Repaso de los capítulos del libro de Joiner et al.

(2019)

Referencia: Joiner, M. C.; van der Kogel, A. J. (Eds.). (2019). Basic Clinical Radiobiology. Boca
Raton: CRC Press (Taylor & Francis Group).

1. Repaso del capítulo 1: “Introducción: el significado de la radiobiología y de la radioterapia para el

tratamiento del cáncer”.

2. Repaso de los capítulos 2 y 3: “Daño inducido por radiación y la respuesta del ADN al daño”;
“Muerte celular después de la irradiación: cómo, cuando y por qué las células mueren”.
(1) Sabemos que el haz de fotones, producido en un material objetivo del LINAC, al incidir sobre la
materia orgánica, producirá ionización en los átomos de ella. No obstante, la mayor parte del daño
biológico la realizan los electrones liberados por la ionización atómica. El recorrido de los electrones,
con sus sucesivas colisiones con la materia orgánica, produciendo excitaciones atómicas o más
ionizaciones, da lugar al fenómeno físico de la agrupación de ionizaciones.
(2) Debido a que el ADN es una macromolécula bioquímica relativamente grande, se convierte en un
objetivo de colisión preferencial para las partículas de la radiación ionizante. Como dijimos antes, la
radiación ionizante produce la agrupación de ionizaciones, la cual puede ocurrir en pocos pares de
bases del ADN.
(3) Una vez que las moléculas bioquímicas son ionizadas por la radiación altamente energética, éstas
producen reacciones químicas que pueden causar rupturas de enlaces químicos y la desorganización de
la estructura molecular.
(4) La muerte celular está relacionada principalmente con la dosis de irradiación altamente energética
entregada al núcleo de la célula, y no tanto con la dosis de radiación entregada a la membrana
plasmática o al citoplasma.
(5) Los sistemas bioquímicos especializados de reparación celular son: reparación de escisión de bases
(base excision repair o BER) (remoción de una base individual dañada), reparación de rupturas de una
sola rama del ADN (single-strand break repair o SSBR), reparación de ruptura de doble rama del ADN
(double-strand break repair o DSBR), y reparación de vínculos cruzados entre ramas (interstrand cross
link repair o ICLR).
(6) Cualquier mutación genética, en estos sistemas bioquímicos de reparación celular, puede producir el
efecto indeseable del aumento de la radiosensibilidad de la célula.
(7) De todas las posibilidades de daño celular por radiación, se considera a la ruptura de doble rama
como la lesión biológico-molecular más grave de todas, pues altera el cromosoma segregado durante la
mitosis, pudiendo provocar el efecto indeseable de una división celular descontrolada.
(8) La célula posee un sistema de respuesta al daño del ADN (DNA damage response o DDR), el cual
es químicamente muy complejo y muy organizado. La DDR determina el tipo de respuesta ante el daño
al ADN y los resultados de él (i.e., reparación del daño o muerte celular).
(9) Las partes de la DDR (i.e., proteínas) son: los sensores, los transductores y los efectores. La función
del sensor de la DDR es inspeccionar el genoma en busca de daños. Si se encuentran daños, el sensor
enviará una señal química, a través de los transductores, a los tres caminos principales de efectores.
(10) Los caminos de los efectores (effector pathway) son las acciones tomadas por las proteínas
efectoras a propósito del daño del ADN. Tres son las posibles acciones llevadas a cabo por un camino
del efector, a saber: (I) muerte celular programada; (II) reparación física del ADN; (III) bloqueo
(temporal o permanente) de los checkpoints del ciclo celular, deteniendo la división celular (i.e., el
progreso de la célula a través de su ciclo celular).
(11) Las proteínas conocidas como sensores inicializan el DDR después de haber reconocido una
lesión. Esta inicialización es la base para la cascada de respuestas al daño del ADN y para el
reclutamiento de efectores específicos. La especificidad de la lesión condiciona la proteína sensorial
presente y la señalización química correspondiente (la acción del transductor) para llamar al efector
correcto.
(12) La forma en la que los transductores llaman a la acción, o camino, a los efectores, es a través de
mecanismos específicos de señalización química. Los mecanismos de señalización química de los
transductores son: la modificación pos-traslacional y la re-localización de proteínas de señalización
