Reporte de laboratorio bioprocesos

Practica de laboratorio Nº 1 y 2
MICROORGANISMO MICROCOCCUS LUTEUS

Angie Daniela Niño Villalobos

Sara Vanessa Rodriguez Blanco
Laura Valentina Baquero Salamanca
Hambra Nicole Ariza Otalora
Vannesa Nonsoque Agudelo
Valentina Talero Garzón

PRIMER ENSAYO

AERÓBICO ESTÁTICO

x 2,94−1,2733 g biomasa
Y = =0,2193
s❑ 10−2,4 g sustrato

Se tendría un rendimiento del 21,93%

AERÓBICO AGITACIÓN
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x 6,28−2,7133333 g biomasa
Y = =0,3985
s❑ 10−1,05 g sustrato
Se tendría un rendimiento del 39,85%

SEGUNDO ENSAYO
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Realice la descripción macroscópica y microscópica de Micrococcus luteus

Es una bacteria que tiene forma esférica (cocos) con un diámetro aproximado de 0.5 – 3.5
micras, microscópicamente se pueden observar en tétradas y en agrupaciones irregulares
de tétradas (grupos de 4). No presentan ni cilios ni flagelos en su superficie. Las colonias
que se observan en los cultivos son circulares y lisos con un color amarillo reluciente u
opaco. La pared celular de estas bacterias está compuesta por peptidoglicano (bacteria
gram-positiva) y un polisacárido de cadena larga, conocido como ácido teichurónico (TUA).
El hábitat primario de estas bacterias es la piel de los mamíferos.

¿Qué caracteriza a una

fermentación batch/discontinua?

Se caracteriza por tener ciclos de carga y descarga, es usado para volúmenes de

producción pequeños, ofrece ventajas como el manejo de instrumentación y control
sencilla,la composición cambia con el tiempo, sin embargo en un tiempo (t) la composición
es constante en toda la mezcla (mezcla perfecta), el volumen permanece constante (no hay
entradas ni salidas) y las condiciones como el pH, temperatura, presión, entre otros son
solamente controladas por el operador. El proceso finaliza cuando todo el sustrato es
consumido por la biomasa, tiene ciertas desventajas pues no ofrece estabilidad de la
composición de los productos y tiene muchas etapas en su ciclo de operación.

Cuáles son las condiciones óptimas de crecimiento para Micrococcus luteus

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Este microorganismo es mesófilo, donde su temperatura óptima de crecimiento es de 30°C;
aeróbicas estrictamente. Su pH se encuentra en un rango de 6.5-7.5, es decir, el
microorganismo es neutrófilo.

Cuáles son las principales rutas metabólicas por las que Micrococcus luteus puede
obtener energía a partir de la glucosa.
● Glucólisis

Según la información A partir de la oxidación de la glucosa, cuáles podrían ser los

productos y subproductos?
● Como producto se obtiene piruvato dos moléculas de ATP
● Como subproducto se obtiene dos moléculas de NADH

Según el punto anterior clasifique el microorganismo metabólicamente y según pH y

temperatura.

❏ Clasificacion metabolica:
● según fuente de carbono: Heterótrofo
● según fuente de energía: Quimioorganótrofo
❏ pH: Neutrófilo
❏ Temperatura: Mesófilo
Organismo aerobio de tipo facultativo

Qué implicaciones tiene sobre el metabolismo celular, el hecho de agitar

continuamente la fermentación

En el reactor la agitación genera una mezcla homogénea y aumenta la velocidad de

transferencia de masa y calor dentro del mismo. Una adecuada velocidad de agitación da
lugar al aumento de la productividad del proceso además que favorece la suspensión de
sólidos, evitando la precipitación de los mismos. Debe evitarse altas tasas de agitación
para prevenir daño en la estructura celular.

En el caso de procesos microbianos el mezclado del fluido afecta la fisiología celular y la

producción de metabolitos; sin embargo en el aumento de escala, la eficiencia del mezclado
tiende a disminuir debido a la necesidad de aumentar las velocidades de agitación-
aireación.
Pero la sensibilidad de las células vegetales a los esfuerzos cortantes impiden este
incremento lo que puede generar la sedimentación celular, disminuir el crecimiento celular y
al mismo tiempo la productividad del proceso.
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De igual manera una agitación inadecuada va a provocar implicaciones en el
microorganismo provocado un estrés hidrodinámico el cual puede llegar a causar daños
celulares o en algunos casos llegar a la muerte de este.

Compare los rendimientos globales Yxs para las fermentaciones del ensayo 1, cómo
podría explicar el flujo de carbono en cada fermentación.

