De las siguientes ecuaciones podemos encontrar que el
El número más grande normalmente se
ANALISIS INSTRUMENTAL II
“DETERMINACION DE PESO
MOLECULAR POR HPLC
(CROMATOGRAFIA DE ALTO
RENDIMIENTO O PERMEACIÓN EN
GEL)”.
PRESENTA: ING. WILBERTH GARCIA
GOMEZ.
INTRODUCCION
 Dentro de los avances que ha tenido la tecnología,
hoy en día podemos decir que en el aspecto
científico se ha dado de igual forma, de tal manera
que la cromatografía no ha sido la excepción. La
cromatografía de permeación en gel fue inventada
por Grant Henry Lathe and Colin Ruthven, en
Londres.
 La cromatografía de permeación en gel (GPC),
también conocida como cromatografía de
exclusión de tamaño (SEC).
 Es una técnica aceptada para caracterizar los
polímeros. Separa las moléculas del polímero en
base a su tamaño de las partículas. Uso primario
está aplicado a la determinación del peso
molecular y las distribuciones de peso
moleculares.
Durante las primeras dos décadas de aceptación de
GPC el énfasis estaba en:
 Mejorar los aspectos fundamentales de
cromatografía.
 La tecnología de la columna.
 Perfecciónón los solventes, y mejorando precisión
de análisis.
. Todos esos tipos de interacciones tienen un papel
Pero, durante los últimos ha habido una
demanda creciente por obtener más información de
GPC, manejado por la necesidad de caracterizar una
serie compleja en aumento de nuevos polímeros.
La molécula del polímero en una solución tiene cierta
forma que depende del tipo del polímero, el tipo del
solvente y temperatura. Normalmente el polímero en
forma de globo, en donde su tamaño depende del
grado de solvatación.
Este globo podría describirse por su volumen (v) y el
radio hidrodinámico (R). Para algunos polímeros que no
son flexibles se usa todavía el valor de radio
hidrodinámico eficaz que representa el radio de la
esfera de ese polímero.
La viscosidad es el parámetro más simple de la solución
del polímero que representa la conducta mecánica de
moléculas del polímero en la solución.
más pequeños.
volumen de la esfera equivalente es proporcional al agrupará alrededor de un punto central, el punto más
producto de viscosidad intrínseca y el peso molecular alto en la curva que se llama la "distribución de peso
polímero. molecular”.
Así que tenemos que tratar con los promedios de pesos
moleculares cuando se trate de polímeros. El promedio
donde : puede calcularse de las maneras diferentes, y cada
[n] =viscosidad intrínseca. manera tiene su propio valor
M=peso molecular. Un promedio importante de los pesos moleculares es el
NA =número de Avogadro, promedio en número (MN) y promedio en peso ( MW).
V=volumen de la esfera equivalente. El primero es el peso calculado por el número del
 El radio hidrodinámico (el radio de giro) del promedio de las moléculas
polímero en la solución podría expresarse
ecu.2
Como podemos ver, la viscosidad intrínseca es un Donde N es el número de las moléculas en el fragmento
parámetro importante ligado al peso molecular del i y Mi es el peso molecular en ese fragmento, el fi es el
polímero y su volumen molecular. fragmento del área en el cromatograma. Este peso
Por la definición la viscosidad intrínseca está un límite molecular normalmente medido por el osmómetro.
de la proporción de la viscosidad específica a la Determinado de la siguiente manera:
concentración del polímero en c = 0, ec.3
donde n es la viscosidad de la solución del polímero, el
ns es la viscosidad del solvente.
La viscosidad intrínseca del polímero el peso molecular
fue relacionado por Mark-Houwink la ecuación .4
donde K y alfa es las constantes específicas para cada
polímero.
Estas constantes expresan las interacciones
intermoleculares del polímero con las moléculas
solventes e interacciones del intramolecular de las
moléculas del polímero consigo mismo .
significante puesto que se forma la molécula del
polímero y definiendo su tamaño
Resolviendo las ecuaciones (2) y (4) nosotros podemos
obtener relación directa de la masa molecular con el
radio hidrodinámico que es importante para el
cromatograma.
EL PESO MOLECULAR DEL POLIMERO.
Si tenemos una muestra de polímero lineal, y algunas EQUIPO GPC
de las cadenas tienen 50000 átomos del carbono en Este sistema mide el peso molecular de polímeros con
ellos, y otros tienen 50000 y 2 átomos del carbono en alta exactitud. Este sistema incluye software GPC. Los
ellos, esta pequeña diferencia no va a sumar a algo. cálculos del peso molecular incluye: la corrección de
Uno nunca encuentra una muestra de un polímero tiempo de retención por el patrón interno, la corrección
sintético en que todas las cadenas tienen el mismo peso de tiempo de atraso entre detectores, y corrección de la
molecular sensibilidad de detector de índice de refracción
En cambio, normalmente tenemos una distribución de
pesos moleculares. Algunas de las cadenas del
polímero serán más grandes que otros. Algunos serán
DIAGRAMA DE FUNCIONAMIENTO DEL GPC. CALIBRACIÓN
Para la calibración tenemos que medir el volumen de
elución, la retención de las soluciones del polímero con
la distribución de peso molecular. La parte del logaritmo
del peso molecular vs. Volumen del elución es la curva
de la calibración. Cada columna tienen su propia curva
de calibración dónde uno enlaza las tres regiones
distintas: la filtración total; la filtración selectiva, y la
exclusión total
EL MECANISMO DE LA SEPARACION.
El eluyente fluye a través de la columna del
cromatograma que tiene material de empaque poroso
con una distribución de tal forma que la velocidad
depende del camino.
molecular y volumen hidrodinámico para el
poliestireno y usamos poliestireno como
estándar. Pero la relación entre volumen
hidrodinámico y peso molecular no es la misma
para todos los polímeros, de modo que sólo
obtenemos una medición aproximada.
BIBLIOGRAFIA.
 Skoog, West, Holler. FUNDAMENTOS DE
QUIMICA ANALITICA. TOMO 2, 4ta EDICIÓN,
EDITORIAL REVERTE.

