Análisis del tamaño de las partículas en la industria farmacéutica: Principios, métodos y

aplicaciones

Boris Y. Shekunov,​1,4 ​Pratibhash Chattopadhyay,​1 ​Henry H. Y. Tong,​2 ​y Albert H. L. Chow3

 
Recibido el 6 de abril de 2006; aceptado el 7 de agosto de 2006; publicado en línea el 27 de diciembre de 2006
Resumen. ​Las propiedades fisicoquímicas y biofarmacéuticas de las sustancias farmacéuticas y las formas de
dosificación pueden verse muy afectadas por el tamaño de las partículas, un parámetro de proceso crítico en la
producción farmacéutica. La cuestión fundamental del análisis del tamaño de las partículas es la variedad de
diámetros equivalentes de las partículas generados por diferentes métodos, lo que se atribuye en gran medida a
la forma de las partículas y al mecanismo de dispersión de las partículas en cuestión. Así pues, para poder
seleccionar la técnica de tamaño más apropiada u óptima, puede ser necesario establecer una correlación cruzada
entre las diferentes técnicas. En el presente examen se ofrece un análisis a fondo del análisis del tamaño de las
partículas en relación con aplicaciones farmacéuticas específicas y aspectos reglamentarios, principios
fundamentales y terminología, tipos de instrumentos, presentación e interpretación de datos, tecnología analítica
en línea y de procesos. A efectos ilustrativos, se presta especial atención al análisis de aerosoles mediante
mediciones del tiempo de vuelo y del impactador en cascada, que se apoya en un análisis computacional
realizado para este examen.
PALABRAS CLAVE: diámetro aerodinámico; aerosoles; aglomeración; dispersión; micro y nanosuspensiones;
impactador; inhalador; PAT; distribución del tamaño de las partículas; polvos; suministro de drogas
respiratorias; forma; tabletas.

  & Propiedades de flujo y empaquetamiento,

INTRODUCCIÓN
Las partículas de ingredientes farmacéuticos activos y no
activos existen en la mayoría de los productos farmacéuticos en
forma de polvos secos, dispersiones líquidas y semisólidas que van
desde nanocoloides hasta gránulos de tamaño milimétrico,
dependiendo de la forma de dosificación y la vía de administración
(Fig. ​1​). El tamaño y la forma de las partículas pueden influir en
una gran variedad de propiedades físicas importantes, en la
procesabilidad de la fabricación y en los atributos de calidad, entre
otros:
& Tasa de disolución y biodisponibilidad de los
ingredientes activos farmacéuticos.
& Tasa de liberación de drogas para formulaciones
de liberación sostenida y controlada.
&La distribución y deposición de partículas ​in vivo​, la
absorción...
y el tiempo de eliminación, especialmente para los aerosoles y los
diferentes sistemas coloidales diseñados para la administración
​ ​Uniformidad de contenido y dosis y otras
selectiva de drogas. &
propiedades
relacionadas con la estabilidad físico-química.
& Comportamiento de la aerosolización y
rendimiento de las formulaciones respiratorias.
1​
Ferro Pfanstiehl Laboratories, Pharmaceutical Technologies, Inde-
pendence, Ohio 44131, USA.
2​
Escuela de Ciencias de la Salud, Instituto Politécnico de Macao, RAE de
Macao (China).
3​
Escuela de Farmacia, Universidad China de Hong Kong, Shatin, N.T.,
Hong Kong SAR, China.
4​
A quien debe dirigirse la correspondencia. (e-mail: shekunovb
@ferro.com)
mezcla y segregación de polvos, características reológicas de las
formulaciones líquidas y semisólidas.
&BGritdad^ de las partículas sólidas en las tabletas
masticables,
pomadas, cremas y la irritabilidad de los preparados oftálmicos.
Estas propiedades afectan en última instancia a la seguridad
y eficacia de los medicamentos. La aparición de una gama de
nuevas tecnologías de ingeniería de partículas y la disponibilidad
de nuevos y sofisticados métodos de caracterización permiten
considerar el diseño B por primera vez^ de partículas con
características y funcionalidad físico-químicas adaptadas.
También se reconoce la importancia del control de calidad, la
coherencia de los procesos y la economía incluso en los procesos
de fabricación más tradicionales (​2​). El propósito del análisis del
tamaño de las partículas es obtener datos cuantitativos sobre el
tamaño medio, la distribución del tamaño de las partículas (PSD)
y la forma de los compuestos que se utilizarán en la formulación
farmacéutica. El análisis del tamaño de las partículas también es
necesario para asegurar la calidad de las formas de dosificación
final y los sistemas de administración de drogas. Además, ha
aumentado el interés por incorporar la instrumentación del
tamaño de las partículas en la vigilancia y el control del proceso,
incluidas las unidades de producción automatizadas. Sin
embargo, la incoherencia de los datos entre los diferentes
métodos, o incluso entre los instrumentos similares de diferentes
marcas de fabricantes, hace que la validación de las BPL y las
BPF sea muy difícil (​2Y5​). En el informe del taller de la AAPS
sobre el análisis del tamaño de las partículas (​2​) se destaca que la
diversidad de tratamientos de las partículas, métodos de análisis
del tamaño de las partículas, expresión e interpretación de los
datos y aplicaciones de los procesos da lugar a aplicaciones
complicadas y a veces

2030724-8741/07/0200-0203/0 ​# ​2006 Springer Science+Business Media, Inc.

 Diagnóstico / Linfático inorgánico

(sistema reticuloendotelial)
Larga circulación (cerebro, tumor)
Transdérmico
Entrega

de

genes Intravenosa /

intramuscular

Ocular
Aerosol
Nasal
Intraperitoneal
Oral, depósito
Oral, gránulos

0.0010.010.110 11001000

(​
Rango de tamaño de las partículas ​ m)

Fig. 1. Rango de tamaño de las partículas para diferentes formas de dosificación y rutas de
administración.

criterios confusos para la selección, adopción o relevancia de las implicación directa y obvia en el rendimiento de la forma de
técnicas disponibles. Hay cuestiones metodológicas fundamentales dosificación. También
relacionadas con el Bwhat que se está midiendo^ pero también
desafíos específicos del análisis farmacéutico, como se enumeran a
continuación:
& Requisitos para el desarrollo de un nuevo método
basado en la forma física específica de la droga y la aplicación
prevista de la misma.
&Cantidades de muestra limitadas, especialmente en los
primeros
etapa de desarrollo de la droga.
& La forma altamente no esférica de muchos
productos farmacéuticos, lo que conduce a una compleja
interpretación de los datos.
&Aglomeración, inestabilidad y otros cambios físicos
que ocurren durante las mediciones.
& Necesidad de desarrollar métodos especializados
para el control de calidad, por ejemplo, en las esferas de los
productos inhalables y parenterales.
& Desafíos del análisis en línea como parte del
sistema de diseño, análisis y control de los procesos de fabricación
(Tecnología Analítica de Procesos, PAT).
&Requisitos reglamentarios.
Los objetivos del presente examen son dobles. En primer
lugar, se examinan las metodologías de análisis del tamaño de las
partículas en torno al concepto fundamental de ​diámetro
equivalente de las partículas,​ teniendo en cuenta la influencia de la
forma y la dispersión de las partículas. Las cuestiones clave aquí
son comunes a una serie de productos farmacéuticos, incluidos los
polvos secos, las suspensiones, los aerosoles, las emulsiones y las
nanopartículas. En paralelo, se revisan las metodologías para
aplicaciones farmacéuticas específicas. Ilustrado con ejemplos
pertinentes de otros campos, se hace hincapié en las formulaciones
de inhalación de polvo seco. Esta es una de las áreas más difíciles
y controvertidas de la caracterización de partículas, que tiene una
sirve para ilustrar las cuestiones metodológicas generales con el
análisis del tamaño de las partículas.

 TAMAÑO DE LAS PARTÍCULAS Y EL RENDIMIENTO DEL

PRODUCTO

 Administración de drogas respiratorias

El rendimiento de los dispositivos de inhalación depende

principalmente de la PSD geométrica y aerodinámica, la forma
de las partículas y las características de dispersión del polvo
(​4​,​6Y10​). Hay tres mecanismos principales de depósito de
aerosoles para la administración pulmonar de medicamentos: la
impactación inercial, la sedimentación y la difusión Browniana
(​11​). En general, las partículas con un diámetro aerodinámico
masivo (MMAD) de 1Y5 mm, se depositan en las regiones
bronquial y alveolar predominantemente por sedimentación, y
tienen la mejor penetración pulmonar (​4​), y están dentro del
rango de tamaño óptimo para la mayoría de los productos de
inhalación oral (​12​). Sin embargo, una mejor comprensión de la
fisiopatología subyacente en los estados de enfermedad puede
permitir un mayor ajuste del tamaño de las partículas para una
administración más eficiente de la droga por vía pulmonar. A
título ilustrativo, consideremos el caso del asma, una enfermedad
común tratada con dos tipos de agentes farmacoterapéuticos por
inhalación, a saber, los brondiladores (agonistas b de acción
corta) y los agentes antiinflamatorios (compuestos este-
roidales). En el tratamiento de la broncodilatación se ha
comprobado que la orientación regional del agonista b2 inhalado
hacia las vías respiratorias proximales es más importante que la
deposición alveolar distal (​13​). Se ha demostrado con partículas
micrónicas de diferentes tamaños (1,5, 3 y 6 mm) que, aunque
las partículas más pequeñas tienen una mayor deposición
pulmonar total, una mayor penetración en las vías respiratorias
distales y una mayor deposición periférica, las partículas más
grandes son más eficaces y permiten una mayor latencia
bronquial (​13​), lo que indica que las partículas dentro del rango
superior de 1Y5 mm son más deseables para los
broncodilatadores. En
En cambio, las enfermedades pulmonares distales parecen Se debe hacer una referencia específica a la mezcla de drogas
aumentar el riesgo de exacerbación recurrente del asma, y la y lactosa que es actualmente el tipo más común de
respuesta inflamatoria en el pulmón distal puede superar a la de las
grandes vías respiratorias (​14​). Los aerosoles extrafinos (MMAD:
1,1Y2,1 mm) tienen un mejor acceso al pulmón distal, con menos
deposición orofaríngea, y lo que es más importante, producen
cambios beneficiosos en la función del pulmón distal (​14​). Los
hallazgos mencionados sugieren que los compuestos esteroidales
de inhalación deben dirigirse a esta región distal de las vías
respiratorias, y las partículas dentro del rango inferior de 1Y5 mm
son más deseables para el control antiinflamatorio. Cabe señalar
también que, si bien actualmente no hay formulaciones de DPI con
MMAD en el rango submicrónico, casi todas las formulaciones
tienen una fracción de partículas de tamaño submicrónico. Es
probable que tales partículas (<0,5 mm) sean exhaladas y esto
puede representar un problema de dosificación.
La tendencia reciente de la administración sistémica de
medicamentos pulmonares hace que sea muy importante
comprender la correlación entre el diámetro aerodinámico,
determinado por mediciones ​in vitro ​o estudios de deposición
pulmonar ​in vivo,​ y los diferentes diámetros geométricos medidos
por diversas técnicas nonaeróticas. Las formulaciones respiratorias
avanzadas pueden consistir en micropartículas o nanopartículas
porosas o altamente no esféricas. La deposición de partículas,
expresada en términos de fracción de partículas finas (FPF),
depende principalmente de la PSD aerodinámica y la MMAD,
mientras que la PSD geométrica (volumen o superficie-volumen)
determina las interacciones entre las partículas, la dosis emitida y
la uniformidad de la dosis, la tasa de disolución y la captación de
partículas. Por ejemplo, las partículas porosas grandes que
contienen proteínas terapéuticas tienen un MMAD típico dentro
del rango de tamaño de 1,5Y4,0 mm, con el correspondiente
diámetro medio de volumen, VMD, entre 3Y12 mm (​15​,​16​). Estas
partículas pueden mostrar un FPF muy alto que alcanza el 65Y95%
y una mayor biodisponibilidad debido al aumento de la tasa de
disolución y al retraso de la eliminación fagocítica natural (​17​). De
manera similar, las partículas porosas de PLGA cargadas con un
deslorelín no péptido se prepararon con VMD de unos 13,8 mm y
una densidad aparente <0,1 g/cm3 (18)​. Estas partículas tan
grandes permitieron una liberación sostenida de péptidos en los
pulmones de las ratas durante más de 7 días debido a su reducida
captación en las células epiteliales respiratorias cuando se
comparan con las partículas sólidas PLGA con el mismo MMAD.
La forma de las partículas también es extremadamente importante.
Por ejemplo, los cristales alargados de ácido cromoglícico y
nedocromilo sódico (​19​) o las placas muy delgadas de xinafoate de
salmeterol (​7​) tenían dimensiones geométricas entre 2Y5 mm pero
un MMAD significativamente más pequeño (0,7Y2 mm). La tasa
de eliminación de partículas también depende de la forma, ya que
las partículas alargadas, como las fibras, son más difíciles de
eliminar de los pulmones (​20)​.
Las nanopartículas son prometedoras en el parto pulmonar
debido a la homogeneidad y el aumento de la eficiencia de las
nanosuspensiones. Por ejemplo, las nanosuspensiones de
budesonida (tamaño medio de 500 nm) mostraron un aumento
significativo de la FPF en un 53Y88% en comparación con las
microsuspensiones (tamaño medio de 4 mm) (​21​). Las
nanopartículas de los medicamentos poco solubles en agua tienen
una mayor tasa de disolución general y pueden tener una ruta de
interacción muy específica con el epitelio traqueal y alveolar. Las
nanopartículas ultrafinas (<150 nm) mostraron un retraso en la
depuración de los pulmones, un aumento de la
interacción/encuadernación con ciertas proteínas y una mayor
translocación del epitelio al circuito y a los órganos diana
subsiguientes (22)​.
 biodisponibilidad se rige típicamente
formulación de la inhalación de polvo (DPI). A menudo se por la disolución del medicamento en
incorpora una pequeña cantidad de partículas finas de lactosa esta categoría (​42​). Para tener en cuenta el efecto de la forma de
(<5Y10 mm) para promover la desagregación en la turbulencia las partículas en la tasa de disolución, los factores de corrección
creada por la inhalación. El aumento de la cantidad de partículas pueden ser
portadoras finas en las mezclas interactivas ternarias, hasta una
cierta proporción de peso, puede mejorar el rendimiento del
aerosol de las formulaciones de inhalación de polvo seco
(​23Y26​). La adición de partículas finas a la lactosa seca por
pulverización o cristalina 63Y90 mm también puede disminuir
las cargas específicas (​27​), y la adhesión de la partícula de
lactosa (4Y15 mm) a las cápsulas de gelatina parece ser
proporcional al tamaño de la partícula para superficies
homogéneas (​28​). La eliminación de esas partículas finas por
decantación húmeda suprime la dependencia de la dispersión de
las partículas en el diámetro medio del volumen de los
portadores (​29)​. Así pues, parece que la perforación del aerosol
se asocia con la presencia de partículas finas adheridas entre los
portadores, pero no con el tamaño inherente de las partículas de
los portadores (​29)​. La presencia de partículas finas de lactosa
(VMD = 5,8 mm) también puede facilitar la perturbación física
de la fuerte interacción cohesiva entre las partículas de la droga,
como el trihidrato de sodio de nedocromilo, al disminuir el
número de contactos entre la droga y la droga y aumentar la
distancia de separación entre las partículas de droga vecinas (​30​).
Dada la fuerte influencia de las finas de lactosa en el rendimiento
general de las formulaciones de inhalación de polvo seco, se
sugiere que durante el análisis del tamaño de las partículas del
portador, el porcentaje en peso de las finas de lactosa (<10 mm),
así como los parámetros estadísticos comunes (por ejemplo, d10​,
​ ,​ y​ etc.) deben vigilarse en todo el sistema.
d50​, d90
Los requisitos de tamaño de las partículas de los aerosoles
nasales son menos estrictos y están menos establecidos que los
del parto pulmonar (​12​). La literatura clásica sugiere que el
tamaño óptimo de las partículas para la deposición en la cavidad
nasal es de 10 mm MMAD (​31​). El rango de tamaño de
partículas más aceptable es de 4,8Y23 mm (​32​). No obstante, es
posible un amplio rango de distribución del tamaño de las
partículas para la administración nasal de productos
farmacéuticos documentados en la literatura contemporánea, que
van desde el nano-tamaño (​33​) hasta 45 mm (​34)​, o incluso hasta
125 mm (​35)​.

 Formas de dosificación oral

Además de las formulaciones de los aerosoles pulmonares y

nasales, otro ejemplo bien documentado es la forma de
dosificación de las tabletas. El rango de tamaño de las partículas
de las tabletas de compresión directa tiende a estar dentro del
rango de 100Y200 mm, principalmente debido a su
comportamiento de compactación requerido y a las propiedades
de flujo del polvo. Sin embargo, es probable que los tamaños de
partículas más pequeños, de unos 20Y50 mm, sean óptimos para
las tabletas masticables (enmascaradas por el sabor) y de rápida
disolución, en las que las características de disolución controlada
y de molienda y desgaste se vuelven más importantes. El tamaño
de las partículas tiene una profunda influencia en casi todos los
pasos de la fabricación de las tabletas, incluida la mezcla (​36), la
granulación (​37​), la compresión (​38) ​y el recubrimiento (​39)​.
También se ha informado de que la forma de las partículas afecta
a los procesos de mezcla (36) y de tableteado (​40)​. Además de la
fabricabilidad de las tabletas, la tasa de disolución, que es
proporcional a la superficie de las drogas, depende en gran
medida de la distribución del tamaño de las partículas de las
drogas (​41​). Esto es particularmente importante para los
medicamentos de la Clase II del Sistema de Clasificación
Biofarmacéutica (baja solubilidad; alta permeabilidad), ya que la
introducidos para considerar las influencias geométricas y es la complejidad de la fabricación y el control del tamaño de las
materiales (​43​). Mediante la manipulación del tamaño de las partículas durante la fabricación en gran escala (​54​).
partículas de los activos y/o excipientes, la tasa de disolución En la administración de drogas tópicas y transdérmicas, el
puede aumentarse mediante la micronización y el tamaño de las partículas es un factor crucial para algunas
nanodimensionamiento (​44​), o reducirse mediante la formulación aplicaciones. Si la droga se suspende
en un preparado de liberación controlada por compresión directa
con polímeros, como la hidroxipropilmetilcelulosa (​45​). No
obstante, hay que tener cuidado de asegurar el aumento de la
superficie efectiva ​en las muestras trituradas, ya que la formación
de agregados puede anular los efectos beneficiosos de los
materiales micronizados o de tamaño nano.
Además de las tabletas estándar, el rendimiento de disolución
de las tabletas de liberación controlada de tipo matricial está muy
influenciado por el tamaño de las partículas de la droga y/o del
excipiente. El umbral de percolación de la droga, la porosidad
crítica en la que la red de poros empieza a abarcar toda la matriz,
está linealmente correlacionado con el tamaño de las partículas de
la droga en las tabletas de la matriz (​46​). Los datos de disolución,
como el momento crítico del cambio cinético, están relacionados
con el tamaño de las partículas de la droga (​47​), y la relación entre
el excipiente y el tamaño de las partículas de la droga (​48​). El
grado de liberación de la ráfaga puede modularse controlando el
tamaño de las partículas de alginato de sodio mediante la
formación de una barrera inicial de gel de ácido algínico (​49)​. El
tiempo de retardo en la matriz de la tableta diseñada para la
liberación colónica puede aumentar al disminuir el tamaño de las
partículas del agente canalizador (por ejemplo, NaCl, Emdex\),
como consecuencia de los poros más pequeños que se forman por
su disolución (​50​). Además de los perfiles de disolución, la fuerza
de aplastamiento de las tabletas de la matriz también puede verse
afectada por el tamaño de las partículas (​51​).
La mejora de la biodisponibilidad de los medicamentos
insolubles en agua en forma de dosis oral puede lograrse en el caso
de las nanopartículas del medicamento, gracias a su mayor
homogeneidad de suspensión y eficiencia en la administración, así
como al aumento del tiempo de residencia (reducción del tiempo
de eliminación). En cuanto a la biodisponibilidad oral, se observó
un aumento típico de la AUC por un factor de 2,5 con la reducción
del tamaño de las partículas de 1.000 a 400 nm (​52​,​53​). En el
mismo estudio se informó también de una reducción de los efectos
de la alimentación/ayuno por un factor de 3Y4. Otras ventajas son
una mayor proporcionalidad de la dosis y un inicio más temprano
de la acción. También se demostró que las nanopartículas exhiben
una mayor bioadhesión y/o una mayor captación en el intestino y
la mucosa colónica inflamada (​52​,​53​).

