El desarrollo de una tecnología adecuada para la producción de probióticos es
una investigación clave para la producción industrial, que debe tener en cuenta la viabilidad y la estabilidad de los organismos involucrados. Los criterios microbianos, la tolerancia al estrés durante el procesamiento y el almacenamiento del producto constituyen la base para la producción de probióticos. En general, las bacterias pertenecientes a los géneros Lactobacillus y Bifidobacterium se han utilizado como probióticos. En base a sus cualidades positivas, las bacterias probióticas son ampliamente utilizadas en la producción de alimentos. El interés en la incorporación de las bacterias probióticas en otros productos además de los productos lácteos ha aumentado y representa un gran desafío. El reconocimiento de los sistemas de administración de dosis para las bacterias probióticas también ha resultado en esfuerzos de investigación destinados a desarrollar alimentos probióticos fuera del sector lácteo. La producción de jugos probióticos se ha considerado más en los últimos años, debido a una mayor preocupación en la salud personal de los consumidores. MICROENCAPSULACIÓN DE MATRIZ ALGINATO-QUITOSANO Para mejorar la efectividad de la supervivencia de las bacterias, los investigadores se han centrado en varias tecnologías de microencapsulación considerando nuevas combinaciones de matrices de soporte. Varios estudios realizados en diferentes cepas bacterianas (Vodnar y col., 2014) han demostrado que el uso de microcápsulas recubiertas de quitosano contribuye significativamente a la supervivencia de las bacterias probióticas durante las condiciones gastrointestinales simuladas. Por lo tanto, los estudios experimentales informaron que las microcápsulas de alginato recubiertas de quitosano son la mejor tecnología para la protección de las bacterias probióticas (como Lactobacillus y Bifidobacterium spp.) (Krasaekoopt y col., 2004). Contra todas las condiciones probadas, otro estudio demostró que L. bulgaricus inmovilizado por microencapsulación de alginato recubierto de quitosano demostró una mayor estabilidad de almacenamiento en comparación con las células libres. Un efecto similar se observó en un estudio realizado por Vodnar y Socaciu en L. casei y L. plantarum. Además, otro estudio destacó que el recubrimiento de quitosano proporcionaba la mejor protección de las bacterias probióticas en condiciones Gastrointestinales simuladas y su supervivencia aumentaba (p <0.05). (Vodnar y col., 2014) Un estudio reciente de 2017 mostró que las cápsulas de pectina-quitosano pueden proteger a L. casei de las condiciones ácidas del estómago y resultó en un mayor número de células viables en el intestino (Bepeyeva y col, 2017). Estos resultados están en línea con otros estudios que informaron que había una correlación entre el aumento de la concentración de material microencapsulante y el aumento de la tasa de supervivencia de las bacterias probióticas en condiciones GI simuladas. ( Anekella, K.; Orsat, V., 2013) En el estudio de (Varankovich et al., 2017), las nuevas microcápsulas de proteína de guisante-alginato con un recubrimiento de quitosano se produjeron por extrusión. Estas microcápsulas se probaron para determinar la inmovilización y la supervivencia de L. rhamnosus R0011 y L. helveticus R0052 durante el almacenamiento y la exposición a condiciones gastrointestinales in vitro. Los resultados indicaron que el recubrimiento de quitosano fue responsable de una mayor viabilidad celular durante nueve semanas de almacenamiento a temperatura ambiente, mejorando significativamente el rendimiento de la microcápsula en comparación con las microcápsulas no recubiertas de quitosano. En condiciones gastrointestinales, la formulación de microcápsulas proporcionó una alta protección para las células, mientras que el almacenamiento refrigerado no tuvo efectos negativos en el rendimiento de la protección de microcápsulas. Además, el recubrimiento de quitosano no aumentó el tamaño de la microcápsula. (Chavarri y col., 2010) L. gasseri y B. bifidum microencapsulados usando quercetina como prebióticos y quitosano como material de recubrimiento en micropartículas de alginato y reportaron una mejor supervivencia durante las condiciones gastrointestinales in vitro. Otros estudios