Revista Mexicana de Ciencias Agrícolas

ISSN: 2007-0934
revista_atm@yahoo.com.mx
Instituto Nacional de Investigaciones
Forestales, Agrícolas y Pecuarias
México

Gaudencio Sedano, C.; Alejandro Manzo, G.; Reymundo Roldán, H.; Castellanos S., José
Alfredo
Propagación in vitro de orquídeas y otras ornamentales
Revista Mexicana de Ciencias Agrícolas, vol. 1, 2015, pp. 451-456
Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrícolas y Pecuarias
Estado de México, México

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Propagación in vitro de orquídeas y otras ornamentales
Gaudencio Sedano, C.1, Alejandro Manzo, G.1, Reymundo Roldán, H.1, José Alfredo Castellanos S.1
Profesor Investigador Universidad Autónoma Chapingo.
Resumen
Debido a que la división por pseudobulbos, es un proceso
de propagación muy lento, se busca probar el método de
propagación in vitro, con diferentes porciones de la planta
(tallos, semillas, hojas, etc.).Con el objetivo de realizar
propagación masiva de plantas de la región de Jonotla,
Puebla, buscando que esta sirva para un uso racional de
este recurso y así fomentar su conservación en esta región,
se construye un laboratorio de cultivos en instalaciones de
la Universidad Autónoma Chapingopara poder realizar
investigaciones con orquídeas, y otras ornamentales
utilizando este método. La investigación se realizará con
orquídeas del género Dendrobium, procedentes de colectas
realizadas en el Mucicipio de Jonotla, Puebla, participarán
en éstas, estudiantes tesistas de las carreras de Agroecología
y Socialogía Rural. Partiendo de la experiencia obtenida por
la Tesista Luisa De Jesús Rivera durante el año 2014, quien
realizó pruebas con pseudobulbos del género Stanhopea
oculataen La Perla, Veracruz.
Palabras clave: Orquídeas, in vitro, Dendrobium,
pseudobulbos.
Introducción
Se realizan estudios de propagación In vitro de Orquídeas
del género dendrobium, dentro del proyecto denominado
“estudios etnobotánicos de orquídeas”, que se efectúa en
la región, Texcoco, Jonotla, Puebla y la Perla Veracruz. Se
realizó propagación de orquídeas del género Stanhopea en
Acapulco, Guerrero, 19, 20 y 21 de febrero de 2015 p. 451-456
La Perla, Veracruz, utilizando el método de reproducción
asexual de división por pseudebulbos, probando tres
sustratos (De Jesús Rivera, L. 2014), sin embargo el número
de plantas producido es muy bajo.
En México, las plantas ornamentales, a pesar de no ser un
producto básico como son las frutas u hortalizas, revisten
gran importancia cultural, ambiental, social y económica.
Se aprovechan más de 1 000 especies con una superficie de
20 000 hectáreas distribuidas en 20 estados de la república y
generando 150 000 empleos directos. 90% de la producción
se destina al mercado nacional y 10% a la exportación,
principalmente como flor de corte y esquejes (Guzmán, 2011).
Las entidades federativas líderes en superficie sembrada
y en valor de la producción son el Estado de México,
Puebla y Morelos, con 70% y 89%, respectivamente. Las
principales flores son la rosa, gladiola y crisantemo las
cuales ocupan 62% de la superficie sembrada. Destacan de
entre las diferentes especies ornamentales, por su valor de la
producción, en cuanto a la superficie cultivada, las orquídeas,
seguidas por las rosas, hortensias, ciclamen, crisantemos,
lilium, geranios, gerberas y Nochebuenas (Leyva, 2014).
Las Orquídeas pertenecen a la familia Orquidaceae,
considerada la de mayor número de especies entre los
vegetales, se le encuentra en todos los hábitats y en ambientes
muy diversos (Freuler, 2008). Sin embargo, los hábitats con
mayor abundancia son las zonas húmedas y muy húmedas.
