ANALISIS INSTRUMENTAL

ESPECTROSCOPIA DE EMISION Y ABSORCION ATOMICA

I. INTRODUCCIÓN

Espectroscopía es la medición e interpretación de la radiación electromagnética absorbida,

dispersada o emitida por átomos, moléculas u otras especies químicas. Estos fenómenos están
asociados con cambios en los estados de energía de las diferentes especies. Por consiguiente,
dado que cada especie posee estados energéticos característicos, la espectroscopía puede
utilizarse para identificarlas y cuantificarlas.

La espectroscopía constituye la base del análisis espectroquímico, en el que la interacción

de la radiación electromagnética con la materia se utiliza para obtener información cualitativa y
cuantitativa acerca de la composición de una muestra. Dentro del análisis espectroquímico, la
espectroscopía atómica estudia la absorción y emisión de la radiación por especies atómicas,
iónicas y moleculares libres. Estas especies son generadas y examinadas en un medio gaseoso
de alta energía, que constituye una fuente de vaporización-atomización-ionización-excitación.

1. Técnicas de espectroscopía atómica con llama.

Cuando una solución es introducida por aspiración en una llama, la mayor parte de los
componentes inorgánicos son vaporizados y convertidos en su forma elemental, y los átomos
son excitados térmicamente por la energía generada mediante reacciones químicas.

En un átomo en su estado de menor energía (estado fundamental), uno de los electrones de

valencia correspondiente a un orbital externo es transferido a un estado electrónico de mayor
energía. Al retornar al estado fundamental o a uno de menor energía, los átomos pierden su
energía de excitación en forma de calor o como radiación electromagnética de longitud de onda
característica.

Explique el origen y. las características de los espectros atómicos, moleculares y continuos.

La absorción de energía térmica generada en una llama seguida por la emisión de toda o
parte de esa energía en forma de una línea espectral discreta se denomina emisión atómica. La
longitud de onda y la intensidad de las líneas de emisión constituyen la base del análisis
cualitativo y cuantitativo por espectrometría de emisión atómica (EEA).

Los átomos neutros gaseosos en su estado fundamental pueden también absorber radiación
a longitudes de onda específicas, correspondientes a las energías de las transiciones
electrónicas en sus orbitales externos. Este fenómeno se denomina absorción atómica. La
medición de la magnitud de esa absorción atómica y su aplicación al análisis cuantitativo
constituyen la espectrometría de absorción atómica (EEA).

La fuente primaria de radiación luminosa es generalmente una lámpara de cátodo hueco del
elemento de interés.

Los factores principales que determinan la magnitud de la emisión y absorción son:

! la distribución energética de niveles excitados.
! las probabilidades de transición para emisión y absorción.
! el coeficiente de absorción atómica.
! las características de la celda de atomización

1
 Indique las expresiones fundamentales que relacionan las señales medidas en emisión y
absorción atómica con la concentración de átomos emisores o absorbentes .

1. Instrumentación

Celda de Detector
atomización

Monoc
romado
r

Modul
ación
sincrón
ica
Dis
posi
tivo
de
lect
ura

2
 Amplificador

Explique el funcionamiento de cada uno de los componentes, e indique cuáles se utilizan para cada técnica.
Identifique las características específicas del instrumento que utilizará en la práctica.

2. Calibración

Como todas las técnicas instrumentales, la espectrometría de llama es una técnica relativa. Por consiguiente,
es necesario establecer experimentalmente una curva (o función matemática) que relacione la señal analítica obtenida
con la concentración del elemento analito en las soluciones a analizar. En el caso más directo, la concentración de una
solución incógnita se obtiene por interpolación gráfica a partir de una curva de señal (A o IE) vs. c , obtenida con varios
estándares (patrones) adecuadamente espaciados, que cubren el ámbito de concentraciones requerido.

Discuta las características de las curvas de calibración obtenidas en emisión y absorción. Defina
sensibilidad y límite de detección.

En la mayoría de los casos es necesario que la composición de las soluciones patrón sea similar a la
de la muestra a analizar. En el caso de soluciones muestras muy complejas, en las que la presencia de
elementos concomitantes puede afectar la respuesta obtenida para el analito, existen otros procedimientos
de calibración, tales como el método de agregado patrón de analito (simple o múltiple).

