Determinación de la incertidumbre en la

medición de la determinación de nitrato con

electrodo selectivo a iones
M. de los A. Arada-Pérez1*, K.Y. Nápoles-Florián2 , J.M. Rodríguez Acebal1
1
Departamento de Química. Facultad de Ciencias Naturales y Exactas, Universidad de Oriente, Santiago de Cuba,
Cuba. 2Geominera Oriente Company. BEU Laboratory

Determination of uncertainty in the measurement of the determination of nitrate

with selective electrode to ions

Determinació de la incertesa en la mesura de la determinació de nitrat

amb elèctrode selectiu a ions

RECEIVED: 24 OCTOBER 2019; REVISED: 20 FEBRUARY 2020; ACCEPTED: 19 MAY 2020

SUMMARY esperado por Nernst para un anión monovalente, el

In this work a commercial nitrate selective electrode
of the brand ORION, USA 9700BNWP was evaluated.
The method used for the determination of the cali-
bration parameters was the method of the additions,
recommended by the IUPAC. The slope value obtained
was (-60.76 ± 1.85 mV ∙ dec-1), according to what was
expected by Nernst for a monovalent anion, the PDL
and LLLR were in the order (10-5mol∙L-1); the response
time (20s) was determined by the direct method. The
ESI was applied to samples of natural waters, by means
of a comparison of paired samples with the spectropho-
tometric method of UV-Visible analysis, without finding
significant differences. The expanded uncertainty of
the measurement was estimated under conditions of
intermediate precision of the analysis for a 95% con-
fidence with values ​​of 10% for contents lower than 10
mg∙L-1 and 6% for higher contents 30 mg∙L-1.
Keywords: ESI, selective electrode to nitrate, deter-
mination of nitrate for visible UV, ESI of liquid mem-
brane, expanded uncertainty.
RESUMEN
En este trabajo se evaluó un electrodo selectivo a ni-
trato comercial de la marca ORION, USA 9700BNWP.
El método empleado para la determinación de los pa-
rámetros de calibración fue el método de las adiciones,
recomendado por la IUPAC. El valor de pendiente
obtenido fue de (-60,76 ± 1.85 mV∙déc-1), acorde a lo
LPD y LIRL estuvieron en el orden (10 -5mol·L-1); el
tiempo de respuesta 20s, fue determinado por el método
directo. Se aplicó el ESI a muestras de aguas naturales,
mediante una comparación de muestras pareadas con
el método espectrofotométrico de análisis UV-Visible,
sin encontrar diferencias significativas. Se estimó la
incertidumbre expandida de la medición en condiciones
de precisión intermedia del análisis para un 95% de
confianza con valores de 10% para contenidos menores
de 10 mg∙L-1 y 6% para contenidos mayores 30 mg∙L-1.
Palabras claves: ESI, electrodo selectivo a nitrato,
determinación de nitrato por UV-visible, ESI de mem-
brana líquida, incertidumbre expandida.
RESUM
En aquest treball es va avaluar un elèctrode selectiu a
nitrat comercial de la marca ORION, USA 9700BNWP.
El mètode emprat per a la determinació dels paràme-
tres de calibratge va ser el mètode de les addicions,
recomanat per la IUPAC. El valor de pendent obtingut
va ser de (-60,76 ± 1.85 mV∙déc-1), d’acord a l’esperat
per Nernst per a un anió monovalent, el LPD i LIRL
van estar en l’ordre (10 -5mg∙L-1); el temps de resposta
20s, va ser determinat pel mètode directe. Es va apli-
car l’ESI a mostres d’aigües naturals, mitjançant una
*Corresponding author:mayarada@uo.edu.cu1;
karel.napoles@sclab.minem.cu2