informaron almidón resistente como prebióticos y quitosano como material de recubrimiento para la encapsulación de diferentes bacterias probióticas y encontraron una mayor viabilidad hasta 6 meses a temperatura ambiente (Iyer, C.; Kailasapathy, K., 2005). Otro enfoque eficiente para mejorar la viabilidad de las bacterias probióticas en condiciones gastrointestinales para la liberación dirigida propone el uso de quitosano y polímeros entéricos en la formulación de perlas microencapsuladas (Liserre, A.M.; Ré, M.I.; Franco, 2007). Por ejemplo, B. animalis subsp. lactis se incorporó en alginato, alginato-quitosano, alginato-quitosano-sreteric y alginato- quitosano-aril-eze. Los resultados indicaron que el uso de quitosano y polímeros entéricos en la formulación de las perlas, especialmente aril-eze, mejoró la tasa de supervivencia de B. animalis, al tiempo que promovió el suministro intestinal controlado de bifidobacterias. En un reciente artículo de revisión de Ramos et al., se investigó un análisis comparativo en profundidad del rendimiento de protección para diferentes recubrimientos. La conclusión sugirió que los recubrimientos con mejor desempeño de protección considerando condiciones de digestión dura fueron quitosano, alginato, poli-L-lisina (PLL) y proteína de suero; sin embargo, entre todos, el quitosano mostró la mejor eficiencia debido a su capacidad para resistir y proteger la célula probiótica viable durante la digestión in vitro. Además, las conclusiones de los autores subrayaron la idea de que más recubrimientos no siempre implican una mejor protección en comparación con las microcápsulas mono-recubiertas. En un estudio de Singht et al., (2017), se utilizaron nuevas matrices de base carboximetilcelulosa-quitosana (CMC-Cht) para la encapsulación de la bacteria probiótica L. rhamnosus GG mediante un método de pulverización con boquilla. Los resultados de las micro y macropartículas híbridas confirmaron su potencial de encapsulación y suministro, siendo la primera encapsulación exitosa de L. rhamnosus GG en partículas CMC-Cht con una tasa de supervivencia aceptable. Li y col., (2011) encapsulado L. casei ATCC 393 con matrices de alginato, quitosano y carboximetil quitosano mediante un método de extrusión, y el sistema aumentó la viabilidad de las células hasta 108 ufc / g en estado seco después de 4 semanas de almacenamiento a 4 ° C . Después de la exposición a las condiciones gastrointestinales, las bacterias encapsuladas mantuvieron su efecto probiótico, lo que indica que las microcápsulas de alginato-quitosano-carboximetilquitosano podrían proteger eficazmente a L. casei contra condiciones adversas y pueden representar una nueva ruta para la entrega de cultivos probióticos como alimento funcional. En un estudio de Zou et al., (2011), la encapsulación de B. bifidum F-35 en microesferas de alginato desarrollada por la técnica de emulsión / gelificación interna se reforzó mediante la adición de pectina / almidón o recubrimiento con quitosano / PLL para mejorar la protección de las bacterias probióticas. En comparación, las microesferas de alginato recubiertas de quitosano mostraron la mayor protección para las bacterias microencapsuladas en condiciones gastrointestinales in vitro y durante 1 mes de almacenamiento a 4 ° C, siendo un enfoque eficiente para la colonización intestinal de las bifidobacterias. Cook et al., (2013) investigaron el recubrimiento LbL de matrices de alginato con quitosano-alginato para la encapsulación de B. breve con el objetivo de mejorar la supervivencia de las bacterias en condiciones de pH bajo, e implícitamente, el suministro intestinal. El estudio experimental demostró que las matrices de alginato recubiertas de múltiples capas aumentaron la viabilidad de las células durante la exposición a condiciones gástricas in vitro. Fareez y col., (2017) implementó con éxito la microencapsulación de L. plantarum LAB12 en perlas de quitosano-alginato-goma de xantano-β- ciclodextrina (Alg-XG-β-CD-Ch) considerando una tasa de supervivencia del 95% a pH 1.8 con liberación facilitada a pH 6.8. Además, las microcápsulas mantuvieron la viabilidad de las células> 7 log UFC / g durante el almacenamiento de 4 semanas a 4 ° C y habían reducido la pérdida de células viables a 75 ° C y 90 ° C. Considerando