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Rev. Per. Quím. Ing. Quím. Vol. 11 N.º 1, 2008. Págs.

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CARACTERIZACIÓN DE k -CARRAGENANO Y λ -
CARRAGENANO OBTENIDOS A PARTIR DE MACROALGA
Chondracanthus chamissoi Y SU APLICACIÓN EN LA
INDUSTRIA ALIMENTARIA.

Norma Salas de la Torre, C. Córdova C., Laura Lengua C., Dora Bazán G.,
Elvira Becerra V., Edmundo Estrada A., Juana Sandívar R., V. Choque C.

Facultad de Química, Ingeniería Química e Ingeniería Agroindustrial; Facultad de Ciencias


Biológicas
Universidad Nacional Mayor de San Marcos

Resumen:
La explotación de las algas productoras de carragenanos se intensifica a partir de los 80. La obtención
de κ -carragenano y λ -carragenano está en función de la selección adecuada de algas, identificación
correcta de las fases de vida, control de parámetros como temperatura, pH, tiempo, concentración de
soluciones.
El proceso de extracción se basa en: solubilidad en agua caliente e insolubilidad en solventes orgánicos
polares. La fase gametofita es punto de partida para la producción de κ -carragenano y la fase esporofita se
orienta a la producción de λ - carragenano. La capacidad gelificante (κ -carragenano) y el comportamiento
viscosante (λ -carragenano) de los carragenanos son características que se aplican para gelificar o espesar
sistemas acuosos.
La fracción gelificante obtenida se empleó en la formulación de productos lácteos. El κ -carragenano
obtenido en laboratorio reemplazó a Lactogel FL610 y Lactogel PS451 en la formulación de flan y pudín
de excelente consistencia, textura, sabor, color y bajo en contenido de calorías. Puede emplearse como
estabilizante en el procesamiento de néctares en reemplazo de carboximetilcelulosa.
La leche achocolatada elaborada con λ -carragenano confirma que carragenanos provenientes de la fase
de vida tetraspórica imparte mayor viscosidad a las suspensiones.
Palabras clave: Carragenanos, Chondracanthus, Polisacáridos, Fracción gelificante.

Abstract:
The exploitation of algae producing carrageenan are intensified since the 80. Obtaining κ-carrageenan and
λ-carrageenan is a function of the proper selection of algae, correct identification of the stages of life,
control of parameters such as temperature, pH, time, concentration of solutions.
The extraction process is based on: soluble in hot water and insolubility in polar organic solvents.
Gametophyte phase is a starting point for the production of κ-carrageenan and phase sporophitic is geared
to the production of λ - carrageenan. The ability gelling (κ-carrageenan) and performance viscosante (λ-
carrageenan) of carrageenan are characteristics that apply to gelificar or thicken aqueous systems. The
gelling fraction obtained was used in the formulation of dairy products. The κ-carrageenan obtained in the
laboratory replaced Lactogel FL610 and Lactogel PS451 in the formulation of custard pudding and excellent
consistency, texture, flavor, color and low calorie content.It can be used as a stabilizer in the processing of
nectars replacing carboxymethylcellulose. Achocolatada milk produced with λ-carrageenan confirmed that
carrageenan from the stage of life tetraspores imparts a higher viscosity suspensions.
Keywords: Carrageenan, Chondracanthus, Polysaccharides, Fraction gelling.

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I. INTRODUCCIÓN Chondracanthus chamissoi es extraída del