Los países con mayor diversidad son los ecuatoriales
(Ecuador, Colombia, Brasil y Perú) Rittershausen, 2007).
452 Acapulco, Guerrero, 19, 20 y 21 de febrero de 2015
México es un país importante por la gran cantidad de
estudios taxonómicos que se han realizado; aquí se han
clasificado más de mil especies de orquídeas, muchas de
ellas endémicas. Cuando llegaron los europeos, aquí ya se
conocía y manejaba la vainilla, orquídea aromática utilizada
para la elaboración de una bebida con chocolate.
A las orquídeas se les encuentra en todo el país pero es más
abundante en zonas cálido-húmedas (Lecoufle, 2006).
A pesar de ser importante en las culturas indígenas y
campesinas, existen alrededor de 20 especies en peligro de
extinción. La principal problemática de la propagación de
las orquídeas es que su sobrevivencia depende de la relación
simbiótica que realizan con los hongos micorrízicos mientras
que en cultivo asimbiótico pueden llegar a germinar hasta
90% de sus semillas.
Por lo antes expuesto, se hace necesaria la investigación de
técnicas de propagación que permitan la conservación y una
explotación sustentable, que a la vez proporcione beneficios
a las comunidades de las regiones de origen.
Justificación
El Centro de Investigaciones Interdisciplinarias y de
Servicio en Ciencia, Naturaleza, Sociedad y Cultura
(CIISCINASYC) ha planteado un proyecto sobre el estudio
etnobotánico de las orquídeas en Jonotla, Puebla, en el cual
la exploración etnobotánica y propagación de las orquídeas
son de interés productivo comercial a futuro, para evitar el
saqueo y explotación irracional. Así, para poder propagar
las orquídeas de manera controlada el método más eficiente
es el cultivo in vitro, el cual ha demostrado en las orquídeas
una gran eficiencia en su germinación y desarrollo; por lo
que se plantea en el presente proyecto crear un laboratorio
de cultivo in vitro para propagar inicialmente las principales
orquídeas del municipio de Jonotla, Pue.
Marco Teórico
Las orquídeas constituyen la familia más grande de las
Angiospermas y por lo tanto la más diversa (Abdelnour y
Muñoz, 1997). El número de especies fluctúa entre 17 000
y 35 000 especies conocidas, las cuales se agrupan en 650 a
900 géneros (Kuan y González, 1993).
Gaudencio Sedano, C. et al.
Se considera la familia con mayor dispersión en el mundo,
procedentes de 800 géneros y alrededor de 130 000 especies,
distribuidas por todo el mundo, excepto los polos y desiertos
de arena, incluso se han encontrado 7 especies en la zona
ártica, pero son más abundantes en las regiones tropicales,
cálido-húmedas (Lecoufle, 2005).
La familia Orquidáceae pertenece a la clase monocotiledóneae
que se caracterizan por una gran diversidad de flores, colores
y aromas, además de las interacciones ecológicas que
presentan con los agentes polinizadores y con hongos con
los cuales forman micorrizas (Lecoufle, 2005).
Las orquídeas fueron conocidas desde la antigüedad, existen
escritos en China de 1 500 años. En Grecia le conocían
desde 375 antes de Cristo, la palabra “orquídea” se deriva
del griego orchis que apareció por vez primera mencionada
en un manuscrito del filósofo griego Theophrastus (371-285
a. C.) el nombre significa “testículo”, haciendo alusión a los
pseudobulbos de algunas especies, y al uso medicinal que se
asignaba a esa flor como afrodisiaca y potencial de fertilidad.
Con el tiempo, la palabra orchis pasó a ser orchidaceae
(término con que se designó a la familia más numerosa del
reino vegetal) (Freuler, 2008).
En México los nativos usaban una orquídea, la vainilla,
para preparar una bebida con el cacao, a la que le conocían
como xocolatl.
Hacia 1731 floreció la primera orquídea tropical de América
en Europa, entonces, se despertó enorme interés por esta
planta, que era cultivada por las clases sociales acomodadas.
