PROCEDIMIENTOS:

Tinción del extendido:

1. Colocar sobre los bordes del lavadero las dos varillas de vidrio.

2. Colocar sobre este soporte de varilla, la serie de láminas con el extendido de

sangre hacia arriba.
3. Cubrir con el colorante fucsina que haya sido filtrada previamente.

4. Calentar suavemente con la llama del mechero de alcohol o con la llama de un

hisopo embebido en alcohol, por debajo de cada lámina portaobjetos, hasta la
emisión de vapores, repitiendo el proceso tres veces. Si el volumen del
colorante disminuye por evaporación, agregar más colorante hasta cubrir el
extendido y dejar enfriar.

5. Lavar con agua

6. Cubrir con decolorante durante 2 minutos (alcohol ácido hasta obtener una
coloración rosa pálido), de ser necesario aumentar un minuto más agregando
decolorante.

7. Lavar con agua

 8. Cubrir con azul de metileno durante 1 minuto

9. Lavar con agua por ambas caras de la lámina

10. Secar al aire

OBSERVACIÓN AL MICROSCOPIO:
La observación microscópica debe cumplir principalmente dos objetivos:
• Determinar si en el extendido hay BAAR (bacilos alcohol ácido resistentes).
• Si los hay, cuantificar aproximadamente la riqueza en bacilos.
Se usa un microscopio con objetivo de l00x de aumento. Antes de usarlo, se debe
colocar una gota de aceite de inmersión sobre el extendido.
En la observación microscópica los BAAR presentan las siguientes características:
Son de color rojo fuerte: destacan sobre un fondo azul.
 Tienen forma recta o como bastoncitos delgados, ligeramente curvos.
 Son muy pequeños (1 - 4 μm).
 Son frecuentemente granulosos.
 Se disponen en grupos de 3 – 10 bacilos que asemejan trozos de hilo o
parecen formas de letras torcidas (con frecuencia se encuentran cerca de los
hilos de fibrina).
En la observación microscópica los BAAR se pueden confundir con:
 Levaduras, que se tiñen más o menos de rojo. Al calentarlas se rompen y
forman grupos de gránulos voluminosos de color rojo.
 Manchas de colorante, cuando el portaobjetos no se ha decolorado
adecuadamente.
 No olvidar que otro bacilo patógeno resistente a los ácidos es el bacilo de la
lepra.

LECTURA:
Es importante tener en cuenta que se considera como campo microscópico
Útil, aquel en el cual se observa elementos celulares de origen bronquial, es
Decir, leucocitos, fibras mucosas y células ciliadas.
L. Observar un mínimo de 100 campos útiles. Hacer un examen completo del primer
portaobjetos empleando el objetivo de 100x, avanzando de izquierda a derecha, con
iluminación máxima y sin filtro de color.
2. Apuntar el número de bacilos observados y el número de campos microscópicos
útiles a observarse, que variará según la cantidad de bacilos que contenga la muestra.

INFORME DE RESULTADOS:

BIBLIOGRAFÍA:
1. Organización Panamericana de la Salud. Manual para el diagnóstico
bacteriológico de la Tuberculosis.Citado el 22 de setiembre de 2020. Disponible
desde: https://files.sld.cu/tuberculosis/files/2009/12/tb-labs-baciloscopia1.pdf
2. Instituto Nacional de Salud. Procedimientos de Laboratorio. Citado el 22 de
setiembre de 2020. Disponible desde: http://repositorio.ins.gob.pe/handle/INS/153