esto, el enfoque Alg – XG – β – CD – Ch puede ser adecuado para la aplicación como perlas poliméricas estables al calor y al pH que incorporan especies de lactobacilos como vehículos de transporte eficientes que cruzan las condiciones gástricas para la colonización intestinal final, como recubrimiento resistente al calor hasta 90 ◦C es una propiedad importante en la fabricación de productos. Por lo tanto, las aplicaciones Alg – XG – β – CD – Ch para los probióticos son amplias y se dirigen a las industrias agroalimentarias, alimentarias y de alimentos. En 2015, el mismo autor, Fareez et al., (2015), demostró que la incorporación de las mismas bacterias probióticas en perlas de alginato-goma de xantano recubiertas de quitosano (Alg-XG) fue un enfoque factible fisicoquímico para la entrega de nuevos ingredientes alimentarios funcionales. Falco y col., (2017), utilizando la técnica LbL, desarrolló una matriz de encapsulación de β-glucano sulfatada y quitosana para L. acidophilus considerando su propiedad prebiótica para otras aplicaciones novedosas, como los portadores de probióticos y nutracéuticos sensibles. En comparación con las células no recubiertas, la viabilidad de las células con cuatro capas de quitosano y β-glucano sulfatado disminuyó solo en 2 log UFC / ml. Bajo exposición GI in vitro, la protección de los recubrimientos se degradó parcialmente, pero se resistió en condiciones gástricas ácidas. La adición prebiótica Hi-maíz (1.0% p / v) a microcápsulas que contienen Lactobacillus spp. recubierto con quitosano mejoró considerablemente (p <0.05) la viabilidad de las células después de la exposición gastrointestinal, y en el yogur almacenado, en comparación con las microcápsulas a base de alginato (Iyer, C.; Kailasapathy, K., 2005). De acuerdo con Bepeyeva et al. (2017). la encapsulación de L. casei en perlas de calcio-pectinato-quitosano proporcionó protección a las células bajo exposición gastrointestinal. Las perlas se prepararon por extrusión de pectina amidada en cloruro de calcio con recubrimiento adicional de quitosano, dando como resultado altos niveles de bacterias viables con la aplicación de administración intestinal. De acuerdo con Kanmani et al. (2011), la encapsulación de LAB Enterococcus faecium MC13 en microcápsulas de alginato recubiertas de quitosano demostró un suministro mejorado de células viables y una buena resistencia a condiciones gastrointestinales adversas. Trabelsi y col., (2013) informaron que L. plantarum TN8 encapsulado en alginato recubierto con quitosano durante 8 semanas de almacenamiento a 4 ° C fue eficaz para mantener la estabilidad de las bacterias probióticas. Los resultados experimentales de Zaeim et al., (2017) propusieron la pulverización electrónica en húmedo como una técnica exitosa y novedosa para la encapsulación de bacterias probióticas (L. plantarum) dentro de microcápsulas de hidrogel de alginato de Ca / quitosano mediante un procedimiento de etapa única y doble con un rendimiento de encapsulación de casi el 98%. La viabilidad de las células aumentó con 1 ciclo logarítmico en comparación con las células libres en condiciones GI simuladas, mientras que la capa externa de quitosano, que se depositó en microcápsulas de alginato de Ca mediante un procedimiento de doble etapa, protegió más eficazmente las bacterias en entornos de pH bajo. INCORPORACIÓN DE MICROCAPSULAS EN ALIMENTOS Bebidas Los probióticos han sido ampliamente desarrollados e incorporados en matrices lácteas. Sin embargo, las personas con intolerancia y alergia a la lactosa, vegetarianos e hipercolesterolémicos, no puden ingerir este tipo de productos, surgiendo así la necesidad de desarrollar nuevos productos como bebidas no lácteas y suplementos en comprimidos (Prado et al., 2008) Las frutas y verduras son una parte esencial de la nutrición humana. En particular, son ricas en agua, vitaminas (vitamina C y vitaminas del grupo B), provitamina A, fitoesteroles, muestran una gran variedad de minerales y fitoquimicos. (DiCagno et al., 2011). Por todo esto se convierten en una nueva opción para el desarrollo de alimentos funcionales probióticos. En los últimos años se han realizado varias investigaciones en diferentes frutas, tipos de preparaciones y microorganismos para el desarrollo de jugos funcionales: Sheehan