Llegó a presentar tanto interés que provocó lo que se le
conoció como la “Orquideomanía” y al saqueo de estas
plantas de sus hábitats naturales en América, llegando a
poner a muchas especies en peligro de extinción.
Las orquídeas son un grupo de plantas muy diverso algunas
de solo unos milímetros de longitud (especies de los géneros
Bulbophyllum y Platystele), hasta otras de gran volumen
y peso como algunas especies de Grammatophyllum. O
bien presentar longitudes de 13.4 m, como es la peruana
Sobralia altissima. Las flores varían en tamaños, desde 1
mm (Platystele) hasta las grandes flores de 15 a 20 cm de
diámetro. (Paphiopedilum, phragmipedium y Cattleya), e
incluso de 76 cm de las flores de Phragmipedium caudatum.
Los aromas son muy diversos, una delicada fragancia en
Cattleya y un hedor característico en algunas especies de
Bulbophyllum (Lecoufle, 2005).
Propagación in vitro de orquídeas y otras ornamentales
Abundantes en las zonas cálidas y húmedas del planeta,
pero con gran adaptación a condiciones ambientales
diversos, secos y cálidos, hasta los húmedos y fríos. Son
plantas herbáceas, perennes, terrestres, o epífitas, a veces
trepadoras (vainilla), a veces saprófitas. Su longevidad es tal
que les consideran eternas, ligadas al árbol en el que viven
(Lecoufle, 2005).
Las orquídeas constituyen una de las familias de plantas
con flores que con más facilidad reconoce la mayoría de las
personas, un nombre que muchos asocian con flores grandes,
bellas y exóticas, muy apreciadas como regalo sofisticado
para ocasiones notables. Sin embargo, esto representa una
visión sesgada de la familia, pues este grupo manifiesta
una gran diversidad de formas florales, muchas de ellas
discretas y carentes de valor ornamental, pero importante
por las relaciones que crean con su ambiente (Velasco y
Beltrán, 2008).
Morfología
Flor: tiene generalmente seis partes que son; tres sépalos
iguales entre sí, ubicados en la parte de atrás y tres pétalos que
están enfrente, de los cuales dos son iguales y uno diferente;
este último se encuentra al centro de la flor, llamado labelo
que es la parte más llamativa y que contiene los órganos
reproductivos. Fruto: son nombrados botánicamente como
cápsulas, divididos en tres en su interior, los hay largos y
ovalados o casi redondos, y pueden tener verrugas o ser
muy angulosos.
Semillas: están hechas de una sola pieza o cotiledón
(monocotiledóneas). En la parte interior de los frutos
podemos encontrar miles de semillas. Su forma general
varía desde forma de hilo (filiforme) o cilíndrica con punta
(fusiforme) y en ocasiones parecen alas o protuberancias.
El tamaño varía desde pocas micras (muy pequeño) hasta
unos 5 milímetros, y su peso varia de 1 a 22 microgramos.
Consta de una cubierta y un embrión, viéndose desprovista
del endospermo que sirve para alimentar al embrión
mientras salen sus hojas. La testa o cáscara está formada
por células muertas y el embrión por un rango de entre
ocho y 200 células.
Hojas: en todas las orquídeas, las hojas son siempre
simples, es decir no presentan divisiones, los márgenes son
enteros y no tienen aserraduras ni espinas, por lo general
son alargadas y angostas, las cuales se conservan durante
453
muchos años. Las hojas de especies que viven en lugares muy
calurosos son cilíndricas, lo que evita que se deshidraten
rápido. Tallos: pueden ser de tres tipos principales: tallos
cilíndricos, pseudobulbos o cormos. Raíces: las raíces
de las orquídeas aéreas están forradas por unas fundas de
células muertas y esponjosas llamadas velamen. Poseen
clorofila bajo esa cubierta, lo que les permite realizar la
fotosíntesis, y facilita la absorción de agua y minerales, ya
que estas plantas dependen para su nutrición de las lluvias
periódicas, nieblas y ramas húmedas; pueden crecer en
todas direcciones y sirven para sujetarse al tronco o ramas
de los árboles (Menchaca et al., 2011).
