.
 Standard: Sol. de iones
hierro III.

Pipetear y mezclar los

reactivos de cada tubo
rotulados.

TUBO STANDARD (S) TUBO BLANCO (B) TUBO DESCONOCIDO (D)

Standard 200 ul + 1ml Agua bidestilada 200 ul Muestra 200 ul + 1ml de

de React. A. + 1ml de React. A. React. A.

Agregar 200ul del React. B. a los 3 tubos

Leer la absorbancia
del tubo D en
espectro. a 600nm
Mezclar con el React. B y volver a leer a antes de agregar el
cada tubo a los 5 min. a 600nm. React. B
 DETERMINACION DE LA TRANSFERRINA

Es la capacidad total de fijación del hierro

en suero de una forma indirecta de medir
la concentración de hierro fijado por la
transferrina.

Composición de Reactivos:
Se utiliza suero libre de hemolisis o Reactivos no provistos:
plasma heparinizado.
 Fer-color de Wiener
lab.
 Agua destilada.

En un tubo de khan colocar 500 ul de Reactivos provistos:

suero + 500 ul de React. A.  React. A: Sol de fe (III)
 React. B: Carbonato de
magnesio granulado
Saturación de transferrina:

 Mezclar y dejar por 5 min a 37 °C

 Con el dosificador agregar el React. B.
 Tapar y agitar vigorosamente 5 min a
T° Ambiente.
 Centrifugar 10 – 15 min a 3000 – 4000
rpm.

Colorimetría:
Seguir procedimiento indicado en el
manual de instrucciones de Fer – color AA.

Leer absorbancia a 600nm

CALCULO DE LOS RESULTADOS:

Se efectúa los cálculos de la misma manera que en la
determinación de hierro sérico, multiplicando por dos el
resultado final, por la dilución del suero; que se calculara
de esta manera: