Medios de cultivos

Presentado por: Cristian Fernando Moreno

Juan David España

Presentado a: María Inés Gallego Murillo

Universidad del Quindío

Facultad de Agroindustrias
2021
 Medios de cultivos Informe N°3

DIAGRAMA DE FLUJO

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RESUMEN

En el video se comienza mostrando una breve información de lo que se va a tratar lo cual es

la preparación de medios de cultivos microbiológicos, hablando de un producto el cual se
llama agar nutritivo el cual nos dice que este producto es rico para el crecimiento de
microorganismos dando a conocer que también tiene la información de la cantidad que se
debe suministrar del producto como de agua. Seguido de la preparación adecuada y detalla
de cómo se debe preparar el producto y dándonos a conocer que elementos de laboratorio
se deben utilizar, seguido de esto realiza dos procesos los cuales son los tubos para un
medio solido o con una caja de Petri dosificando el medio. Posteriormente deja enfriar el
medio para que se solidifique y concluir el video.

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CUESTIONARIO
1. Consulte y explique diez medios de cultivo empleados en microbiología
relacionando sus características.

 Medios selectivos
Como hemos dicho, los medios selectivos son aquellos caldos o agares que estimulan el
crecimiento de una o unas especies de bacterias concretas e inhiben el de las otras. Es
decir, estos medios selectivos son los que se utilizan cuando queremos estudiar una
muestra en la que sabemos que habrá muchas comunidades bacterianas distintas, pero
solo nos interesa recuperar una.

1.1. Agar MacConkey

El agar MacConkey es un medio de cultivo

que inhibe el crecimiento de las bacterias
gram positivas y estimula la reproducción de
los bacilos gram negativos, los cuales suelen
estar detrás de infecciones urinarias, diarreas,
enfermedades gastrointestinales, bacteriemias
(bacterias en la sangre), peritonitis e incluso el
tifus, el cólera o la peste.

1.2. Agar sangre

Como su propio nombre indica, el agar sangre dispone
de sangre en su composición, la cual suele ser de
ovejas, caballos o, a veces, humanos. Es utilizado para
estudiar la función hemolítica de distintos patógenos,
es decir, su capacidad para destruir los eritrocitos
(glóbulos rojos) cuando circulan por el torrente
sanguíneo. Dependiendo de lo que añadamos,
permitirá el crecimiento de unas especies concretas,
siendo un medio muy selectivo.

1.3. Agar chocolate

El agar chocolate es el medio de cultivo que
se obtiene al calentar el agar sangre. Sea como
sea, el más utilizado es aquel en el que se
añade vancomicina (un antibiótico) y distintos
nutrientes para estimular el crecimiento
únicamente de “Neisseria gonorrhoeae” y

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“Neisseria meningitidis”, bacterias responsables de la gonorrea y meningitis,

respectivamente.

1.4. Agar Sabouraud

El agar Sabouraud es un medio de enriquecimiento y
aislamiento de distintas especies de hongos,
levaduras y mohos. Por lo tanto, es útil cuando no
queremos detectar bacterias (de hecho, tienen
distintos antibióticos para impedir su desarrollo),
sino este tipo de microorganismos, sean patógenos o no.

1.5. Caldo tetrationato

El caldo tetrationato es un medio líquido (a
diferencia de los agares sólidos que hemos ido
viendo) que contiene sales biliares y otras
sustancias inhibitorias que impiden el desarrollo
de las bacterias gram positivas y el de algunas
gram negativas, pues solo nos interesa que
crezcan las bacterias que disponen de una
enzima determinada, que es la tetrationato
reductasa (de ahí el nombre). Este medio de cultivo es muy útil, pues, para el
aislamiento de colonias de “Salmonella”, responsable de enfermedades de
transmisión alimentaria.

1.6. Caldo selenito

El caldo selenito es otro medio de cultivo líquido para el
aislamiento de “Salmonella”, aunque en este caso su
método de acción no se basa en detectar la enzima
anterior, sino en inhibir (mediante el selenito) el
crecimiento de otras bacterias presentes en nuestro tracto
digestivo.

