TALLER 1 BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR

GRUPO 2

PRESENTADO POR

JUAN ESTEBAN CASTRILLÓN

SARA MUNERA MOSQUERA
DIEGO ALEJANDRO LOPERA
MARIA JOSE TOLEDO PALACIOS

PRESENTADO A

ARLEY CAMILO PATIÑO

FACULTAD DE CIENCIAS FARMACEUTICAS Y ALIMENTARIAS

QUIMICA FARMACEUTICA
UNIVESIDAD DE ANTIOQUIA
MEDELLIN
2020
1. Investigadores del Programa “Patoquito” incubaron extractos solubles de E. Coli con
una mezcla de dATP, dTTP, dGTP y dCTP, todos ellos marcados con 32P en el grupo
α-fosfato. Al cabo de algún tiempo, la mezcla de incubación fue tratada con ácido
tricloroacético, que hace precipitar el DNA, pero no los precursores nucleotídicos. El
precipitado fue recogido, y la cantidad de precursor incorporado en el DNA fue
determinada a partir de la cantidad de radiactividad que estaba presente en el
precipitado

- ¿Si cualquiera de los cuatro precursores nucleotídicos fuese omitido de la

mezcla de incubación, se encontraría radiactividad en el precipitado?
Justifique.

Si uno de estos dNTP estuviera ausente, se daría una replicación incompleta.

Por ejemplo si en la cadena molde tenemos A,G,T,C y no tuviéramos para
complementar la C la replicación llegaría hasta la base T, la cual sí tendría su
complementario. Por lo tanto, si habría un DNA precipitado hasta donde llegó
la replicación, con su respectiva radiación.

- ¿Se incorporaría 32P en el DNA si solamente estuviera marcado el dTTP?

Justifique.

La marcación en el DNA va a ser visible, en cada base la cual su

complementario sea dTTP, por lo tanto no se va a dar una marcación
constante, es decir, la radiación va a observarse de manera intermitente.

- ¿Se encontraría radiactividad en el precipitado si se marcara con 32P el

fosfato β o γ en lugar de los α de los desoxirribonucleótidos? Explique

Si el marcador 32P se ubica en los grupos fosfato β o γ. El 32P quedará

soluble en el proceso de polimerización, impidiendo que haya un precipitado y
por lo tanto evidencia de radiactividad; dado que estos grupos se liberan al
medio, quedando solamente disponible el grupo alfa en el polímero donde se
unirá el marcador.
 2. En un laboratorio un grupo de investigadores que trabajaban con bacterias se dieron a
la tarea de dilucidar ciertas predicciones acerca de la conducción del DNA durante la
replicación. Dichos investigadores después de muchas discusiones consideraron tres
propuestas relacionadas con este trabajo

- Replicación semiconservativa: Cada uno de los dúplex hijos debería consistir

en una cadena completa heredada del dúplex parental y una cadena completa
sintetizada de nueva cuenta.
- Replicación Conservadora: Una de las cadenas dúplex hijas debería contener
sólo el DNA parental, mientras que las otras dúplex hijas, solo el DNA
resintetizado.
- Replicación Dispersiva: Los dúplex hijos contendrían cadenas constituidas por
DNA nuevo y antiguo.

Según tus conocimientos cómo podrías ayudar a los investigadores en un

experimento a demostrar cual de tres tipos de replicación es la que se lleva a
cabo?

En un cultivo de bacterias introducimos un isótopo A procedente del nitrógeno, posterior a

esto las bacterias toman el isótopo introducido y lo utilizan para sintetizar nuevas moléculas
biológicas, incluyendo su ADN; por lo que va haber una marcación de dicho isótopo A en
todas las bases nitrogenadas del ADN; posterior a esto y sabiendo la frecuencia con la que
dichas bacterias se dividen, se introduce un segundo isótopo B también procedente del
nitrógeno para que haya una marcación y proceder al análisis.

Si dichas bacterias en la generación dónde se introdujo el isótopo B posterior al isótopo A son

analizadas y un dúplex corresponde al isótopo original A y otro dúplex corresponde al
isótopo B, se puede inferir que dicha replicación es de tipo conservativa, puesto que se
conserva la replicación del tipo A y se genera un nuevo dúplex con el isótopo introducido que
en este caso es el isótopo B; es importante aclarar que la replicación es conservativa siempre
y cuando no haya interacción en las bandas entre el isótopo A y el isótopo B.

Si en el análisis anterior se demuestra cierto tipo de interacción en los dúplex entre el isótopo
A y el isótopo B, procedemos a determinar si es de carácter semiconservativo o dispersivo. Si
en las hebras de ADN replicadas no se ven fragmentos del isótopo A y del B en una misma
banda, sino que por el contrario, una hebra está señalizada solo con el isótopo A y otra solo
con el B, se concluye que la replicación es semiconservativa. Es decir que la célula al
dividirse, va a preservar información, donde tendrá una hebra molde que corresponde a la
genética del isótopo inicial A, y al interactuar con el isótopo B generará la hebra
complementaria que será marcada por éste, correspondientemente tendremos de dos hebras
madres, cuatro hebras hijas donde dos conserven la información original del isótopo A y dos
de ellas introduzcan la información del isótopo B en dos dúplex.

Finalmente, si esto no sucede y por el contrario en la replicación del ADN resulta en dos
duplex correspondiente a una mezcla, o "híbrido" entre el isótopo A y el isótopo B; ambas
con fragmentos tanto de un isótopo como del otro, donde no haya una hebra que corresponda
a un solo isótopo sino que ambos estarán presentes en los dúplex, es ahí cuando se determina
que se trata de un modelo dispersivo donde cada cadena individual es un mosaico de ADN
original y nuevo.