et al. (2007) evaluaron la supervivencia de Lactobacillus y Bifidobacterium en jugo de naranja, piña y jugo de arándano. Los resultados mostraron diferencias entre las cepas y su nivel de resistencia a ácidez. Todas las cepas sobrevivieron por más tiempo en el jugo de naranja y piña: mientras que L. casei DN-114 001, L. rhamnosus GG y L. paracasei NFBC43338 mostraron el mayor crecimiento por encima de 106 UFC/mL al cabo de 12 semanas en los jugos de naranja y piña. Saarela et al., (2011) evaluaron el potencial de mutagénesis UV para generar una cepa ácido resistente de Bifidobacterium animalis subsp. lactis Bb-12. Esta cepa, al someterla a almacenamiento en jugo de manzana (pH 3,5), mejoró su estabilidad en jugo de bajo pH. Yoon et al., (2006) evaluaron jugo de col como matriz en jugos con adición de L. plantarum C3, L. casei y L. delbrueckii D7. Después de 4 semanas de almacenamiento en frío a 4,0°C, los recuentos de células viables de L. plantarum y L. delbrueckii fueron de 4,1 x 107 y 4,5 x 105 UFC/mL. Mientras que L. casei no sobrevivió al pH bajo y a las condiciones de la matriz. Champagne y Gardner (2008) evaluaron la capacidad de supervivencia de nueve cepas de lactobacilos (L. acidophilus LB2, LB3 y LB45, L. brevis LB6, L. rhamnosus LB11y LB24, L. fermentum LB32, L. plantarum LB42 y L. reuteri LB38) inoculados en una bebida de frutas comercial (Oasis Health Break: piña, manzana, naranja, pera, uva, maracuyá y limón; purés: melocotón, fresa, mango y kiwi) almacenada a 4,0°C durante un máximo de 80 días. El inóculo inicial fue de aproximadamente 107 UFC/mL. Las especies con mayor capacidad de supervivencia fueron L. plantarum LB42, L. reuteri LB38, L. fermentum LB32 y L. rhamnosus LB11 con poblaciones por encima de 106 UFC/mL al cabo de los 80 días. Shah et al. (2010) determinaron la supervivencia de las bacterias probióticas (L. rhamnosus HNOO, B. lactis HNO01 y L. paracasei LPC 37), en un sistema modelo de jugo de frutas. Las bacterias probióticas fueron inoculadas en jugo con varias vitaminas y antioxidantes a una concentración celular de aproximadamente 106 UFC/mL por 6 semanas. Los resultados mostraron el efecto de los antioxidantes en la supervivencia de las BAL con poblaciones de 107 UFC/mL, al cabo de las 6 semanas. Nualkaekul y Charalampopoulos (2011) estudiaron la supervivencia de L. plantarum NCIMB8826 en varios tipos de jugos, como naranja, pomelo, grosella negra, piña, granada, arándano y jugo de limón; desarrollando un modelo matemático que describe la dependencia de pH, ácido cítrico y ácido ascórbico. La concentración celular inicial fue de aproximadamente 106 UFC/mL y las soluciones preparadas fueron almacenadas a 4,0°C durante 6 semanas. El modelo obtenido predijo la supervivencia de las células en naranja, grosella negra y piña; sin embargo, no lo hizo en toronja y granada. Teniendo en cuenta los resultados de los análisis de la composición de los zumos y el modelo desarollado, los autores dedujeron que en ciertos jugos, otros compuestos parecen proteger a las células durante el almacenamiento, siendo probablemente las proteínas y fibra dietética, las principalmente asociadas. Moussavi y Adams, (2010) inocularon en jugo de granada, cuatro cepas de bacterias lácticas: L. plantarum, L.delbruekii, L. paracasei, L. acidophilus. La fermentación se realizó a 30,0°C durante 72 horas. Variables como concentración de la población, pH, acidez titulable, azúcar y metabolismo de los ácidos orgánicos se midieron durante el periodo de fermentación y la viabilidad de todas las cepas se determinó durante el tiempo de almacenamiento a 4,0 °C en 4 semanas. Los resultados indicaron L. plantarum y L. delbruekii mostraron mayor viabilidad durante el tiempo de almacenamiento. Las células viables se mantuvieron en concentraciones aproximadas de 108UFC/mL por 2 semanas, pero dicha concentración disminuyó drásticamente después de 4 semanas. Pereira et aL,(2011) evaluaron la fermentación de jugo de manzana por L. casei NRRL B-442 y determinaron la cantidad de inóculo adecuado y el tiempo de fermentación. Posterior a esto, midieron la viabilidad en el jugo durante 42 días a 4,0°C. Las condiciones óptimas para la producción de jugo de manzana fueron: pH inicial de 6,4, la temperatura de fermentación de 30,0° C, el nivel inoculación