3
Describa otros procedimientos para calibración y discuta las posibles fuentes de error.

4. Selección de las condiciones de operación

Los procesos que sufre el analito en la celda de atomización son esencialmente comunes a ambas
metodologías, con lo cual en ambos casos es necesario optimizar:
! la selección del tipo y condiciones de la llama (relación oxidante/combustible)
! la región de observación en la llama

como así también

! el paso de banda espectral del monocromador empleado para la selección de la longitud
de onda
! la velocidad de aspiración de la solución
! los parámetros del sistema de detección y lectura

y en el caso de absorción atómica

! la intensidad de corriente de la lámpara de cátodo hueco

Discuta para cada una de las técnicas, la influencia de las variables indicadas sobre la
sensibilidad, la relación señal - ruido, la presencia de interferencias espectrales y el límite de
detección.

5. Interferencias

Interferencia es el efecto de un concomitante presente en la muestra sobre la señal

generada por el analito. La presencia de un interferente conduce en todos los casos a un error
sistemático. Existe una interferencia cuando el resultado de la medición sobre una dada solución
de muestra difiere del obtenido con la misma concentración de analito en la misma combinación
química y solvente, pero en ausencia del interferente.

En EEA y EAA con llama se producen esencialmente las mismas interferencias, aunque con
magnitudes diferentes. Pueden clasificarse en cuatro grupos:

1. Espectrales, incluyendo efectos de emisión o absorción de fondo.

2. Físicas, asociadas con el transporte y dispersión de la muestra en la llama.

3. Químicas, relacionadas con la vaporización del soluto.

4. De ionización, relacionadas con la variación de la concentración de átomos neutros emisores

o absorbentes en la llama provocada por el fenómeno de ionización térmica.

Explique de qué manera son afectadas por las interferencias espectrales las mediciones
en EEA y EAA con llama.

4
 Discuta procedimientos para corrección por fondo espectral. Indique cuáles son
aplicables al instrumento que utilizará en la práctica.

II. ESPECTROSCOPIA DE EMISION ATOMICA CON LLAMA

PARTE EXPERIMENTAL

1. Objetivos
Comparar dos métodos de calibración para la determinación de calcio en muestras de
agua mineral comercial. Evaluar la influencia del agregado de agentes liberadores y buffers de
ionización en el mecanismo de atomización de calcio en una llama de aireacetileno.

2. Instrumental
Se utilizará un espectrómetro de absorción / emisión atómica Metrolab 4200, provisto de
un quemador de flujo laminar para llama de aire-acetileno.

3. Calibración

Se compararán dos métodos de calibración: curva de calibración estándar con patrones

acuosos y método de agregado patrón de analito.

A. Preparar cinco soluciones patrón de calcio comprendidas entre 2 y 25 mg/l a partir de

una solución de 1000 mg Ca/l.
B. Preparar tres soluciones de concentración constante de Ca (10 mg/l) y concentración
creciente de fosfato (5, 10 y 100 mg/l).
C. Preparar una solución diluyendo adecuadamente la muestra de agua mineral comercial
de tal manera que caiga en el ámbito lineal de la curva de calibrado.
D. Repita la preparación de esta solución (dilución de la muestra), con el agregado de
cloruro de potasio (2000 mg/l) y nitrato de lantano (2000 mg/l), respectivamente. No olvide
preparar los blancos de reactivo para cada caso.

Teniendo en cuenta el ámbito de linealidad y la concentración de calcio en la muestra diseñar

una curva de agregado patrón con un mínimo de cuatro puntos.

4. Procedimiento

A. Con la ayuda del personal docente y el manual de instrucciones del espectrómetro,

utilizar una de las soluciones patrón (10 mg Ca/l) para seleccionar las condiciones generales de
trabajo para la determinación de calcio (longitud de onda, ancho de ranura, ganancia del sistema
detector). Asimismo optimizar la relación combustible-comburente de la llama y la altura de
observación.
B. Una vez seleccionados los parámetros óptimos medir la intensidad de emisión para
todas las soluciones.
C. Desplazar el monocromador a una longitud de onda situada 1 nm por encima y por
debajo de la longitud de onda de trabajo y repetir las mediciones de intensidad. El valor promedio
de estos valores se considerará como la intensidad del fondo espectral.