1.7. Agar EMB

El agar EMB es un medio de cultivo sólido muy
útil para el aislamiento de enterobacterias, es
decir, aquellas que habitan de forma natural
nuestros intestinos pero que, ante determinadas
situaciones, pueden pasar a comportarse como
patógenos. “Escherichia coli” es el claro ejemplo
de ello, y, además, este medio permite que se
observen claramente sus colonias, las cuales
desarrollan un color brillante negro verdoso.
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1.8. Agar SS
El agar SS es un medio de cultivo sólido
utilizado para el aislamiento de, además de
“Salmonella”, “Shigella”, una bacteria que
normalmente se contagia a través de alimentos o
agua contaminada y que provoca una infección
que cursa con diarrea (la cual suele contener
sangre), fiebre y dolor abdominal.

1.9. Agar Vogel-Johnson

El agar Vogel-Johnson es un medio de cultivo sólido
diseñado para el aislamiento de “Staphylococcus
aureus”, una bacteria que puede causar muchos tipos
de infecciones distintas, desde enfermedades de la
piel (es lo más común) hasta infecciones óseas,
pasando por neumonías, bacteriemias, endocarditis
(infección del corazón) e intoxicaciones
alimentarias. Inhibe el crecimiento de todas las gram
negativas y el de algunas gram positivas.

1.10. Agar manitol sal

El agar manitol sal, también conocido como
manitol salado, es un medio de cultivo sólido
que sigue siendo utilizado para el aislamiento de
“Staphylococcus aureus”, aunque en este caso el
poder inhibitorio sobre el resto de bacterias es
más fuerte. Es decir, es más selectivo que el
anterior.

1.11. Agar BCYE

El agar BCYE es un medio de cultivo sólido
especialmente diseñado para el aislamiento de
“Legionella” y “Nocardia”, dos géneros de bacterias
responsables de una neumonía grave (potencialmente
mortal) y de una infección pulmonar que puede

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diseminar, en personas inmunodeprimidas, a otros órganos (piel, cerebro,

corazón…), respectivamente.

1.12. Agar BHI

El agar BHI es un medio de cultivo sólido que vuelve a
ser útil para el aislamiento de hongos, aunque en este
caso se centra en la detección de aquellos que actúan
como patógenos. De nuevo, dispone de varios
antibióticos para inhibir el crecimiento de las bacterias.

1.13. Agar Baird-Parker

El agar Baird-Parker es un medio de cultivo sólido diseñado para
el aislamiento de “Staphylococcus aureus”, aunque en este caso
permite el crecimiento de otras especies de estafilococos, siempre
que sean coagulasa positivos, es decir, que dispongan de esta
enzima conocida como coagulasa.

1.14. Caldo EC
El caldo EC es un medio de cultivo líquido diseñado
para permitir el crecimiento de coliformes, un grupo de
distintos géneros de bacterias que sirven como
indicador de la contaminación fecal tanto de aguas
como de alimentos.

1.15. Agar verde brillante

El verde brillante es una sustancia
inhibidora que impide el crecimiento de
todas las bacterias gram positivas y de la
mayoría de gram negativas. En este sentido,
el agar verde brillante es un medio de
cultivo sólido utilizado para el aislamiento
de distintas especies de “Salmonella”

1.16. Agar TCBS

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El agar TCBS es un medio de cultivo sólido que contiene Tiosulfato, Citrato y Sales
Biliares. De ahí el nombre. Sea como sea, estas sustancias estimulan el crecimiento
selectivo de distintas especies de “Vibrio”, un género bacteriano que provoca
enfermedades gastrointestinales y donde destaca “Vibrio cholerae”, responsable del
cólera.

2. Medios diferenciales
Como hemos mencionado anteriormente, los medios diferenciales son aquellos en
los que permitimos el crecimiento de distintas comunidades bacterianas, pero,
gracias a las propiedades del medio, podemos diferenciarlas entre ellas.

Pero, ¿cómo? Básicamente, induciendo a las bacterias presentes en la muestra a

desarrollar distintas reacciones químicas, las cuales se manifestarán con un cambio
de color en nuestro medio de cultivo o con la observación de fenómenos como la
movilidad de colonias o la formación de gas. De este modo podemos diferenciar
especies de bacterias.

2.1. Medio TSI

El medio TSI es un medio de cultivo diferencial en el que
se busca determinar la capacidad de la bacteria para
degradar el azúcar y formar gas y sulfuros de hidrógeno.
Dependiendo de lo que observemos (hay perfiles que nos
permiten comparar y saber ante qué nos encontramos),
podremos determinar qué bacteria había en la muestra.

