El cultivo celular :

corresponde al conjunto de
técnicas que permite el
mantenimiento in vitro de
células manteniendo sus
propiedades
CULTIVOS PRIMARIOS
 Lineas celulares

 Tumores
 Transformacion por:
- transfección con oncogenes
- hidrocortizona

1952. Grey y col. (Grey, Coffman y Kubicek, 1952) establecen la

primera línea celular continua, las actualmente bien conocidas
células HeLa .
 Lineas celulares comunes
 3T3 fibroblasto (ratón)
 BHK21 fibroblasto (hamster)*
 MDCK celula epitelial(perro)
 HeLa celula epitelial(humana)*

 L6 mioblasto (rata)
 PC12 celula cromafínica (rata)
 HL60 celula(humana)*
Curva de Crecimiento
Instrumentación del laboratorio
de cultivo celular
 Cabinas de flujo laminar
 Incubadores
 Instrumentos de microscopía para
observar las células
 Instalación de criogenia
 Equipo de esterilización
 Otros
 Tipos de cabina
 Cabina de flujo  Cabina de flujo
laminar horizontal laminar vertical
 Incubadores
  Termostato
 Dispositivo de mezcla
de aire y CO2
 Control de húmedad
ambiente
 Dispositivo de
recircularización del
aire
 Otros
 Microscopio  Depósito de N2
invertido líquido para el
mantenimiento de
células
Micropipeta
automática
 Caracteristicas de los Medios

 Soluciones salinas
equilibradas (BSS).
 Aminoácidos.
 Vitaminas.
 Otros suplementos
orgánicos de bajo peso
molecular.
 Hormonas y factores de
crecimiento (suero).
 Medios para cultivo
 Medio Basal de Eagle (BME). Crecimiento de
fibroblastos de ratón y células HeLa.
 Medio Mínimo Esencial de Eagle (MEM). Se usa para
cada casi todo tipo de cultivos
 R.P.M.I. 1640. Medio diseñado para el crecimiento de
linfoblastos y líneas celulares leucémicas en
suspensión.
 Medio MEM modificado por Dulbeco (DMEM). Se usa
para la selección de hibridomas.
 Modificación de Iscove del medio DMEM (IMDM). Es
muy útil para el cultivo de linfocitos en medio libre de
suero. También sirve para otros tipos celulares, pero
entonces requiere suero a bajas concentraciones.
 Antibioticos y Antifúngicos

A fin de evitar el crecimiento de

contaminantes en el cultivo se suele
suplementar éste con sustancias
antibióticas de diferente espectro de
acción. La adición de antibióticos ha de
ser estrictamente controlada para evitar
efectos nocivos sobre el cultivo.
Distintos factores estimulan la
diferenciación de cierto tipo
celular