JULY - DECEMBER 2020 | 215

comparació de mostres aparellades amb el mètode
espectrofotomètric d’anàlisi UV-Visible, sense trobar
diferències significatives. Es va estimar la incertesa
expandida del mesurament en condicions de precisió
intermèdia de l’anàlisi per a un 95% de confiança amb
valors de 10% per continguts menors de 10 mg∙L-1 i 6%
per a continguts majors 30 mg∙L-1.
Paraules clau: ESI, elèctrode selectiu a nitrat, deter-
minació de nitrat per UV-visible, ESI de membrana
líquida, incertesa expandida
INTRODUCCIÓN
En la UEB Laboratorio de la Empresa Geominera
Oriente, se determina en agua las concentraciones del
ion nitrato a través del método ultravioleta – visible1.
El mismo da resultados confiables, pero requiere de
un gran tratamiento de las muestras para su posterior
determinación, teniendo en cuenta que, la muestra a
medir por el método UV-Visible debe ser ópticamente
clara, o sea, ausencia de partículas en suspensión que
interfieran en la respuesta analítica de la medición, el
medio no debe ser viscoso y por tanto se requeriría de
un proceso de filtrado previo, contribuyendo con el
posible aumento de errores en la determinación, sin
olvidar también que la determinación de nitrato por este
método está limitada a la cantidad de materia orgánica
presente en la muestra, en donde esta no debe superar
los 10 %, ya que la misma absorbe a la misma longitud
de onda que el anión nitrato y se hace necesario realizar
la medición a dos longitudes de ondas, la primera donde
absorben ambas especies y la segunda donde absorbe
sola una, para luego por diferencia estimar la cantidad
de absorbancia correspondiente a la cantidad de nitra-
to en la muestra. Es de señalar la existencia de otros
métodos que permiten la determinación de nitrato2-5.
El empleo del método potenciométrico de análisis6 con
el uso de electrodos selectivos a iones, aprovechando
las distintas capacidades analíticas que estos presentan
(posibilidad de realizar las mediciones en el campo de
toma de muestras por lo que se emplean mucho en el
monitoreo ambiental, se aplican casi a cualquier matriz
química, fácil utilización) frente al método espectrofo-
tométrico UV-Visible, donde la muestras a determinar
necesariamente debían permanecer ópticamente claras
durante la determinación, ahora con el empleo de los
electrodos selectivos solo se necesita un dispositivo
(bastante económico) en el cual registrar el poten-
cial que se origina en la celda electroquímica entre el
electrodo indicador y el de referencia a corriente nula,
para estimar mediante una regresión lineal entre el
potencial de respuesta y la actividad del ion primario, la
concentración del anión nitrato presente en la muestra,
en donde, la materia en suspensión (turbidez), el color
y la viscosidad de la muestra no afecta la respuesta
analítica del sensor7-15.
La palabra incertidumbre significa duda, y en su sen-
tido más amplio, incertidumbre de medición significa
duda acerca de la validez del resultado de una medición,
así como de la exactitud del resultado16.
216 | AFINIDAD LXXVII, 591
La definición del término incertidumbre (de medición)
empleada en esta investigación y tomada de la versión
actual adoptada por el Vocabulario Internacional de
Términos Básicos y Generales en Metrología17 es “Un
parámetro asociado con el resultado de una medición,
que caracteriza la dispersión de los valores que podrían
ser atribuidos razonablemente al mensurando.
El parámetro incertidumbre, puede ser, por ejemplo,
una desviación estándar (o un múltiplo dado de ella),
o la amplitud de un intervalo de confianza. En gene-
ral, la incertidumbre de medición comprende muchos
componentes. Algunos de estos componentes, pueden
evaluarse a partir de la distribución estadística de los
resultados de series de mediciones y que pueden ca-
racterizarse mediante desviaciones estándar.
Los otros componentes, que también pueden ser ca-
racterizados por desviaciones estándar, son evaluados
a partir de la suposición de distribuciones de probabi-
lidad basada en la experiencia u otra información. En
Las Guía ISO y normas cubanas, se refieren a estos
casos diferentes como estimaciones Tipo A y Tipo B
respectivamente18,19 . Donde las estimaciones del Tipo
A corresponden al método de evaluación de la incer-
tidumbre mediante análisis estadístico de series de
observaciones y las del Tipo B corresponden al método
de evaluación de la incertidumbre por medios distintos
al análisis estadístico de series de observaciones18.
En muchos casos en análisis químico, el mensurando
será la concentración de un analito. Sin embargo el
análisis químico es utilizado para medir otras cantida-
des, ej. Color y pH. Por lo tanto se utilizará el término
general “mensurando”.
La definición de incertidumbre dada, se enfoca sobre
un intervalo de valores que el analista cree que podría
ser atribuido en forma razonable al mensurando.
En la práctica, la incertidumbre del resultado puede
provenir de muchas fuentes posibles, incluyendo algunos
de los siguientes ejemplos: Definición incompleta del
mensurando (por ejemplo, falla en la especificación de
la forma exacta del analito que se está determinando);
muestreo – puede ser que la muestra medida no re-
presente al mensurando definido; efectos de matriz e
interferencias; conocimiento insuficiente de los efectos
de las condiciones ambientales sobre el procedimiento
de medición, o medición imperfecta de las condiciones
ambientales; sesgo debido al personal al leer instrumen-
tos analógicos; incertidumbre de pesadas y de equipo
volumétrico; resolución instrumental o discriminación
de la tolerancia; valores asignados a estándares de me-
dición o materiales de referencia; valores de constantes
u otros parámetros obtenidos de fuentes externas y
que son utilizados en el algoritmo de reducción de
datos; aproximaciones y suposiciones incorporadas
en el método y procedimiento de medición; variación
aleatoria; trazabilidad del método, etc.
Por lo que en este trabajo nos propusimos, emplean-
do el método potenciométrico de análisis determinar
iones nitrato con el electrodo comercial combinado
selectivo de membrana líquida modelo Thermo Scien-
tific 9700BWNP ORION VERSASTAR en muestras
de aguas naturales garantizado una buena precisión,
sensibilidad y veracidad en los resultados.
 Ecuación 2