 
Administración de drogas oftálmicas, tópicas y transdérmicas

El tamaño de las partículas de las fórmulas de liberación

controlada oftálmica ha demostrado ser muy importante para
equilibrar la tasa de liberación de la droga, la mejora de la
biodisponibilidad, la comodidad del paciente y la facilidad de uso
(​54​). Cuando se formulan adecuadamente para la administración
oftálmica, las partículas se retienen en el callejón sin salida ocular
y la droga se libera a una tasa que no es ni demasiado rápida ni
demasiado lenta para permitir una penetración adecuada de la
droga en los tejidos oculares. Las nanopartículas (típicamente
alrededor de
300 nm) sin bioadhesión pueden ser eliminadas del sitio
precorpóreo casi tan rápidamente como las soluciones acuosas. Las
micropartículas (diámetro medio de 1Y3 mm) pueden ser más
adecuadas para la liberación controlada, pero la presencia de
fracción de partículas gruesas por encima de 25 mm las hace
menos tolerables y pueden causar irritación en el ojo. Uno de los
principales desafíos en el desarrollo de esos sistemas de partículas
 de taxol (​20​,​53)​.
en un vehículo, el tamaño de las partículas puede convertirse en En el área ampliamente investigada de
un regulador clave del flujo (​55​). Si la droga tiene una baja la entrega dirigida, los fagocitos mononucleares, las células
solubilidad en el vehículo, la disminución del tamaño de las dendríticas, las células endoteliales y los cánceres (células
partículas puede promover la entrega de la droga al aumentar la tumorales y neovasculatura tumoral) son todos objetivos
tasa de disolución de las partículas (​55​). El tamaño de las importantes para las nanopartículas, con partículas de tamaño
partículas también ejerce una influencia significativa en las vías medio
de penetración cutánea: las partículas de más de 10 mm
permanecen en la superficie de la piel; las partículas de entre 3 y
10 mm se concentran en los folículos pilosos; las partículas de
menos de 3 mm pueden penetrar tanto en los folículos como en el
estrato córneo (​56​). En el caso de las partículas menores de 3
mm, incluidas las nanopartículas en la mayoría de los casos, la
absorción percuta- nea se realiza principalmente por vía folicular.
La penetración en la piel de las nanopartículas de poliestireno
polimérico (20 y 200 nm) se logra mediante la localización
folicular, pero no hay vías de penetración no folicular alternativas
(​57​). Se obtienen resultados similares en minoxidil con
nanopartículas de copolímero en bloque (40 nm y 130 nm) (​58​).
La elección juiciosa del tamaño de las partículas en las
formulaciones tópicas no sólo puede maximizar la eficacia local
dentro del área de la piel sino que también puede minimizar las
posibles reacciones adversas sistémicas.

 
Formulaciones parenterales

Dado que actualmente la mayoría de las formulaciones

parenterales son productos basados en soluciones, el análisis del
tamaño de las partículas se centra normalmente en la detección
de la contaminación por partículas (Cuadro ​I​), cuando las
posibles fuentes son materias extrañas, precipitación de drogas o
incompatibilidad de la formulación. Esa contaminación
particulada puede dar lugar a una oclusión vascular y a una
embolia pulmonar, por lo que debe controlarse estrictamente. Por
la misma preocupación de seguridad, las partículas de tamaño
micrométrico (>1 mm) deben excluirse de las formulaciones de
nanosuspensión intravenosa. Además, el aumento del tamaño de
las partículas puede disminuir tanto la capacidad de inyección
como la capacidad de inyección. La obstrucción de la aguja
puede ocurrir debido a la obstrucción por una sola partícula o por
el efecto puente de múltiples partículas y, por lo tanto, el tamaño
de cada partícula debe ser inferior a aproximadamente un tercio
del diámetro interno de la aguja.
En el caso de las suspensiones parenterales, como la
superficie específica está directamente relacionada con la tasa de
disolución, el tamaño de las partículas es importante para
determinar el patrón de liberación de la droga ​in vivo.​ Las
aplicaciones de las nanosuspensiones están creciendo
rápidamente, en todas las áreas de la administración intravenosa,
IM, ID, SC y cerebro-intratecal. Por ejemplo, en el caso de la
inyección intravenosa de agentes anticancerígenos, muchos de
los cuales son insolubles en agua, las nanosuspensiones (99% de
PSD acumulada de tamaño inferior a 1 mm) son cada vez más
importantes para la administración de drogas. En el caso de la
farmacocinética rápida, la rápida disolución plasmática de las
nanopartículas proporcionó una distribución tisular equivalente a
la de la formulación de la solución, como se muestra en el caso
del flurbiprofeno (​20​,​53​). Por otra parte, también se pudo lograr
una mejor entrega del depósito de identificación mediante una
disolución lenta y se observó una mejor entrega de SC (47%)
para las nanosuspensiones ​frente a las microsuspensiones
(​20​,​53​). Otro ejemplo es la eficacia del nanopartículas de
paclitaxel en el modelo de tumor murino MV-522 de xenoinjerto
de pulmón humano (es decir, Taxol 30 mg/kg ​frente a 9​ 0 mg/kg
de suspensiones de nanopartículas), en el que la nanoformulación
muestra una disminución múltiple del peso del tumor ​frente al
peso casi constante del tumor observado para la administración
 Mesa I. Fuentes de referencia del análisis del tamaño de las partículas en USP-NF, EP, JP e
ISO
USP 28-NF 23 & EP (Suppls. 5ª Ed.) & JP (14ª Categoría ISO

Terminología en:
El tamaño de las partículas 776 2.9.37. Y 9,276
La finura del polvo 811 2.1.4., 2.9.12. Y Y
La forma de las partículas 776 2.9.37. Y 9,276
Muestreo Y Y Y 14,487, 14,488
Técnicas de caracterización
Cribado analítico 786 2.9.38. 44, 46 2,395, 3,310
Microscopía óptica 776 2.9.13., 2.9.37. 46 13,322, 14,488
La difracción del láser 429 Y Y 13,320
Obscurecimiento de la luz 788 Y Y Y
Sedimentación gravitacional Y Y Y 13,317
Sedimentación centrífuga Y Y Y 13,318
La detección de la zona eléctrica Y Y Y 13,319
Dispersión dinámica de la luz Y Y Y 22,412, 33,321
Dispersión de la luz Y Y Y 21,501
La dispersión de rayos X de ángulo pequeño Y Y Y 13,762
Movilidad eléctrica diferencial Y Y Y 15,900
Atenuación ultrasónica Y Y Y 20,998
Porosimetría Y Y Y 15,901
Rayo enfocado Y Y Y En preparación
Determinación de la distribución de tamaños
aerodinámicos
Impactadores de cascada 601 2.9.18.
Las partículas de materia en:
Productos parenterales 788 2.9.19., 2.9.20. 20, 24 Y
Productos oftálmicos 789 Y 25 Y

limita a la evaluación de la calidad y la eficacia, sino que también

a menudo menor de 100 nm. Aquí son claramente evidentes tanto sirve como parte integrante del control de la seguridad del
los potenciales diagnósticos como los terapéuticos de la producto.
nanomedicina (​59​). El tamaño y la distribución de tamaño de las
nanopartículas tienen un papel fundamental en la determinación de
su destino y los efectos terapéuticos tras su administración, así
como su interacción con la membrana celular y su penetración a
través de las barreras fisiológicas de los medicamentos (​60​). Las
nanopartículas de menos de 150 nm de diámetro tienen una vida
media prolongada en la circulación sistémica debido a su absorción
más lenta por los microfagos. Sin embargo, el tamaño no es el
único factor que afecta a esta captación. Por ejemplo, las
micropartículas con forma de gusano de varios micrones de
longitud (con una sección transversal de 10Y100 nm) mostraron
tiempos de circulación de varios días (​20​,​61​). En comparación con
los liposomas esféricos, estos polímeros (compuestos, por ejemplo,
de PEG-PLA y PEG-PCL) son más robustos y capaces de una
circulación sistémica prolongada. Diferentes estudios ​in vivo
muestran que estas estructuras parecidas a los gusanos se
comportan como nanopartículas para la célula y el cuerpo. Esto
indica que todas las propiedades de las partículas, como el tamaño,
la forma y las características de la superficie, deben ser
investigadas en tales formulaciones.
Aunque en muchas aplicaciones puede preferirse una
distribución de tamaños uniforme, puede utilizarse una mezcla de
nanopartículas de diferentes tamaños de partículas para incorporar
la cinética de liberación deseada en el diseño de la quimioterapia a
fin de individualizar la terapia para los pacientes (​60​). A medida
que la nanotecnología se exalta cada vez más tanto en la
comunidad pública como en la científica, también se pone de
relieve la preocupación por su toxicidad (​62​). Se ha informado de
cambios patológicos dependientes del tamaño de las partículas en
los pulmones de ratones expuestos a sílice coloidal de tamaño
nanométrico (​63​). Se ha recomendado que se caracterice la
distribución del tamaño y la forma de los nanomateriales en los
ensayos rutinarios de detección de toxicidad (​64​). Por lo tanto, el
análisis del tamaño de las partículas de los nanopartículas no se
 
CUESTIONES REGLAMENTARIAS

Es evidente que cada vez se hace más hincapié en el análisis

del tamaño de las partículas en el control reglamentario. Aunque
las directrices genéricas de la Conferencia Internacional sobre
Armonización (ICH) son aplicables en la mayoría de los países,
siguen existiendo sutiles diferencias en estas directrices
especificadas por diversas farmacopeas nacionales. En el cuadro
I figuran ​las fuentes de referencia del análisis del tamaño de las
partículas en las diferentes farmacopeas y las normas de la ISO
para el dimensionamiento de las partículas, que incluyen las
definiciones así como las características técnicas y los principios
de trabajo de los instrumentos de dimensionamiento de partículas
más comunes. Como se muestra en la Tabla ​I​, sólo unos pocos
instrumentos de medición de tamaño de partículas están
incluidos en las monografías de las farmacopeas. Esto, por
supuesto, no excluye ninguna otra técnica adecuada de
caracterización de partículas, siempre que pueda justificarse por
la aplicación y el análisis riguroso de los datos. Factores como la
velocidad, el costo y la informatización del análisis del tamaño
de las partículas en la industria farmacéutica dan lugar a la
adaptación de varios tipos de instrumentos que pueden medir la
PSD de pequeñas muestras en períodos de tiempo muy cortos en
comparación con las técnicas clásicas de caracterización de la
Farmacopea, como los tamices y los métodos basados en la tasa
de sedimentación (Cuadro ​I​). Por regla general, los instrumentos
de laboratorio y de proceso para la determinación del tamaño de
las partículas que se utilizan en la industria farmacéutica
cumplen las normas sobre el formato electrónico de los datos,
como la norma 21 CFR Parte 1 (​65​) de la FDA, que permite a la
FDA aceptar registros y firmas electrónicas en lugar de registros
en papel y firmas manuscritas. En ese reglamento se describen
los controles para garantizar que los registros y las firmas
electrónicas sean dignos de confianza, fiables y compatibles con
la labor de la FDA.
Las directrices de la ICH establecen explícitamente que el
tamaño de las partículas es una de las propiedades
físico-químicas que influyen en la per-
formancia del producto farmacéutico y su fabricabilidad
(​http://www.ich.org). En los criterios de aceptación de la ICH Q6A
se describen otras especificaciones en nuevas sustancias de drogas
para productos de drogas solubles o en suspensión (Fig. ​2​). En las
suspensiones orales e inyectables para nuevos productos de drogas,
la distribución del tamaño de las partículas también puede
proponerse en lugar de la prueba de disolución. En el caso de los
productos parenterales, los criterios de aceptación deben ser
apropiados, incluyendo el tamaño máximo de la fracción de
partículas gruesas, la claridad de la solución, las partículas
extrañas y las partículas visibles y subvisibles. Las partículas
extrañas en los productos farmacéuticos inhalados y de aerosol
nasal (OINDP) son uno de los temas de discusión activos entre el
Consorcio Farmacéutico de Aerosoles sobre Regulación y Ciencia
(IPAC-RS) y la FDA. El IPAC recomienda una caracterización
completa que incluya el número de partículas, el rango de tamaño
y la identidad durante el desarrollo, y el recuento de partículas
durante la fabricación para el suministro del mercado (​66​). La
FDA ha publicado varias directrices para la industria relacionadas
con la distribución del tamaño de las partículas en diversos
productos, como los productos farmacéuticos para inhalación de
dosis medidas y de polvo seco (​67​), y los productos farmacéuticos
para aerosoles nasales y soluciones de inhalación, suspensiones y
aerosoles (​12​), incluida la evaluación de la bioequivalencia (​68)​.
Además, la preparación de un Documento Técnico Común para
fines de registro farmacéutico requiere las siguientes secciones de
información para el análisis del tamaño de las partículas (​69)​:
& Descripción del proceso de fabricación y los
controles del proceso.
&Identificación de la distribución del tamaño de las
partículas de la
sustancia de la droga.
&Especificación, y su justificación.
&Procedimientos analíticos y su validación.
&Resultados de los análisis de los lotes.
& Identificación de la influencia del tamaño de las
partículas en el rendimiento del producto.
En la administración pulmonar de productos farmacéuticos,
es evidente que la distribución aerodinámica de tamaños es el
parámetro más importante que afecta al rendimiento de los
aerosoles. Sin embargo, cabe señalar que en el documento de
orientación de la FDA, los criterios de aceptación expresados en
términos de MMAD y GSD solamente (que representan las
medidas de la tendencia central y la propagación,
respectivamente), así como en términos de fracción respirable o
dosis respirable, no se consideran adecuados para caracterizar la
distribución del tamaño de las partículas de la dosis total (​12​,​67​).
La FDA recomienda que la masa total de droga recogida en todas
las etapas y accesorios debe estar entre el 85 y el 115% de la
declaración de la etiqueta en base a cada actuación (​67​). Dado
que la binhalabilidad^ de las formulaciones también puede verse
afectada negativamente por los cambios en el tamaño y la forma
de las partículas asociados a la inestabilidad del estado sólido
durante el almacenamiento (​70​), la FDA recomienda que la
humedad y la temperatura relativas se especifiquen y controlen
en el procedimiento de prueba para minimizar el crecimiento
higroscópico, las agregaciones de partículas y la variabilidad que
surge de estas fuentes (​67​). Las pruebas de uniformidad del
contenido de la dosis tanto para los IDMp como para los IPD
especifican que la cantidad de ingrediente activo por
determinación debe estar dentro del T20% de la declaración de la
etiqueta para >90% de las muestras, y T25% de la declaración de
la etiqueta para todas las muestras, y la media debe estar dentro
del T15% de la declaración de la etiqueta (67)​. ​Si el primer nivel
de 10 contenedores falla, el segundo nivel de 30 contenedores
debe coincidir con las especificidades. La distribución del
tamaño de las partículas emitidas tanto para los IDMp como para
los IPD debe ser determinada por un impactador de cascada de
varias etapas. La masa total del medicamento recogida en todas
las etapas y accesorios debe estar dentro del T15% de la
declaración de la etiqueta sobre la base de cada actuación, y eso
en cada etapa y cada accesorio debe ser reportado (​67​). Además,
existen controles más estrictos en los DPI. Por ejemplo, la
distribución del tamaño de las partículas de la sustancia
farmacológica en los IBD medidos por el dispositivo debe
establecerse y vigilarse en la dosis inicial y en la última dosis del
número de dosis indicado en la etiqueta (​67​). Los requisitos
reglamentarios en materia de uniformidad del contenido de los
aerosoles nasales son relativamente menos estrictos.

¿Es el tamaño de las Si la respuesta ​es afirmativa

SÍ partículas crítico para la a cualquier
disolución, la solubilidad o la
biodisponibilidad?

¿Es el tamaño de las

partículas crítico
para el producto de
la droga
¿NO procesabilidad​?