Submareal y exportada, principalmente, a
Las algas marinas se caracterizan por su países asiáticos (Japón) para su transfor-
riqueza en oligoelementos, proteínas, vi- mación y consumo directo.
taminas, iodo, fósforo, potasio, que no son
frecuentes en otros alimentos; pero su gran
riqueza está en los hidrocoloides que posee, II. PARTE EXPERIMENTAL
considerados nutracéuticos.
El proceso de extracción de carragenanos
Las algas rojas contienen polisacáridos se basa en dos propiedades fundamentales
complejos denominados ficocoloides (ca- de los carragenanos:
rragenanos) cuyas propiedades dependen
• Su solubilidad en agua caliente.
en gran medida de los cationes a los que se
asocian, así pueden formar geles firmes en • Su insolubilidad en solventes orgánicos
presencia del catión potasio (k-carragenano) polares.
o fracciones no gelificantes (λ-carragenano)
debido a su alto grado de sulfatación. Las algas Chondracanthus chamissoi con
estructuras reproductivas maduras se re-
Chondracanthus chamissoi, alga rodophyta colectaron del Submareal en la Bahía de
que abunda en la Costa Sur del Pacífico de Paracas por los miembros del grupo de in-
aguas templadas (Bahía de San Nicolás, La- vestigación que encabeza el profesor César
guna Grande, Playa Mendieta, Pisco), de la Córdova, y trasladadas a la Planta Piloto de
que se extrae κ-carragenano, λ-carragena- la Facultad de Química e Ingeniería Química
no, ι-carragenano y μ-carragenano, poseen para ser separadas en sus fases de vida:
propiedades antivirales, antilipogénicas e
• Fase gametofito femenino,
hipolipemiantes, según diversos autores; así
Baba y colaboradores [3] lograron inhibir la • Fase gametofito masculino,
replicación de algunos virus en dextran sulfa- • Fase tetraspórica,
to; después, Fuertes C. [7] propone que todo
polisacárido sulfatado tiene efectos similares • Cuarto grupo (mezcla de las fases), 4to G.
o superiores frente a diversos virus con una
ventaja manifiesta para los polisacáridos Etapa de Preparación de las Algas
naturales. Posteriormente, se ensaya con
Las algas clasificadas en sus fases de vida
la fracción soluble λ-carragenano extraída
son lavadas para remover materia extraña,
de Chondracanthus chamissoi en su fase
y enjuagadas repetidamente con agua des-
femenina y tetraspórica, y se observa que
tilada. Posteriormente, se somete a secado
posee gran actividad inhibitoria de la repli-
hasta peso constante y por fases. Se proce-
cación viral del virus de inmunodeficiencia
dió luego a molienda grosera.
adquirida, VIH.
Las algas molidas son sometidas a hi-
La fracción insoluble gametofita κ-carragena-
dratación con agua destilada y agitación
no, muestra menos actividad inhibitoria viral.
constante. Se enjuagó repetidamente para
En el Perú no existe industria procesadora extraer pigmentos y sales, así tenemos las
de carragenanos, siendo importada de preparadas para la extracción.
Estados Unidos de Norteamérica, Japón,
Francia, Canadá, Dinamarca y Chile. Etapa de Extracción de κ-carragenano
(Tratamiento Alcalino en Frío)
En el Perú, existen tres empresas que se de-
dican a la extracción y comercialización del Para el proceso de extracción, se ha toma-
alga fresca, refrigerada, congelada y seca; do el método modificado de Craige y Leigh
éstas son: Crosland Técnica S.A., Peruvian (1978), siendo adaptado con algunas varian-
Seaweeds S.R.L. y Vidal Vidal Elio. tes por la responsable del proyecto.

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Las algas preparadas son tratadas con hi- Etapa de Fraccionamiento


dróxido de potasio al 6% P/P con agitación
vigorosa para promover la extracción total El carragenano semi refinado es hidratado
de polisacárido. Deberán permanecer en la con agua destilada y se deja en reposo por
solución alcalina durante 24 horas. Evacuar una hora. Luego se lleva a baño maría a
parte de la solución alcalina dejando un 80 °C durante dos horas. Luego separar
remanente que cubra solamente las algas las fases por filtración al vacío. La fracción
por otro tiempo igual. gelificante es insoluble y es retenido en el
filtro, esta fracción es tratada con cloruro
Se retiran las algas de la solución alcalina y de potasio al 0,20% P/P y posteriormente
se observa el agua remanente, presenta un se extiende en bandejas de acero inoxida-
matiz amarillo intenso. ble para llevarla a congelación. Congelar y
descongelar (2 veces). Secar en estufa de
Seguidamente, se colocan las algas en sa- 42 - 45 °C por 24 horas, aproximadamente.
cos de muselina o nylon de doble tramo y se El polvo obtenido de color blanco debe
sumergen en agua destilada, repetidamente, pesarse para calcular el rendimiento de
y se deja por 12 horas. κ-carragenano.
Estirar las algas en forma uniforme en ban- Por otro lado, el filtrado (fracción no gelifican-
dejas de acero inoxidable y llevar a congela- te), es tratada con isopropanol coagulando
ción por 12 horas y descongelarlas. Repetir completamente. Esta fracción es extendida
este paso dos veces. en bandejas de acero inoxidable y llevadas a
Llevar a estufa de 42 - 45 °C hasta peso secado a 45 ºC hasta peso constante. Pesar
constante. Pesar el carragenano semi re- el λ-carragenano para efectos de hallar el
finado. rendimiento.