de 10' UFC/mL y 16 horas de fermentación. Durante el almacenamiento refrigerado, el conteo celular fue superior a 108 UFC /mL. DiCagno et al. (2011) evaluaron el efecto de W. cibaria, L. plantarum, L. sp. y L. pentosus sobre las propiedades de batidos de fruta (rojo y verde). Aislaron e identificaron las bacterias de mora, ciruela, kiwi, papaya e hinojo. El batido rojo fue preparado a partir de cerezas, tomate, moras y ciruelas pasas; para el verde utilizaron kiwi, hinojo, espinaca y papaya. La inoculación se realizó con poblaciones cercanas a 108 UFC/mL manteniéndose por 30 días a 4,0°C. En el trabajo, se obtuvieron poblaciones finales cercanas a 108 UFC/mL en los dos batidos luego de los 30 días de almacenamiento. Czyzowska et al. (2006 ) evaluaron la influencia de la fermentación láctica de L. paracasei 0916-0923-0920, L. plantarum 0858, L. delbrueckii 0854, L. brevis 0944 en la estabilidad de los colorantes presentes en el jugo de remolacha roja. Como resultado obtuvieron que la fermentación láctica influyó tanto sobre el pigmento rojo como en el amarillo y observaron un aumento de betanidina en los jugos fermentados. Saarela et al. (2009) evaluaron el efecto de la fermentación y la estabilidad de almacenamiento de L. rhamnosus sobre jugo de manzana con ácidos y sales biliares. La inoculación en los jugos de manzana a pH 3,6, 3,4 y 3,2 se realizó con poblaciones de aproximadamente 10' UFC/mL almacenándose durante 6 semanas a 4,0°C. Como resultado obtuvieron que al cabo de las 6 semanas, el jugo que presentó mejor comportamiento en cuanto a la viabilidad celular fue el de pH de 3,6. También se encontró que las células fueron más sensibles al ácido málico en comparación con HCI. Según los autores, la exposición al ácido málico puede resultar útil para evaluar a largo plazo la estabilidad de los preparados probióticos en el jugo de manzana y podría aumentar la estabilidad del microorganismo en el jugo. Un estudio [126] analizó el efecto del recubrimiento multicapa de perlas de alginato sobre la viabilidad de L. plantarum inmovilizado en condiciones gástricas in vitro y durante el almacenamiento en jugo de granada (un jugo altamente ácido) a 4 ° C. Las perlas examinadas estaban sin revestir, con una sola capa o con doble capa de quitosano. Los resultados obtenidos mostraron una mejora en la tasa de supervivencia de las células en el caso de perlas recubiertas de quitosano, bajo solución gástrica simulada (pH 1,5) en comparación con el control (perlas no recubiertas). La fuerte protección del quitosano puede ser el resultado de interacciones electrostáticas entre el quitosano y las perlas de alginato. Este fue el primer estudio que investigó este proceso de doble recubrimiento para la inmovilización de probióticos con el objetivo de aumentar su supervivencia y resistencia, demostrando ser mejor que el proceso de un solo recubrimiento [126]. Además, en un estudio posterior, los mismos autores [68] confirmaron que el uso de perlas de alginato con doble recubrimiento de quitosano produjo una concentración celular de 107 UFC / ml y 105 UFC / ml para L. plantarum y B. longum, respectivamente, Después de 6 semanas de almacenamiento en jugo de granada y jugo de arándano. Por lo tanto, el recubrimiento de quitosano ofreció una protección adicional significativa a la de la matriz de encapsulación en las bacterias durante el almacenamiento de microcápsulas dentro de los productos de jugo. Esto respalda la afirmación de que más de un revestimiento de capa de quitosano es un enfoque prometedor para mejorar la supervivencia de las células probióticas en matrices de alimentos ácidos fuertes [68]. García-Ceja y col. [124] desarrolló un néctar de durazno probiótico mediante la adición de microencapsulado L. acidophilus y L. reuteri en un sistema de alginato-quitosano para una protección eficiente. Los resultados revelaron que las cuencas de alginato-quitosano protegían la viabilidad de los lactobacilos en el néctar de durazno ácido, lo que representa una alternativa sólida para los productos de bebidas funcionales considerando la combinación de dos lactobacilos, por lo que proporciona más beneficios para la salud de los consumidores. Otros productos alimenticios Malmo y col. [116] desarrollaron un soufflé de chocolate probiótico con