¿Es el tamaño de
las partículas
crítico para la
estabilidad del
producto?
 ¿Es el tamaño de las
partículas crítico para
la uniformidad del
contenido o la
apariencia del
producto?
Fig. 2. Algoritmo que establece los criterios de aceptación de la distribución del tamaño de las partículas (según
las pruebas de sustancias farmacológicas específicas de la ICH).
La distribución de las gotas y el tamaño de las partículas en la
formulación nasal son requeridos en la guía de la FDA (​12​),
aunque las especificaciones del tamaño de las partículas aquí están
menos establecidas que en el caso del parto pulmonar.
Actualmente se están elaborando recomendaciones y
directrices relacionadas con el análisis del tamaño de las partículas
y es probable que se amplíen considerablemente en el futuro. Una
de las posibles esferas de expansión es la inclusión de nuevas
monografías sobre instrumentación y metodología en las actuales
farmacopeas, por ejemplo, el método de difracción láser y el
impactador en cascada de próxima generación, el IGN (véase el
cuadro ​I​). Otra esfera importante es la coordinación entre los
requisitos reglamentarios y la práctica industrial. Por ejemplo, ha
habido controversia en relación con el balance de masa de drogas
del 85Y115% recogido en todas las etapas y accesorios del
impactador de cascada (​67​,​68​). La industria respondió a ello
formando varios grupos de trabajo y proponiendo
recomendaciones de cambios (​71​,​72)​. Esto condujo a la relajación
del requisito de uniformidad del contenido del aerosol en el aerosol
nasal y la solución de inhalación, la suspensión y los productos
farmacéuticos en aerosol (​12​). La AAPS, junto con la FDA y la
USP, organiza una serie de talleres de análisis del tamaño de las
partículas. En esos talleres se prevé examinar las cuestiones
actuales relativas a las normas sobre partículas, el muestreo de
polvos, la preparación de muestras, la aglomeración, la forma de
las partículas, el método de validación y la interpretación de los
datos (​2​).
 MEDIDAS DEL TAMAÑO DE LAS PARTÍCULAS
 Metodología general
La figura ​3 ​ilustra el principio básico del análisis del tamaño
de las partículas. Los métodos de dimensionamiento empleados
pueden subdividirse en dos grandes categorías: las técnicas de
exploración de corrientes y las de exploración de campos. En la
primera se examinan o cuentan las partículas de una en una y luego
se clasifican en cestas de tamaño correspondiente, mientras que en
la segunda se mide simultáneamente todo el conjunto de partículas
y se obtiene el PSD a partir de esta respuesta integral del campo
B^. Claramente ambas categorías tienen sus ventajas y desventajas.
Debido a que el barrido de la corriente proporciona un parámetro
experimental adicionalVel número de partículas medidas, suele
ofrecer una mejor resolución, límites de cuantificación más bajos y
una interpretación de los datos más conveniente (​2​,​73​). Por otra
parte, los métodos de exploración de campo suelen ser más
rápidos, más robustos y más adecuados para aplicaciones ​en
línea/en línea.​
 Diámetro equivalente de las partículas
El tamaño de las partículas, si se define como una dimensión
lineal característica^, es una cantidad ambigua para las partículas
no esféricas. Además, con la excepción de la microscopía, el
tamaño de las partículas no puede ser medido directamente. Los
datos obtenidos no son una propiedad exclusiva de las partículas,
sino que dependen de la respuesta física del instrumento analítico
en relación con el tamaño y la forma de las partículas. Incluso en el
caso de las partículas esféricas, las diferencias físicas, que se
manifiestan en los diferentes diámetros equivalentes medidos,
pueden dar lugar a algunas discrep- cias, típicamente dentro del
10% en términos de diámetro medio por volumen (​10​,​74Y76​). En
el caso de las partículas no esféricas, esta desviación se amplía
considerablemente porque la mayoría de los métodos de medición
están diseñados para partículas esféricas y no pueden discriminar
entre diferentes formas. En la figura ​4 ​se ilustran los datos
obtenidos para este examen sobre las partículas de diversas
formas utilizando tres instrumentos diferentes (véase el cuadro
II​). Sólo en el caso de las partículas de sílice esféricas, los datos
encontrados fueron iguales al verdadero diámetro de la partícula.
Se observaron desviaciones relativamente pequeñas en el caso de
las partículas de acetaminofeno de forma prismática (tubular)
(AP I). Se observan grandes desviaciones en el caso de las
partículas con forma de plaqueta del xinafoato de salmeterol y en
el caso de los cristales altamente aciculares y con forma de aguja
del acetaminofén (AP II). Este efecto no estaba relacionado con
el ​desgaste de las partículas durante la dispersión, sino con la
forma de las partículas (véase más abajo). Además, la
aglomeración en el caso de las nanopartículas de óxido de zinc
dio lugar a que los datos fueran incoherentes con el tamaño de
las partículas primarias. La razón de esas desviaciones es que
todos esos instrumentos funcionan con principios físicos
diferentes y están calibrados para partículas esféricas no
aglomeradas. Esto no suele ser el caso de los materiales
farmacéuticos. Se hicieron observaciones similares en estudios
anteriores sobre la correlación entre los métodos (​2​,​7​,​10​,​74​,​75​).
Las discrepancias del análisis del tamaño de las partículas se han
observado en el caso de la lactosa de flujo rápido, que dio un
tamaño medio de las partículas de 49Y86 mm por dispersión de
luz láser y 40 mm por análisis microscópico (​77​). Pero incluso
en el caso del mismo tipo de mediciones, por ejemplo, utilizando
los principios de inercia aerodinámica, los resultados pueden
depender del diseño específico del instrumento. En un estudio
comparativo entre el impactador de cascada de Andersen (ACI),
el impactador de próxima generación (NGI) y el medidor de
partículas aerodinámicas en tiempo de vuelo (APS)
(​78​) para tres formulaciones generadas con IDMp, el tamaño de
las partículas fue subestimado por la APS y los datos fueron
incoherentes para los dos diseños de impactador de cascada que
funcionaban en condiciones casi equivalentes. Aunque algunas
de estas discrepancias podrían atribuirse a cuestiones de
formulación, no puede descartarse la dependencia del diámetro
aerodinámico medido de la corriente de aire y la geometría del
instrumento, como se ha comprobado en algunos otros estudios
(​79Y81​). Se recomendó (​78​) que tanto los datos de la APS como
los del IGN se evaluaran formulación por formulación en
relación con la gran base de datos que ya existe para las
mediciones basadas en la ACI.
Debido a las mencionadas limitaciones físicas de las
técnicas de medición, se ha introducido el concepto de ​diámetros
de partículas equivalentes.​ Se trata de diámetros de esferas
calibradas que dan el mismo valor de una determinada propiedad
física cuando se analizan en las mismas condiciones que las
partículas de forma irregular. Por ejemplo, el diámetro
equivalente al volumen es el diámetro de una esfera que tiene el
mismo volumen que el de una partícula no esférica medida por el
mismo instrumento de tamaño de partícula. El diámetro
equivalente de Stokes es el diámetro de la esfera que cae con la
misma velocidad en un líquido como partícula no esférica, etc.
Es posible subdividir todos los diámetros equivalentes en dos
grupos básicos: geométricos (es decir, relacionados con la
superficie esférica, la sección transversal, el volumen, etc.) y de
comportamiento (por ejemplo, sedimentación, deposición
inercial, etc.) (​2​). Este último grupo puede estar directamente
relacionado con alguna propiedad farmacéutica relevante durante
la fabricación o la administración de la droga. Cabe señalar
también que el diámetro de la partícula equivalente se define no
sólo por el atributo físico de la partícula medida, geométrico o de
comportamiento, sino también por la técnica de medición (por
ejemplo, difracción láser, análisis de imágenes, detección de
zonas eléctricas, etc.) y a menudo por el algoritmo de
procesamiento de datos. Por lo tanto, el número de diferentes
diámetros equivalentes es casi tan grande como
 Fig. 3. Metodología de análisis del tamaño de las partículas.
el número de diferentes métodos de medición de partículas. A
pesar de esta variabilidad, se requiere una correlación cruzada
entre las diferentes técnicas para determinar cuál es el diámetro
equivalente más pertinente para un API o formulación
determinados. Ese análisis combinado de datos permite establecer
los efectos de la forma de las partículas, la aglomeración de las
partículas y la inestabilidad de la muestra en las mediciones del
tamaño de las partículas.
 Muestreo y dispersión
El objetivo principal del muestreo es retirar la menor cantidad
de material a granel que pueda proporcionar un PSD
representativo. Los problemas de muestreo de los polvos
farmacéuticos suelen deberse a la segregación de partículas o a un
peso de muestreo insuficiente. La segregación puede producirse
como percolación entre las fracciones de partículas gruesas y finas
o como aglomeración entre diferentes especies de mezclas
multicomponentes. En el caso de las suspensiones, los gradientes
de concentración y la sedimentación de partículas pueden dar lugar
a un muestreo selectivo. Mezclar y/o construir la muestra a partir
de un gran número de incrementos puede reducir al mínimo estos
problemas. Se recomiendan las siguientes reglas de Bgolden^ para
el muestreo adecuado de polvos (​82​):
&Un polvo debe ser probado cuando está en movimiento.
& La totalidad de la corriente de polvo debe tomarse
durante muchos incrementos cortos de tiempo en lugar de tomar
parte de la corriente durante todo el período de tiempo.
Se dispone de dispositivos de muestreo que confirman estas
reglas, como el rifle giratorio (​82​). Lamentablemente, la reducción
de las muestras de los laboratorios farmacéuticos a cantidades de
miligramos puede requerir muestreadores de polvo muy
especializados o muestras de suspensiones agitadas o lechos
fluidificados.
Una cuestión más fundamental de la toma de muestras es el
número y el peso de las muestras necesarias. El primero puede
evaluarse utilizando la siguiente expresión (​83​):
​ ​1 þ​ ðt s​ =$dÞ2ð1Þ 
n¼
donde ​n es ​el número de muestras necesarias para asumir el nivel
de confianza ​t,​ ​s e​ s la desviación estándar de la muestra y Dd es
la máxima diferencia permisible entre la estimación y el valor
real del diámetro de la partícula. Para las aplicaciones
farmacéuticas, se utiliza un valor ​t = ​ 2 (confianza del 95%) para
la calidad de trabajo y ​t = ​ 3 (nivel de confianza del 99,9%) para
la calidad total (​53​). Por ejemplo: ​s ​= 0,5 mm, ​t = ​ 2, Dd = 0,5
mm da ​n = ​5. En cuanto al peso de la muestra, es evidente que el
peso límite (mínimo) de la muestra requerida está
predeterminado por las partículas gruesas de la PSD, porque
estas partículas siempre están subrepresentadas durante el
muestreo. Puede utilizarse la siguiente relación (​82​):
¼ 5​ × 10-7 ​d3 .​ ​r​,​s 2Σð1=wc ​- ​2Þð2Þ 
ms ​
donde ​ms (mg)
​ es el peso límite, ​d (​ mm) es el diámetro medio de
las partículas más gruesas de la muestra, r (g/cm3) es la densidad
del polvo, s es el error de muestreo tolerado, ​wc ​es la masa
fraccionaria de la clase más gruesa que se está muestreando. Para
valores típicos ​wc ​= 0,1; s = 0,05 (5%); r = 0,5 g/cm3, se puede
estimar que se necesita menos de 1 mg de muestra para ​d < ​10
mm (aerosoles finos), mientras que se necesitarán varios gramos
de cada muestra para partículas con d = 100Y200 mm (formas de
dosificación oral).
Las partículas de materiales orgánicos farmacéuticos
pueden ser muy cohesivas y estar cargadas electrostáticamente,
formando aglomeraciones de diferentes tamaños y estructuras. Si
las fuerzas que sostienen
Fig. 4. a) Morfología de las partículas de: sílice, óxido de zinc, xinafoato de salmeterol; acetaminofeno, AP I
(prismático) y acetaminofeno, AP II (acicular). b) Los correspondientes diámetros de volumen medio medidos
por instrumentos de tiempo de vuelo (​TOF,​ AeroSizeri con AeroDisperser, TSI Inc, EE.UU.), difracción láser
(​LD,​ Helos/Rodos, Sympatec GmbH, Alemania) y contador de Coulter (Coulter Multisizer II, Coulter
Electronics GmbH, Alemania).
 Tabla II. Características de algunas técnicas de medición de tamaño de partículas
comúnmente utilizadas

Diámetro de Rango de medición

Técnica Método partículas efectivo, ​2m El PSD más representativo
equivalente
Análisis de imágenes Imágenes directas Área proyectada 3Y150 Ponderado por números
ópticas
SEM Imágenes directas Área proyectada 0.01Y150 Ponderado por números
LD Difracción de ángulo bajo (Fraunhofer) Promedio angular 0.5Y1,000 Ponderado por volumen
medición de los anillos lineal (Feret_s)
DLS Medición de la intensidad de la luz Hidrodinámica 0.003Y3 Ponderado por volumen
correlaciones de las partículas en
El movimiento
Contador de rejas browniano Volumen 0.6Y1,200 Ponderado por volumen
Detección de zonas
eléctricas
TOF Medición de la velocidad de las Aerodinámica, 0.5Y200 Ponderado por números
partículas
en la expansión del flujo de aire ultra-Stokesiano
CI La impactación inercial de partículas Aerodinámica, 0.5-10 Ponderación de la masa
como
función de la velocidad del aire ultra-Stokesiano

Microscopía electrónica de barrido ​SEM;​ difracción láser ​LD; dispersión dinámica de la l​ uz ​DLS; ​tiempo de vuelo ​TOF​; impactador de cascada ​CI.

las partículas primarias son débiles y más bien de naturaleza física, (​7​,​10​). Esto es particularmente valioso para las formulaciones
se dice que las partículas están en forma de ​aglomerados blandos respiratorias de polvo seco, en las que esa dispersión está
(​84​). Se dice que las partículas fuertemente adheridas, Bbridged^ directamente relacionada con el rendimiento de los inhaladores de
forman ​aglomerados duros,​ que típicamente se originan en el polvo seco. La dispersión de los polvos en el flujo de aire es
proceso de formación de partículas, limpieza o secado
inadecuados. La partícula ​primaria p​ uede consistir en cristales
simples, sólidos semicristalinos o amorfos. Las partículas
primarias también pueden ser aglomerados de núcleos
submicrónicos y pueden tener una estructura hueca o porosa. En lo
que respecta al análisis del tamaño de las partículas, los
aglomerados duros se consideran partículas individuales y parte
del conjunto de partículas. Sin embargo, la dispersión ineficiente
de los aglomerados blandos, que se observa típicamente tanto en
los polvos secos como en las suspensiones, puede contribuir a la
mayor parte del error analítico. El objetivo es eliminar la mayor
cantidad posible de aglomeración de partículas de la muestra que
se va a analizar y, al mismo tiempo, evitar el desgaste ​de las
partículas ​(molienda), debido al uso de fuerzas de dispersión
excesivas.
Según el tipo de mediciones, se puede lograr la dispersión en
una célula líquida, con la adición de agentes tensioactivos
apropiados. La dispersión también puede lograrse mediante una
agitación controlada y/o la aplicación de ultrasonidos. Los líquidos
polares suelen utilizarse para dispersar los sólidos polares y los
líquidos no polares para dispersar los sólidos no polares (​82​). Los
surfactantes iónicos o no iónicos se seleccionan para que coincidan
con la diferencia de polaridad de la superficie (para aumentar la
eficacia de la humectación). Lo ideal es que los sólidos sean
prácticamente insolubles en el disolvente de dispersión. En casos
extremos, el sólido puede dispersarse en su solución saturada en un
disolvente adecuado. Aquí siempre existe la posibilidad de
cambiar la distribución del tamaño de las partículas debido a los
efectos termodinámicos de maduración de BOswald^ o de
recristalización (​85​). El uso de la dispersión líquida es necesario
para cualquier sistema submicrónico porque tales partículas son
imposibles de dispersar en estado seco. También se comprobó que
la dispersión líquida con ayuda de ultrasonidos era el método más
eficaz para medir la PSD primaria de algunos polvos secos de
inhalación fuertemente aglomerados (​10​).
Los dispersores de polvo seco, que suelen ir unidos a
instrumentos estándar de difracción láser y de tiempo de vuelo,
constituyen un medio muy conveniente para controlar y estudiar
los efectos de la dispersión con polvos de tamaño micrométrico
definido como el equilibrio de fuerzas generadas por las
tensiones aerodinámicas que son necesarias en la dispersión de
las partículas. El mecanismo de dispersión es muy complejo y
puede implicar la dispersión por aceleración, por flujo de
cizallamiento así como por impacto u otras fuerzas mecánicas.
Apenas es posible anticipar todos los factores implicados, sin
embargo, es factible realizar un estudio comparativo de
diferentes polvos para un mismo dispositivo, considerando la
energía fluida suministrada por el flujo de aire, ​f,​ y tomando
como medida adecuada de dicha energía la magnitud de la
tensión turbulenta viscosa, tS ​=K f ​3/2​. El coeficiente, ​K,​ describe
cuán eficiente es el dispositivo de dispersión a una tasa de flujo
de aire constante. Empíricamente, el perfil de dispersión de cada
polvo puede encontrarse en función del caudal o de la presión de
dispersión (diferencial), que se relacionan progresivamente entre
sí (Fig. ​5​). El perfil de dispersión de la Fig. ​5a ​muestra que el
diámetro medio del volumen de partículas (DMP) alcanza una
meseta. Esto significa que la mayoría de los aglomerados están
dispersos y que el caudal correspondiente es óptimo para las
mediciones. Los polvos más cohesivos y fuertemente
aglomerados se dispersan a un mayor caudal. Además de
proporcionar el régimen de dispersión óptimo, la dependencia
similar a la de la Fig. ​5 ​es útil para comparar el rendimiento de
diferentes polvos en los DPI. El proceso de dispersión en los DPI
se produce típicamente en la región inferior de los flujos (<100
l/min) en la Fig. 5b que corresponde a la tensión turbulenta
viscosa, tS, entre 1Y30 N/m2 (​6Y9​)​. Este hecho explica por qué el
rendimiento de muchos IPD llenos de polvo de drogas
micronizadas o de lactosa es relativamente bajo.
Una técnica de imagen, como la microscopía óptica o
electrónica, puede proporcionar una descripción útil de los
aglomerados de partículas micrónicas y submicrónicas
escasamente dispersas sobre una superficie de sustrato de
microscopio (​87​). Este enfoque se basa en la teoría fractal, que
está vinculada a la dimensión fractal del límite de la imagen, d.
El proceso de evaluación de la dimensión fractal del límite
implica la estimación de su perímetro ​P, ​por un polígono con un
número de lados, ​n:​

P ​¼ ​nl ​¼ ​klð1-6Þ
ð3Þ 

El lado l se conoce como el parámetro de resolución. Las

unidades funcionales de los agregados pueden describirse
utilizando sus dimensiones fraccionarias, lo que permite medir la
resistencia^ de las estructuras de las partículas observadas bajo
un micro
 alcance. En la figura ​6 ​se muestra un ejemplo de este algoritmo méticamente, la precisión puede definirse como la desviación
aplicado a los agregados de nanopartículas de griseofulvina estándar media ​s p​ ara una serie de mediciones (​82​):
producidos mediante la extracción de fluidos supercríticos de
las ​85​). Dos
las regiones de la estructura fractal pueden verse con d = 1.12 a una
alta

​  
N ​ ​P
sD
integración resuelta  s¯ ¼
correspondiente al P¼0 Nð5Þ 
empaquetamiento de las
partículas individuales y d = 1,4
característica de la
aglomeración durante el secado.
Tanto para los sistemas de
polvo seco como para los
líquidos, puede ser

concluyó en general que el desarrollo de una técnica y un
procedimiento de dispersión adecuados es por lo menos tan
importante como el propio análisis del tamaño de las partículas. En
el caso de los polvos de inhalación y los sistemas submicrónicos, el
control de la desagregación es el factor dominante que puede
requerir la validación mediante el uso de una cartera de técnicas
complementarias (​7​,​10​).
 Exactitud, precisión y principales fuentes de error
Las siguientes definiciones de la Validación de
Procedimientos Anatómicos (ICH Q2A y Q2B)
(​http://www.ich.org) son aplicables a la clasificación de las
partículas:
La exactitud ​es la cercanía de acuerdo entre los valores que
son aceptados ya sea como un valor verdadero convencional o un
valor de referencia aceptado y el valor encontrado (Btrueness^).
En términos matemáticos, Faccuracy_ puede definirse como la
desviación porcentual media, A¯ , de una distribución del tamaño
de las partículas experimentales (PSD) de la PSD estándar (​82​):
donde ​s ​es la desviación estándar para una clase de tamaño
determinado. El
El término relacionado con la ​repetibilidad s​ e utiliza para
denotar la precisión en las mismas condiciones de
funcionamiento durante un corto intervalo de tiempo (precisión
intra-ensayo). ​La reproducibilidad e​ s la precisión entre
laboratorios, que se aplica generalmente a la normalización de la
odontología de la metanfetamina y a los ensayos entre
laboratorios en estudios de colaboración. Estas características
son muy importantes para todas las investigaciones
farmacéuticas, BPL y BPFC porque reflejan directamente la
calidad de la instrumentación, así como la fiabilidad y la
coherencia del procedimiento operativo (​2​,​88​).
Otras características importantes para el análisis de
partículas son la ​resolución y​ ​el alcance​. ​La resolución ​se define
por el ancho y el número de las clases de tamaño de las
partículas individuales dentro del rango de tamaño de las
partículas medidas. El rango bdinámico^ se utiliza para describir
el rango de tamaño en el que se pueden alcanzar los niveles de
precisión y repetibilidad requeridos sin cambiar la configuración
del instrumento. La resolución y el di-

a
1
5
N
# ​¼  A ​D ​P
P¼0
Nð4Þ 

 
donde ​DP ​es el ancho de la clase de
tamaño, ​N e​ s el número de clases de
tamaño, ​A es la desviación porcentual d​ el
tamaño medido y estándar para una clase de
tamaño determinada. Una gran desviación
del estándar no significa que el instrumento
esté en error, sino que se está midiendo un
parámetro diferente mediante la técnica
estándar. Esta cuestión fundamental está
directamente relacionada con la definición
del diámetro de la partícula equivalente. En
la literatura farmacéutica se ofrecen
muchos ejemplos. El monográfico USP
<601> (Tabla I) ​compara las ​mediciones
microscópicas y aerodinámicas de los
inhaladores de dosis medida (pMDI). Se
indica que, si bien las mediciones del
tamaño de las partículas realizadas por el una aplicación farmacéutica determinada, el
microscopio pueden utilizarse para evaluar
el número de partículas grandes,
aglomerados y partículas extrañas en las
emisiones de los pMDI, la prueba debe
sustituirse, siempre que sea posible, por un
método para determinar la distribución
aerodinámica del tamaño de las partículas
del aerosol de la droga que sale del
inhalador. La distribución aerodinámica del
tamaño de las partículas define la manera
en que se deposita un aerosol durante la
inhalación. Sin embargo, es evidente que el
análisis del tamaño de las partículas por
sedimentación gravimétrica o centrífuga es
el método más apropiado para evaluar la
estabilidad de la suspensión de pMDI. Así
pues, para lograr la precisión necesaria para
 5

0 50 100 150
0 200 250
velocidad de flujo, f, L/min

25
250

20
200

15
150

10
100

5
50

0 0 1 2
3
presión, bar
El principio general sería utilizar la técnica de medición que se Fig. 5. a) Perfiles de dispersión experimentales para dos lotes diferentes
asemeja al proceso. de xinafoate de salmeterol (​7​). b) Relación entre la presión del aire de
La ​precisión e​ s la cercanía de acuerdo (grado de dispersión) dispersión, el caudal, ​f​, y la tensión turbulenta viscosa de la boquilla, ​tS​,
entre una serie de mediciones obtenidas a partir de múltiples determinada para el dispersor de polvo seco de 4 mm RODOS (Sympatec
GmbH).
muestreos de la misma muestra homogénea. Mathe-
 Las ​fuentes c​ omunes ​de errores ​en el análisis del tamaño de
las partículas son las siguientes:
& Errores instrumentales (hardware)V que reflejan
las limitaciones del método analítico y que generalmente se
asocian con la exactitud de las mediciones como se describe
anteriormente.
&Errores estadísticosV que dependen en su mayoría de la
procedimientos de muestreo y dispersión.
& Errores de interpretación de datos
(software)Vque pueden ocurrir debido a la aplicación de
algoritmos más o menos adecuados de computación y análisis.
&Errores del operadorV que normalmente se deben a errores
calibración, configuración, procedimientos operativos.
En general, cualquier instrumento de
tamaño de partículas tiene un rango

5.5

4.5 -5 -4 -3 -2-1 dinámico óptimo, donde el error

instrumental es minúsculo. El error de
En () muestreo siempre aumenta y el error de
dispersión disminuye con el aumento del
tamaño de las partículas, como se explica
en la siguiente sección. Es posible separar
los errores instrumentales de los errores
estadísticos utilizando diferentes
secuencias de muestreo o de dispersión
(​82​). La variación total (​s2​) es la suma de
las variaciones individuales debidas al
procedimiento de medición y a los demás
factores. Para la descripción cuantitativa,
se recomienda utilizar las Ecs. ​4 ​y ​5 para
describir ​la exactitud y precisión
respectivamente. Las evaluaciones, que se
basan en la comparación de los diámetros
medios de las partículas y no en las
estadísticas de toda la PSD, a menudo
conducen a una subestimación de estos
errores. Por ejemplo, los compuestos de
inhalación pueden tener una MMAD muy
similar e incluso la misma GSD, pero
presentan PSD completamente diferentes,
como distribuciones monomodales y
bimodales, y se comportan de manera
diferente durante la aerosolización
(​89​,​90​).