𝑢𝑢𝑠𝑠2𝑅𝑅𝑅𝑅 Es la incertidumbre Ecuación

Ecuación
Ecuación 3 típica asociada 3
con la 3precisió
Ecuación 2

donde intervieneEcuación
la variabilidad
3 asociada con los errore
Siendo 𝑢𝑢𝑐𝑐(𝑁𝑁𝑁𝑁3−) la incertidumbre combinada absoluta de iones nitrato expresada en mg·L-1.
Siendo𝑢𝑢la𝑐𝑐(𝑁𝑁𝑁𝑁
Siendo
como 𝑢𝑢raíz − −la laincertidumbre
incertidumbre combinada
combinada absoluta
absoluta dedeio
MATERIALES Y MÉTODOS 3 )cuadrada de lacombinada
sumatoria de los cuadrados
Siendo 𝑐𝑐(𝑁𝑁𝑁𝑁 ) incertidumbre
3la absoluta
Donde:
Siendo 𝑢𝑢𝑐𝑐(𝑁𝑁𝑁𝑁3−de
) laiones nitratocombinada
incertidumbre expresada en mg·L
absoluta -1
. nitrato expresada en mg·L .
de iones -1

Todos los reactivos empleados fueron de calidad𝑢𝑢ana-

2
𝑠𝑠𝑅𝑅𝑅𝑅 Es la incertidumbre Donde:de
Donde:
serie típicanasociada réplicas con lade precisióncontenido del analito
estimada (precisión en alt
intermedia),
lítica. El agua fue bidestilada con conductividadDonde: ≤2 Donde:
µS∙cm-1. donde interviene2la2variabilidad asociada con los errores aleatorios del análisis, se calculó
El reactivo empleado, KNO3 marca REACHIM, puro
𝑢𝑢𝑠𝑠2𝑅𝑅𝑅𝑅 Es la incertidumbre 𝑠𝑠𝑅𝑅𝑅𝑅EsEs
𝑢𝑢𝑅𝑅𝑅𝑅
𝑢𝑢𝑠𝑠incertidumbre Eslalalaincertidumbre
incertidumbre
típica asociada
incertidumbre asociada
con la precisión
típicaa típica
típica los asociada
asociada (precisióncon
con lacon
duplicados
estimada
asociada pre- de laprecisión
precisió
laniveles
intermedia), de
como
para análisis, fue secado a 105 0C antes de su pesada en la raíz cuadrada
cisión de la sumatoria
estimada (precisión de losintermedia),
cuadrados de donde la incertidumbre
interviene asociada a una
donde interviene la variabilidad asociada con los errores aleatorios del análisis, se calculó
balanza analítica Mettler. Las soluciones más diluidas
serie dondedonde
la empleando
variabilidad interviene
interviene el mismo
asociada lala variabilidad
con método,
los errores
variabilidad asociada
enasociada
el mismo
aleatorios con con losloserrores
laboratorio
del errore
y la y
se prepararon por dilución de la más concentrada. comode la raízn réplicas
análisis,
cuadrada dede
secontenido
lacalculó
sumatoria del
como analito
de losla cuadrados en altas
raíz cuadrada de layincertidumbre
debajas concentraciones
la sumatoria asociada a una
El electrodo indicador selectivo empleado es uno co-
incertidumbre de los cuadrados
asociada de la incertidumbre asociada a analito
una de interés,
mercial combinado a nitrato de membrana líquida de serie de n réplicas
la como
seriecomo
estudio. dedelanla
losraíz
a contenido
raíz
réplicas cuadrada
duplicados
cuadradadel analito
de contenido dede
de niveles la
enlaaltas desumatoria
contenido
sumatoria
del analito
delde
ende loslos
y bajas concentraciones
altas cuadrados
ycuadradosy la d
Thermo Scientific 9700BWNP. La solución de llenado empleando
incertidumbre bajas
el mismo
asociada concentraciones
método,a los en el mismo
duplicados y de
la incertidumbre
laboratorio
niveles de asociada
y elcontenido
mismo analista aen
del analitolosunade semana
interés, de
interno, se realizó con soluciones suministrada por la serieseriedededen niveles
duplicados nréplicas
réplicas dedecontenido
de contenido contenido
del analito del dedel analitoen4enaltas
Ecuación
analito
interés, alt
marca ORION VERSASTAR. estudio.
empleando el mismo empleando método,elen mismoel mismo laboratorio
método, en yelelmismomismo analista
laboratorioen una semana de
La calibración de los electrodos se realizó a través del y el mismo analista asociada
incertidumbre en2 una semana aloslosde estudio.
duplicados
método de las adiciones aceptado por la IUPAC20, en un
estudio. incertidumbre u
asociada : es laa4incertidumbre
Ecuación
1 duplicados dedeniveles
asociada niveles
a unadede
intervalo de 10-5- 1 mol·L-1, para obtener un intervalo u12 : es la incertidumbreEcuación asociada Ecuación
4a una serie 4 de n réplicas.
de actividad del ion primario de 10-9-10-2mol·L-1. empleandoelelmismo
empleando mismo
u22 : es método,
método,
la incertidumbre enenelelmismo mismo laboratorio
laboratorio
asociada a una y
y el
2
Para la determinación del Tiempo de respuesta se uu21::es
2 es la la incertidumbre
incertidumbre asociada asociadaaauna unaserie seriededen nréplicas.
duplicados.
empleó el método directo21; los coeficientes de selecti- estudio.
estudio.
u22 : es la incertidumbre asociada a una serie de n duplicados.
vidad potenciométricos fueron determinados a través
del método de las soluciones mezcladas20.
Los equipos empleados fueron: Balanza Digital de
usesgo Esta incertidumbre
la usesgo se Esta
Esta incertidumbre
cuantificó
incertidumbre
a partir de ensayos se cuantificó
se cuantificó
de recuperación
a partir aEcuación
Ecuación
partir 4 4ensay
de
a dos niveles
de
de
𝑢𝑢 𝑐𝑐.𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐 La incertidumbre de la curva de calibración se c
Mettler, modelo AE 160; Estufa de la MEMERT, modelo usesgo Esta incertidumbre
concentración,
ensayos deserecuperación
cuantificó a partir
para el criterio de aceptación
a dosde niveles
ensayos de concentración,
de recuperación
del porciento de recuperación se escogió el
a dos niveles de
2
2 : es ladel
100-800; Agitador Magnético de la Jenway, modelo para el criterio de u
concentración, 1u
aceptación
:1es ladel
para incertidumbre
elincertidumbre
criterioporciento de de asociada
recupe-
asociada
aceptación del aporcie
a una una se
1000; pH-Metro Digital de la Thermo Scientific, modeloconcentración, para
estadístico t deración sumatoria
Student.
else criterio
escogió deaceptación
de ellos cuadrados