Algas rojas (Chondracanthus chamissoi


Colocar muestras de algas preparadas en
400 ml de KOH al 6% P/P (24h)
Separación de las algas de fase de
vida gametofítica de las esporofitas
Prueba con resorcinol - acetal Remover la solución alcalina y colocar las
algas en sacos de muselina, enjuagar
repetidamente hasta neutralizar (24h)
Alga de Fase de vida gametofita

Estirar las algas en bandejas uniformemente y


llevadas a congelación
Secado del alga (5g, aprox.)
T: 60ºC

Congelar y descongelar (2 veces)


Colocar algas en 400 ml de H2O destilada (1h)

Secar en estufa de 42-45 ºC, hasta peso constante


Lavar las algas repetidamente

Pesar carragenano semirrefinado


Alga preparada

Gráfico N.°1. Etapa de Preparación de las Gráfico N.°2. Etapa de Extracción de κ-carra-
Algas. genano.

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Carragenano semirrefinado + 500 ml de


agua destilada, 1h

Llevar solución a baño María


T: 80 ºC, t=2h

Separar la fracción gelificante de la no


gelificante por filtración al vacío

Carragenano insoluble Filtrado (fracción gelificante)


+ +
KCL al 0.2% (Fracción gelificante) Isopropanol

Congelar y cortar en tiras Gelificación completa

Congelar y descongelar Vaciado uniforme en bandejas de


(2 veces) acero inoxidable

Secar en estufa a Secado de 42-45 ºC


42-45 ºC hasta peso constante

Pesar y Molturar Pesado

K-carragenano refinado Molturado

-carragenano refinado

Gráfico N.°3. Etapa de Fraccionamiento.

III. RESULTADOS

TABLA N.° 1: Rendimiento de carragenano semi refinado

PESO CARRAGENANO RENDIMIENTO


MUESTRA PESO DE MUESTRA
SEMIRREFINADO (%)

N° 1 (♀) 5,000 g. 2,6213 52,4


N° 2 (♂) 5,000 2,2923 45,8
N° 3 ( ) 4,6240 3,0383 65,7
N° 4 (4 G)
to
5,000 1,9109 38,2

TABLA N.° 2: Peso de κ-carragenano y λ-carragenano

PESO DE PESO carragenano PESO PESO


MUESTRA
MUESTRA SEMIREFINADO κ-carragenano λ-carragenano

N° 1 (♀) 5,000 g. 2,6213 1,8138 0,8075


N° 2 (♂) 5,000 g. 2,2923 1,7690 0,5233
N° 3 ( ) 4,6240 3,0383 0,9445 2,0938
N° 4 (4 G)
to
5,000 1,9109 1,1475 0,7633

TABLA N. ° 3: Rendimiento de κ-carragenano

PESO RENDIMIENTO
MUESTRA PESO MUESTRA
κ-carragenano (%)

N° 1 (♀) 5,000 g. 1,8138 36.2


N° 2 (♂) 5,000 g. 1,7690 35.4
N° 3 ( ) 4,6240 0,9445 20.4
N° 4 (4 G) to
5,000 1,1475 23.0

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TABLA N. ° 4: Rendimiento de λ-carragenano

PESO RENDIMIENTO
MUESTRA PESO MUESTRA
λ-carragenano (%)

N° 1 (♀) 5,000 g. 0.8075 16.15


N° 2 (♂) 5,000 g. 0.5233 10.5
N° 3 ( ) 4,6240 2.0938 45.3
N° 4 (4 G)
to
5,000 0.7633 15.2

CARACTERIZACIÓN DE κ Y λ CARRA- La fracción gelificante es capturada en el


GENANOS filtro y tratada con cloruro de potasio formán-
dose el gel consistente. El mecanismo de
La etapa de caracterización de κ y λ carrage- gelificación se presenta porque las molécu-
nanos se ha efectuado empleando métodos las de carragenano desarrollan estructuras
de análisis instrumental que se indican a helicoidales que reaccionan entre sí creando
continuación: una red tridimensional.