 Validación, Calibración y Verificación

Fig. 6. Dependencia del perímetro de las partículas normalizadas (dividido
por el diámetro medio proyectado), ​P,​ del parámetro de resolución
normalizada, l, ambos en coordenadas logarítmicas, para las nanopartículas
de griseofulvina que se muestran en la fotografía del MEB.
Los rangos de tamaño de las partículas suelen estar inversamente
relacionados entre sí: la mejor resolución suele lograrse cuando el
instrumento está configurado para medir un rango de tamaño de
partículas específico y relativamente estrecho. Por ejemplo, es bien

sabido que los diferentes instrumentos de tamaño (con la posible
excepción de la microscopía electrónica) no abarcan toda la gama
de partículas utilizadas en la liberación controlada (CR), que va
desde unos pocos nanómetros para los sistemas micelares hasta
cientos de mm para las grandes microesferas (​88​). El rango de
tamaño de las partículas entre 0,5 y 1 mm es el más problemático,
con los datos más incoherentes obtenidos por técnicas como la
dispersión de la luz, la conductividad eléctrica y el oscurecimiento
de la luz. Evidentemente, este rango pertenece al límite mismo de
los métodos de medición de partículas más importantes (Tabla ​II​),
donde la precisión es la más baja. Esto es de particular importancia
para los sistemas con PSD relativamente amplios, bimodales y
multimodales. En esos casos, una combinación de microscopía
electrónica con un análisis de recuento del tamaño de las partículas
descrito a continuación puede ofrecer la mejor precisión y
resolución.
Durante ​la validación,​ un instrumento
se somete a una serie de
procedimientos ​de calificación​. Estos procedimientos de
cualificación comprueban las condiciones generales de
funcionamiento de un instrumento, la correcta instalación de
todos los componentes de hardware y software y el correcto
funcionamiento de los componentes.
La calibración e​ s un proceso en el que se utiliza un
instrumento para medir un estándar conocido y se ajusta su
respuesta hasta que la respuesta dada corresponda al estándar. El
instrumento mantendrá entonces este ajuste durante un período
de tiempo limitado y luego se apartará gradualmente del estado
calibrado. El ​material del patrón ​consiste en partículas esféricas
con valores certificados que se trazan directamente al patrón
Bmetro^ (por ejemplo, a través del microscopio). Los
microscopios y los analizadores de imágenes, tanto ópticos como
SEM, suelen calibrarse utilizando gránulos certificados. En
dispositivos como TOF y CI, los fabricantes proporcionan
métodos de calibración interna fijos. Las técnicas ópticas, como
la LD, la dispersión de la luz y la DLS, implican el uso de una
escala de medición fundamentalLongitud de onda del láser, y por
lo tanto no requieren calibración.
Se lleva a cabo un procedimiento de ​verificación ​o
calificación ​del rendimiento de ​todos los instrumentos para
asegurar que todas las especificaciones (hardware y software)
estén dentro de los límites establecidos. Esto se logra
generalmente utilizando un ​material de referencia q​ ue es un
material B-estable de forma de partícula arbitraria, sus valores
certificados son referidos a un método de referencia^ (​82​). El
tamaño del material de referencia se compara con su
valores certificados para determinar la precisión del instrumento. como resultado más de
Los materiales de referencia suelen suministrarse con el
instrumento en forma de polvos secos fácilmente dispersables (por
ejemplo, sílice, vidrio, SiC) o suspensiones estables de esferas de
látex o poliestireno estrechamente clasificadas (monodis- perse),
disponibles en rangos de tamaño tanto nanométrico como
micrométrico. Para la mayoría de las mediciones se recomienda la
certificación con al menos dos materiales de referencia
correspondientes a los extremos superior e inferior del rango de
tamaño dinámico.
Todos los puntos discutidos anteriormente deben reflejarse en
los procedimientos operativos estándar (POE) que contienen toda
la información necesaria para el control y la revisión de los
documentos de control y garantía de calidad, incluidas las
especificaciones funcionales y de diseño, los procedimientos de
prueba, los documentos de lanzamiento de productos, los
certificados y las directrices de servicio. Por ejemplo, el desarrollo
de métodos analíticos fiables y validados para el dimensionamiento
de partículas de los parenterales de liberación controlada (CR) para
su uso en la investigación y el desarrollo, así como en la
fabricación del control de calidad ha sido uno de los temas de un
taller organizado por la EUFEPS y la AAPS (​88​). Se señaló que la
distribución de tamaños de las microesferas para el producto final
debería ser la misma que la utilizada para los lotes clínicos.
Además, se necesita un control de calidad con una validación
adecuada para determinar si se produce una segregación durante la
elaboración y, en caso afirmativo, qué procedimientos desarrollar
para evitar este problema. El mismo instrumento y el mismo
procedimiento operativo estándar deben utilizarse para las pruebas
de control de calidad de un producto determinado. Esta limitación
puede crear problemas en la ampliación de la escala y en los
cambios en el lugar de fabricación.

 
INSTRUMENTACIÓN

 Microscopía y análisis de imágenes

Entre las técnicas más utilizadas en la investigación y el

desarrollo farmacéutico (Cuadro ​II​), la microscopia se aplica a
menudo como método de medición absoluta de partículas porque
es el único método en el que se pueden observar y medir las
partículas individuales y se puede determinar su forma (​7​,​5​,​10​,​74​).
Aunque la resolución teórica de la microscopía de luz es de unos
0,2 mm con los objetivos de inmersión de alta apertura numérica
(NA), el halo de difracción da una gran sobreestimación de las
partículas en la región de menor tamaño micrométrico. La
resolución de un microscopio óptico es una función del aumento
óptico, el tipo, la calidad del objetivo, la apertura numérica, el tipo
de medio de inmersión y también las características ópticas de las
propias partículas. Por lo tanto, el límite inferior exacto, con una
precisión determinada, debe evaluarse para cada microscopio
individual. La microscopía confocal puede aplicarse para aumentar
el contraste de la imagen, pero se mantiene la limitación general de
la longitud de onda óptica (​91​). La determinación del tamaño de la
parábola mediante el método óptico también está limitada por
consideraciones estadísticas durante el análisis de la imagen
computadorizada. El algoritmo utilizado suele calcular el diámetro
del área proyectada equivalente o el diámetro del perímetro
proyectado. Como la orientación de las partículas en un sustrato
suele dar el área máxima, esto da lugar a un tamaño de partícula
aparentemente mayor que el medido por otras técnicas (​82​). Sin
embargo, el error más común, con mucho, es el muestreo
subrepresentativo. El número mínimo de partículas, ​Nmin​, que se
han de medir puede estimarse en términos del error máximo de
muestreo de la distribución de la PSD como ​Nmin > ​ 1/s2. Esto da
 complejo índice de refracción que
10.000 partículas para una desviación estándar máxima del 1%. depende
La precisión depende en gran medida de la clase de partículas
más gruesas que se midan. Según la norma ISO 14488 (Tabla ​I​),
el número mínimo de partículas depende de la PSD y
típicamente se necesitan más de 1.000.000 de partículas para
alcanzar un error máximo inferior al 1%.
Aunque la microscopía, en particular la microscopía
electrónica de barrido (MEB), es la técnica más esencial para el
análisis del tamaño de las partículas, no es muy fiable para el
dimensionamiento por sí sola y siempre debe utilizarse en
combinación con otras técnicas. Hay grandes errores estadísticos
y también sesgos asociados a la orientación preferencial de las
partículas y a la aglomeración de partículas que son difíciles de
controlar y minimizar. Esto, en efecto, dará lugar a un número
bajo de partículas medidas por imagen y a tiempos de cálculo
elevados. Varias técnicas de imagen son capaces de abordar
algunos de estos problemas. El análisis de imágenes ópticas de
barrido de corrientes permite una recogida de datos más rápida y
una orientación controlada de las partículas de tamaño
micrométrico (véase Interpretación y presentación de datos). La
microscopía electrónica de criotransmisión (Cryo-TEM) puede
utilizarse para proporcionar información sobre las partículas en
suspensiones congeladas sin secar, evitando así posibles
problemas de agregación de partículas. La microscopía
electrónica ambiental (ESEM) permite medir las dispersiones
acuosas a presión atmosférica, aunque a expensas de la
resolución de la imagen (​92​).
Existe un grupo cada vez más amplio de técnicas de imagen
que pueden discriminar entre los ingredientes far-macéuticos
activos y no activos en las formulaciones: microscopía confocal
fluorescente, espectroscopía vibratoria (IR, Raman) y SEM con
rayos X de energía dispersiva (SEM/EDX). Por ejemplo, la
imagen química Raman se desarrolló para el análisis PSD
específico de API de varias suspensiones de corticoides en
aerosoles nasales acuosos (​93​). El rango espectral de
1.600Y1.700 cmj1 permitió distinguir fácilmente entre la droga y
los excipientes de la mezcla, así como la droga adherida a las
partículas del excipiente. De manera similar, la microscopía
Raman se aplicó a las pruebas de partículas extrañas en
productos de drogas de inhalación (​66)​. La microscopía de
fuerza atómica (AFM), es otra técnica de imagen basada en el
escaneo (tapping) de sondas a nanoescala sobre la superficie de
la muestra. Aunque este método es relativamente lento y por lo
general requiere una elaborada preparación de la muestra, las
imágenes son muy similares a las obtenidas por MEB con una
resolución de hasta varios nm. Además del tamaño y la forma de
las partículas, el MFA también puede proporcionar información
sobre las propiedades de la superficie de las partículas, por
ejemplo, las interacciones interparticulares en las formulaciones
de los DPI (​94​).

 
Técnicas de Difracción Láser y Dispersión Estática

La LD se está convirtiendo rápidamente en el método

estándar preferido para el dimensionamiento de partículas en la
industria farmacéutica. Esto se debe a su corto tiempo de
análisis, su robustez, su alta precisión, su reproducibilidad, su
amplio rango de medición y su flexibilidad de operación
utilizando accesorios de dispersión líquidos, en spray y secos
(​7​,​10​,​74Y76​). La mayoría de los instrumentos de LD emplean
una fuente de luz láser HeYNe estándar (longitud de onda de
632,8 nm) y consisten en un sistema óptico para la
transformación Fourier de la luz difractada en un detector
sensible a la posición. El patrón de dispersión de la luz de las
partículas no esféricas es muy com-plex, variando en función del
ángulo de dispersión, el tamaño y la forma de las partículas y el
tanto en la refracción de la luz (componente real) como en la denominado análisis de
absorción (componente imaginario). Sin embargo, la difracción
hacia adelante (Fraunhofer) depende sólo del tamaño de la
partícula, un diámetro tangencial promediado azimutalmente
(Feret_s). Este diámetro puede asociarse con el diámetro
equivalente al proyectado, que se define por la intensidad global de
la luz difractada. El diámetro equivalente al volumen no se mide
mediante la técnica de difracción láser, aunque el volumen PSD se
deriva del patrón de difracción de Fraunhofer mediante un sistema
de ecuaciones lineales incorporadas en el algoritmo del
instrumento (​95​,​96​). Los algoritmos, basados en la rigurosa teoría
de la dispersión de Mie, deberían aplicarse idealmente para las
partículas de menos de 25 mm (​3​), sin embargo, éstos requieren el
conocimiento de índices de refracción complejos que no están
disponibles para la mayoría de los materiales orgánicos y que no
son directamente medibles con los instrumentos disponibles.
Beekman ​y otros (​ ​3​) demostraron que los errores en la estimación
del índice de refracción Beffective^ pueden producir PSD
radicalmente diferentes, en particular para las partículas de menos
de 10 mm. Por lo tanto, en la práctica, los errores de dispersión
con partículas pequeñas y las incertidumbres introducidas por el
componente imaginario del índice de refracción pueden superar la
inexactitud asociada a la teoría simplificada de Fraunhofer (​96​).
En el caso de las partículas no esféricas, como las placas y las
agujas orientadas al azar, el diámetro del volumen suele estar
sobreestimado debido al mayor diámetro de proyección de estas
formas (Fig. ​4b​). Otro error puede tener su origen en la alta
concentración de partículas analizadas, el alto oscurecimiento del
rayo láser, que provoca una múltiple dispersión de la luz y la
sobreestimación de las partículas finas (subdimensionamiento del
PSD). Esto puede evitarse fácilmente manteniendo el
oscurecimiento, generalmente monitoreado durante las
mediciones, dentro de un intervalo de 0,1Y0,3. En algunos
instrumentos, el método LD se combina con mediciones de
dispersión de la luz multiángulo y multi-longitud de onda, que
permiten la expansión del rango de medición dinámico y se
convierten esencialmente en el método de dispersión de la luz láser
estática multiángulo (LLS) (​5​,​92​).
Como ya se ha mencionado, el diámetro equivalente medido
por la LD no está directamente relacionado con el volumen o la
superficie de las partículas y, por lo tanto, se debe tener cuidado al
interpretar estos datos para cualquier aplicación farmacéutica. A
efectos de control de calidad, basta con establecer una correlación
fiable entre los datos de la LD y, por ejemplo, la PSD medida por
análisis de imágenes o mediciones aerodinámicas (​3​,​7​,​10​,​76​). En
los casos en que se mide el tamaño de las partículas para la forma
de dosificación, los diferentes ingredientes de la formulación
pueden afectar fuertemente a los datos. Entre los ejemplos cabe
citar la evaluación de la mezcla de polvos y la homogeneidad de
las tabletas (​2​), las mediciones de las pulverizaciones de
nebulizadores (​76​,​90​), la separación y agregación de fases en las
suspensiones de IDMp (​97​,​98) ​y la desagregación en las DPI (​86​).
Por último, cabe señalar que las técnicas como la dispersión de
rayos X de ángulo pequeño (SAXS) (​99​) y la dispersión de
neutrones de ángulo pequeño (SANS) (​92​) se basan esencialmente
en el mismo principio físico de la difracción de la luz, pero con la
aplicación
de una longitud de onda de radiación mucho más corta
(típicamente varias A˚ ).
Esto permite un aumento de la resolución hasta bien entrada la
región de la nanoescala, haciendo posible la observación de
coloides, micelas, láminas y nanoestructuras similares. Sin
embargo, estas técnicas no son para aplicaciones rutinarias o
comunes y requieren una considerable especialización en la
recopilación e interpretación de datos. Cabe señalar también que el
análisis de difracción de rayos X de polvo (XRPD), a veces
 electroforética de la luz para medir el
La dispersión de rayos X en ángulo (WAXS), no es estrictamente potencial zeta importante para la
una técnica de tamaño de partícula. La XRPD permite determinar estabilidad de los coloides. Una interesante variación del DLS es
los parámetros de la red y el ensanchamiento físico de los picos
de difracción como medida acumulativa de las imperfecciones de
la red cristalina (​100​). Esto último está relacionado con los
efectos del tamaño de los defectos de los cristales, como los
granos, los límites de los ángulos pequeños y los fallos de
apilamiento que, sin embargo, no pueden atribuirse directamente
al tamaño geométrico de las partículas.

