CÉLULAS EUCARIOTAS.

EL NÚCLEO CELULAR
Envoltura
nuclear

Heterocromatina

Nucléolo
CÉLULAS EUCARIOTAS. EL NÚCLEO CELULAR

Es un compartimento intracelular
recubierto por una doble membrana
que permite mantener al ADN celular
aislado del citoplasma.

La MB externa es continuación del

RE y el espacio inter-MBs tiene
continuidad con el lumen de RE.
Ambas membranas se conectan en
los poros nucleares.

Una red de filamentos intermedios

llamada lámina nuclear recubre la MB
interna y brinda soporte mecánico al
núcleo.
CÉLULAS EUCARIOTAS. EL NÚCLEO CELULAR
Envoltura
nuclear

Heterocromatina

Nucléolo
LA ENVOLTURA NUCLEAR
La MB interna contiene proteínas de anclaje para la heterocromatina y la
lámina. La externa es la continuidad de la del RER

Los complejos del poro en las células animales pesan 25 106 Da y

están constituidos por 30 proteínas diferentes (nucleoporinas) con
simetría octogonal.
 Las moléculas menores a 5000 Da pasan por libremente mientras que las mayores lo
deben hacer por transporte activo unidas a proteínas receptoras

Las moléculas menores a 5000 Da

pasan libremente mientras que las
mayores lo deben hacer por
transporte activo, unidas a proteínas
receptoras
LA MEMBRANA Y LA LÁMINA NUCLEAR SE DESORGANIZAN DURANTE LA MITOSIS
 LOS CROMOSOMAS EUCARIÓTICOS
El material genético (ADN) se divide en un # variable de cromosomas lineales constituido
por cromatina (ADN+proteínas).
En la etapa G1 del ciclo celular, cada cromosoma está formado
por una única molécula de ADN, mientras que en G2, lo
constituyen 2 moléculas idénticas de ADN.
La mayoría de las células humanas
poseen dos juegos completos de Cariotipo espectral Sondas
cromosomas: un juego de cromosomas fluorescentes de ADN que
generan un color diferente para
materno y un juego de cromosomas cada cromosoma.
paterno. Son DIPLOIDES.

Los dos juegos no son Cada JUEGO, consta de un número de cromosomas autosómicos (comunes a todos los
idénticos sino que miembros de la especie) y un cromosoma sexual (se distribuyen según el sexo del
son HOMÓLOGOS individuo).
EN LOS MACHOS, EL PAR DE CROMOSOMAS SEXUALES NO ES COMPLETAMENTE
HOMÓLOGO YA QUE EL CROMOSOMA X ES MUY DIFERENTE AL Y

Hibridización con sondas específicas para cromosoma marcadas con un fluorescente diferente

Los cromosomas son de diferente tamaño

 ¿CÓMO REALIZAR UN CARIOTIPO?
Fitohemoaglutinina
como factor inductor
de mitosis.

Coloración con Giemsa de cromosomas en el inicio de

fase M. Bandas oscuras en zonas ricas en AT.
 BANDEO CROMOSÓMICO. CARIOTIPO

CLASIFICACIÓN SEGÚN LA
Posición del centrómero
POSICIÓN DEL CENTRÓMERO
(constricción primaria)

a) Metacéntricos
Posición del satélite
b) Submetacéntricos
(constricción secundaria)
c) Submetacéntrico con zona satélite
d) Acrocéntricos
e) Telocéntricos
 CENTRÓMERO, TELÓMEROS Y ORÍGENES DE REPLICACIÓN:
3 SECUENCIAS INDISPENSABLES EN UN CROMOSOMA LINEAL FUNCIONAL
 ADN repetido en tándem
Son repeticiones que se ordenan de manera consecutiva, de modo que secuencias
idénticas se disponen unas detrás de otras.

Satélite: en centrómero, brazos cortos de cr acrocéntricos.

Son secuencias de entre 5 y varios cientos de nucleótidos que se repiten en tándem miles de veces generando
regiones repetidas con tamaños entre 100 kb y varias megabases.

Minisatélites: en telómeros y regiones VNTR que se utilizan en medicina forense.

Son secuencia de 10 - 60 nucleótidos que se repite en tándem generando secuencias de entre 100 y 20.000 pb. El
genoma humano contiene unos 30.000 minisatélites.

VNTR: número variable de repeticiones en tándem

Microsatélites: STR que se utilizan en el test de paternidad
Secuencias básicas de 2-4 nucleótidos, su repetición en tándem origina secuencias de menos de 150 nucleótidos.

