UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

Vicerrectorado de Investigación, Doctorados e Innovación

CENTRO DE BIOLOGÍA

Nombre: Ariel García

Asignatura: Biología Aplicada
Fecha: 27/07/2020

CUESTIONARIO PARA LA OBSERVACIÓN DE BACTERIAS GRAM.

1. Grafique los pasos de la preparación para la tinción de Gram.

I. Primero, se procede a colocar el cristal violeta y esperamos 1 minutos

hasta que qué se fije correctamente. [CITATION Tin17 \l 12298 ]

II. Segundo, lavamos correctamente con Agua oxigenada la placa durante

aproximadamente unos 10 segundos. [ CITATION Tin17 \l 12298 ]

III. Tercero, procedemos a utilizar un gotero para colocar gotas de lugol en

la muestra, a continuación de colocar las gotas de lugol esperamos 1
minuto hasta que haga efecto. [ CITATION Tin17 \l 12298 ]
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IV. Cuarto, para la eliminación de las estructuras gram-del cristal violeta

aplicamos alcohol (Cetona) durante unos 30 segundos. [ CITATION
Tin17 \l 12298 ]

V. Quinto, lavamos nuevamente la muestra con agua destilada durante 10

segundos. [ CITATION Tin17 \l 12298 ]

VI. Sexto, procedemos añadir gotas de safranina y esperamos

aproximadamente durante 1 minuto. [ CITATION Tin17 \l 12298 ]
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VII. Séptimo, procedemos a lavar nuevamente la muestra con agua destilada

por 10 segundos. [ CITATION Tin17 \l 12298 ]

VIII. Por último, procedemos a secar la placa a temperatura ambiente o con un

paño seco cuidadosamente para poder extraer la muestra y así poder
diferenciar las células Gram. [ CITATION Tin17 \l 12298 ]

2. Grafique en 2 campos ópticos las observaciones al microscopio de bacterias

Gram positivas y Gram negativas.
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3. Según el video de tinción simple para bacterias enliste los pasos para dicho
procedimiento.

I. Para realizar este procedimiento nos ayudamos de un puente de tinción y

un mechero para fijar.

II. Como primer paso para realizar el frotis de la bacteria a teñir debemos
colocar 1 gota destilada en el porta objetos y sobre ella una pequeña
muestra de yogurt y dejamos secar.

III. Para fijar las bacterias pasamos el portaobjetos por la llama con la
muestra hacia arriba y luego añadimos azul de metileno al 1% lo dejamos
actuar durante 5 minutos para que tiña todas las bacterias.

IV. Lavamos suavemente con agua y culminado esto añadimos alcohol por 2
minutos para desgrasar la muestra y una vez culminado lavamos con
agua y dejamos secar.

V. Para observar la tinción utilizaremos el microscopio óptico con un

aumento de 100X, para esto debemos añadir 1 gota de aceite de
inmersión.

VI. Finalmente las bacterias se tiñen de color azulado por el azul de

metileno.

RESULTADOS
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BIBLIOGRAFÍA
 Murillo, F. d. (Dirección). (2017 ). Tincion para la Observacion de las bacterias del
Yogurt [Película].