 Dispersión dinámica de la luz (DLS)

Este método, también conocido como espectroscopia de

correlación de fotones (PCS) o dispersión cuasielástica de la luz,
se utiliza principalmente para medir los sistemas coloidales de
nanopartículas como emulsiones, micelas, liposomas y
nanosuspensiones (​5​,​85​,​90​,​92​). Cuando un rayo láser pasa a
través de suspensiones líquidas que contienen partículas en
movimiento Browniano, experimenta fluctuaciones en su
intensidad debido a la dispersión de la luz. En el instrumento
DLS, las mediciones de esta fluctuación de intensidad en un
ángulo de dispersión determinado se utilizan para inferir el
tamaño de la partícula o el diámetro hidrodinámico_ de las
partículas suspendidas. Los instrumentos del DLS miden las
fluctuaciones de la intensidad de la luz dispersada con el tiempo,
a fin de generar una función de autocorrelación de decadencia
exponencial. A continuación se analiza esta función para
determinar los tiempos de decaimiento característicos, para
determinar el coeficiente de difusión exclusivo de las
suspensiones de dispersión y, junto con la ecuación de
StokesYEinstein, el radio hidrodinámico. La principal ventaja del
método DLS es que proporciona una medición absoluta sin más
información sobre la composición y las propiedades ópticas de
las partículas en suspensión. El límite inferior del instrumento
depende de la potencia del láser y de la relación señal/ruido y
puede ser tan bajo como 2 nm. Por lo tanto, puede utilizarse para
medir los tamaños no sólo de las micelas y coloides de los
surfactantes, sino también de las macromoléculas. Los datos
obtenidos con el instrumento suelen tener dos formatos, según el
tipo de algoritmos utilizados para la inversión de la función de
autocorrelación. Normalmente se utiliza una distribución
gaussiana para representar las dispersiones unimodales. Para las
distribuciones multimodales (por ejemplo, bimodales) del tamaño
de las partículas se requiere un análisis más complejo. La
introducción de la polidispersidad también puede dar lugar a una
complicación importante porque las ecuaciones utilizadas para
reducir el tamaño de las partículas se vuelven más ambiguas y
menos estables (​101​). Los algoritmos utilizados proporcionan
información sobre el tamaño medio de las partículas, los anchos
y los modos de pico de las distribuciones del tamaño de las
partículas. Los datos basados en la intensidad, recogidos por el
instrumento, pueden reducirse de manera fiable a una PSD
ponderada por volumen. Sin embargo, las partículas grandes (>3
mm) pueden distorsionar completamente las mediciones y, por lo
tanto, se recomienda un análisis complementario con el
instrumento de dispersión de LD o láser para corroborar los
resultados obtenidos.
Una de las desventajas del método DLS es que en algunos
casos las muestras pueden requerir una dilución significativa
para la medición precisa del tamaño, lo que puede ser
problemático para la medición del tamaño de las gotas de las
emulsiones. Se han desarrollado e implementado nuevos
enfoques que utilizan fibra óptica y retrodispersión en algunos
instrumentos comerciales para permitir mediciones en
suspensiones concentradas. Muchos equipos diseñados para el
DLS también pueden tener un accesorio para la dispersión
la espectroscopia de correlación de fluorescencia (FCS) (​102​). La
FCS es una técnica bien establecida para determinar el coeficiente
de difusión, el tamaño y la masa de las partículas, así como para
caracterizar la unión de ligandos de bajo peso molecular a
moléculas receptoras más grandes en solución. En el FCS la
fluorescencia inducida por láser de las partículas de un volumen de
sonda muy pequeño se autocorrelaciona con el tiempo de difusión.
Una extensión instrumental de dos colores de la configuración
confocal estándar del FCS permite el análisis de correlación
cruzada de dos especies fluorescentes diferentes. Así, al etiquetar
diferentes partículas es posible localizar diferentes componentes
dentro de las partículas y obtener información sobre la
composición de los complejos. Una espectroscopia de correlación
Raman menos desarrollada (​103​) amplía el dominio de la
espectroscopia de fluctuación óptica a la luz difusa Raman,
combinando la identificación química obtenida por dispersión
Raman con la información sobre el tamaño y la dinámica de las
partículas obtenida por espectroscopia de correlación.
 Contador de rejas (Sensor de la zona eléctrica)
Este instrumento fue desarrollado originalmente para medir
las células de la sangre y los cultivos de células. Por lo tanto, su
principio es muy adecuado para la medición de suspensiones no
aglomeradas y estables (​10​,​75​,​82​). Las partículas se suspenden en
un electrolito débil y se pasan por un pequeño orificio, separando
dos electrodos. A medida que cada partícula del electrolito cruza el
orificio, desplaza su propio volumen de electrolito causando un
aumento de la impedancia eléctrica. Este cambio de impedancia
genera pulsos de voltaje, que son proporcionales al volumen de las
partículas y se utilizan para medir el diámetro del volumen
equivalente de la partícula. El análisis con el contador de Coulter
es rápido y muestra una buena reproducibilidad de la medición.
Además, el análisis del tamaño de las partículas puede realizarse
en una gama de tamaños generales relativamente amplia (Tabla ​II​),
utilizando diferentes electrosensores (tubos de apertura). El rango
dinámico de los diferentes tubos varía entre el 2 y el 60% del
diámetro del orificio porque la respuesta de las partículas más
pequeñas se pierde en el ruido electrónico, mientras que en el caso
de las partículas más grandes puede producirse una respuesta no
lineal y una edad de bloqueo. La calibración es esencial para esta
técnica. Las dificultades suelen estar relacionadas con la dispersión
de las partículas, en particular en el caso de materiales muy
hidrofóbicos o poco húmedos (​10​). También se encuentran
dificultades para la medición de drogas solubles en agua para las
que la solubilidad de la droga en el electrolito debe ser mínima;
para las partículas porosas, los aglomerados sueltos (flóculos) y,
por último, para las partículas de forma extrema (agujas, placas
delgadas y varillas) en las que se observan grandes errores en el
diámetro equivalente de volumen (​82​).
 Tiempo de vuelo (TOF)
Dispositivos como el API AeroSizeri y el Aerodynamic
Particle Sizer (APS) (TSI Inc., EE.UU.) se basan en la vigilancia
del tiempo de vuelo de las partículas que son aceleradas por
corrientes de aire y expandidas a velocidades sónicas, entre dos
rayos láser. Las partículas más pequeñas son aceleradas a una
velocidad más rápida que las partículas más grandes debido a las
diferencias de masa. El diagrama aerodinámico de las partículas se
calcula utilizando curvas de calibración para partículas esféricas de
densidad conocida incorporadas en el software de análisis de datos.
Las versiones más recientes de este instrumento tienen una
electrónica mejorada para minimizar las coincidencias y ampliar el
rango dinámico midiendo pulsos individuales de
partículas grandes. TOF es una técnica de exploración de
corrientes rápidas, que tiene el potencial de realizar mediciones
de alta resolución dentro de un rango dinámico relativamente
amplio. Requiere pequeñas cantidades de muestras para el
análisis de tamaño. Mide un diámetro aerodinámico equivalente
y, por lo tanto, es una elección lógica para las mediciones de
aerosoles farmacéuticos. Sin embargo, como se muestra a
continuación, este diámetro equivalente es diferente del que se
obtiene a pequeñas velocidades del aire y también es muy
sensible a la forma de las partículas (​7​.​104​). Cuando se aplica sin
los factores de corrección de la forma, la medición del TOF
típicamente subestimaría el diámetro del volumen de la partícula.
Una parte integral del instrumento es un dispersor aerodinámico,
que puede utilizar un generador de aerosoles de lecho fluidizado,
levantando el polvo de una plataforma giratoria (​79​) o utilizando
un adaptador de inhalador. Aplicando la misma metodología que
se muestra en la Fig. ​5, hay que asegurarse de ​que, en el caso de
los polvos cohesivos, el dispositivo de dispersión sea adecuado
para la desagregación de partículas, de modo que se eviten
errores muy significativos tanto con exactitud como con
precisión. Las grandes densidades de números de partículas,
generalmente para partículas submicrónicas, pueden introducir
algunos artefactos, como el sobredimensionamiento debido a
errores de coincidencia (​105​).
 Impactor de cascada (CI)
El Impactador de Cascada de Andersen (ACI) y el
Impactador de Próxima Generación (NGI) (Tabla ​I) ​son las
principales técnicas utilizadas tanto para el desarrollo como para
las pruebas de QA/QC de los productos de inhalación
comerciales (​2​,​78​). La determinación del tamaño se basa en la
impactación inercial de las partículas en aerosol que pasan a
través de las aberturas decrecientes de las boquillas en las etapas
de deposición subsiguientes. Cada etapa de deposición
proporciona un diámetro de corte aerodinámico definido
(partículas recogidas con una eficiencia del 50%). Las placas de
recogida pueden revestirse para evitar el rebote de las partículas.
Se puede controlar la humedad, la temperatura, el diferencial de
presión sobre el inhalador bajo prueba y la tasa de flujo de aire.
Los instrumentos también se suministran con puerto de
inducción USP, preseparador y filtro fino. Los impactadores se
calibran a determinadas velocidades de flujo de aire, como se
muestra en la Tabla ​III​; sin embargo, las mediciones pueden
realizarse a cualquier velocidad de flujo arbitraria, definida por
el diferencial de presión sobre el dispositivo del inhalador. El
USP especifica las mediciones realizadas para los DPI a una tasa
de flujo de aire que produce una caída de presión de 4 kPa sobre
el inhalador que se va a probar y una duración consistente con la
retirada de 4 litros de aire de la boquilla del inhalador. Esto
puede justificarse claramente por las diversas resistencias de
flujo de los diferentes DPI con implicaciones obvias para la
energía de dispersión dentro del inhalador. Las condiciones de
prueba estándar para los pMDIs son 28Y30 l/min. Los diámetros
de corte para los diferentes flujos se pueden calcular basándose
en la ecuación de Stokes, como se explica en las siguientes
secciones. La estimación del tamaño de las partículas se basa
típicamente en la distribución de masa determinada por análisis
químicos (UV o HPLC), que es necesaria a partir de las perspec-
tivas terapéuticas y reguladoras para discriminar entre las
sustancias activas (es decir, el fármaco) y las inactivas (es decir,
el portador). El parámetro más importante que se mide es la
fracción de partículas finas​, ​FPF,​ que se define como la masa de
partículas (con referencia a la dosis emitida) por debajo de un
determinado diámetro de corte (por ejemplo, 4,7 mm, es decir,
por debajo de la fase 2 del ACI). El diseño plano del ING suele
considerarse más adecuado para las mediciones automatizadas.
El IGN también tiene curvas de eficiencia de recolección más
pronunciadas, ofreciendo
la ventaja de un fraccionamiento de tamaño más preciso (​78​.​106​).
Hay varios otros impactadores incluidos en Pharmaco-poeias
(Tabla ​I​), como el Impactador Líquido Multietapa (MSLI). Cada
etapa, excepto la Etapa 5, de MSLI debe prescindir de
20 ml de líquido. La determinación del tamaño se basa en la
interacción aero-solilíquido, dando una simulación más realista de
la impactación en los pulmones. Aunque el agua es la elección
preferida de los disolventes, también se pueden utilizar disolventes
orgánicos, especialmente para drogas poco solubles. Sin embargo,
esto puede crear problemas en la posible evaporación del
disolvente, ya que en el MSLI se utiliza normalmente un flujo de
aire de 60 l/ min. Tanto las mediciones de CI como las de MSLI
son, en general, muy laboriosas. El Impactador de Baja Presión de
Calibración Eléctrica, ELPIi (​107​) se basa en la detección de la
carga de partículas, lo que permite el análisis ​in situ de alta
velocidad de las fracciones de partículas depositadas en 13 etapas
diferentes. Sin embargo, este principio no permite una medición
directa de las distribuciones ponderadas de la masa de la droga y
requiere un procedimiento de calibración más complejo (​108)​.
 ANÁLISIS DE DATOS
 Interpretación y presentación de datos para productos
farmacéuticos
El conocimiento de las necesidades específicas de
formulación y las características físicas de los sistemas de
partículas es indispensable para una presentación eficaz de los
datos. El análisis del tamaño de las partículas comprende tanto la
medición como la descripción cuantitativa de las propiedades
físicas de las partículas. En la mayoría de los casos, el análisis
requiere una metodología específica de medición del tamaño y una
interpretación cuidadosa de los datos. Como guía general, es
apropiado determinar la distribución del tamaño de las partículas
sobre el principio de comportamiento de que la técnica de
medición se asemeja mucho a^ las condiciones en las que las
partículas serán usadas: procesadas, formuladas o entregadas. Los
diámetros relacionados con la filtración y el tamizado pueden
utilizarse para la representación del tamaño de las formu- laciones
inyectables y orales respectivamente, el diámetro aerodinámico
equivalente para los aerosoles y el diámetro equivalente de la
sedimentación hidrodinámica (Stokes) para las micro y
nanosuspensiones. Cuando la aplicación del diámetro equivalente
de la partícula de comportamiento sea problemática, se debe hacer
una correlación entre la propiedad física o biofarmacéutica de la
partícula en cuestión y una del diámetro equivalente geométrico
bien definido. Así pues, las propiedades de las formulaciones
farmacéuticas, como la dosis y la velocidad de disolución de la
droga, suelen venir dadas por la distribución de la masa/volumen
de las partículas y el diámetro equivalente de la superficie (​85​). La
química y la termodinámica de la droga
Tabla III. Diámetros de corte aerodinámico para ACI, MSLI y NGI
CI (Tasa de flujo)
Escenario 0 1 2 3
ACI (28,3 l/min)​a 9 5.80 4.70 3.30
MSLI (30 l/min)​b Y Y 9.6 4.4
MSLI (60 l/min)​a Y 6.8 3.1
NGI (30 l/min)​b Y 11 6.6 3.9
NGI (60 l/min)​a Y 7.8 4.6 2.7
​ ndersen; impactador de líquido de múltiples etapas ​MSLI​; impactador farmacéutico de próxima generación ​NGI​.
Impactador de cascada ​ACI A
una calibración de archivo​
.
La información sobre la estabilidad también puede representarse
utilizando el diámetro equivalente tanto de volumen como de
superficie (​109​). Las distribuciones basadas en números son
importantes a efectos de control de calidad, por ejemplo, el
análisis de la presencia de partículas extrañas en las inyecciones
(véase el cuadro ​I​) y las fórmulas respiratorias (​66​).
La correcta presentación e interpretación de los datos es
esencial para la consistencia y comprensión de lo que se está
midiendo^. La variación en el formato de los datos, por ejemplo,
la naturaleza del diámetro equivalente de las partículas, el tipo de
PSD o la definición de los diámetros medios apropiados, a
menudo escapa a una definición clara en la investigación
farmacéutica. Esto es inconveniente pero puede ser
estandarizado. Una cuestión más grave es que en muchos casos
los datos brutos obtenidos por un instrumento de medición de
partículas se ajustan a un determinado modelo matemático, en
particular en el caso de las técnicas de exploración sobre el
terreno, según lo dictan los algoritmos de reunión e
interpretación de datos. Este tratamiento puede predisponer los
datos a una interpretación o sesgo particular, como la
exageración o subestimación de los finos, las partículas gruesas o
las compuertas de agregación, el desplazamiento sistémico de los
diámetros medios de las partículas, la aparición de modos
artificiales en la TSP. Por ejemplo, los instrumentos de
difracción láser pueden producir artefactos dependientes del
modelo y fabricante del instrumento porque la óptica, los
sensores y el software empleados pueden ser muy diferentes
(​2​,​3​).
La siguiente sección trata de términos y definiciones
matemáticas más generales, que pueden aplicarse a cualquier
presentación de datos y tipo de instrumentación.
 Distribución del tamaño de las partículas (PSD)
La PSD de un polvo puede describirse por la dimensión de
la partícula, ​r, asignada de la s​ iguiente manera: número (​r = 0​ );
longitud (r = 1); área proyectada, área de superficie (​r = 2​ );
volumen ​r = 3​ ); masa o peso (​r ​= 3, sin vacíos), que corresponde
a las PSD ​ponderadas por número​, ​superficie ​y ​volumen (o
masa) r​ espectivamente. En el caso de las partículas esféricas,
estas distribuciones pueden convertirse fácilmente de un tipo a
otro. Sin embargo, en el caso de las partículas no esféricas, para
la conversión se requiere información sobre los factores de forma
de la superficie y del volumen. Por regla general, la PSD
ponderada por volumen (masa) es la descripción más apropiada
para los materiales farmacéuticos. La PSD ponderada por
números es útil para determinar el tamaño de las partículas
primarias en los sistemas aglomerados, así como la estanqueidad
de una PSD. Cuanto más se aproximen las PSD ponderadas por
número y por volumen, más estrecha será la
Diámetros de corte, ​2m
4 5 6 7
2.10 1.10 0.65 0.43
2.4 Y Y Y
1.7 Y Y Y
2.3 1.4 0.84 0.51
1.6 0.96 0.57 0.33
b Valores calculados​
.
 distribución del tamaño de las partículas. La presentación gráfica
de la PSD se hace en términos de ​distribución acumulativa​, ​Qr​, y
distribución de frecuencia (densidad)​, ​qr​, calculada a partir de los
datos acumulados. Estos parámetros están relacionados por la
siguiente ecuación normalizada:
dmax
​ ​QrðdmaxÞ- QrðdminÞ ​¼ ​1ð6Þ 
qrðxÞdx ¼
 
 
donde ​dmin ​y ​dmax ​definen el rango de tamaño de las partículas.
En la práctica, la Ec. ​6 ​siempre se calcula como una suma de las
clases de tamaño de las partículas, es decir, los recipientes
individuales en los que el instrumento clasifica la partícula. En la
Fig. ​7 ​se muestra una PSD típica con ​diámetros promedio de
partículas​. El promedio del ​modo
El diámetro corresponde al pico y la ​mediana r​ epresenta
partícula
50% mediavolumen o número, ​d50)​ . La
(de masa, S 8​
de ​un sistema de partículas de tamaño d ​min.
desigual se representa...
que se encuentra en un sistema de esferas que tienen sólo dos
características
de la distribución original. A continuación se presenta la ecuación
general para el cálculo de los diferentes valores del diámetro medio
de las partículas:
d½n; ​m​] ¼ ðn - ​msÞ
ffiPffiffiffiffiffiffidffiffiffin
ffiffi$ffiffiffiNffiffiffiffi  
donde ​DN ​es el número de partículas en una clase de tamaño. Los
diámetros medios de las partículas más utilizados son:
d[1​ ,0]Diámetro medio varítmico que corresponde al diámetro
lineal medio ter; ​d[​2,0]Vdiámetro medio de la superficie;
d[3​ ,0]VDiámetro medio del volumen; ​d[3,​2]VDiámetro medio del
saliente que corresponde a la superficie específica;
d[4​ ,3]Vmomento del volumen que corresponde al centro de
gravedad B^ del volumen (o masa) - PSD ponderado (​82​).
Cualquier PSD también puede caracterizarse por su desviación
estándar, s, del valor medio correspondiente, ​d ​:
sffiPffiffiffiffiffi
ffi.
ffiffidffiffiffi-ffiffiffi
ffiffiffiffiffiΣffiffi2ffi
ffiffiffiffiffiffiffiffi
 
¼P ​ ​ N
d$
$N
Aproximadamente, el ancho de la PSD puede ser estimado usando
un parámetro llamado propagación ​de la PSD.​ Se calcula a partir
de las fracciones inferiores y superiores de la PSD acumulada
como: (​d90 j​ ​d10)​ / ​d50​.
Los productos farmacéuticos exhiben una amplia gama de
PSD. Se pueden observar distribuciones carac-terísticas que
recuerdan a las formas normales (gaussianas), log-normales y otras
formas canónicas. Esas distribuciones se prestan bien al
tratamiento analítico matemático, por ejemplo, la conversión entre
diferentes diámetros medios, momentos y tipos de PSD (​82​). Sin
embargo, en la mayoría de los casos, las PSD están sesgadas y
tienen formas arbitrarias para las que deberían aplicarse las Ecs.
6Y8 ​generales y los cálculos numéricos.
ya sea por la esfericidad de ​la partícula​, ​8​, o el ​factor de forma de
superficie a volumen, aSV:
8 ​¼ ðdV=dsÞ2 ¼ 1​ =αsv ð9Þ 
La esfericidad s​ e define como la relación entre el área de la
superficie de una esfera con un diámetro de volumen equivalente
dV​, y el área de la superficie real de la partícula, definida por el
diámetro de la superficie equivalente, ​dS​. El máximo ​8 ​= 1
corresponde a una esfera. La esfericidad puede medirse mediante
análisis de imágenes calculando directamente los diámetros en la
Ec. ​9​. La esfericidad también se relaciona con el área superficial
específica, ​S,​ a través de la siguiente relación - nave (​7​):
6
dXmax
x-1q3ðxÞ$xð10Þ 
donde se determina la PSD ponderada por volumen, ​q3(​ ​x​ )
preferentemente mediante una técnica basada en el diámetro de
las partículas de volumen equivalente y se mide el ​S,​ por ejemplo
mediante la adsorción de nitrógeno BET (​7​). Las partículas no
esféricas se observan típicamente en todas las orientaciones, lo
que provoca un ensanchamiento de
ð7Þ  la distribución del tamaño medido. Así,
incluso un conjunto Bmonodispersado^
de partículas no esféricas tendrá su
propio PSD. Algunos artefactos pueden
aparecerVpor ejemplo, la medición por
difracción láser de partículas aciculares
puede exhibir
que corresponde a los diámetros característicos de mini-max y de
difracción máxima de estas partículas (​95​). La función de
ensanchamiento de la forma puede medirse con el mismo
instrumento, si se dispone de partículas monodispersas no
esféricas, por ejemplo, mediante el tamizado, la filtración, el
sedimento u otras técnicas de clasificación. Sin embargo, ese
enfoque se ha visto gravemente limitado por la falta de una
fuente de partículas con una geometría y una densidad bien
definidas (​104​). Otra posibilidad es medir la forma de las
partículas bajo el microscopio y luego calcular la función de
ampliación de la forma asumiendo la orientación estadística de
las partículas. La figura ​8 ​muestra
un ejemplo de dicho cálculo realizado para monodis-
ð8Þ  polvo persistente
salmeterol, de xinafoate
que consiste en muyde
plaquetas finas (Fig. ​4a​). Es característico
que tal PSD se desvíe hacia los diámetros
de partículas más pequeños, teniendo el
 Forma de las partículas
Todas las ecuaciones anteriores son aplicables a los diámetros
de partículas equivalentes, que están influenciados por la forma de
la partícula. Suponiendo que la forma de la partícula no depende
del tamaño de la misma, se puede proporcionar su descripción
cuantitativa
Fig. 7. Distribución del tamaño de las partículas ponderada por volumen
(​PSD​) típica obtenida mediante un instrumento de LD (RODOS,
Sympatec GmbH) y los correspondientes diámetros medios. Obsérvese
que tanto la PSD acumulativa como la de densidad (frecuencia) se
presentan en la escala logarítmica.
 máximo se desplazó hacia la mayor proyección de partículas. El
diámetro de la partícula del área de proyección equivalente, que se
muestra en la Fig. ​8​, es el diámetro equivalente apropiado para la
microscopía, las técnicas ópticas de escaneo y también para las
mediciones de difracción láser. La PSD medida^, ​qr​(​x​), es una
convolución de la PSD de Breal^, ​qr0​(​x​), y la función de
ensanchamiento de la forma, ​p(​ ​x)​, normalizada en consecuencia:
s
qr0ðx þ sÞpðx ​-  dAðStoke rffiffipffiffifficffiffiffi
1 sÞdsð11Þ  ​ d​ V
qrðxÞ ​¼ 
Q —s
 