Distribución de las orquídeas a nivel mundial
La familia Orchidaceae constituye uno de los grupos de
plantas más diversos, con alrededor de 25 mil especies
conocidas a nivel mundial (Chase et al., 2003; Dressler,
2005).
Las orquídeas se distribuyen en todos los continentes
(excepto la Antártida) pero su mayor diversidad se concentra
en las regiones tropicales. Las especies más vistosas han
sido conocidas y apreciadas por diferentes culturas desde
tiempos muy antiguos. En China y en Japón se conoce su
cultivo desde hace al menos 25 siglos.
Figura 1. Distribución total orquidáceas.
Distribución de las orquídeas a nivel nacional
Se estima que alrededor de 40% de las orquídeas existentes
en México son endémicas (Soto, 1996). El país se sitúa en
el límite norte del trópico americano, alberga una notable
riqueza de orquídeas, de las cuales han sido registrados en
el país alrededor de 1 260 especies y 170 géneros (Hágsater
et al., 2005; Soto, 2007).
454 Acapulco, Guerrero, 19, 20 y 21 de febrero de 2015
Figura 2. Distribución de orquidáceas en México.
En México, la mayor variedad y cantidad de orquídeas se
encuentran en los estados de Guerrero, Oaxaca, Veracruz
y Chiapas. Entre ellas, hay una especie muy importante,
originaria de Veracruz, que da un fruto aromático del
que se extrae una sustancia para la repostería: la vainilla
(CONABIO, 2012).
Propagación
La nutrición de las orquídeas
La mayoría de las orquídeas tienen un hábito de crecimiento
epífito, por lo que han evolucionado y se han adaptado para
poder sobrevivir en el medio en que se desarrollan, su medio
generalmente se caracteriza por tener una escasa retención
de humedad y nutrientes. Posiblemente el cambio evolutivo
más importante es el desarrollo de raíces especializadas que
desempeñan varias funciones, además de darles soporte, ya
que, permiten absorber agua y nutrientes del ambiente en
forma muy eficiente a través de una capa de células muertas
llamada velamen que es muy esponjosa y llena de huecos
(Fiatt, 2006).
Otro cambio evolutivo importante es el hecho de que las
orquídeas captan la luz durante el día, pero procesan los
alimentos durante la noche, este cambio es motivado para no
tomar C02 en el día y evitar la deshidratación, este proceso
se le llama Metabolismo Ácido de las Crasuláceas (CAM).
Todos estos aspectos hacen que las orquídeas sean plantas
de crecimiento muy lento.
Gaudencio Sedano, C. et al.
Propagación sexual
La propagación sexual en las orquídeas se puede realizar por
semillas. Deben cultivarse en laboratorio. La orquídea produce
un gran número de semillas, miles por cada fruto, incluso hasta
2 millones de semillas, son de un tamaño como como granos
de polvo. En condiciones naturales sólo unas cuantas logran
germinar debido a que casi no tienen sustancias de reserva y
requieren ser colonizadas por un hongo que vive en el suelo
que le proporciona los nutrientes necesarios para germinar
y desarrollarse en un principio (http://www.infojardin.com/
plantas_de_interior/orquideas.htm).
División. La propagación por división se puede realizar
dividiendo la planta (pseudobulbos) y obtener varios
ejemplares. Se dividen los pseudobulbos y se planta cada uno
en una maceta distinta de tamaño apropiado y con sustrato
fresco. (http://www.infojardin.com/plantas_de_interior/
orquideas.htm).
Cultivo in vitro. La propagación y cultivo de las orquídeas
fue revolucionado a partir de las investigaciones de Knudson
(1922) quien trabajando con semillas pudo germinarlas en un
medio simple con azúcar y a partir de estas investigaciones
una gran cantidad de orquídeas se han podido propagar a
partir de segmentos de hoja, segmentos nodales de plántulas
provenientes de semillas germinadas in vitro, nudos florales,
ápices, rizomas y secciones apicales.