5. Tratamiento de resultados

Calcular la concentración de calcio en la muestra por ambas metodologías (curva de

calibración y método de agregado patrón). Comparar críticamente. Expresar los resultados con
sus correspondientes límites de confianza.

5
 Comparar los resultados obtenidos en ausencia y presencia de cloruro de potasio y
nitrato de lantano. Justificar las diferencias si las hubiera.
Calcular el límite de detección y la sensibilidad (para el cálculo del LD utilizar la medición
de la desviación estándar para 10 lecturas sucesivas del blanco de reactivos).

CUESTIONARIO

1) Discuta la influencia de la temperatura de la llama sobre las señales obtenidas en EEA y en

EAA.

2) Analice ventajas y desventajas de la utilización de una llama de óxido nitroso-acetileno frente

a una llama de aire-acetileno en el trabajo práctico. Podría utilizar una llama de aire-butano?

3) Analice la influencia de cantidades sub-, sobre- y estequiométricas de fosfato, con respecto a

Ca, en la muestra a analizar.

4) ¿Utilizaría el procedimiento del trabajo práctico para determinar Ca en agua de mar? Discuta.

! Ver: B.E.Mc Clellan, "Water", Capítulo 23, en "Flame Emission and Atomic Absorption
Spectrometry", Vol 3. Elements and Matrices. J. Dean and T.C. Rains, eds. , Marcel Dekker, Inc.
N.Y., 1975, p. 548.

5) Discuta la conveniencia de utilizar el método del agregado patrón frente al método de la curva
de calibración en determinaciones por espectrometría de emisión por llama.

6) Discuta brevemente cómo espera que varíe la sensibilidad en la determinación de Ca en agua

mineral cuando se aumenta la ranura del monocromador.

7) Sugiera posibles explicaciones para las siguientes observaciones efectuadas cuando se

determina Ba en solución acuosa por espectrometría de emisión en llama:

! La emisión a la longitud de onda analítica, para bajas concentraciones, es despreciable si la

llama es de aire-acetileno, pero apreciable cuando la llama es de óxido nitrosoacetileno.

! El Ba presenta líneas de emisión a 553.55 nm y 455.40 nm. La intensidad observada en una

llama laminar de óxido nitroso-acetileno para una solución de 10 m/ml es apreciable a ambas
longitudes de onda. Pero si se agregan a la solución cantidades crecientes de cesio, la emisión
de la primera línea se incrementa hasta alcanzar un valor constante, en tanto que la emisión de
la segunda disminuye.

! Con la llama de óxido nitroso-acetileno, al variar la altura de observación sobre el quemador de

4 mm a 20 mm, la intensidad de emisión disminuye abruptamente, pero vuelve a aumentar al
incrementar ligeramente el flujo de acetileno.

8) Para determinar Ca por emisión atómica, 5 g. de una muestra de origen geológico se

disuelven en un volumen dado de una mezcla ácida, se filtra y se disuelve a 100 mi. Para estimar
la concentración residual de Ca se prepara un blanco de reactivos con un volumen de mezcla
ácida igual al doble del anterior, diluido a 100 ml. Muestra y blanco se analizan por el método del
agregado patrón, con los siguientes resultados (las concentraciones indicadas corresponden a
mg/ml de Ca agregado en cada caso, a
alícuotas de 20 mi, despreciando la variación de volumen).
Calcular el % de Ca en la muestra original.

6
MUESTRA

Agregado A
promedio 0
0.100
1 0.160
2 0.220
3 0.290

BLANCO
agregado A
promedio 0
0.100
2 0.170
4 0.290
6 0.380

1) En la llama de N20 - C2H2 el Ba(I) presenta una línea de emisión a 553.55 nm que se
superpone a una banda molecular correspondiente a CaOH. El espectro observado
para 0.5 mg Ba/mL en presencia de concentraciones elevadas de Ca es el siguiente:

Cómo determinaría en este caso la relación

de intensidades línea - fondo? Indique qué
parámetros instrumentales podrían variarse
para mejorar ese valor. Justifique su
respuesta.