microencapsulación DSM 17938 de L. reuteri a través de un sistema de alginato recubierto de quitosano, incorporándolo a la matriz de masa antes de hornear a 180 ° C durante 10 min (80 ° C en el núcleo del producto). Los autores informaron un porcentaje de supervivencia del 10% de la población probiótica después de la cocción y solo del 1% para las células libres. Además, el estudio mostró una resistencia significativa de las bacterias microencapsuladas cuando se exponen a altas temperaturas en pruebas de alimentos reales en comparación con las condiciones in vitro, lo que indica una posible capa extraprotectora de las matrices de alimentos en las células probióticas. Talebzadeh y Sharifan [L.] incorporaron con éxito L. acidophilus LA-5 microencapsulada en postres de gelatina probiótica. En comparación con las bacterias libres y las cuentas de alginato, las cuentas de alginato recubiertas de quitosano mostraron una mayor estabilidad física, forma esférica y actividad metabólica en las pruebas de GI. Además, el número de bacterias recubiertas viables mantenidas por encima de 6 log (10) UFC / g después de 42 días de almacenamiento y la gelatina probiótica proporcionó atributos altamente sensoriales. La combinación del recubrimiento de quitosano con microcápsulas de almidón resistente al calcio y al almidón de maíz mediante técnicas de emulsión proporcionó probióticos viables incrementados: L. acidophilus LA-5 y L. casei 431 en panes horneados [128]. Los autores desarrollaron pan simbiótico, a saber, bollos de hamburguesa y pan blanco por adición de inulina. Los resultados mostraron que este sistema de microencapsulación puede usarse para desarrollar productos de panadería probióticos con viabilidad celular mejorada contra condiciones de alta temperatura sin impacto negativo en la textura o el sabor, teniendo en cuenta que los bollos de hamburguesa tenían una tasa de supervivencia de probióticos más alta y L. casei 431 era más resistente a alta temperatura que L. acidophilus LA-5. El estudio más reciente realizado por Farias et al. [129] utilizaron un sistema de microencapsulación de alginato de calcio-quitosano mediante un método de extrusión para incorporar L. rhamnosus ASCC 290 y L. casei ATCC en helado de mombin amarillo. Los autores compararon el comportamiento y la viabilidad de las células libres y encapsuladas dentro de la matriz alimentaria contra el almacenamiento en condiciones de baja temperatura (-18 ° C durante 150 días) y la exposición gastrointestinal. Los resultados revelaron que L. casei libre (−1,64 log) tenía una mayor resistencia a la congelación que L. rhamnosus libre (−1.92 log), mientras que L. rhamnosus y L. casei encapsulados presentaron eficiencias de protección de 73.8% y 79.5%, respectivamente. En la simulación GI, el 86,2% de L. rhamnosus (−0,83 log) y el 84% de L. casei (−1,3 log) estaban protegidos por las cápsulas de alginato-quitosano. Por lo tanto, para preparar el helado de mombin amarillo probiótico, el proceso de encapsulación no es ventajoso para todas las bacterias probióticas, a saber, L. rhamnosus, cuya tasa de supervivencia fue mayor en forma libre que en microencapsulación, pero ventajoso para L. casei. Los hidrocoloides utilizados en la microencapsulación probiótica es un método ampliamente utilizado para mejorar la supervivencia en el helado durante el almacenamiento congelado. El estudio de Zanjani et al. [130] indica que la microencapsulación de probióticos a través de almidones de alginato de calcio, trigo, arroz y maíz con alto contenido de amilosa (Hylon VII) recubiertos con quitosano y PLL aumentó la supervivencia de las bacterias probióticas, a saber, L. casei ATCC 39392 y B. adolescentis ATCC 15703 , en helado después del almacenamiento a -30 ° C durante 100 días. Los recubrimientos de quitosano y PLL aumentaron significativamente la viabilidad celular durante el almacenamiento de helado, así como el tamaño de las microcápsulas. Esto se debe a la estructura integrada de microcápsulas proporcionada por el almidón de nylon. Además, la evaluación sensorial del helado probiótico no indicó un efecto significativo sobre las propiedades organolépticas durante el período de almacenamiento a -30 °. REFERENCIAS Vodnar, D.C.; Socaciu, C. 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