intermedia. Normalmente, la modificación pos-traslacional afecta el sitio específico de la cromatina
que rodea el daño del ADN, preparándolo para el reclutamiento de las proteínas efectoras pertinentes.
(13) Un camino de efector muy importante es la apoptosis. La apoptosis es un mecanismo bioquímico
que causa la muerte celular por medio de la proteína p53. La proteína p53 tiene las siguientes
funciones: la supresión tumoral y la regulación de los genes que controlan tanto los checkpoints del
ciclo celular como la muerte celular programada (i.e., el efecto del camino de la proteína p53 es
bloquear la proliferación celular o causar la muerte celular.). En otras palabras, el camino de la proteína
p53 es pro-reparación, pro-arresto y pro-apoptosis. La activación de la proteína p53 se lleva a cabo por
la señalización química provocada por la ATM, después del daño al ADN por irradiación.
(14) Otro camino de efector muy importante es el que afecta los checkpoints del ciclo celular.
Recordemos que el ciclo celular se caracteriza por tres fases, a saber: G1, S y G2. A cada una de estas
fases le corresponde la activación de un checkpoint que puede inducir la ralentización del progreso de
la célula a través del ciclo celular o, incluso, bloquear totalmente tal avance por el ciclo celular. Estos
checkpoints tienen la función de retrasar el ciclo celular tal que la DDR celular tenga más tiempo para
reparar los daños al ADN. Todo esto permite evitar la propagación del daño del ADN, sus mutaciones
asociadas y la replicación de lesiones en el ADN.
(15) Los efectos de los checkpoints, después de la irradiación y durante una fase específica del ciclo
celular, son los siguientes: (i) durante la fase G1, el checkpoint retrasará la entrada a la fase S; (ii)
durante la fase S, el checkpoint disminuirá el tiempo de la replicación celular del ADN (aumento de la
tasa de síntesis de proteínas) y aumentará la cantidad proteína CDK2 fosforilada, la que produce
ralentización del progreso a través de la fase S; (iii) debido a una dosis baja de radiación, se activa el
checkpoint de la fase G2 que, por medio del complejo de proteínas ATM-CHK2-CDC25A/C, bloquea
el progreso del ciclo celular hacia el final de la fase G2 (i.e., este checkpoint impide que la célula entre
en el proceso de mitosis con un ADN dañado).
(16) En suma, los checkpoints tienen la función de proteger la integridad del genoma más que el apoyo
a la supervivencia de la célula.
(17) Los caminos principales de los efectores de reparación del daño al ADN son: BER, SSBR y la
DSBR. Este último camino efector es el más importante a propósito de la radiosensibilización de las
células.
(18) Durante una BER, una proteína especializada, llamada glicosilasa, removerá la base dañada,
dejando un sitio sin base (abasic site). Luego, una proteína, llamada endonucleasa (AP-APE), cortará la
columna del ADN, dejando una ruptura de rama de ADN, convirtiendo el caso de daño en un caso de
SSB. Posteriormente, el proceso de reparación ocurrirá por medio de dos caminos efectores posibles, a
saber: parche corto o parche largo.
(19) La DSBR consiste de dos mecanismos, a saber, la recombinación homóloga (homologous
recombination o HR) y la unión no-homóloga del extremo del ADN (non-homologous end joining o
NHEJ).
(20) El mecanismo de la HR usa la cromátida hermana homóloga replicada (no dañada), como una
plantilla, para la reparación de la DSB. Éste es el mecanismo de reparación de ruptura doble de rama
más confiable, pues restaura la secuencia original del ADN. Las proteínas que actúan en este
mecanismo, para la replicación del ADN homólogo, son las helicasas. Y, finalmente, recordemos que la
HR también repara el daño por ICL.
(21) El mecanismo de la NHEJ simplemente lo que hace es conectar los dos extremos de la ruptura
doble de rama de ADN. La larga proteína ADN-PKcs forma un puente físico entre los extremos de las
rupturas de las ramas de ADN, para mantenerlas cerca, para la posterior reparación. La NHEJ sólo
actúa durante la fase G1 y es el mecanismo de reparación más propenso a errores.
(22) Las células madre tienen una HR más eficaz que las células diferenciadas. La HR solamente es
usada por la células proliferantes y, por tanto, las células no-proliferantes solamente usan la NHEJ.
(23) La respuesta al daño del ADN de las células cancerosas está alterado (por mutación genética o por
desregulación de la transcripción), tal que el genoma es inestable.