Sabiendo, la función ​p​(​x)​ y la función determinada
experimentalmente ​qr(​ ​x)​ , el Breal^ PSD puede ser
deconvolucionado numéricamente a partir de la Ec. ​11​.
Hay muy pocos instrumentos analíticos que puedan
determinar tanto la forma como el tamaño de las partículas.
Algunos instrumentos de análisis de imágenes automatizados de
barrido de corrientes, por ejemplo, Sysmexi , Malvern, Reino
Unido y QICPICi, Sympatec, Alemania (​110​), pueden determinar
la Bcircularidad^ de la partícula, que se define por la relación entre
el perímetro de la partícula y la circunferencia del círculo
equivalente de la proyección. Otro dispositivo (el analizador de
tamaño y forma de aerosol de Aspecti, Biral, Reino Unido) se basa
en la anisotropía de la dispersión láser de las partículas
individuales y caracteriza la forma de las partículas por un único
parámetro llamado ​factor de asimetría​, que está relacionado con la
relación de ​aspecto de la partícula,​ es decir, la relación entre las
dimensiones máximas y mínimas características de la partícula. El
factor de asimetría toma valores entre 0 (partículas esféricamente
simétricas) y 100 (fibras largas).
 Diámetro de las partículas aerodinámicas
El concepto de ​diámetro aerodinámico​, ​dA,​ es fundamental
para cualquier medición de aerosoles y la administración de drogas
respiratorias. Se define como el diámetro de las esferas de
densidad unitaria, que alcanzan la misma velocidad en la corriente
de aire que las partículas no esféricas de densidad arbitraria. El
diámetro medio más importante de los aerosoles es el ​diámetro
aerodinámico masivomediano,​ MMAD, que puede encontrarse
como ​d50 ​en la PSD acumulativa ponderada en función de la masa
(o ponderada en función del volumen en el caso de las partículas
sólidas) con el diámetro aerodinámico equivalente. Los cálculos
basados en la ecuación dinámica general de Newton para las
partículas no esféricas con diámetro equivalente al volumen (​dV​)
conducen a la siguiente ecuación para el diámetro aerodinámico
(​7​.​104​):
​ d​
dffi p ​CdðReAÞ  CcðRevÞ 
A V​
p0 ​CdðRev;​ ​8Þ ​CcðReAÞ 
en relación con la corriente de aire. ​ReA ​y
donde r0 es la densidad unitaria (de las
esferas de calibración esférica) y r es la ReA d​ enotan partículas con diámetros ​dA y​
densidad de la partícula. ​Cd e​ s el dV ​respectivamente. ​Cc e​ s el factor de
coeficiente de arrastre de corrección de
partículas que es generalmente Cunningham que depende del diámetro de
la partícula
una función de la esfericidad de la
partícula y el número de Reynolds de la
partícula, ​Re u​ radV=µ donde ​ra y​ m
son la densidad y la viscosidad del aire, ​u
es la velocidad de las partículas
Los regímenes pueden definirse como Stokesiano (​Re < ​0,1) y
ultra Stokesiano (0,5 < Re < ​100) y​ Newtoniano (Re > 100) ​(6​ 2).
Para las partículas esféricas en el régimen de flujo Stokesiano, el
coeficiente de arrastre asume la conocida relación: ​Cd ​= 24/Re.
Por lo tanto, la Ec. ​12 ​conduce a la expresión simplificada para el
diámetro aerodinámico de Stokes ampliamente utilizada en la
literatura de aerosoles:
ð13Þ 
sÞ ffi
donde ​c ​es el ​factor de forma dinámica​, definido como la
relación entre la fuerza de arrastre de una partícula y la fuerza de
arrastre de la esfera equivalente al volumen de la partícula a la
misma velocidad. Así, las partículas no esféricas tienden a tener
un diámetro aerodinámico más pequeño. En el caso de los
aerosoles líquidos, como los nebulizadores y los aerosoles
pMDIs, la forma de la partícula en forma de gota no es
completamente esférica debido a la deformación por las
tensiones del aire. Por ejemplo, se ha demostrado que las gotitas
líquidas de más de unos pocos mm de diámetro aerodinámico
fueron sistemáticamente subdimensionadas en los medidores de
TOF (​81​.​104​). Estas mediciones también se ven afectadas por el
tipo de instrumento (​41​,​76​,​78)​. La relación (​12​) también explica
por qué las partículas porosas permiten obtener aerosoles mucho
mejores que los materiales sólidos -su diámetro aerodinámico se
reduce en comparación con el diámetro equivalente en volumen.
Las interacciones interparciales-tardía disminuyen con un
aumento del diámetro equivalente al volumen y, por lo tanto,
tales partículas pueden ser aerosolizadas más fácilmente y
penetrar más profundamente en el sistema respiratorio.
 PREDICCIONES Y CORRELACIONES PARA
LAS MEDICIONES DE AEROSOLES
Como se muestra en la Ec. ​12​, el diámetro aerodinámico
depende de las propiedades de las partículas (tamaño geométrico,
forma, morfología de la superficie, densidad) y de la dinámica
del flujo de aire (geometría del flujo, turbulencia, carácter del
cizallamiento y arrastre
1.0
0.8
ð12Þ  0.6
   
0.4
0.2
deslizamiento de
0.0

(​80​.​104​) y que se vuelve significativo sólo para las partículas
submicrónicas (​7​). La Ec. ​12 ​se resuelve numéricamente en casos
generales. Esta ecuación es también igualmente aplicable a
partículas sólidas, partículas porosas y agregados siempre que se
conozca la densidad de las partículas (o fracción vacía para los
agregados). El flujo
110
diámetro de
proyección
equivalente, m
Fig. 8. Función de amplificación de la forma de las partículas
plaquetarias de xinafoato de salmeterol (​7​) con unas dimensiones
características de 4×4×0,2 mm y una esfericidad ​8 ​= 0,3 (véase la Fig.
4a​). Esta función se calculó para partículas orientadas estadísticamente
utilizando sus proyecciones en coordenadas cartesianas.
fuerzas). Los polvos de inhalación no suelen ser esféricos y
siempre se aglomeran con un posible efecto de triboelectroficación
a altos números de Reynolds característico de las boquillas CI y
TOF (​7​.​111​). Los aerosoles líquidos suelen presentar problemas de
evaporación de las gotas, separación de fases e influencia de los
aditivos tanto en la atomización de las gotas como en la
distribución del tamaño de las partículas (​76​,​78​,​98​). Así pues,
siempre ha habido un problema con la selección de las técnicas de
tamaño de las partículas y los métodos de validación para la
administración de drogas por vía respiratoria. Los estudios clínicos
in vivo s​ obre la deposición de diferentes formas de dosificación
mediante la evaluación cinética y los ensayos de medicamentos o
la vigilancia directa de los pulmones mediante la gammagrafía son
muy laboriosos, costosos y poco prácticos en los estudios de
formulación. Claramente, la tarea final es determinar la masa (o
volumen) de PSD en base al diámetro aerodinámico equivalente,
dA​. El método de impactación en cascada es el más cercano a tales
mediciones, pero también muy laborioso y de baja resolución. Este
método está pensado principalmente para el control de calidad,
donde el foco está en las medidas relativas del rendimiento del
producto. Los resultados obtenidos en el impactador dependen de
la tasa de flujo de aire y del diseño del inhalador. Por lo tanto, un
enfoque sistemático y científico de la formulación de aerosoles
requiere el uso de otras técnicas de dimensionamiento de partículas
como el análisis de imágenes, la difracción láser y el TOF. El
enfoque correcto aquí es predecir
los valores de ​dA u​ tilizando el equivalente geométrico
correspondiente
Los ters, calculados utilizando el modelo de Ganser (​115​) y la
Ec. ​12​, cambian de manera no lineal con su diámetro de volumen
equivalente. Estas son también funciones de la esfericidad de las
partículas, ​8​; las partículas con pequeñas ​8​, tales como placas
delgadas, agujas y varillas tienen diámetros aerodinámicos
reducidos y por lo tanto sus diámetros equivalentes de volumen
serán subestimados, si tales partículas pueden dispersarse
eficientemente y no se alinean en el flujo de aire. Además, la
Fig. ​9b ​muestra que el diámetro aerodinámico de las partículas
no esféricas es una función del número de Reynolds de las
partículas (o de la velocidad del flujo) y disminuye a alta ​Re​. La
razón subyacente de este efecto es que el factor de forma
dinámica aumenta con el incremento de ​Re​. El efecto de la
subestimación del diámetro de las partículas no esféricas se
observó en las técnicas de TOF (​7​,​80​,​104​) (también Fig. ​4) ​y en
el impactador de cascada (​4​,​7​). Además, incluso en el caso de las
partículas esféricas de densidad reducida, como las partículas
porosas diseñadas para el suministro a los pulmones profundos,
el diámetro aerodinámico depende del ​Re.​ Como se muestra en
la Fig. ​10​, se espera una desviación significativa de hasta el 45%
de la dependencia de la raíz cuadrada (Ec. ​13​), para las partículas
ligeras en el flujo ultra-stokesiano.
Otro supuesto bien conocido del flujo de Stokes es
hecho para recalcular los diámetros aerodinámicos de corte,
dC(Stokes) a​ partir de los diámetros de calibración, ​dC0,​ en los
impactadores de cascada:

​ ​dC0
dCðStokesÞ ¼ sffiQffiffiffiffi0ffi ð14Þ 
diámetros (por ejemplo,
volumen o proyección) y para
encontrar un factor de
corrección para ​el dA e​ n
diferentes flujos de aire.
Por lo tanto, debe
destacarse que la
aerodinámica

El diámetro es una función de la velocidad del flujo de aire,
expresada a través del número ​Re ​[Ec. ​12​], y por consiguiente es
diferente para todos los dispositivos de medición de partículas
aerodinámicas y para el sistema respiratorio humano. El flujo de
Stokes [Ec. ​13​] no siempre puede aplicarse sin introducir un error
sistemático significativo. Los siguientes intervalos de ​Re p​ ueden
calcularse para diferentes técnicas de medición aerodinámica y
partículas entre 0,5 y 5 mm:
segundo enfoque, más general, consiste en describir el coeficiente
de arrastre de las partículas, ​Cd,​ en función tanto del diámetro
equivalente al volumen de la partícula (​dV)​ como de la velocidad
de la partícula (​8​) (​7​.​114​.​115​). Estas correlaciones semiempíricas
son típicamente válidas tanto para los regímenes de flujo
Stokesiano como ultra-Stokesiano. La figura ​9a ​muestra cómo el
diámetro aerodinámico...

&10 < Re < 100: TOF AeroSizeri

&5< Re < 50: TOF APSi
y 0.1 < ​Re < 20​: ​CI
& 0,01 < Re < ​2 (​ sistema respiratorio humano entre
el bronquiolo terminal y la tráquea)
En los cálculos anteriores, se tomaron como referencia diferentes
boquillas y caudales tanto para el ACI como para el IGN (​112​).
Aparentemente, las partículas cambian su velocidad relativa y su
trayectoria continuamente en todos estos instrumentos, y por lo
tanto, es difícil definir con precisión qué ​Re debe t​ omarse como el
número de Reynolds de la partícula. Sin embargo, tanto la técnica
TOF como la del impactador implican una alta aceleración de las
partículas en las boquillas y, su velocidad relativa puede llegar a la
de la velocidad del aire de la boquilla (​80​).
Se pueden utilizar dos enfoques para calcular el ​dA u​ tilizando
la Ec. ​12​. Primero, el factor de forma dinámica puede determinarse
experimentalmente a partir de mediciones de sedimentación o TOF
(​104​,​113​) y luego los coeficientes de arrastre calculados aplicando
correlaciones semiempíricas conocidas para partículas esféricas. El
donde ​Q ​es una tasa de flujo arbitraria y ​Q0,​ es el flujo de aire
calibrado (Tabla ​III​). Para el incremento del flujo de aire de 30 a
100 l/ min en el IGN, la Ec. ​12 predice ​un error de
aproximadamente 15% de subestimación del diámetro
aerodinámico para partículas con ​dV = ​ 1,5 mm y ​8 ​= 0,5 debido
a la aproximación de Stokes. Análogamente, puede introducirse
un error sistemático de 5Y10% en la Ec. ​14 ​para diámetros de
corte de partículas porosas (ver Fig. ​10​).
Por último, cabe señalar que todo el debate anterior se
refiere al efecto de la impactación inercial, que es válido para un
Re ​> 0,1 relativamente grande y que representa el principal
mecanismo de deposición en las vías respiratorias superiores.
Los otros dos fenómenos principales que afectan a la deposición
de partículas en los pulmones, la sedimentación y la difusión,
también se definen por los diámetros aerodinámicos equivalentes
que están relacionados respectivamente con la velocidad de
sedimentación y la difusión Browniana en el régimen de flujo de
Stokes.

 ANÁLISIS DE TAMAÑO EN LÍNEA/EN LÍNEA Y

TECNOLOGÍA DE ANÁLISIS DE PROCESOS

Existe un grupo especializado de instrumentos de medición

de partículas y sensores desarrollados para aplicaciones ​en línea
o ​en el Internet​. En línea significa típicamente que el
muestreador, el dispersador y/o el sensor se montan en la línea
de producción. Un flujo parcial de partículas necesario para el
análisis es guiado a través del sistema de dispersión y siempre se
recicla en el flujo principal de producción. La configuración en
línea es cuando el dispersor y el sensor están fuera de la línea de
producción pero acoplados de forma estrecha y directa. Un flujo
parcial se alimenta a través del dispersor y se recicla o se
elimina. Por regla general, la velocidad, la fiabilidad y la
robustez tienen prioridad en estos instrumentos sobre la
resolución
 5
y precisión. Las técnicas ópticas no son invasivas y se prestan
bien al análisis cuantitativo y son particularmente ventajosas
para las mediciones dinámicas. El advenimiento de la 4
electrónica de alta velocidad y de los sistemas informáticos de
rápida automatización ha facilitado enormemente esas
aplicaciones. Por ejemplo, existen sistemas comerciales en 3
línea/en línea para la difracción láser equipados con
muestreadores/dispersores apropiados (por ejemplo, Insiteci de
Malvern, Reino Unido; Mytosi y Safiri de Sympatec, Alemania). 2
Por lo general, las partículas se toman de un chorro de aire de
corriente controlada o de suspensiones diluidas. El anemómetro
Doppler de fase (​76​.​116​), basado en la medición del patrón de 1
interferencia producido por las partículas que se mueven a través
de la intersección de dos rayos láser, es un excelente
instrumento para caracterizar los chorros de líquido y las 0
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1
partículas en los chorros, dando el número y la velocidad de las
partículas además del diámetro de las mismas. Las mediciones densidad, g/cm3
de reflectancia del haz enfocado (FBRMi), basadas en la
medición del tiempo requerido para que un haz de láser que se
mueve a una velocidad fija cruce una partícula (Lasenteci,
Mettler Toledo, EE.UU.), representa una de las

Fig. 10. Diámetro aerodinámico de las

partículas esféricas en función de
la densidad de la partícula y el número de
a​ Reynolds calculado para el diámetro del
10
volumen ​dV=5 m ​ m.

partículas se asumió como unidad.

0
0 2 4 6 810
diámetro de volumen, ​d ​V ​, ​m
b
5

0
10100
Re
Fig. 9. a) Diámetro de las partículas aerodinámicas en función del diámetro
del volumen, ​dV​, y la esfericidad, ​8​, ​en el intervalo 10<Re<200 (TOF
AeroSizer). (b) El mismo diámetro calculado en función del número de
Reynolds, ​Re​, para partículas con esfericidad, ​8 ​= 0,5​. ​La densidad de las
the few techniques developed for batch-reactor processes. For
such applications, sensors have to operate in a harsh, often
aggressive environment, resistant to contamination of optical
surfaces and high level of background noise. For the non- optical
methods, acoustic attenuation spectrometry (​97​,​117​) is capable of
particle sizing of concentrated (1Y70% w/w) liquid suspensions
and slurries within a very wide dynamic range between
0.01Y3,000 mm. The disadvantage of this method, however, is
the requirement for a precise knowledge of several physical
constants for dispersed and continuous media.
In general, the dynamic quality of ​in situ d​ ata is much
superior to the ex situ results obtained using standard particle size
analysis. The following areas of applications can be
distinguished:

& Investigations into the particle behaviour in

different inhalers and sprays.
&In situ ​mechanistic studies and optimization of
particle formation processes (e.g., spray-drying, crystalliza- tion,
etc.).
&Industrial process monitoring and control-process
analytical technology (PAT).