estadístico porciento dede larecuperación
t de Student. desviación estándar
se escogió el
ORION VERSASTAR; Cronómetro de la ZTE, modelo 2
estadístico t de Student.
estadístico t de u22uStudent.
: es
:Ecuación
2es lala 5incertidumbre
incertidumbre 5 deasociada
asociadaa una a seuna se
331; Micropipeta (10-100 µL) RONGTAl, modelo 15307 𝑐𝑐.𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐 La incertidumbre
𝑢𝑢intercepto. de la curva
Ecuación calibración c
y Espectrómetro UV-Visible Génesis, modelo 10S Ecuación 5
RSd: desviación estándar relativa de la recuperación.
Toda la data experimental fue procesada empleando sumatoria de estándar
los cuadrados Ecuación 5
los programas Origin 8.023 y Stargraphics 5.124 y el RSd: desviación relativa de lade la desviación
recuperación. Ecuación estándar
6
n: número de réplicas del ensayo.
intervalo de confianza fue estimado por la siguiente Esta incertidumbre
usesgoEsta
uintercepto.
sesgo incertidumbre
n: número de RSd: sese
réplicasdesviación
del cuantificó
cuantificó
ensayo. estándar a partir
a partir dedeensayos
relativa ensay de
ecuación. 𝑠𝑠𝑎𝑎 : desviación estándar de la p
𝑢𝑢𝑐𝑐.𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐 La
𝑢𝑢𝑐𝑐.𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐 La incertidumbre de La
incertidumbre
incertidumbre
la curva de calibración dede la la curva
se curva
calculóde
de
calibración
como
calibración se c
la raíz cuadrada de la
ecuación 1 seconcentración,
concentración,
calculó como la para raízpara elelcriterio
cuadrada criterio
den: la de deaceptación
número
sumatoriaaceptación
de
de del
réplicas
Ecuación
los delporcien
6porcie
del e
sumatoria decuadrados los cuadrados de la
de desviación
la desviación estándar
estándar
𝑠𝑠𝑏𝑏 : desarrollada
desviación
desarrollada por
estándar
por
la pendiente y
del
el
in
sumatoria de los cuadrados de la desviación estándar
Dónde: ∆X: intervalo de confianza : nivel de signi- la estadístico
pendiente y elt de
estadístico t deintercepto. Student.
Student.
de 𝑢𝑢𝑐𝑐.𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐𝑐 La incertidumbre de la curva de calibración𝑠𝑠se𝑎𝑎 :calculó
ficación,: grados de libertad, : desviación estándarintercepto. desviación estándar de la p
como la raíz cuadrada de la
la pendiente. intercepto. Ecuación 6
Ecuación 6 desarrollada por la pendiente y el
La incertidumbre expandida de la medición se calculó sumatoriaude los cuadrados de la desviación estándar
𝑠𝑠𝑏𝑏 : desviación Ecuación5 5del in
Ecuación
Pot La incertidumbre del potencial deestándar respuesta se
según el método establecido en la literatura especia- intercepto. 𝑠𝑠𝑎𝑎 : desviación estándar de la pendiente Ecuación 6
lizada aplicando la metodología descrita en la guía RSd: desviación estándar relativadede
de incertidumbre de la medición (GUM)16,19 por sus repetibilidad 𝑠𝑠𝑏𝑏 : desviaciónde RSd: desviación
Ecuación
lasestándar
mediciones6
del intercepto enestándar
el equipo, relativa
la resoluci la
siglas en inglés, donde lo primero que se realiza es la 𝑠𝑠𝑎𝑎 : desviación estándar de 𝑎𝑎 𝑠𝑠 : desviación
la pendiente estándar de la p
n: n: número
número de réplicas
dederéplicas del
del seen e
identificación del mesurando, en este caso corresponde Pot La
uredondeo incertidumbre
en
La incertidumbre las cifra
𝑠𝑠𝑏𝑏 : desviación de del
del significación.
estándar potencial
del potencial
intercepto de respuesta respuesta
al ion nitrato en aguas naturales, luego se identifican uPot La incertidumbre se cuantificó del teniendo
potencial de cuenta𝑠𝑠la
enrespuesta 𝑏𝑏 : desviación estándar del in
se repetibilidad
cuantificó de
teniendo las en cuenta la
las posibles fuentes de incertidumbre que tributan al mediciones
repetibilidad en el equipo,
de las la resolución reportada
mediciones en el equipo, por el la resoluci
análisis y se cuantifican, posteriormente se lleva a repetibilidad
un uPot La deincertidumbre
las mediciones
fabricante y el en el equipo,
delredondeo
potencial de en
lalasresolución
respuesta cifra dereportada
se cuantificó
porEcuación
significación. el fabricante 7
teniendo en cuenta la
y el
modelo matemático donde se calcula la incertidumbre redondeo en las cifra de de las significación.
combinada de la medición como la raíz cuadrada de redondeo
repetibilidad
en las: cifra es lade significación.asociada a la repe
mediciones en el equipo, la resolución reportada por el fabricante y el
𝑢𝑢(𝑃𝑃𝑃𝑃𝑃𝑃.𝑟𝑟𝑟𝑟𝑟𝑟) incertidumbre
la sumatoria de los cuadrados de las incertidumbres redondeo u en
Pot las La
cifra de incertidumbre
significación. Ecuación 7del potencial Ecuación de 7respuesta se
típicas calculadas.(Ecuación 2).
𝑢𝑢(𝑃𝑃𝑃𝑃𝑃𝑃.𝑟𝑟𝑟𝑟𝑟𝑟)asociada
: esEcuación 7
la aincertidumbre Ecuacióna7la res
asociada
Para este estudio la incertidumbre combinada se 𝑢𝑢(𝑃𝑃𝑃𝑃𝑃𝑃.𝑟𝑟𝑟𝑟𝑟𝑟)repetibilidad : es la incertidumbre
de las
la repetibilidad del potenciómetro
mediciones en el equipo, la resoluci
𝑢𝑢(𝑃𝑃𝑃𝑃𝑃𝑃.𝑟𝑟𝑟𝑟𝑟𝑟) : es la incertidumbre asociada a la repetibilidad del potenciómetro
calculó de la siguiente manera:
𝑢𝑢(𝑃𝑃𝑃𝑃𝑃𝑃.𝑟𝑟𝑟𝑟𝑟𝑟) : es la 𝑢𝑢 incertidumbre : es la incertidumbre
asociada asociada a la repe
a la resolución del potenciómetro
𝑢𝑢(𝑃𝑃𝑃𝑃𝑃𝑃.𝑟𝑟𝑟𝑟𝑟𝑟) : es (𝑃𝑃𝑃𝑃𝑃𝑃.𝑟𝑟𝑟𝑟𝑟𝑟)
𝑢𝑢(𝑃𝑃𝑃𝑃𝑃𝑃.𝑟𝑟𝑟𝑟𝑟𝑟) : eslas la cifra
la incertidumbre incertidumbre
asociada a la resolución asociada al rendodeo e
del potenciómetro
redondeo en de significación.
𝑢𝑢(𝑃𝑃𝑃𝑃𝑃𝑃.𝑟𝑟𝑟𝑟𝑟𝑟)
𝑢𝑢
: es la incertidumbre asociada al rendodeo en la última cifra de
: es la incertidumbre asociada al rendodeo en la última cifra de significación
significación
𝑢𝑢(𝑃𝑃𝑃𝑃𝑃𝑃.𝑟𝑟𝑟𝑟𝑟𝑟) : es la incertidumbre asociada a la reso
(𝑃𝑃𝑃𝑃𝑃𝑃.𝑟𝑟𝑟𝑟𝑟𝑟)