NOTAS SOBRE BIOLOGÍA MOLECULAR:

(i) El ADN (ácido desoxirribonucleico) es una escalera torcida, o doble hélice, y ésta incluye genes a lo
largo de su longitud. Estos genes sirven como códigos para la producción de proteínas corporales y
otros químicos. El ADN se compone de azúcares, fosfatos, y bases.
(ii) Los genes del ADN son secciones particulares de esta macromolécula, y su función principal es
dirigir la síntesis de proteínas (i.e., la fabricación de proteínas) adentro de la célula.
(iii) Las bases del ADN (ubicadas en cada rama) son: adenina (A), citidina o citosina (C), guanina (G) y
tiamina (T). A y G son bases purinas; C y T son bases pirimidinas. Las bases purinas son largas y las
bases pirimidinas son cortas. Estas bases están unidas a través de la “columna vertebral”, i.e., la
estructura química de los azúcares y los fosfatos. Estas bases bioquímicas son las que portan la
información genética.
(iv) La información genética fluye así: ADN – ARN – proteína o, equivalentemente, gen – transcripción
– producto genético.
(v) El ADN está envuelto alrededor de histones (complejo de proteínas) para formar la cromatina. La
cromatina es el bloque básico de construcción de los cromosomas.
(vi) Los cromosomas se encuentran adentro del núcleo celular, son cuerpos coloreados con forma de
gusano, que contienen un número de moléculas de ADN fuertemente enrolladas.
(vii) La mitosis es el proceso celular por el cual se dividen tanto el núcleo celular como la célula
completa. La mitosis es una fase del ciclo celular. El ciclo celular es la esperanza de vida total de una
célula particular, desde su desarrollo para convertirse en célula madre, hasta su división en dos células
hijas idénticas. Antes de la fase mitótica, tenemos la interfase, que es la fase temporalmente más larga y
que en ella ocurre un crecimiento celular (i.e., síntesis de proteínas y producción de nuevos orgánulos).
Después de que pasa la interfase, la célula entra en la fase de la mitosis. Durante la mitosis, ocurre la
división de cromosomas duplicados y emparejados, dividiéndose en cromosomas individuales,
idénticos y desemparejados.
(viii) La modificación pos-traslacional es un forma de regulación de la función de una proteína en
particular, producida por un gen del ADN, por medio de otros procesos en la célula. Las regulaciones
de la función de proteína pueden darse como modificación de la proteína (e.g., fosforilación), como
cambios en el tiempo de vida de la proteína (e.g., ubiquitinación), o como cambios en la localización de
la proteína.
(ix) Fosforilación: ésta es un mecanismo común para la modificación de la función de un proteína en la
célula. Recordemos que el grupo de fosfatos, contenido en el ADN, es el grupo químico de alta energía
más común en la célula. La fosforilación puede ocurrir como quinasa (agregando fosfatos) o como
fosforilasas (removiendo fosfatos).
(x) ATM son las siglas para ataxia telangiectasia, la cual es una enfermedad que afecta los caminos
efectores de reparación.
(xi) La apoptosis es un modo de muerte celular rápida, después de la irradiación.
(xii) Los checkpoints están gobernados por complejos de CDK-ciclino y sus inhibidores. Estos
complejos reguladores cambian la cantidad y la actividad de las proteínas, impulsando el progreso del
ciclo celular.

NOTAS SOBRE LAS PARTES DE LA CÉLULA:

(i) El núcleo celular contiene una gran cantidad de la macromolécula del ADN. El núcleo celular es un
orgánulo, i.e., un pequeño órgano, que lleva a cabo las funciones de la síntesis de proteínas.
(ii) Esquema de una célula animal:

(iii)