Práctica 9

Dosimetría de agentes
químicos para la inducción
de mutaciones
 Inducción de mutaciones
• La inducción de mutaciones se usa con el fin de acelerar
el proceso de obtención, desarrollo y selección de
nuevos rasgos agronómicos de interés económico.

• Este tipo de mejoramiento, utiliza la propia información

genética de la planta, que artificialmente genera
variantes genéticas aleatorias, de manera similar al
proceso natural de la mutación espontánea.

• Esto da lugar a plantas mutantes con rasgos nuevos,

potencialmente útiles en el mejoramiento de cultivos.
 Mutaciones y agentes mutagénicos
• Las mutaciones, espontáneas o inducidas, pueden involucrar
delecciones, inversiones, traslocaciones, o lo que es más común,
mutaciones puntuales del ADN.
• Los agentes mutagénicos físicos suelen producir cambios de mayor
envergadura, mientras que los químicos por lo general dar lugar a
mutaciones puntuales.
• Los agentes mutagénicos físicos, principalmente las radiaciones
ionizantes (ejemplo: rayos gamma, rayos X, neutrones rápidos, luz UV),
pueden aumentar la tasa de mutación natural por mil a un millón de
veces. Más del 70% de variedades mutantes de cultivos fueron creados
usando mutágenos físicos.
• Los agentes mutagénicos químicos pueden ser análogos de bases de
ácidos nucleicos (cafeína), agentes que atacan al ADN (formalina),
nitrógeno, gas mostaza, colorantes de acridina (proflavina, acridina),
carcinógenos (benzopireno), sulfato de cobre, ácido bórico, ácido
fórmico, colchicina, uretano, entre otros.

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Mutaciones y agentes mutagénicos

Castillo-Martínez et al. 2015

 Determinación de la dosis
adecuada
• Uno de los pasos más importantes es la determinación de
la dosis adecuada que se debe aplicar al cultivo para
generar la variabilidad deseada.

• La dosis adecuada estará influenciada por la variación

intrapoblacional y las condiciones ambientales.
 Materiales (por grupo)
• 250 g de semillas de cebada.
• Colchicina a diferentes concentraciones: 2, 4 y 10 tabletas de 0.5
mg c/u en 100mL
• Agua destilada.
• Tierra agrícola.
• 20 Macetas o contenedores de aprox. 15 cm de diámetro.
• 20 Placas Petri.
• 20 palitos de 20 cm (o cables #14 cortados).
• Vasos altos.
• Papel toalla.
• Recipientes de 4 litros de capacidad.
• Pipeta descartable.
• Plumón marcador.
• Regla.
• Materiales de protección personal (guantes, mascarilla).
 Procedimiento
1. Preparación de tratamientos:
• Realizar un pre-remojo de las semillas en agua destilada
durante 12 horas a temperatura ambiente.
• Disolver la colchicina, de acuerdo a las concentraciones
o/tratamientos a utilizar.
• Remojar las semillas en los diferentes tratamientos durante
3 horas a temperatura ambiente.
• Enjuagar las semillas 3 veces en agua corriente.
2. Procedimiento para la germinación de semillas:
• Rotular las placas Petri, indicando cada tratamiento y
repeticiones según el diseño experimental utilizado.
• Colocar en la base de cada placa Petri, los círculos de papel
toalla.
• En cada placa, de acuerdo al rótulo de estas, colocar 20
semillas tratadas con colchicina.
• Cubrir las semillas con papel toalla cortado en círculo del
mismo diámetro de la placa, humedecer con agua
destilada.
• Cerrar las placas Petri, colocarlas en posición invertida.
• Colocar las placas Petri al azar y en condiciones de
oscuridad total.
• Evaluar a los 3 y 7 días (Fig. 1).
Procedimiento para la germinación de semillas

Figura 1. Evaluación de semillas germinadas a los 3

días.
3. Procedimiento para el crecimiento radicular:
• Desinfectar cada palo de 20 cm o cable #14.
• Preparar cartuchos de papel toalla envolviendo cada
uno de los palos.
• Humedecer con agua destilada.
• Colocar los palos en los vasos altos, ubicando a las
semillas hacia la parte superior.
• Los palos son colocados al azar, con 4 repeticiones por
cada tratamiento.
• La evaluación se realiza a los 10 o 14 días (Fig. 2).
Procedimiento para el crecimiento radicular

Figura 2. Evaluación del

crecimiento de raíces
4. Procedimiento para el crecimiento de la parte
aérea de la planta:
• Preparar los recipientes para sembrar las semillas.
• Sembrar 20 semillas por cada recipiente, a 1 cm de la
superficie.
• Humedecer con agua corriente.
• Ubicar los recipientes al azar.
• La evaluación se realiza a los 30 días (Fig. 3).
Procedimiento para el crecimiento de la
parte aérea de la planta

Figura 3. Evaluación del

tamaño de la planta a los
30 días.
5. Análisis estadísticos:
• Recopilar los datos: número de semillas germinadas,
longitud de la raíz y altura de planta.
• Realizar la verificación de supuestos.
• Realizar el análisis de varianza.
• Comparar los tratamientos.

6. Estimación de la dosis adecuada:

• Determinar qué dosis es la más conveniente para inducir
mutaciones en el cultivo en estudio. Se considera aquella
que produce un 20% de variación respecto al testigo.
Discutir y concluir.