STR: Short Tandem Repeats

 GENOMA Y GENES
GENOMA:
Es la totalidad de la información genética de
GEN:
una especie
Unidad funcional de la herencia.
En los humanos comprende 3,2 109 pbs
Segmento de ADN que contiene la información
distribuidos en 24 cromosomas nucleares (22
para la elaboración de un ARN funcional
autosómicos y 2 sexuales) más una mínima
fracción de ADN mitocondrial.
 CORRELACIÓN ENTRE EL NÚMERO DE GENES Y LA COMPLEJIDAD DEL ORGANISMO
Los procariotas poseen un
Tamaño del genoma N° aprox. de
único cromosoma circular.
(x106pb) genes
Los eucariotas unicelulares poseen un
genoma muy compactado. El genoma de
la levadura está distribuido en 16
cromosomas.
E. coli 4,6 4.300

Los genes humanos se empaquetan con una menor densidad,

presentando gran cantidad de secuencias intercaladas no
codificantes.
Los genes humanos poseen una mayor longitud que los de
levadura (no está reflejado en el esquema)
S. cerevisiae 12 6.300

Humanos 3.200 24.000

 GEN EUCARIOTA
Constituido por porciones codificantes (exones) interrumpidas por porciones no codificantes
(intrones) y está asociado a secuencias regulatorias de ADN.

Estas secuencias regulatorias son responsables de activar o desactivar un determinado gen en

un determinado tiempo, nivel y tipo celular.

Las secuencias reguladoras están dispuestas a lo largo de miles de pbs mientras que en
organismos con genomas más concisos, serán mucho más cortas.
 REPRESENTACIÓN DEL CONTENIDO DE LA SECUENCIA DE NUCLEÓTIDOS DEL
GENOMA HUMANO

DNA no

LINEs (long interspersed nuclear elements), SINEs (Short …), elementos símiles a retrovirus y trasposones son elementos
genéticos móviles que se han multiplicado en nuestro genoma.

Sec. Repetidas sencillas: secuencias de menos de 14pbs repetidas que forman

largos segmentos.

Duplicaciones segmentales: largos bloques repetidos en 2 o más posiciones del genoma

La organización de genes en un cromosoma (Cromosoma humano 22)

Es el más pequeño
(48 106 pbs., el 1,5% del genoma).

La mayor parte del brazo pequeño

contiene secuencias repetitivas muy
empaquetadas
(heterocromatina)
 CROMATINA = ADN + PROTEÍNAS

PROTEÍNAS HISTÓNICAS
Pequeñas proteínas con alto
contenido de aminoácidos
básicos (alta carga positiva)
HISTONAS NUCLEOSÓMICAS
H2A, H2B, H3, H4
HISTONAS NO NULEOSÓMICAS
H1

PROTEÍNAS NO HISTÓNICAS
 EUCROMATINA Y HETEROCROMATINA

La cromatina menos condensada se llama EUCROMATINA y la más condensada

HETEROCROMATINA.

La HETEROCROMATINA: ES RESISTENTE A LA EXPRESIÓN GÉNICA. En una

célula de mamífero constituye más del 10% del genoma

HETEROCROMATINA CONSTITUTIVA Y FACULTATIVA

CONSTITUTIVA: Es idéntica para todas las células del organismo, carece de información genética, incluye a
los telómeros y centrómeros del cromosoma.

La heterocromatina constitutiva contiene un tipo particular de ADN denominado ADN satélite, formado por gran
número de secuencias cortas repetidas en tándem.

FACULTATIVA: diferente en los distintos tipos celulares, contiene información que podría ser transcripta,
genes que no se expresan o que están silenciados pero que podrían activarse en algún momento. Un ejemplo
típico es el cromosoma X inactivado en las células somáticas femeninas.
INACTIVACIÓN DEL CROMOSOMA X EN MAMÍFEROS

El cromosoma sexual X posee unos 1000

genes mientras que el Y sólo unos 100.

En mamíferos existe un mecanismo de

“compensación de dosis” mediante el
cual, en las células somáticas de las
hembras , uno de sus cromosomas X (ya
sea el paterno -Xp- o el materno –Xm-)
se inactiva transcripcionalmente por
condensación.

Las células somáticas de una hembra

son mosaico ya que este proceso se
activa en el embrión de 1000 células
donde cada una inactiva Xp ó Xm al azar.
CROMATINA Y REPLICACIÓN

Diferentes regiones de un
cromosoma se replican a
distintos momentos

El ADN de la
heterocromatina se
replica más tarde pero
no más lentamente.
 Cromatina vista al microscopio electrónico

(A) Cromatina aislada de un núcleo interfásico. Fibra de 30 nm.

(B) Cromatina experimentalmente desempaquetada. Fibra de 11 nm (collar de nucleosomas)

ORGANIZACIÓN DEL NUCLEOSOMA
El NUCLEOSOMA =

núcleo de la partícula
nucleosómica
(8 histonas + ADN de 147 pb)
+
ADN espaciador
(de hasta 80 pb).