Ecuación 2 𝑢𝑢𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚
𝑢𝑢𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚 𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜 : Es la: Es
𝑢𝑢𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚 𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜 incertidumbre
la incertidumbre :asociada
: Es
Es la
asociada
𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜 laalalincertidumbre
incertidumbre
análisisdede
análisis rutina
rutina elasociada
según
según Ecuación
asociada
el método.
método. alIncluye
Incluye análisis
7
al análisis de rutina según el método. Incluye la in-
Ecuación 3 la incertidumbre 𝑢𝑢 asociada
la incertidumbre
certidumbre a:asociada
asociada es
a la
la lapreparación
incertidumbre
preparación del patrón
a la del asociada
patróny yel el
preparación
supresor dealinterferencias,
y rendodeo
de interferencias,
supresor
del patrón e
la(𝑃𝑃𝑃𝑃𝑃𝑃.𝑟𝑟𝑟𝑟𝑟𝑟)
incertidumbre
𝑢𝑢 (𝑃𝑃𝑃𝑃𝑃𝑃.𝑟𝑟𝑟𝑟𝑟𝑟) : es asociada
la a
incertidumbre la preparación
asociada del
a lapatrón
repe
el supresor de interferencias, tolerancias de pipetas,
tolerancias de pipetas, volumétricos, balanzas, masas molares, etc. En esta fuente de
tolerancias de pipetas, volumétricos, balanzas, masas molares, etc. En esta fuente de
volumétricos, balanzas,
todos losmasas
𝑢𝑢𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚𝑚 𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜𝑜
incertidumbre se decidió agrupar molares,
: Es la incertidumbre
componentes etc.en En
asociada
que tributan esta
menor al análisis
cuantía al
incertidumbre tolerancias
se decidió𝑢𝑢agrupar detodos
(𝑃𝑃𝑃𝑃𝑃𝑃.𝑟𝑟𝑟𝑟𝑟𝑟)
pipetas,
: es
los la volumétricos,
incertidumbre
componentes balanzas,
que tributan asociada
en a masas
laalres
menor cuantía
peso matemático de la incertidumbre combinada en la determinación del mesurando.