For example, Shekunov ​et al. h​ ave studied the dynamic

behavior of particles during and after the aerosolization process
in DPIs using an LD method (​6​). Measurements were made in
parallel to the Anderson cascade impactor, allowing for a direct
comparison between the time-averaged aerody- namic diameter
or MMAD given by impactor and the volume particle size
distribution reported by in-line laser diffraction. The data was
compared in relation to the emitted dose and FPF. This
time-resolved analysis differentiated the diffraction patterns
produced by the different sections of aerosol cloud such as
primary drug particles, aggregates and carrier particles. The
cumulative size distribution obtained for different drug powders
of salmeterol xinafoate, combined with the computation of the
aerodynamic diameter, showed the correct values of FPF. The
total emitted dose was in good
 sampling sampling

Sensor I Sensor II

Stop Dispensing
Re=0.1 S
Re=1
Re=10 t
Re=100 o
p
Predictive Models for Blending
B
l
e
n
d
i
n
g
Fig. 11. Flow chart showing an example of in-line control of a drug/excipients blending process based on particle
size analysis.

precipitation (​116​). For example, laser diffraction and Doppler

agreement with the cascade impactor measurements made on the anemometry in combination with laser interferometry and particle
same samples. In a similar study with pMDIs, a simplified theory imaging velocimetry (PIV) were used to study the particle
of particle agglomeration within propellant droplets was tested formation process by mixing or spraying of organic solutions with
using a combination of LD (Malvern Spraytec) and TSI APS supercritical carbon dioxide (​116​). Special flow-through
time-of-flight measurements (​98​). This study aimed to determine if high-pressure optical cells were
this mechanism was responsible for the observation that the upper
limit deliverable by a pMDI suspension was below 1% w/w.
However, the data obtained did not conform to this model; some
alternative explanations such as influence of droplet evaporation on
the LD measure- ments and changes in the aerodynamic behaviour
of pMDI sprays with increase of the particle concentrations were
proposed. Rogueda ​et al. ​(​97​) also used acoustic attenuation
spectrometry to study separation phenomena in HFA pro- pellants
based on a selection of commercial pMDI suspen- sions (Ventolin,
Flixotide and Salbuhexal). Quantitative data were obtained on the
dynamics of flocculation of primary particles before agglomeration
into the clusters. After aggregation, the clusters sediment leaving
behind the smaller particle, and thus gives rise to apparent
decreases in both particle concentration and size. The differences
observed between different formulations were attributed to the
proper- ties of the primary particlesVsize and surface
characteristics. In the area of new pharmaceutical technologies, the
research challenge is intimately linked with the design of reliable
in-line measurements, in order to provide means for scientifically
driven process development and optimization. The emphasis is on
understanding of the mechanism of particle formation processes
leading to process optimization. This principle has, for example,
been applied to investigation of processes of spray drying
(​118​,​119​), crystallization (​117​,​120​) and supercritical fluid
built on a modular principle whereby the view area could be
moved relative to the nozzle using different lengths of
connecting tube sections, thus permitting observation of different
flow areas. Such a configuration could also be applied to control
the ratio between the feed flows, one of the ​critical parameters
for this process. In a recent study, a very important problem of
evaporation kinetics during spray- drying was studied by Dem ​et
al​. using a single droplet technique (​119​). Crystallization of
D-mannitol, an excipient for the DPI formulations, was
investigated. Information on the evaporation process was
obtained through static (elastic) light scattering measurements,
while the crystallinity of the resulting material was determined
by micro-Raman spectros- copy (nonelastic scattering). By
identifying the polymorphic forms generated under different
conditions of temperature and relative humidity, a phase diagram
of D-mannitol was constructed and the formation of three
different polymorphic forms as well as a solution phase at high
relative humidity was assigned to distinct regions of process
conditions.
The most important application of in-line/online analysis
lies in the area of pharmaceutical manufacturing, manifested
through the process analytical technology (PAT) initiative. PAT
is a collaborative effort between the FDA and industry to
facilitate the introduction of new and efficient technolo- gies into
the industry. The pharmaceutical manufacturing has been
historically based on batch processes followed by laboratory
testing and analysis to verify the product quality (​121​). The
majority of such processes have been developed empirically.
Automated process controls, process adjust- ments or
improvements were considered difficult for any validated and
approved process. However it is quite clear that much advantage
is to be gained here by applying the process engineering science.
PAT is defined as a system for the analysis and control of
manufacturing processes based on timely measurements of
critical quality parameters a​ nd performance attributes of raw
materials and in-process materials. The major goal of PAT is to
acquire in-depth
knowledge of the process, based on in-process electronic data
rather than on laboratory testing of the final product. The
definition of the critical parameters, the method of their analysis
and control are directly linked to the application of in-line/online
techniques. It includes feedback process-con- trol strategies,
product-process optimization strategies and information
management tools.
Particle size distribution and particle shape, together with
some selected chemical and solid-state material properties, usually
constitute the ​critical variables o​ f a pharmaceutical manufacturing
process. Typically some relevant mean particle diameters form a
part of feedback control loop. In an example of schematic blending
process taken from reference (​122​), the particle sizes of the
materials are monitored and controlled at two consecutive process
stages prior to tablet compression: first, raw material
functionality/dispensing for both active ingredient and excipients
and, second, particle size distribution ​versus ​the blending time
with disintegrant and other excipients (Fig. ​11​). A major cause of
poor content uniformity of solid dosage forms is a mismatch of
drug and excipient particle size leading to segregation, especially
for low drug to excipient ratio blends (​2​). The poor content
uniformity may result even with ideal mixing if the drug particle
size is too large and/or the particle size distribution is too broad.
However, reduction of drug particle size can also adversely affect
the drug agglomeration and powder flow properties. Therefore
there is an optimum range of accept- able drug particle sizes taken
as the critical quality parameter. This parameter may also depend
on other related properties (e.g., surface, shape, cohesion) of the
drug particles as well as those of the excipient materials. Thus the
PAT here should be able to provide an information output
leading to predictive models and most efficient blending process.
CONCLUSION AND FUTURE PROSPECTS
The seemingly inconsistent particle size data, in terms of both
accuracy and precision of various instruments, can usually be
traced back to the differences in the measured equivalent particle
diameters, which may be magnified by the influence of the particle
shape and variability of the particle dispersion. The fundamental
methodological factors associ- ated with particle shape and
aerodynamic particle properties are emphasized in this review.
These factors can be taken into account by careful data
interpretation and appropriate mathematical description of particle
size distribution, in which the conversion between physically
different equivalent diameters, e.g., geometric and aerodynamic, is
possible and serves as a useful analytical tool. The same
instrument and the same method eventually must be used for
quality control testing of a given product. However, a cross
correlation between different methods is necessary to select a
relevant technique and provide in-depth data analysis.
The development of particle sizing instrumentation may be
envisaged in the areas of automated size/shape measure- ments.
The application of high-speed systems may be developed for
monitoring dynamic processes including more sophisticated
analytical systems based on neural nets. This is particularly
important for integration of PAT into pharma- ceutical
manufacturing. A quantitative and consistent mea- surement of
agglomeration phenomena and improvement of
the dispersion techniques are required for all classes of particle
size instruments. For more comprehensive data interpretation,
new computational algorithms tested by empirical models are
needed for consistent conversion between different equivalent
particle diameters, namely, between the statistical projection
diameters given by various imaging instruments and laser
diffraction, equivalent volume diameters and aerodynamic
particle diameters. It is clear that computational fluid dynamics
(CFD) can be applied to predict, with high accuracy, the dynamic
shape factors and equivalent aerodynamic (or hydrodynamic)
diameters at different flow regimes. This is particularly important
in the case of aerosol measurements. An additional problem, with
little data presently available, is the preferential particle
orientation and characteristic time of particle rotation. Proper
control of this problem will provide an understanding of the
particle dynamics and enable determination of the particle shape.
The particle shape in some cases may vary with the particle size
due to different precipitation mecha- nisms for fine and coarse
particle fractions. This problem can only be addressed using
high-resolution stream-scanning measurement techniques.
Finally, it is clear that as more particle sizing methods become
validated and accepted by the pharmaceutical industry, they will
be included in Pharmacopoeias and Regulatory Agencies_
guidelines, thus enabling more consistent application of these
techniques in pharmaceutics.
ACKNOWLEDGMENT
One of the authors (Henry H. Y. Tong) would like to
acknowledge the financial support of Macao Polytechnic
Institute [Project No. RP/ESS-7/2005].
 