Destacan los trabajos de Arditti y Ernst (1993) quienes
describen las metodologías de propagación in vitro de 83
especies de orquídeas en las cuales se utiliza prácticamente
toda la planta como fuente de inóculo y destacan los medios
de cultivo MS, KC y VW. Los suplementos orgánicos
naturales más importantes son el agua de coco, pulpa de
plátano, caseína hidrolizada, entre otros. Goh (1990) realiza
un trabajo exhaustivo del cultivo in vitro de orquídeas
simpodiales que crecen a lo largo de un rizoma como los
géneros Epidendrum, Dendrobium, Cattleya, Oncidium,
Bulbophyllum y Encyclia, entre otros.
Entre los reguladores de crecimiento más utilizados destacan
en la propagación de Paphiopedilumel uso de 13 μM de BA,
1.6 μM de ANA, 0.15 mM de sulfato de adenina y 15% de
agua de coco (v/v), logrando con este medio la propagación
in vitro y simultáneamente logran el enraizamiento de
Propagación in vitro de orquídeas y otras ornamentales
los brotes obtenidos. (Huang 2001). En Paphiopedilum
philippinensedonde se utilizó como inóculo segmentos de
hoja sembrados en el medio MS con los macroelementos al
50% y suplementado con 1 mg l-1 de TDZ ó 1 mg l-1 de 2,4-D
y 0.1 mg l-1 de TDZ donde se formaron yemas adventicias
directamente de las zonas de corte del tejido en un mes en
oscuridad (Yu et al., 2004).
Cheah y Sagawa (1978) describen el método de propagación
in vitro de Aranda Wendy Scout y Aranthera James Storei,
especies en las cuales se utiliza como inóculo ápices y yemas
laterales cultivadas en el medio VW sólido con 2% de sacarosa
y 15% de agua de coco o 5% de homogenizado de plátano o
en medio líquido con agitación a 160 rpm. Después de ocho
semanas de cultivo se forman los protocormos (PLBs) los cuales
se cultivan exclusivamente en medio líquido sin sacarosa. Las
condiciones de incubación fueron luz continua las 24 h y 26 °C
y una iluminación de 40 µmol m-2 s-1 (Cheah y Sagawa, 1978).
Solis de la Piedra (2002) realizó la evaluación de los medios
de cultivo KC y VW suplementados con pulpa de plátano y
carbón activado en el cultivo in vitro de Brassavola cucullata
L. y Oncidium cebolleta (Jacq.) Sw. Los resultados indicaron
que ambos medios favorecieron respuestas semejantes en
la brotación y el Medio KC (Knudson) fue mejor para la
formación de raíces en ambas especies.
Materiales y métodos
La propagación de las orquídeas de manera eficiente se
realizará mediante la germinación de las semillas en un
medio de cultivo in vitro razón por la cual es importante
contar con un laboratorio de cultivo de tejidos donde se
cuente con las condiciones de asepsia requeridas y los
reactivos, materiales y equipos necesarios. También, se
probarán cortes de porciones de tejidos de pseudobulbos,
hojas o raíces.
El laboratorio. El laboratorio de propagación in vitro de
plantas ornamentales se instalará en el lado oriente del
edificio ¨Efraín Hernández Xolocotzi¨ de la Universidad
Autónoma Chapingo en Chapingo, México, con una
superficie de aproximadamente 22 m2.
Especies vegetales. Las plantas ornamentales inicialmente
a propagar en el laboratorio serán diferentes especies de
orquídeas del municipio de Jonota, Pue.
455
Literatura citada
Abdelnour, E. A. y Muñoz, A. 1997. Rescate, establecimiento,
multiplicación y conservación in vitro de germoplasma de
orquídeas en vías de extinción. Cartago, Costa Rica. Instituto
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