2.2. Citrato de Simmons

El citrato de Simmons es un medio de cultivo
diferencial útil para, valga la redundancia, diferenciar
entre distintas especies de coliformes. El medio se basa
en determinar la capacidad de las bacterias para utilizar
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el citrato como fuente de carbono. Si no es capaz de usarlo, el medio se mantendrá

verde. Pero si es capaz, pasará a ser azul.

2.3. Caldo urea

El caldo urea es un medio de cultivo diferencial que permite, de
nuevo, diferenciar entre distintas especies. Se basa en
determinar la capacidad de la bacteria de degradar la urea. Si la
bacteria tiene la enzima necesaria, el color pasará a ser rojo,
mientras que si no dispone de ella, se mantendrá en el color
original.

2.4. Medio SIM

El medio SIM es un medio de cultivo diferencial que
determina la capacidad de la bacteria para formar indol
(un compuesto químico orgánico), producir sulfuro de
hidrógeno y moverse. Dependiendo del perfil obtenido,
estaremos ante una especie u otra.

2. Consulte la fórmula molecular y estructural de cada uno de los medios de cultivo

del numeral 1.

1. BD MacConkey II Agar Fórmula

por litro de agua purificada

Digerido pancreático de gelatina 17,0 g

Digerido pancreático de caseína 1,5
Digerido péptico de tejido animal 1,5
Lactosa 10,0
Sales biliares 1,5
Cloruro sódico 5,0
Rojo neutro 0,03
Cristal violeta 0,001
Agar 13,5
pH 7,1 ± 0,2
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Ajustada y/o suplementada para satisfacer los criterios de rendimiento.

2. AGAR SANGRE DE CORDERO

Peptona de caseína 10 g
Peptona de carne 5g
Extracto de levadura 3g
Extracto de corazón 3g
Cloruro sódico 5g
Almidón de maíz 1g
Agar bacteriológico 15 g
Sangre de cordero 50 ml
Fórmula (en g/l) pH: 7.2 ± 0.2.

3. Agar de chocolate

Peptona de caseína 15 g
pH 7.2 ± Peptona de soja 5g
0,2 Extracto de levadura 5g
Glucosa 2g
Cloruro sódico 5g
4. Agar
Agar Bacteriológico 15g
Supl.enriq, con beta-NAD 0,015 g
Sangre de cordero 53 ml
Suero de caballo 5 ml
Fórmula (por L final)
Sabouraud
FORMULA EN GRAMOS POR LITRO DE AGUA DESTILADA:
Agar 15.0
Dextrosa 40.0
Peptona especial 10.0
pH 5.6 ± 0.2.

5. Caldo Selenito De Sodio

Mezcla de Peptonas 5.0 g

Lactosa 4.0 g
Fosfato de Sodio 10.0 g
Selenito de Sodio 4.0 g
pH 6.5 ± 0.2

6. Agar EMB
Fórmula en gramos por litro de agua destilada:

Agar 13.5
Lactosa 5.0
Azul de metileno 0.065
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Peptona especial 10.0

Eosina Y 0.4
Fosfato dipotásico 2.0
Carbón activado 2,0 g
Sacarosa 5.0
Extracto de levadura 10,0 g
Agar Agar 22,0 g
(pH 7.2 ± Alfa-ketoglutarato (sal mono-K) 1,0 g 0.2).

7. Agar SS

Agar bacteriológico 13.5

Verde brillante 0.0003
Extracto de carne 5
Mezcla de peptona 5
Tiosulfato de sodio 8.5
Sales biliares 8.5
Lactosa 10
Rojo neutro 0.025
Citrato de sodio 8.5
Citrato férrico 1

8. Medio BASE (BCYE-Cys)

(Fórmula por litro)

pH final: 6,9 ± 0,1

9. Medio TSI

Digerido pancreático de caseína 10,0 g

Digerido péptico de tejido animal 10,0
Cloruro sódico 5,0
Lactosa 10,0
Sacarosa 10,0
Glucosa 1,0
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Sulfato ferroso de amonio 0,2

Tiosulfato sódico 0,2
Rojo fenol 0,025
Agar 13,0

pH 7,3 ± 0,2

10. Citrato de Simmons

El agar citrato Simmons se elabora de acuerdo con la fórmula descrita por Simmons (1).
Citrato sódico 1
Cloruro sódico 5
Sulfato magnésico 0,2
Fosfato de amonio dihidrogenado 1
Fosfato dipotásico 1
Azul bromotimol 0,08
Agar 15

pH final 6,8 ± 0.2

Medios de cultivo Según su estado físico

Cultivos solidos Los medios de cultivo sólidos (como el TSA)

Cultivos líquidos
Cultivos semisólidos
contienen el agente solidificante (generalmente
agar al 1,5-2%)
los medios de cultivo líquidos (como el agua
de peptona) no llevan adicionados agentes
solidificantes;
los medios de cultivo semisólidos (como el
Agar de Hugh-Leiffson contienen el agente
solidificante en menor concentración que los
sólidos.