las moléculas más pequeñas podrían distribuirse en el

volumen líquido y su velocidad de migración es lenta.
Las moléculas más grandes no podrían fluir cerca de las
paredes del poro, aunque todos ellos penetran en el
espacio del poro

Las moléculas más grandes experimentan el estorbo en
la filtración dentro del espacio de poro y se mueven
principalmente a través de la columna alrededor de las
partículas con una posible velocidad más rápida.
Como resultado las moléculas más grandes salen
primero de la columna, y los más pequeños salen al
final.
Generalmente, los cromatogramas de GPC representan
del polímero la distribución de peso molecular, pero
para asociar cierto volumen de elución al peso
molecular se necesita calibrar la columna particular.
LAS INTERACCIONES
Cuando usted selecciona el solvente para GPC es
importante considerar dos condiciones.
Primero, el solvente tiene que disolver su polímero
completamente y preferentemente evitar solvatacion
significante del polímero en cadena.
Segundo, tiene que suprimir todas las posibles
interacciones del polímero con la superficie del material
del empaque. El último es muy importante para los
cálculos de peso moleculares correctos.
APLICACION
ANALISIS DE UNA RESINA.
 MUESTRA RESINA COMERCIAL EPOXI.
 EMPAQUETADO: HIDROFOBICO.
 ELUYENTE: TETRAHDROFURANO.
 COLUMNA: SILICE POROSA.
 DIMENSIONES:6.2 mm * 250 mm.

DESVENTAJA
 Hay una desventaja con la SEC. En realidad en
la SEC no medimos masa sino el volumen
hidrodinámico de las moléculas poliméricas, es
decir, el espacio que ocupa una molécula
particular cuando se encuentra en solución. A
partir de la SEC podemos hacer una
aproximación al peso molecular, puesto que
conocemos la relación exacta entre peso