REFERENCES
1. J. Clarke. Inspired by design: evaluating novel particle production
techniques. Proceedings of the Conference on Respiratory Drug
Delivery, Boca Raton, FL, X:287Y295 (2006).
2. D. J. ​Burgess, ​E. ​Duffy, ​F. ​Etzler, and ​A. J. ​Hickey. Particle size
analysis: AAPS workshop report, cosponsored by the Food and
Drug Administration and the United States Pharmacopoe- ia. ​AAPS
J. ​6:1Y12 (2004).
3. A. ​Beckman, ​D. ​Shan, ​A. ​Ali, ​W. ​Dai, ​S. ​Ward-Smith, and ​M.
Goldenberg. Micrometer-scale particle sizing by laser diffrac- tion:
critical impact of the imaginary component of refractive index.
Pharm. Res. 2​ 2:518Y522 (2005).
4. T. M. ​Crowder, ​J. A. ​Rosati, ​J. D. ​Schroeter, ​A. J. ​Hichey, and
T. B. ​Martonen. Fundamental effects of particle morphology on
lung delivery: predictions of Stokes_ law and the particular
relevance to dry powder inhaler formulation and development.
Pharm. Res. 1​ 9:239Y245 (2002).
5. R. J. ​Haskell. Characterization of submicron systems via optical
methods. ​J. Pharm. Sci. 8​ 7:125Y128 (1998).
6. B. Y. Shekunov. Production of powders for respiratory drug
delivery. In P. York, U. B. Kompella, and B. Y. Shekunov (eds.),
Supercritical Fluid Technology for Drug Product Devel- opment.​
New York: Marcel Decker. ​Drugs Pharm. Sci. 1​ 38:247Y282
(2004).
7. B. Y. ​Shekunov, ​J. C. ​Feeley, ​L. ​Chow, ​H. H. Y. ​Tong, and ​P.
York. Aerosolisation behaviour of micronised and supercriti-
cally-processed powders. ​J. Aerosol Sci. 3​ 4:553Y568 (2003).
 8. D. L. ​French, ​D. A. ​Edwards, and ​R. W. ​Niven. The influence of
formulation on emission, deaggregation and deposition of dry
powders for inhalation. ​J. Aerosol Sci. ​27:769Y783 (1996).
9. W. I. ​Li, ​M. ​Perzl, ​J. ​Heyder, ​R. ​Langer, ​J. D. ​Brain, ​K. H.
Englmeier, ​R. W. ​Niven, and ​D. A. ​Edwards. Aerodynamics and
aerosol particle deaggregation phenomena in model oralYpharyngeal
cavities. ​J. Aerosol Sci. ​27:1269Y1286 (1996).
10. C. ​Bosquillon, ​C. ​Lombry, ​V. ​Preat, and ​R. ​Vanbever. Comparison
of particle sizing techniques in the case of inhalation dry powders. ​J.
Pharm. Sci. ​90:2032Y2041 (2001).
11. H. M. ​Courrier, ​N. ​Butz, and ​T. F. ​Vandamme. Pulmonary drug
delivery systems: recent developments and prospects. ​Crit. Rev.
Ther. Drug ​19:425Y498 (2002).
12. Center for Drug Evaluation and Research (CDER) ​Guidance for
industry: nasal spray and inhalation solution, suspension, and spray
drug productsV ​ ​chemistry, manufacturing, and con- trols
documentation,​ U.S. Department of Health and Human Services,
Food and Drug Administration, Center for Drug Evaluation and
Research (CDER), Rockville, MD, 2002.
13. O. S. Usmani, M. F. Biddiscombe, and P. J. Barnes. Regional lung
deposition and bronchodilator response as a function of b​2​-agonist
particle size. ​Am. J. Respir. Crit. Care Med. ​172: 1497Y1504 (2005).
14. R. J. ​Marin. Therapeutic significance of distal airway inflammation
in asthma. ​J. Allergy Clin. Immunol. ​109:S447YS460 (2002).
15. D. A. ​Edwards, ​A. ​Ben-Jebria, and ​R. ​Langer. Recent advances in
pulmonary drug delivery using large, porous inhaled particles. ​J.
Applied Physiol. 8​ 4:379Y385 (1998).
16. S. P. ​Duddu, ​S. A. ​Sisk, ​Y. H. ​Walter, ​T. E. ​Tarara, ​K. R. Trimble,
A. R. ​Clark, ​M. A. ​Eldon, ​R. C. ​Elton, ​M. ​Pickford, ​P.
H. ​Hirst, ​S. P. ​Newman, and ​J. G. ​Weers. Improved lung delivery
from a passive dry powder inhaler using an engineered PulmoSphere​\
powder. ​Pharm. Res. 1​ 9:689Y695 (2002).
17. D. A. ​Edwards, ​J. ​Hanes, ​G. ​Caponetti, ​J. ​Hrkach, ​A. B. Jebria, ​M. L.
Eskew, ​J. ​Mintzes, ​D. ​Deaver, ​N. ​Lotan, and ​R. Langer. Large
porous particles for pulmonary drug delivery. ​Science
276:1868Y1871 (1997).
18. K. Koushik, D. S. Dhanda, N. P. S. Cheruvu, and U. B. Kompella.
Pulmonary delivery of deslorelin: large porous PLGA particles and
HPbCD complexes. ​Pharm.Res. 2​ 1: 1119Y1126 (2004).
19. H. K. ​Chan and ​I. ​Gonda. Physicochemical characterization of
new respirable form of nedocromil. ​J. Pharm. Sci. 8​ 4:692Y696
(1995).
20. B. ​Shekunov. Nanoparticle technology for drug deliveryVfrom
nanoparticles to cutting-edge delivery strategies. Part I. Meet- ing
reports. ​IDrugs ​8:399Y401 (2005).
21. T. S. ​Weidmann, ​L. ​DeCastro, and ​R. ​Wood. Nebulization of
nanocrystals: production of respirable solid-in-liquid-in-air colloidal
dispersion. ​Pharm. Res. ​14:112Y116 (1997).
22. W. G. ​Kreyling, ​M. ​Semmler-Behnke, and ​W. ​Moller. Ultrafine
particlesVlung interactions: does size matter. ​J. Aerosol Med.
19:74Y83 (2006).
23. P. ​Lucas, ​K. ​Anderson, and ​J. N. ​Staniforth. Protein deposition from
dry powder inhalers: fine particle multiplets as perfor- mance
modifiers. ​Pharm. Res. ​15:562Y569 (1998).
24. F. ​Podczeck. The influence of particle size distribution and surface
roughness of carrier particles on the ​in vitro p​ roperties of dry powder
inhalations. ​Aerosol Sci. Tech. 3​ 1:301Y321 (1999).
25. M. D. ​Louey and ​P. J. ​Stewart. Particle interactions involved in
aerosol dispersion of ternary interactive mixtures. ​Pharm. Res.
19:1524Y1531 (2002).
26. S. P. ​Shah and ​A. ​Misra. Liposomal amikacin dry powder inhaler:
effect of fines on ​in vitro​. ​AAPS Pharm. Sci. Tech. 5​ :1Y7 (2004).
27. F. S. Bennett, P. A. Carter, G. Rowley, and Y. Dandiker.
Modification of electrostatic charge on inhaled carrier lactose
particles by addition of fine particles. ​Drug Dev. Ind. Pharm.
25(1):99Y103 (1999).
28. T. H. ​Ibrahim, ​T. R. ​Burk, ​F. M. ​Etzler, and ​R. D. ​Neuman. Direct
adhesion measurements of pharmaceutical particles to gelatine
capsule surfaces. ​J. Adhes. Sci. Technol. 1​ 4:1225Y1242 (2000).
29. N. ​Islam, ​P. ​Stewart, ​I. ​Larson, and ​P. ​Hartley. Effect of carrier
size on the dispersion of salmeterol xinafoate from interactive
mixtures. ​J. Pharm. Sci. ​93:1030Y1038 (2004).
30. M. J. Clarke, M. J. Tobyn, and J. N. Staniforth. The formulation of
powder inhalation systems containing a high mass of nedocromil
sodium trihydrate. ​J.Pharm.Sci. 9​ 0: 213Y223 (2001).
31. P. ​Taylor. Nasal drug delivery. In M. E. Aulton ​M. E. Aulton (ed).,
Pharmaceutics: The Science of Dosage Form Design​, Churchill
Livingstone, London, 2002, pp. 489Y498.
32. V. M. ​Leitner, ​D. ​Guggi, ​A. H. ​Krauland, and ​A. ​Bernkop-
Schnurch. Nasal delivery of human growth hormone: ​in vitro a​ nd
in vivo e​ valuation of a thiomer/glutathione microparticu- late
delivery system. ​J. Control. Release ​100:87Y95 (2004).
33. A. ​Vila, ​H. ​Gill, ​O. ​McCallion, and ​M. J. ​Alonso. Transport of
PLA-PEG particles across the nasal mucosa: effect of particle size
and PEG coating density. ​J. Control. Release 9​ 8:231Y244 (2004).
34. J. Varshosaz, H. Sadrai, and R. Alinagari. Nasal delivery of insulin
using chitosan microspheres. ​J. Microencapsul. 2​ 1: 761Y774
(2004).
35. R. J. ​Garmise, ​K. ​Mar, ​T. M. ​Crowder, ​C. R. ​Hwang, ​M. Ferriter,
J. ​Huang, ​J. A. ​Mikszta, ​V. J. ​Sullivan, and ​A. J. Hickey.
Formulation of a dry powder influenza vaccine for nasal delivery.
AAPS PharmSciTech. ​7:E1YE7 (2006).
36. V. ​Swaminathan and ​D. O. ​Kildsig. Polydisperse powder mixtures:
effect of particle size and shape on mixture stability. ​Drug Dev.
Ind. Pharm. ​28:41Y48 (2002).
37. T. Shiraishi, A. Sano, S. Kondo, H. Yuasa, and Y. Kanaya. Studies
on the granulation process of granules for tableting with a high
speed mixer. II. Influence of particle size of active substance on
granulation. ​Chem. Pharm. Bull. ​43: 654Y659 (1995).
38. T. ​Yajima, ​S. ​Itai, ​H. ​Hayashi, ​K. ​Takayama, and ​T. ​Nagai.
Optimization of size distribution of granules for tablet com-
pression. ​Chem. Pharm. Bull. 4​ 4:1056Y1060 (1996).
39. T. ​Yao, ​M. ​Yamada, ​H. ​Yamahara, and ​M. ​Yoshida. Tableting of
coated particles. II. Influence of particle size of pharmaceu- tical
additives on protection of coating membrane from mechanical
damage during compression process. ​Chem. Pharm. Bull.
46:826Y830 (1998).
40. C. ​Sun and ​D. J. W. ​Grant. Influence of crystal shape on the
a tableting performance of l-lysine monohydrochloride dihy- drate.
J. Pharm. Sci. 9​ 0:569Y579 (2001).
41. S. Simoes, A. Sousa, and M. Figueiredo. Dissolution rate studies
of pharmaceutical multisized powdersVa practical approach using
the Coulter method. ​Int. J. Pharm. ​127: 283Y291 (1996).
42. J. B. Bressman and C. Reppas. ​In vitroY ​ i​ n vivo c​ orrelations for
lipophilic, poorly water-soluble drugs. ​Eur. J. Pharm. Sci. ​11
(Suppl. 2):S73YS80 (2000).
43. S. ​Horkovics-Kovats. Characterization of an active pharma-
ceutical ingredient by its dissolution properties: amoxicillin
trihydrate as a model drug. ​Chemotherapy ​50:234Y244 (2004).
44. H. ​Hu, ​K. P. ​Johnston, and ​R. O. ​Williams III. Nanoparticle
engineering processes for enhancing the dissolution rates of poorly
water soluble drugs. ​Drug Dev. Ind. Pharm. 3​ 0:233Y245 (2004).
45. J. ​Siepmann, ​H. ​Kranz, ​N. A. ​Peppas, and ​R. ​Bodmeier.
Calculation of the required size and shape of hydroxypropyl
methylcellulose matrices to achieve desired drug release profiles.
Int. J. Pharm. ​201:151Y164 (2000).
46. I. ​Caraballo, ​M. ​Millan, and ​A. M. ​Rabasco. Relationship between
drug percolation threshold and particle size in matrix tablets.
Pharm. Res. 1​ 3:387Y390 (1996).
47. M. J. ​Fernandez Hervas, ​M. T. ​Vela, ​I. ​Caraballo, and ​A. M.
Rabasco. Effect of drug particle size on the release behaviour of
NaCl-matrix systems. ​Eur. J. Pharm. Biopharm. ​42:208Y211
(1996).
48. A. ​Miranda, ​M. ​Millan, and ​I. ​Caraballo. Study of the critical
points of HPMC hydrophilic matrices for controlled drug delivery.
Int. J. Pharm. ​311:75Y81 (2006).
49. C. V. ​Liew, ​L. W. ​Chan, ​A. L. ​Ching, and ​P. W. S. ​Heng.
Evaluation of sodium alginate as drug release modifier in matrix
tablets. ​Int. J. Pharm. ​309:25Y37 (2006).
50. M. L. ​Gonzalez-Rodriguez, ​F. ​Maestrelli, ​P. ​Mura, and ​A. M.
 Rabasco. ​In vitro r​ elease of sodium diclofenac from a central core
matrix tablet aimed for colonic drug delivery. ​Eur. J. Pharm. Sci.
20:125Y131 (2003).
51. F. ​Sadeghi, ​H. A. ​Garekani, and ​F. ​Goli. Tableting of Eudragit RS
and propranolol hydrochloride solid dispersion: Effect of particle
size, compaction force, and plasticizer addition on drug release.
Drug Dev. Ind. Pharm. 3​ 0:759Y766 (2004).
52. B. E. ​Rabinow. Nanosuspensions in drug delivery. ​Nat. Rev. Drug
Discov. ​3:785Y796 (2004).
53. B. E. Rabinow. ​Pharmacokinetics of nanosuspensions.​ Presen- tation
at Nanotechnology for Drug Delivery Conference, Philadelphia, PA
(2005).
54. S. ​Ding. Recent developments in ophthalmic drug delivery.
PSTT 1​ :328Y335 (1998).
55. A. C. ​Williams. ​Transdermal and Topical Drug Delivery​,
Pharmaceutical Press, London, 2003.
56. A. Rolland. Particulate carriers in dermal and transdermal drug
delivery: myth or reality? In: A. Rolland (ed.), ​Pharmaceutical
Particulate CariiersV ​ ​Therapeutic Applications,​ Marcel Dekker,
New York, 1993, pp. 367Y421.
57. R. ​Alvarez-Roman, ​A. ​Naik, ​Y. N. ​Kalia, ​R. H. ​Guy, and ​H. Fessi.
Skin penetration and distribution of polymeric nano- particles. ​J.
Control. Release 9​ 9:53Y62 (2004).
58. J. ​Shim, ​H. ​Seok Kang, ​W. S. ​Park, ​S. H. ​Han, ​J. ​Kim, and ​I. S.
Chang. Transdermal delivery of minoxidil with block copoly- mer
nanoparticles. ​J. Control. Release ​97:477Y484 (2004).
59. S. M. ​Moghimi, ​A. C. ​Hunter, and ​J. C. ​Murray. Nanomedicine:
current status and future prospects. ​FASEB J. 1​ 9:311Y330 (2005).
60. S. S. ​Feng. Nanoparticles of biodegradable polymers for new-
concept chemotherapy. ​Exp. Rev. Med. Devices ​1:115Y125 (2004).
61. D. E. Discher. ​Nanoparticles, cells, and the body: new lessons from
self-assembling polymers.​ Presentation at Nanotechnology for Drug
Delivery Conference, Philadelphia, PA, 2005.
62. A. ​Nel, ​T. ​Xia, ​L. ​Madler, and ​N. ​Li. Toxic potential of materials at
the nanolevel. ​Science 3​ 11:622Y627 (2006).
63. T. ​Kaewamatawong, ​N. ​Kawamura, ​M. ​Okajima, ​M. ​Sawada,
T. ​Morita, and ​A. ​Shimada. Acute pulmonary toxicity caused by
exposure to colloidal silica: particle size dependent patho- logical
changes in mice. ​Toxicol. Pathol. 3​ 3:743Y749 (2005).
64. G. Oberdorster, A. Maynard, K. Donaldson, V. Castranova, J.
Fitzpatrick, K. Ausman, J. Carter, B. Karn, W. Kreyling, D. Lai, S.
Olin, N. Monteiro-Riviere, D. Warheit, H. Yang, and ILSI Research
Foundation/Risk Science Institute Nanomate- rial Toxicity Screening
Working Group. Principles for char- acterizing the potential human
health effects from exposure to nanomaterials: elements of a
screening strategy. ​Part. Fibre Toxicol. ​2:8 (2005).
65. Food and Drug Administration ​Code of Federal Regulations 21, Pt.
1,​ U.S. Department of Health and Human Services, Food and Drug
Administration, Rockville, MD, 1997.
66. M. Niemann, M. Fusser, and L. Scaffidi. A critical comparison:
particle counting with light obscuration and automated Raman
microscopy. Proceedings of the Conference on Respiratory Drug
Delivery, Boca Raton, FL, X:529Y532 (2006).
67. Center for Drug Evaluation and Research (CDER) ​Guidance for
industry: metered dose inhaler (MDI) and dry powder inhaler (DPI)
drug products, chemistry, manufacturing, and controls,​ U.S.
Department of Health and Human Services, Food and Drug
Administration, Center for Drug Evaluation and Research (CDER),
Rockville, MD, 1998.
68. Center for Drug Evaluation and Research (CDER) ​Guidance for
industry: bioavailability and bioequivalence studies for nasal
aerosols and nasal sprays for local action​, U.S. Department of
Health and Human Services, Food and Drug Administration, Center
for Drug Evaluation and Research (CDER), Rockville, MD, 1999
and 2003.
69. Center for Drug Evaluation and Research (CDER) and Center for
Biologics Evaluation and Research (CBER) ​Guidance for industry:
M4: the CTDV ​ ​quality questions and answers/location issues,​ U.S.
Department of Health and Human Services, Food and Drug
Administration, Center for Drug Evaluation and Research (CDER),
Rockville, MD, 1999 and 2003.
70. M. Trunk and C. Weiler. Estimation of the aerodynamic
particle size stability of spray-dried powders by thermoanalyt- ical
investigations. Proceedings of the Conference on Respira- tory
Drug Delivery, Palm Desert, CA, IX:385Y387 (2004).
71. ITFG/IPAC Collaboration, CMC Specifications Technical Team,
and Particle Size Distribution Working Group. Initial assessment
of the ITFG/IPAC aerodynamic particle size distribution database
by the CMC Specifications Technical Team of the ITFG/IPAC
Collaboration. ​http://0-www.fda.gov.-
lilac.une.edu/ohrms/dockets/ac/00/techrepro/3609_rpt2.pdf. ​Cit- ed
29 Aug 2000.
72. Inhalation Technology Focus Group/International Pharmaceu- tical
Aerosol Consortium on Regulation and Science Tests and Methods
Technical Team Recommendations to the Food and Drug
Administration: metered dose inhaler tests and methods in the
chemistry, manufacturing, and controls. Draft guidances for
metered dose inhalers and dry powder inhalers. ​Drug Inf. J.
36:549Y556 (2002).
73. F. M. ​Etzler. Particle size analysis: a comparison of methods.
Am. Pharm. Rev. ​7:104Y108 (2004).
74. B. H. Kaye, D. Alliet, L. Switzer, and C. Turbitt-Daoust. The
effect of shape on intermethod correlation of techniques for
characterizing the size distribution of powder. Part 1. Corre- lating
the size distribution measured by sieving, image analysis and
diffractometer methods. ​Part. Part. Syst. Charact. 1​ 4: 219Y224
(1997).
75. B. H. ​Kaye, ​D. ​Alliet, ​L. ​Switzer, and ​C. ​Turbitt-Daoust. The
effect of shape on intermethod correlation of techniques for
characterizing the size distribution of powder. Part 2. Corre- lating
the size distribution as measured by diffractometer methods,
TSI-Amherst aerosol spectrometer and Coulter counter. ​Part. Part.
Syst. Charact. ​16:266Y272 (1999).
76. T. E. ​Corcoran, ​R. ​Hitron, ​W. ​Humphreys, and ​N. ​Chigier. Optical
measurement of nebulizer sprays: a quantitative comparison of
diffraction, phase Doppler interferometry and time of flight
techniques. ​J. Aerosol Sci. ​31:35Y50 (2000).
77. H. G. ​Brittain, ​S. J. ​Bogdanovich, ​D. E. ​Bugay, ​J. ​DeVincentis,
G. ​Lewen, and ​A. W. ​Newman. Physical characterization of
pharmaceutical solids. ​Pharm. Res. ​8:963Y973 (1991).
78. J. P. ​Mitchell, ​M. W. ​Nagel, ​K. J. ​Wiersema, and ​C. C. ​Doyle.
Aerodynamic particle size analysis of aerosols from pressurized
metered-dose inhalers: comparison of Andersen 8-stage cas- cade
impactor, next generation pharmaceutical impactor and model
3321 aerodynamic particle sizer aerosol spectrometer. ​AAPS
Pharm. Sci. Tech. ​4:1Y9 (2003).
79. M. L. Thatcher, B. A. S. Brown, B. J. Gabrio, and M. Johnson. A
rapid protein particle size measurements method for metered dose
inhaler development: novel use of the small scale powder disperser
and aerodynamic particle sizer. Presented at Annual AAPS
Meeting, Denver, CO, 21Y25 October 2001.
80. Y. S. ​Cheng, ​E. B. ​Barr, ​I. A. ​Marshall, and ​J. P. ​Mitchell.
Calibration and performance of an API aerosizer. ​J. Aerosol Sci.
24:501Y514 (1993).
81. P. A. ​Baron. Calibration and use of the aerodynamic particle sizer
(APS3300). ​Aerosol Sci. Tech. ​5:55Y67 (1986).
82. T. Allen. ​Particle Size Measurement.Powder Sampling and
Particle Size Measurement, vol. 15. C ​ hapman & Hall, London,
1997.
83. R. Davies. In M. Grayson (ed.), ​Kirk-Othmer Encyclopedia of
Chemical Technology,​ 3rd ed. John Wiley, 1982, p. 528.
84. G. ​Nichols, S
​ . ​Byard, ​M. J. ​Bloxham, ​J. ​Botterill, ​N. J. ​Dawson,
A. Dennis, ​V. ​Diart, ​N. C. ​North, and ​J. D. ​Sherwood. A
review of the terms agglomerate and aggregate with a
recommendation for nomenclature used in powder and particle
characterization. ​J. Pharm. Sci. 9​ 1:2103Y2109 (2002).
85. B. Y. Shekunov, P. Chattopadhyay, J. Seitzinger, and R. Huff.
Nanoparticles of poorly water-soluble drugs prepared by
supercritical fluid extraction of emulsions. ​Pharm. Res. 2​ 3:
196Y204 (2006).
86. N. Y. K. ​Chew, ​B. Y. ​Shekunov, ​H. H. Y. ​Tong, ​A. H. L. ​Chow,
C. ​Savage, ​J. ​Wu, and ​H. K. ​Chan. Effect of amino acids on the
dispersion of disodium cromoglycate powders. ​J. Pharm. Sci.
94:2289Y2301 (2005).
87. B. H. Kaye. Making and characterizing nanopowders. Proceed-
ings of PBS, Chicago, 2001.
88. D. J. ​Burgess, ​D. J. A. ​Crommelin, ​A. S. ​Hussain, and ​M.-L. Chen.
Assuring quality and performance of sustained and
 controlled release parenterals: EUFEPS Workshop report.
AAPS Pharm. Sci. 6​ :1Y12 (2004).
89. J. C. Feeley, P York, B. S. Sumby, H. Dicks, and M. Hanna. ​In vitro
assessment of salbutamol sulphate prepared by micro- nisation and a
novel supercritical fluid technique. ​Drug Delivery to the Lungs
IX:196Y199, (1998).
90. B. Y. Shekunov, P. Chattopadhyay, D. Yim, D. Cippola, and B.
Boyd. AERx aerosol properties of drugYlipid nanosuspensions
produced using supercritical extraction of emulsion (SFEE).
Proceedings of the Conference on Respiratory Drug Delivery, Boca
Raton, FL, 10:609Y612 (2006).
91. N. B. E. ​Sawyer, ​S. P. ​Morgan, ​M. G. ​Somekh, ​C. W. ​See, ​E.
Astrakharchik-Farrimond, and ​B. Y. ​Shekunov. Amplitude and phase
microscopy for sizing of spherical particles. ​Appl. Opt.
42:4488Y4499 (2003).
92. W. Smith and S. Murdande. Nanosizing for improving the delivery
of drugs with poor solubility (in press). ​Pharm. Res. (​ 2006).
93. O. Klueva, M. P. Nelson, P. J. Treado, and A. M. Waligorski. An
ingredient-specific method for particle size characterization of
corticosteroid nasal sprays. Proceedings of the Conference Particles
2006: medical/biochemical, diagnostic, pharmaceutical and drug
delivery applications of particle technology. Orlando, FL, pp.
101Y102 (2006).
94. P. M. ​Young, ​D. ​Cocconi, ​P. ​Colombo, ​R. ​Bettini, ​R. P​ rice, ​D.
F. ​Steele, and ​M. J. ​Tobyn. Characterization of a surface modified
dry powder inhalation carrier prepared by Bparticle smoothing^. ​J.
Pharm. Pharmacol. 5​ 4:1339Y1344 (2002).
95. N. ​Gabas, ​N. ​Niquily, and ​C. ​Laguerie. Response of laser diffraction
particle sizer to anisometric particle. ​Part. Part. Syst. Charact.
11:121Y126 (1994).
96. S. Ro¨ thele, H. Naumann, and M. Heuer. The application of
Fraunhofer diffraction below 1 mm to particle size analysis from
0.1mm to 2000mm. Proceedings of the 7th European Symposium on
Particle Characterisation, Nu¨ rnberg, Germany, 1998.
97. P. G. Rogueda, V. Buckin, and E. Kudryashov. Size and
concentration monitoring of HFA suspensions. Proceedings of the
Conference on Respiratory Drug Delivery, Boca Raton, FL,
X:453Y456 (2006).
98. P. G. Rogueda. Particle aggregation in aerosol clouds. Pro- ceedings
of the Conference on Respiratory Drug Delivery, Boca Raton, FL,
X:449Y452 (2006).
99. B. Y. Shekunov, P. Taylor, and J. G. Grossmann. Structural
phenomena in hydrogel drug systems. ​J. Cryst. Growth ​198Y
199:1335Y1339 (1999).
100. B. Y. ​Shekunov, ​J. C. ​Feeley, ​A. H. L. ​Chow, ​Y. ​Tong, and ​P. York.
Physical properties of supercritically-processed and micronized
powders for respiratory drug delivery. ​KONA Powder Part.
20:178Y187 (2002).
101. D. F. ​Nicoli, ​D. C. ​McKenzie, and ​J. S. ​Wu. Application of dynamic
light scattering to particle size analysis of macro- molecules. ​Am.
Lab. 2​ 3:32Y40 (1991).
102. J. ​Weyermann, ​D. ​Lochmann, ​C. ​Georgens, ​I. R ​ ais, ​J. ​Kreuter,
M. ​Karas, ​M. ​Wolkenhauer, and ​A. ​Zimmer. Physicochemical
characterisation of cationic polybutylcyanoacrylat-nanopar- ticles by
fluorescence correlation spectroscopy. ​Eur. J. Pharm. Biopharm.
58:25Y35 (2004).
103. W. Schrof, J. Klingler, S. Rozouvan, and D. Horn. Raman correlation
spectroscopy: a method for studying chemical composi- tion and
dynamics of disperse systems. ​Phys. Rev. E ​ 57:R2523YR2526
(1998).
104. I. A. ​Marshall, ​J. P. ​Mitchell, and ​W. D. ​Griffiths. The behaviour of
regular-shaped non-spherical particles in a TSI aerodynamic particle
sizer. ​J. Aerosol Sci. ​22:73Y89 (1991).
105. W. R. Foss and N. Egilmez-Reynolds. Assessment of the API
AeroSizer for measuring the particle size distribution of dry
powder aerosols. Proceedings of the Conference on Respirato- ry
Drug Delivery, Palm Harbor, FL, VII:407Y410 (2000).
106. A. ​Kamiya, ​M. ​Sakagami, ​M. ​Hindle, and ​P. R. ​Byron.
Aerodynamic sizing of metered dose inhalers: an evaluation of the
Andersen and next generation pharmaceutical impactors and their
USP methods. ​J. Pharm. Sci. 9​ 3:1828Y1837 (2004).
107. P. Mikkanen, M. Moisio, J. Ristimaki, T. Ronkko, J. Keskinen,
and T. Korpiharji. Measuring DPI charge properties using ELPI.
Proceedings of the Conference on Respiratory Drug Delivery,
Palm Desert, CA, IX:465Y467 (2004).
108. J. C. Keil, R. Kotian, and J. Peart. Using and interpreting aerosol
electrostatic data from electrical low pressure impactor.
Proceedings of the Conference on Respiratory Drug Delivery,
Boca Raton, FL, X:605Y608 (2006).
109. H. H. Y. ​Tong, ​B. Y. ​Shekunov, ​P. ​York, and ​A. H. L. ​Chow.
Thermal analysis of trace levels of polymorphic impurity in
salmeterol xinafoate samples. ​Pharm. Res. ​20:1423Y1429 (2003).
110. W. Witt, U. Ko¨ hler, and J. List. Direct imaging of very
fast particles opens the application of the powerful (dry) dispersion
for size and shape characterization. PARTEC 2004, Nu¨ rnberg.
111. A. H. Boer, D. Gjaltema, W. Witt, and H. W. Frijlink. The use of
laser diffraction technique for the characterisation of the aerosol
cloud from inhalation device. Proceedings of the Conference on
Respiratory Drug Delivery, Palm Harbor, FL, VII:585Y588
(2000).
112. D. R. ​Roberts and ​F. J. ​Romay. Relationship of stage mensuration
data to the performance of new and used cascade impactors. ​J.
Aerosol Med. 1​ 8:396Y413 (2005).
113. J. E. ​Brockmann and ​D. J. ​Rader. APS response to nonspher- ical
particles and experimental determination of dynamic shape factor.
Aerosol Sci. Tech. 1​ 3:162Y172 (1990).
114. R. P. ​Chhabra, ​L. ​Agarwal, and ​N. K. ​Sinha. Drag on non-
spherical particles: an evaluation of available methods. ​Powder
Technol. ​101:288Y295 (1999).
115. G. H. ​Ganser. A rational approach to drug prediction of spherical
and nonspherical particles. ​Powder Technol. ​77:143Y152 (1993).
116. J. Baldyga, M. Henczka, and B. Y. Shekunov. Fluid dynamics,
mass transfer, and particle formation in supercritical fluids. In
P. York, U. B. Kompella, and B. Y. Shekunov (eds.), ​Supercritical
Fluid Technology for Drug Product Development​, Marcel Dekker
Series, 2004, 91Y157.
117. P. ​Mougin and ​D. ​Wikinson. ​In situ ​measurement of particle size
during the crystallization of l-glutamic acid under two
polymorphic forms: influence of crystal habit on ultrasonic
attenuation measurements. ​Cryst. Growth Des. 2​ :227Y234 (2002).
118. I. Zbicinski, C. Strumillo, and A. Delag. Drying kinetics and
particle residence time in spray drying. ​Dry.Technol. 2​ 0:
1751Y1768 (2002).
119. C. Dem, M. Egen, M. Kru¨ ger, and Juu¨ rgen Popp. Understand-
ing the spray design process through single droplet investiga-
tions. Proceedings of the Conference on Respiratory Drug
Delivery, Boca Raton, FL, 10:257Y266 (2006).
120. A. R. ​Heath, ​P. D. ​Fawell, ​P. A. ​Bahri, and ​J. D. ​Swift. Estimating
average particle size by focused beam reflectance measurement
(FBRM). ​Part. Part. Syst. Charact. 1​ 9:84Y95 (2002).
121. L. X. ​Yu, ​R. A. ​Lionberger, ​A. S. ​Raw, ​R. ​D_Costa, ​H. ​Wu​A.
S. ​Hussain. ​Applications of process analytical technology to
crystallization processes​, FDA CDER, Rockville, MD, 2003.
122. D. C. Watts (2004). Process analytical technology (PAT): what_s
in a name?​http://www.fda.gov/cder/OPS/PATCommis-
sionerSem2004/frame.htm​.