El proceso de esterilización debe ser diseñado, validado y llevado a cabo para asegurar que
es capaz de eliminar la carga microbiana del producto o un microorganismo más resistente
y no contaminar el proceso que realizaremos en el laboratorio.
5.
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Según su origen los medios de cultivo se dividen en medios sintéticos y medios naturales.
• Los medios sintéticos o químicamente definidos son medios compuestos por
productos químicos conocidos y se utilizan para realizar estudios metabólicos, por ejemplo:
agar blando, caldo nutritivo, agar eosina azul de metileno, etc.
• Los medios naturales o químicamente no definidos son aquellos medios que se
preparan a partir de sustancias naturales animales o vegetales, por ejemplo: suero, leche,
papa, etc.
Composición y utilización
Según su utilización y su composición los medios de cultivo se pueden clasificar en:
• Simples
• Enriquecidos
• Selectivos
• Diferenciales
• Enriquecimiento

1. Medios Simples
• Poseen los requisitos nutricionales para permitir el desarrollo bacteriano general,
ejemplos: agar nutritivo, caldo nutritivo, entre otros.

• Poseen los requisitos nutricionales para permitir el desarrollo bacteriano general,

ejemplos: agar nutritivo, caldo nutritivo, entre otros.

2. Medios enriquecidos

 Son medios simples o comunes, a los que se le añaden ciertos elementos como
sangre, suero, líquido ascítico, huevo, glucosa, vitaminas, etc. lo que permite el
aporte de factores de crecimiento o sustancias que neutralizan agentes inhibidores
del crecimiento en bacterias exigentes nutricionalmente, entre algunos ejemplos:
agar sangre, medio de Löwenstein-Jensen, enriquecido con huevo para facilitar el
crecimiento de Mycobacterium; agar desoxicolato-lactosa (DLA), enriquecido con
lactosa y desoxicolato.

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3. Medios selectivos

 Se consiguen añadiendo al agar nutritivo compuestos químicos nocivos para algunas

bacterias cuyo crecimiento no es de interés o también mediante una alteración de las
condiciones físicas del medio, entre algunos ejemplos tenemos
 El agar Mac Conkey que contiene cristal violeta.
 Thayer-Martin medio selectivo para Neissar, ya que este posee antibióticos como la
vancomicina colistina y nistatina.
 Caldo lactosado bilis verde brillante en donde la bilis inhibe el crecimiento de
bacterias gran positivas.

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 Löwenstein-Jensen con verde de malaquita es selectivo para Mycobacterium.

4. Medios diferenciales

 A estos medios se le adiciona sustancias para que solo crezcan ciertas bacterias y
estas, al actuar sobre alguna de las sustancias adicionadas, permiten observar
macroscópicamente ciertas propiedades de crecimiento que ayudan a diferenciar sus
colonas de otras especies diferentes, entre algunos ejemplos encontramos:
 Agar eosina azul de metileno (EMB), diferencia E. coli (color verde metálico
brillante) de colonias de Enterobacter aerogenes (color rosado, consistencia mucosa
y crecimiento abundante).
 Agar sangre, diferencia variedades de Streptococcus pyogenes en Streptococcus
betahemolíticos de Streptococcus alfa hemolítico y gama hemolítica.
 Agar Salmonella-Shigella tiene lactosa y un indicador de pH que permite
diferenciar las colonias de bacterias fermentadoras de este disacárido.

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5. Medios de enriquecimiento

 Son medios líquidos que favorecen o permiten la multiplicación de las bacterias

cuando la muestra obtenida es muy pobre, por ejemplo:
 Caldo tioglicolate, favorece el crecimiento de las bacterias anaeróbicas.
 Caldo tetrationato favorece crecimiento de bacterias microaerófilas.
 Los caldos bilis y de Muller-Kauffman, favorecen el crecimiento del género
Salmonella.
 Caldo o agua peptonada se utiliza para el crecimenot de Vibrio Cholerade.

1.

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