1. MÉTODO DE ANÁLISIS FÍSICO-QUÍMI- De la Tabla N.º 3, observamos que el mayor


COS rendimiento en k-carragenano presenta la
muestra que corresponde a fase gametofito
• Determinación de la viscosidad de los
femenino (36,2%) seguida de la muestra de
carragenanos por el método Stormer o
fase gametofito masculino (35,4%).
Brookfield; nos sirven para medir visco-
sidad y la consistencia de los geles. La fracción que pasa a través del filtro,
• Determinación del punto de gelificación. corresponde a la fracción no gelificante,
siendo tratada con isopropanol coagulan-
• Determinación del pH. do completamente. De la Tabla N.º 4, se
desprende que el mayor rendimiento de
2. MÉTODO DE ANÁLISIS QUÍMICOS lambda carragenano, corresponde a la fase
• La caracterización de 3,6 anhidroga- esporofítica (45,3%).
lactosa se determinará mediante el
Formulación de productos lácteos a partir de
método espectrofotométrico de Yaphe y
k y λ - carragenanos obtenidos
Arsenault (1965), con las modificaciones
hechas por Craigie y Leigh (1978), em- La tecnología lechera presenta diversas
pleando fructosa como estándar y 1,087 formas de preparación de los productos
como factor de corrección. Lo que nos de- lácteos cuidando su valor nutricional y sus
terminará la presencia de galactanos. propiedades sensoriales.
• El contenido de grupos sulfato se de- Los carragenanos interactúan favorable-
terminará por el método turbidimétrico, mente con las proteínas de la leche; en nues-
empleando cloruro de bario con sulfato tro, caso hemos diseñado la formulación de
de potasio como estándar. tres productos:
• El grado de sulfatación (GS) se calculará – Flan de leche formulado con k-carrage-
mediante la razón No. de moles de sulfato nano obtenido.
/ No. moles de disacáridos. – Pudín de chocolate con k-carragenano
obtenido.
– Leche achocolatada con λ - carragenano
IV. DISCUSIÓN
obtenido.
Fracción gelificante (k-carragenano) y Frac-
El k-carragenano reemplazó a Lactogel FL
ción no gelificante (λ-carragenano)
610 (flan) y Lactogel PS 451 (pudín), obte-

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RESULTADOS DE ANÁLISIS DE ESPECTROS INFRARROJO DE CARRAGENANOS


Equipo FTIR: NICOLET – Modelo “IMPACT 410”
110
100 327-02

849.20
105
95

1639.23

1157.11
100 327-06

1431.91
1471.10
90

1249.98
95
2923.66

1070.25
% Transmittance

% Transmittance
85 90

584.15

451.93
80 85

2970.87
709.78
75 80

3410.06

703.25
929.58

929.81
70 75
3402.98

70

1253.56
65

1158.36
1071.14

1639.09
65
60
60
55
55
4000 3000 2000 1000 4000 3000 2000 1000
Wavenumbers (cm-1) Wavenumbers (cm-1)

Patrón D-fructuosa Comparación de k-carragenano masculino


con D-fructuosa de referencia

100 100 D(-)-fructos e


referencia
% Transmittance

90
95
80
70 90
60
% Transmittance

2938.17
85

867.99
780.56
50 3304.54
40 80

922.13
100 327-02
95 75

819.64
% Transmittance

90

973.27
85 70
80

1258.80
75 65

1421.69
70

1079.30
65 60

1649.05
60
55 55
50
4000 3000 2000 1000 4000 3000 2000 1000
Wavenumbers (cm-1) Wavenumbers (cm-1)