El rendimiento para la fermentación agitación resultó ser mayor que la de estática, esta
diferencia se puede argumentar que en la producción de biomasa, y tal como se muestra en
la tabla de resultados se obtiene mayor cantidad de biomasa. Esto también se debe a que
en una fermentación de agitación el proceso tiene mayor cantidad de oxígeno y esto mejora
la dispersión de oxígeno en la dispersión de nutrientes, pH, la homogeneización y entre
otros, es decir, que esto permite que la distribución de biomasa sea mucho mejor y esto
hace que el microorganismo establezca de mejor forma su ruta metabólica, dicho de otra
manera, la diferencia de los rendimientos globales está netamente relacionado por las rutas
metabólicas que realiza el microorganismo, teniendo en cuenta si tiene mayor cantidad de
oxígeno o no, es decir con agitación o estática. Hay que aclarar que en la estática también
hay presencia de oxígeno sino que en menor cantidad.

Cuál de los dos métodos de cuantificación de biomasa, recomendaría.

Están los métodos por cuantificación tales como peso seco, y espectrofotometría (también
descrita como densidad óptica o absorbancia a 600 nm). Ambas cuantifican las unidades de
la biomasa en una muestra, las diferencias radican en aspectos como que por ejemplo, en
la densidad óptica se ha demostrado que soluciones diluidas, tienen casi la misma
absorbancia por unidad de concentración de peso seco. Esto demuestra una relación
directamente proporcional, las ventajas de eso presentan que, se puede trabajar en rangos
de luz visibles y el rango ultravioleta, lo que indica a su vez es que se trabajan en este
método densidades de grandes rangos de altas densidades microbianas hasta las más
bajas, de microorganismos de bajos tamaños (unidades nanométricas).

En el peso seco, es un método común cuando se tienen grandes volúmenes. Aquí se

considera que en el secado de la biomasa se pierden componentes volátiles pueden
perderse y así mismo existir la degradación de la biomasa. También pueden presentarse
propiedades higroscópicas de la célula así que los errores por la absorción de humedad
atmosférica puede aumentar el peso de la biomasa.
Por los volúmenes del caso de estudio, es mas recomendable usar la cuantificación por
espectrofotometría ya que la concentración de biomasa al realizar la disolución de las
muestras patrón, esta se puede ver severamente afectada en el haz de luz ya que la
presencia del microorganismo puede ser demasiado baja para que la máquina lo detecte.
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Compare el primer y segundo ensayo y discuta.(TENGA EN CUENTA LAS
CONDICIONES EXPERIMENTALES DE CADA UNO)

Los resultados de ambos ensayos se verán afectados en primer lugar porque las
concentraciones iniciales del sustrato en cada ensayo son diferentes, por lo tanto, si
tenemos en consideración que una mayor cantidad de sustrato indicará un mayor
crecimiento de la biomasa en el ensayo correspondiente, además, se demuestra que en un
cultivo microbiano con bacterias aerobias la producción de la biomasa se ve beneficiada por
factores como la agitación, ya que la distribución del oxígeno disponible en el reactor será
mejor, facilitando el metabolismo celular y la fosforilación oxidativa.

Se podrían realizar comparaciones sobre el crecimiento si en el ensayo 1 se tuvieran las

condiciones punto a punto en el tiempo, para poder realizar la comparación de la
absorbancia vs. la espectrofotometría en ambos, aunque según la teoría de Brock en
microbiología, la absorbancia relacionada a la concentración indica que el grado Brix que
son las unidades de medida son directamente equivalentes al gramo de peso seco, esto
indica que, ambos ensayos son efectivos, pero el ensayo número dos presenta un
comportamiento en el cual antes de la hora 12 ya el microorganismo se encuentra en fase
exponencial. Así que la producción de masa será mayor, mientras que en el ensayo uno
esto no es demostrable, pero el porcentaje de peso seco es menor.
Esto demuestra actitudes como que la afinidad del microorganismo por el sustrato es
mayor, y que la fase de adaptación es corta

CONCLUSIONES

1. El rendimiento con agitación da mucho mayor debido a que hay una mejor
distribución de oxígeno y al estar en constante mezclado se encuentran en las
mejores condiciones a diferencia del estático que no tiene condiciones favorables,
esto se ve reflejado en el cálculo de rendimiento anteriormente mostrado.

2. Se deben asegurar condiciones óptimas como pH, temperatura, agitación para

obtener y favorecer a que se obtenga un máximo rendimiento. El estudio de estas
condiciones determina el rendimiento probable del estudio, además considerar
factores como concentración de sustrato, afinidad con el sustrato y el tiempo de
adaptación a las condiciones de crecimiento.

3. Como condiciones óptimas de crecimiento para este microorganismo, debe

asegurarse una temperatura de 30°C y un pH entre 6.5-7.5.

4. En el segundo ensayo no se presenta una fase de adaptación tan larga sin embargo
la fase exponencial es larga igual que la estacionaria lo que evidentemente se ve
reflejado en su rendimiento.Esto influido en la velocidad de crecimiento.

5. Se pudo observar que el rendimiento para la fermentación en estado de agitación

fue mayor que en estado estático debido a que al agitar la mezcla a velocidad de
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transferencia de masa y calor lo cual proporciona una producción de biomasa
favorable.

BIBLIOGRAFÍA

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