A veces al referirnos al núcleo

de la partícula nucleosómica lo
hacemos directamente como
“nucleosoma” y no estamos
incluyendo al espaciador.
 HISTONAS
Proteínas pequeñas (102-135 aa) que conservan un motivo estructural llamado “PLIEGUE DE HISTONA” que
consta de 3 hélices-α unidas por 2 lazos

Todas las histonas nucleosómicas poseen un motivo “pliegue de histona” y una cola N-terminal.

PLIEGUE DE Formación
HISTONA del dímero
H2A H2A-H2B
 El octámero de Histonas y el Nucleosoma
4 heterodímeros de histonas En cada NUCLEOSOMA se
forman el octámero establecen diversas
interacciones entre proteína y
Un dímero H3-H4 se asocia ADN:
con otro idéntico formando un
tetrámero H3-H4 que luego se •numerosas interacciones
asocia con 2 dímeros H2A-H2B electrostáticas (entre las
formando el octámero. lisinas y argininas de las
histonas y las cargas
Las colas N-terminal de las negativas del ADN)
histonas se extienden hacia el
exterior del octámero. •142 puentes de H entre
histonas y ADN
El ensamblado de los •numerosas interacciones
monómeros y dímeros para hidrofóbicas
formar el octámero está
asistido por “chaperonas de
histonas”
MODELOS DE LA FIBRA DE 30 nm
MODELOS DE ESTABILIZACIÓN DE LA FIBRA DE 30 nm
COLA N-TERMINAL DE HISTONAS NUCLEOSÓMICAS

Histona H1 (verde) consiste en un

core globular y dos colas.
CONDENSACIÓN DE CROMOSOMAS MITÓTICOS
MODELO DE ORGANIZACIÓN DEL CROMOSOMA INTERFÁSICO:
BUCLES ANCLADOS A UN EJE PROTEICO

CONDENSINA (DÍMEROS DE PROTEÍNAS Smc)

Regiones de la fibra de 30 nm libres de nucleosoma que poseen unidas proteínas de
pegado específico al ADN. Estas regiones son susceptibles de degradación

DISTRIBUCIÓN DE LAS HISTONAS DURANTE LA REPLICACIÓN

REMODELACIÓN DE NUCLEOSOMAS POR CORRIMIENTOS DEL ADN MEDIANTE COMPLEJOS
REMODELADORES DEPENDIENTES DE ATP
ELIMINACIÓN O CAMBIO DE UN OCTÁMERO DE HISTONAS MEDIANTE COMPLEJOS
REMODELADORES DEPENDIENTES DE ATP

Las chaperonas de histonas tienen

carga negativa (alto contenido de
aspartato y glutamato
 Estrategia que permite heredar los patrones de modificaciones de las histonas

Ciertas estructuras de cromatina son heredables: es un tipo herencia EPIGENÉTICA ya que se

basa en una estructura proteica en vez de una secuencia de ADN.
 MODIFICACIONES EPIGENÉTICAS
Modificación Regulación del grado de compactación del ADN por
de histonas histonas (posicionamiento y modificaciones:
Cromosoma metilaciones, fosforilaciones y acetilaciones)

Cromatina Conjunto de elementos

(ADN+Proteínas) que regulan la
expresión de los
genes sin modificar la
Nucleosomas secuencia del ADN y
hacen posible que los
diferentes tipos de
Metilación del ADN células y
Transcripción
ARNm tejidos expresen
determinados genes y
Degradación del ARN
no otros, y además, lo
Micro ARN Traducción
Alteración de traducción hagan en el momento
Proteína adecuado
LAS HISTONAS NUCLEOSÓMICAS SUFREN MODIFICACIONES COVALENTES REVERSIBLES

arginina

N-metil arginina
La mayoría de las MODIFICACIONES COVALENTES REVERSIBLES se producen en las
cola N terminal aunque también pueden aparecer en el pliegue

Las acetil transferasas: agregan

grupos acetilo a residuos de Lys
mientras que las desacetilasas
los retiran

Las metil transferasas: agregan

grupos metilo a residuos de Lys
mientras que las desmetilasas los
retiran
 EL CÓDIGO DE HISTONAS:
Viene dado por las
modificaciones covalentes y la
presencia de ciertas variantes
de histonas.

El código de histonas permite

descifrar qué acción biológica
debe llevarse a cabo en esa
región:
Reparación, transcripción,
indica si ha sido replicado
recientemente
ALGUNOS SIGNIFICADOS DEL CODIGO DE HISTONAS
Variantes de Histonas sitio específicas que determinan funciones específicas de la
cromatina