Modo delaoperación
peso matemático deincertidumbre
la incertidumbre asociada
combinada
del Espectrómetro JULYen
Génesis - la
10S a la preparación
determinación
UV-Visible | 217 del
patrón
del mesurando.
incertidumbre se decidió agrupar todos los componente
DECEMBER 2020
𝑢𝑢(𝑃𝑃𝑃𝑃𝑃𝑃.𝑟𝑟𝑟𝑟𝑟𝑟) : es la incertidumbre asociada al rendodeo e
Modo de operación
Introducir del Espectrómetro
los valores Génesis
de nombre de la prueba. 10S UV-Visible
Especificar el valor de longitud de onda de
fuente de incertidumbre se decidió agrupar todos los
componentes que tributan en menor cuantía al peso
matemático de la incertidumbre combinada en la de-
terminación del mesurando.
Modo de operación del Espectrómetro Génesis
10S UV-Visible
Introducir los valores de nombre de la prueba. Especi-
ficar el valor de longitud de onda de trabajo. Posicionar
las muestras. Ajustar los parámetros. ombrar el archivo
de datos. Definir las concentraciones de los estándares.
Medir la curva de calibración. La pantalla de Estánda-
res muestra la absorbancia de todos los estándares, la
pendiente, la intersección y el coeficiente de correlación
de la curva estándar y medir las muestras.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Los parámetros de calibración obtenidos para el ESI
a nitrato comercial son: S (mV.déc-1) -60,76±1.85; LPD
(mol·L-1) 1.48·10-5; LIRL (mol·L-1) 3.17·10-5; R2 = 0,985 y
Sd (S) mv∙déc-1 igual a 0.93.
El electrodo mostró pendiente de -60.76 mV∙déc-1,
concordantes a las obtenidas con los plastificantes:
DBP, TEHP, o-NPOE y DOP en ESI de membrana
líquida polimérica, con la sal cuaternaria NTDA (-61.2
± 0.2,-59.9 ± 0.9, -56.4 ± 0.8, -59.6 ± 0.4 mV∙déc-1 res-
pectivamente)25. Respecto al LPD, están en el mismo
orden que otros homólogos comerciales, pero superiores
a los reportados por Arada Pérez25, para ESI a nitrato
con membrana líquida y la sal cuaternaria de amonio
NTDA: 9.59 ·10-6> 8.49 ·10-6> 7.79· 10-6> 9.59 ·10-6> 5.30
·10-6 mol·L-1 respectivamente.
Las cuatro curvas de calibración fueron comparadas a
través de los intervalos de confianza de las pendientes
y los términos independientes (intercepto).
Tabla 1. Comparación de las curvas de calibración
realizadas (todos los términos están expresados en
mV∙déc-1).
El valor escogido de t = 2.131 (a=0.05) con 15 grados de
libertad corresponde a la tabla de valores críticos para
la distribución t de Student para pruebas bilaterales.
Como se puede apreciar el valor de pendiente de la
curva 2 no cae dentro de los intervalos de confianza de
los valores de pendiente de las otras curvas realizadas,
no siendo así los correspondientes al intercepto elimi-
nando la posibilidad de existencia de sesgo entre las
218 | AFINIDAD LXXVII, 591
curvas, sin embargo la posibilidad de haber encontrado
diferencias entre los valores de pendiente aplicando el
mismo proceder analítico nos infiere que la incertidum-
bre debida a la preparación de la curva de calibración
es variable ya que como todos sabemos mientras el
valor de pendiente esté más cercano al esperado por
Nernst para aniones monovalentes (-59.16 mV∙déc-1) a
25 0C la respuesta del sensor es más estable y precisa.
No obstante, los valores obtenidos en esta prueba no
son definitivos para inferir la posibilidad de falta de
reproducibilidad en la respuesta del ESI, existen otros
factores sujetos al aumento de los errores casuales y
causales en la preparación de la curva.
Se elaboró una regresión lineal entre la respuesta
del electrodo frente a diferentes actividades del ion
primario, como se muestra en la Figura 2.
Figura 1. Curva de calibración para la determinación de
la linealidad.
En la Figura 1, a partir del rango de actividades fi-
nales y del potencial medido, se obtuvo el coeficiente
de determinación ajustado (`R2) igual a 0,985, el cual
indica el grado de ajuste del modelo referido a los gra-
dos de libertad; la pendiente de -60,76 mV∙déc-1; com-
probándose la respuesta nernstiana del electrodo, el
coeficiente de correlación (r) fue de 0.992 lo cual nos
indica la fuerte relación que existe entre el potencial
de respuesta originado en la celda electroquímica y el
logaritmo de la actividad del ion primario.
Los estadísticos calculados de la regresión son: Coe-
ficiente de correlación (r) igual a
0.992; Coeficiente de determinación (R2) igual a 0.985;
R2 ajustado (`R2) igual a 0.985 para (n= 68) observaciones.
La prueba elegida para comprobar la linealidad del
método fue la del análisis de varianzas (ANOVA) entre
el potencial de respuesta de la celda electroquímica y
la actividad del ion primario.
Tabla 2. Análisis de varianza realizado para la determi-
nación de la linealidad.
S.C.: Suma de cuadrados, g.l.: grados de libertad, C.M.:
cuadrado medio.
 Como se puede observar en la tabla ANOVA, el p-
Valor es inferior al nivel de significación (α=0,01), lo
cual indica para un 99% de confianza que la regresión
desarrollada entre el potencial de respuesta y la actividad
del ion primario se ajuste a un modelo lineal.
Del estudio de las interferencias al ion interferente
Cl- a dos niveles de concentración (10-1 y 10-2mol·L-1),
arrojo que este ion es fuertemente interferente en la
determinación de nitrato con valores-1respectivos de sus
coeficientes de selectividad de 2,0∙10 y 5,09∙10 mol·L-1,
-2