K-carragenano masculino λ –carragenano femenino

RESULTADO DE ANALISIS DE: CARRAGENANOS

Código Resultados
Código Cliente Determinaciones
USAQ (%)
κ - Carragenano
327-01 Sulfatos 13.05
Femenino 15-10-07
κ - Carragenano
327-02 Sulfatos 15.83
Masculino 16-10-07
κ - Carragenano
327-04 Sulfatos 11.95
4to. Grupo 06-07
κ - Carragenano
327-05 Sulfatos 14.66
Femenino 06-07
Lambda Carragenano
327-07 Sulfatos 28.22
Femenino 15-10
Lambda Carragenano
327-09 Sulfatos 20.41
4to. Grupo 06-07
Lambda Carragenano
327-10 Sulfatos 24.56
Masculino 06-07

Métodos: Sulfatos (SO4=): APHA 4500 SO4=E

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PICO 0 PICO 1 PICO 2 PICO 3 PICO 4 PICO 5 PICO 6 PICO 7
CÓDIGO
(cm-1) (cm-1) (cm-1) (cm-1) (cm-1) (cm-1) (cm-1) (cm-1)

K-CARRAGENANO
327-01 3419 2922 2113 1639 1429 1234 1042
Femenino(15/10/07)

K-CARRAGENANO
327-02 3402 2923 2100 1639 1471 1253 1071
Masculino(16/10/07)

K-CARRAGENANO
327-03 3411 2919 2128 1639 1460 1228 1067
Tetra ( /06/07)

K-CARRAGENANO 4to.
327-04 3408 2922 2100 1639 1449 1247 1069
grupo( /06/07)

K-CARRAGENANO
327-05 3403 2921 2100 1638 1462 1232 1071
Femenino ( /06/07)

λ-CARRAGENANO
327-06 3600 3410 2970 2119 1639 1431 1249 1070
Femenino ( /06/07)

λ-CARRAGENANO
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327-07 3600 3417 1637 1432 1075


Femenino(15/10/07)

λ-CARRAGENANO
327-08 3600 3400 1638 1425 1248 1069
Tetra ( /06/07)

λ-CARRAGENANO
327-09 3600 3407 1634 1439 1250 1070
4to.grupo( /06/07)

λ-CARRAGENANO
3�����
27-10 3600 3387 1638 1439 1253 1072
Masculino( /06/07)

D-Fructuosa
Referencia 3402 2942 2121 1640 1060
90 % PUREZA

D-Fructuosa 100 % PUREZA 3304 2938 2120 1649 1079

OH O
OH CH2 Sulfato orgá- Sulfato
GRUPO FUNCIONAL Intramolecular C C
Libre O nico orgánico R - CH2- OH
Asociado

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FORMULACIÓN DE FLAN CON K-CARRAGENANO OBTENIDO

♀ ♂ 4to. GRUPO

Azúcar refinada 29,16 g. 29,16 29,16


K-carragenano 0,715 0,715 0,715
Sal refinada 0,100 0,100 0,10
Etil vainillina 0,018 0,018 0,018
Amarillo N.° 5 0,0008 0,0005 0,0036
Rojo N.° 2 0,0005 0,0004 0,0006

PARÁMETROS DE CONTROL DE FLAN

♂ ♀ 4to. GRUPO

Tiempo de gelificación 31’ 26’ 32’


Densidad 1,0461 1.0458 1.0417
Color MUY BUENO BUENO REGULAR
Sabor BUENO MUY BUENO MUY BUENO

FORMULACIÓN DE PUDÍN DE CHOCOLATE

♂ ♀ 4to. GRUPO

Azúcar refinada 80,0 g 80,0 g 80,0 g


K-carragenano 1,0 1,0 1,0
Maizena 5,0 5,0 5,0
Cocoa 10,0 10,0 10,0
Etil vainillina 0,2 0,2 0,2
Leche 0,600 L 0,600 L 0,600 L

PARÁMETROS DE CONTROL DE PUDÍN DE CHOCOLATE

♂ ♀ 4to. GRUPO

Tiempo de gelificación 6’ 5’ 8’
Color BUENO BUENO REGULAR
Sabor BUENO MUY BUENO BUENO