7
III. ESPECTROSCOPIA DE ABSORCION ATOMICA

PARTE EXPERIMENTAL

1. Objetivos

Evaluar la importancia de la selección del ancho de ranura y la longitud de onda en

espectroscopia de absorción atómica. Aplicar esta técnica a la determinación de níquel en una
aleación metálica.

2. Instrumental

Se utilizará un espectrómetro de absorción/emisión atómica Metrolab 4200, provisto de

un quemador de flujo laminar para llama de aire-acetileno y una lámpara de cátodo hueco de
níquel como fuente de radiación.

3. Preparación de la muestra.

Pesar exactamente alrededor de 0,1g de muestra (realizar el tratamiento por duplicado),

añadir 5 ml de HC1 (c) y 2,5 ml de HNO 3 (c) y calentar suavemente sobre tela metálica hasta
disolución completa.. Dejar enfriar y trasvasar a un matraz aforado de 100,0 ml. completando
hasta el enrase con agua destilada. Pipetear 10,00 ml de esta solución y diluir a 100,0 ml en un
matraz aforado. Realizar en paralelo un blanco de reactivos.

4. Calibración

Preparar estándares para calibración conteniendo respectivamente 0, 5, 10, 15, 20 y 50

mg Ni/l en una solución base que contenga 0,5 % (v/v) de HCl y 0,25 % (v/v) de HNO 3.

5. Procedimiento

A. Con la ayuda del personal docente y el manual de instrucciones del espectrómetro

seleccionar las condiciones generales de trabajo para la determinación de níquel (longitud de
onda, ancho de ranura, ganancia del sistema detector).
B. Utilizando las soluciones patrones obtener curvas de calibración analítica (absorbancia
vs concentración) a dos longitudes de onda (232 nm y 341,5 nm) y a dos anchos de banda
espectral (0,2 nm y 0,5 nm), respectivamente.
C. Medir la absorbancia para la solución de la muestra y calcular el valor de concentración
por interpolación a partir de la curva analítica.

6. Tratamiento de resultados

A. Calcular la concentración de níquel en la aleación metálica utilizando todos los gráficos

de calibración obtenidos (cuatro en total). Comparar críticamente. Expresar los resultados con
sus correspondientes límites de confianza.
B. Calcular el límite de detección y la sensibilidad (para el cálculo del LD utilizar la medición
de la desviación estándar para 10 lecturas sucesivas del blanco de reactivos).
CUESTIONARIO

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1) Discuta las ventajas y desventajas que reporta trabajar con intensidades de lámpara más altas
que las recomendadas por el fabricante.

2) ¿Por qué si la lámpara de cátodo hueco es una fuente de líneas es necesario utilizar un
monocromador?

3) ¿Es posible utilizar la instrumentación de espectrofotometría molecular para realizar medidas

en absorción atómica?

4) En la determinación de níquel el ancho de banda espectral juega un rol fundamental cuando

se trabaja a una longitud de onda de 232 nm, ya que si se pasa de un ancho de banda de 0,1 nm
a 0,5 nm la sensibilidad y el ámbito dinámico lineal disminuyen. Sin embargo, cuando se
determina Cu a una longitud de onda de 324,7 nm, el mismo cambio de ancho de banda no
produce prácticamente variación de sensibilidad ni de los ámbitos de linealidad. Discuta las
causas de este comportamiento diferente.

5) Discuta la conveniencia de corregir el fondo espectral en las mediciones realizadas en el

trabajo práctico.

6) Discuta críticamente las siguientes afirmaciones:

a) La absorción atómica es más sensible que la emisión atómica.
b) Modular electrónicamente la lámpara de cátodo hueco permite corregir la absorción
inespecífica de los componentes de la llama.
c) En absorción atómica el ámbito de linealidad depende del tipo de llama utilizada.

7) Una muestra de NaCl contiene Cu (II) en una concentración de aproximadamente 0,003 %.

Diseñe un protocolo de análisis que permita la cuantificación del cobre indicando: masas,
volúmenes, reactivos a utilizar, preparación de la muestra y patrones, procedimiento general y
cálculos.