por lo que de estar presente en muestras reales, se hace

necesario eliminarlo con un supresor de interferencias,
sino la respuesta del sensor se vería afectada ya que
disminuye el rango analítico de trabajo.

Aplicación del ESI a la determinación de nitrato

en muestras de aguas naturales.
A las muestras de aguas naturales, se le determinó
nitrato, empleando el ESI comercial, a través del método
potenciométrico de análisis y el método UV-visible, es-
tablecido en el Estándar Método. En la tabla 3 siguiente
se pueden observar los resultados obtenidos al aplicar
ambos métodos a las muestras, se realizó la prueba de
muestras pareadas para evaluar la existencia de dife- Figura 2. Fuentes de incertidumbre asociadas a la
rencias significativas entre las medias de las réplicas determinación de nitrato con ESI comercial.
realizadas por ambos métodos.
En las siguientes tablas se muestran los diferentes
Tabla 3. Estadísticos calculados a las réplicas realizadas componentes asociados a la incertidumbre combinada
por ambos métodos. en la determinación del ion primario con su corres-
pondiente peso matemático en el cálculo de la incer-
tidumbre relativa.

Tabla 4. Cuantificación de las fuentes de incertidumbre

(Tipo A) en la determinación de iones nitrato por el ESI
comercial.

Como se observa en la tabla el P-Valor fue muy su-

perior al nivel de significación escogido (a=0.05) en
todos los niveles de concentración analizados, lo cual
demuestra que no existen diferencias estadísticamente
significativas entre las medias de las concentraciones
en los distintos niveles del analito determinado, para
un 95% de confianza. Incluso si se escogiera un nivel
de significación correspondiente a 0.001 que equivale al
99.9% de confianza para todos los niveles de concentra-
ción, la probabilidad de que las diferencias de las medias
sean distinta de cero entre los dos métodos estarían
en un orden inferior al 1 por 1000, o sea, bien bajas.

Cálculo de la incertidumbre
En la siguiente figura se desglosa mediante un dia-
grama de causa y efecto las principales fuentes de
incertidumbre que tributan al análisis bajo condiciones
de precisión intermedia del análisis.

JULY - DECEMBER 2020 | 219

 Tabla 5. Cuantificación del sesgo del análisis por añadido La incertidumbre expandida relativa calculada resultó
y recobrado (veracidad del método) para niveles de concentración superior en menor valor
mientras que para mayor nivel de concentración resultó
inferior, esto se encuentra en concordancia con las
diferentes incertidumbres típicas calculadas y el aporte
de cada una de ellas a la incertidumbre combinada de la
medición ya que como se muestra en el figura 3 al ser la
precisión del método el de mayor peso matemático en
el modelo de cálculo seleccionado es de esperar que el
comportamiento de la incertidumbre expandida relativa
a distintos niveles de concentración bajo las mismas
condiciones de análisis empleadas en este estudio tenga
un comportamiento análogo a la precisión del método
o sea a menor concentración disminuye la precisión
(valor numérico aumenta, aumenta la presencia de
errores aleatorios en el método), a mayor concentración
aumenta la precisión (valor numérico disminuye, dis-
El cálculo texp. Se siguió según lo reportado en la minuye la presencia de errores aleatorios en el método).
referencia26.
Ecuación 8
Ecuación 8