FORMULACIÓN DE LECHE PARÁMETROS DE CONTROL DE


CHOCOLATADA LECHE CHOCOLATADA

⊗ ATRIBUTOS DE CALIDAD ⊗
Azúcar refinada 80,0 g
Color BUENO
Lambda carragenano 0,5
Sabor MUY BUENO
Cocoa 10,0
Consistencia BUENA
Ácido ascórbico 0,030
Textura BUENA
Etil vainillina 0,20
MUY
Dulzor
Sorbato de potasio 0,24 ACENTUADO
Leche 0,600 L

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niéndose productos de excelente consisten- ponde a la estructura química de dichos


cia y con bajo contenido de calorías. Su pre- compuestos, al haberse caracterizado
paración es simple no requiere de horneado todos los grupos funcionales, tal como
ni tiempos de cocción prolongados. se muestra en el cuadro respectivo.

La leche chocolatada presentó sabor, co- • Del análisis de los grupos sulfato se
lor, textura y consistencia muy buenos que observa que λ - carragenano presenta
confirmaron que la fase tetraspórica genera mayor contenido de grupos sulfato que
un carragenano que le imparte mayor visco- k - carragenano, con lo que se confirma
sidad a las suspensiones. su propiedad viscosante.
• La costa sur del Pacífico (Pisco), de
aguas templadas posee condiciones
V. CONCLUSIONES
climáticas muy especiales para el cultivo
• La identificación de las fases se realizó de estas algas (rodophitas), materia pri-
visualmente y químicamente mediante ma para la producción de hidrocoloides
el método del resorcinol-acetal, que de múltiples aplicaciones en la industria
después del baño maría se observa la alimentaria, farmacéutica, odontológica,
coloración y se concluye: textil, curtiembre.
– Matiz rojo oscuro, corresponde a alga • Baba y colaboradores [3] lograron inhibir
en fase de vida gametofita. la replicación de algunos virus en dex-
– Matiz color rosado, se trata de alga transulfato, posteriormente Fuertes C. [6]
en fase de vida esporofita. propone que todo polisacárido sulfatado
tiene efectos similares o superiores
• Las unidades galactosa sulfatada en frente a diversos virus con una ventaja
posición C6 han sido convertidas en uni- manifiesta para los polisacáridos natu-
dades 3,6 anhidrogalactosas mediante rales. Posteriormente, se ensaya con
tratamiento alcalino. la fracción soluble lambda carragenano
• De la Tabla N.º 1, se concluye que la fase extraída de Chondracanthus chamissoi
tetraspórica presenta mayor proporción en su fase esporofítica, y se observa
de carragenano semirrefinado y la míni- que posee gran actividad inhibitoria en
ma corresponde al 4to Grupo (mezcla de la replicación viral del VIH.
fases).
• La fracción gelificante se debe a las mo- VI. AGRADECIMIENTOS
léculas de k-carragenano que desarrollan
• Consejo Superior de Investigación de la
estructuras helicoidales que reaccionan
UNMSM
entre sí creando una red tridimensional. En
la Tabla N.º 3, observamos el rendimiento
de k-carragenano que alcanza al 36,2%, VII. REFERENCIAS
para la fase gametofito femenino; y 35,4%,
[1] Bixler H, Kevin Johndro, Falshaw R
para la fase gametofito masculino.
(2001). Kappa-2 carrageenan: Struc-
• La fracción no gelificante (λ - carrage- ture and performance of commercial
nano) alcanza el mayor rendimiento extracts. Performance in two simulated
(45,3%), que corresponde a la fase te- dairy applications. Food Hidrocolloids.
traspórica como se observa en la Tabla pp. 619 - 630.
N.º 4.
[2] Falshaw R, Bixler Hj, Johndro K (2001).
• De los resultados de los análisis in- Structure and performance of com-
frarrojos sobre diez muestras de k y λ mercial kappa-2 carrageenan extracts.
carragenanos se concluye que corres- Food Hidrocolloids. pp. 441 - 452.

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[3] Falshaw R, Bixler Hj, Johndro K (2003). [7] Alama Vallejos E, Aojalla R. Estudio del
Structure and performance of commer- Efecto hipolipemiante de polisacáridos
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