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• Métodos de aislamiento.
Método Cuadrado
Método Zig-Zag
MÉTODO DE LA PLACA DE VERTIDO
• En esa técnica son necesarias diluciones seriales de
la muestra dada.
• Se toma un conjunto de tubos cada uno que contiene
9 ml de agua destilada estéril.
• Luego se agregan 10ml de muestra original al primer
tubo que contiene agua destilada. Desde este tubo
1ml se transfiere al segundo tubo que contiene 9ml
de agua destilada &
• Finalmente 1ml de cualquier dilución adecuada
se mezcla con medio nutriente en la caja petri.
• El contenido se mezcla a fondo mediante una
suave rotación de petrídicos.
• Luego, tales placas se incuban durante un
período de tiempo específico.
Cont..
Aislamiento unicelular por un
micromanipulador
• En este método se puede
seleccionar una sola célula
del cultivo mixto.
• Luego se transfiere a un
medio nutritivo adecuado.
TÉCNICAS DE TINCIÓN
• Propósito de la tinción:
• Para una mayor visualización de las células.
Para el estudio de sus estructuras
Para diferenciar las celdas
Tinción
diferencial Tinción
simple
Tinción Tinción
de Gram ácido-
rápida
Procedimiento de tinción de Gram
Christian gram descubrió en primer lugar el diferencial
técnicas de tinción, para diferenciar los tipos de
bacterias.
Tinción grampositiva:
i. Primero tome las bacterias y se propague en un
portaobjetos limpio.
ii. Este frotis se seca pasándolo sobre la llama azul.
iii. Añadir solu violeta cristalino. & permitir 30-60 seg.
iv. Elimine el exceso de manchas con agua.
v. A continuación, añadir solu yodo. & permitir 60
segundos.
vi. Lavar con agua.
vii. Finalmente lavar el portaobjetos con alcohol.
viii. Lavar con agua & observar bajo el microscopio.
Cont..
• Observación:
• Si la mancha aparece un violeta profundo o negro púrpura,
entonces se llaman como bacterias grampositivas.
• por ejemplo, estafilococos, neumococos, etc.
Tinción gramnegativas:
El procedimiento de tinción es similar al grampositivo.
Si las bacterias no retienen la mancha violeta cristalina,
entonces es contra teñida por safranina durante 10
segundos.
Lavado con agua & observar el frotis bajo el microscopio.
Observación : si se produce color rosado o rojo, se trata de
bacterias gramnegativas. e.g. E.coli, S.typhi etc.
Método de tinción rápida ácida de Ziehl
Neelsons
• Ciertos organismos no son fácilmente teñidos por los
tintes habituales probablemente debido a la
presencia de una capa externa repelente al agua o
alto contenido de lípidos, pero cuando se tiñen con
manchas rápidas de ácido pueden conservar el color
incluso lavado con ácido.
•
• Mycobacterium tuberculosis & Mycobacterium
leprae.
Pneumoccoci Neumonía
Salmonella Tifoidea
Vibriocholera Cólera
Mycoplsma pneumonae Neumonía
Shigella Disentería
TÉTANOS
ÁNTRAX
LEPRA
GRACIAS