𝑑𝑑𝑑𝑑𝑑𝑑𝑑𝑑𝑑𝑑 t exp (𝑎𝑎, 𝑔𝑔. 𝑙𝑙) < t tab (𝑎𝑎, 𝑔𝑔. 𝑙𝑙)

La recuperación del contenido de nitrato fue significativa: t exp (a, gl) Student para
La recuperación del contenido de nitrato fue significa-
-1
concentraciones
tiva:<10
t expmg·L fue de 2.17 y t tab (a, gl) Student de 2.365;
(a, gl) Student para concentraciones
para-1concentraciones
<10 mg·L fue
de 2.17 y t tab (a, gl) Student de 2.365; para concentraciones
≥30mg·L-1 la t exp (a, gl) Student fue de 1.47 y la t tab (a, gl) Student fue de 2.262, por lo que se
≥30mg·L la t exp (a, gl) Student fue de 1.47 y la t tab (a, gl)
-1

acepta. Student fue de 2.262, por lo que se acepta.

Como se observa en las tablas 4 y 5 están desglosados

los principales componentes de mayor aporte al peso Figura 3. Influencia de las diferentes incertidumbres
Como se observa en las tablas 4 y 5 están desglosados los principales componentes de mayor
matemático de la ecuación para el cálculo de la incerti- típicas calculadas en la incertidumbre combinada en
dumbre de
porte al peso matemático combinada
la ecuacióndepara
la medición en lala incertidumbre
el cálculo de determinación combinada de la contenido menor de 10 mg∙L-1.
de nitrato con el electrodo selectivo a nitrato Orion
VERSASTAR
medición en la determinación en aguas
de nitrato con elnaturales, las cuales
electrodo selectivo se obtuvie-
a nitrato Orion VERSASTAR
ron sobre la base de mediciones repetidas, siendo estas, CONCLUSIONES
n aguas naturales, las cuales se obtuvieron sobre la base de mediciones repetidas, siendo estas, el
el sesgo del análisis mediante ensayos de recuperación
esgo del análisisy mediante
la propiaensayos
precisión del análisisy bajo
de recuperación condiciones
la propia de análisis bajo
precisión del El ESI evaluado, presentó pendiente de -60,76±1,85
precisión intermedia del método desarrollado; esto se mV∙déc-1, con valor de su LPD y LIRL en el rango de 10-5
encuentra
ondiciones de precisión en concordancia
intermedia por lo referido
del método desarrollado; por otros
esto se encuentra mol·L-1, con un tiempo de respuesta rápido, alcanzando
en concordancia
autores y la literatura especializada consultada 4-7
4-7
en su estabilidad a los 20 s. Fue posible la determinación
por lo referido portrabajos
otros autores y la literaturaal
relacionados especializada
cálculo deconsultada
incertidumbre en trabajos
en relacionados
de nitrato en muestras de aguas naturales a través del
mediciones analíticas.
l cálculo de incertidumbre en mediciones analíticas. método potenciométrico de análisis. La incertidumbre
Se calcularon las incertidumbres típicas relativas de la medición estimada, demostró que bajo condiciones
Se calcularon las asociadas a latípicas
incertidumbres tolerancias
relativasdeasociadas
los equipos de volumen,
a la tolerancias de de
de los equipos precisión intermedia del análisis a niveles inferiores
diferencias en la temperatura de calibración y tempe- de contenido del analito resultó mayor el componente
volumen, diferencias en la
ratura detemperatura
trabajo del de material
calibraciónvolumétrico
y temperaturaempleado
de trabajo del material
de la Ur (10%) que para niveles de mayor contenido del
certificado de pureza de los reactivos, tolerancia de la
volumétrico empleado certificado de pureza de los reactivos, tolerancia de la balanza analítica
analito, donde Ur fue menor (6%).
balanza analítica utilizada así como la incertidumbre
utilizada así comoasociada a la masa
la incertidumbre molaradel
asociada la analito
masa molarensayado, las ensayado,
del analito que las que
resultaron los de menor aporte significativo a la incer- REFERENCIAS
esultaron los de tidumbre
menor aporte significativode
combinada a la
la incertidumbre
medición, elcombinada
componente de la medición, el
matemático total resultó menor frente al presupuesto
omponente matemático total resultó menor frente al presupuesto desglosado en las mediciones
1. H. Higuchi and S. Motomizu, Flow-Injection Spec-
desglosado en las mediciones repetidas. trophotometric Determination of Nitrite and Ni-
epetidas. Las incertidumbres expandidas relativas calculadas trate in biological Samples, Analyst. Sci. 15 (1999)
en 2 niveles de concentración de nitrato en mg∙L-1 129-134.
(10mg∙L-1< x con una U (relativa) % = 10 y ± 0,10 x C ; 2. R., Belgrano, Colasurdo V., and Díaz O. Quím
x ≥30 mg∙L-1 con una U (relativa) % = 6 y y ± 0,06 x C) Nova 26.5 (2003).
para un 95% de confianza, con factor de cobertura k=2.

220 | AFINIDAD LXXVII, 591

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