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DE ÁCIDOS CARBOXÍLICOS
Y CARBOHIDRATOS MEDIANTE GC-MS
NANCY PÉREZ RODRÍGUEZ* , PERLA ELIZONDO MARTÍNEZ* , BLANCA NÁJERA MARTÍNEZ*
L
os ácidos carboxílicos y carbohidra- La cromatografía de gases es una de las técni-
tos están presentes en la naturaleza cas analíticas más ampliamente utilizadas y, en com-
y en productos comerciales que ac- binación con el detector de espectrometría de ma-
tualmente se encuentran en el mer- sas, constituye una herramienta esencial en el aná-
cado. lisis de muestras orgánicas complejas.
Las fórmulas comerciales que en su composición Esta técnica (GC-MS) presenta las ventajas de
contienen una mezcla de estos compuestos son ser sensible y específica en la identificación, confir-
ampliamente utilizados en cosmetología, dermato- mación y cuantificación de sustancias, además de
logía1 y agroquímicos, entre otros, los cuales, por ser de uso común en los laboratorios industriales.
su naturaleza, presentan dificultades para su análi- En el presente trabajo, desarrollado en conjunto
sis y cuantificación. con una empresa privada,8 se efectuó el análisis de
Estas mezclas son el resultado de procesos quí- un hidrolizado de la cáscara de arroz, que contie-
micos, como la hidrólisis, o de procesos microbio- ne dentro de su composición ácidos carboxílicos y
lógicos, como la fermentación de productos natu- carbohidratos, utilizando como técnica analítica la
rales;2 en ambos casos se obtiene una mezcla com- cromatografía de gases capilar acoplada a la es-
pleja, que por provenir de un producto natural no pectrometría de masas.
siempre presenta la misma composición química. Previo al análisis de la muestra se aplicó una
Aplicar un método analítico adecuado para ca- técnica de derivatización, utilizando agentes
racterizar y cuantificar eficientemente esos produc- sililantes, posteriormente los compuestos de interés
tos es de gran utilidad, permite relacionar el proce- fueron separados por cromatografía de gases y
so con el producto resultante, además de poder analizados por espectrometría de masas. Para com-
certificar su composición química al pretender co- pensar los efectos de matriz y las variaciones en el
mercializarlos, ya que sería una garantía de cali- volumen de inyección se utilizaron las técnicas de
dad del producto, por consecuencia, la confianza estándar interno y adición de estándar.
en el uso del mismo.
Actualmente, el uso de técnicas acopladas como Metodología
la cromatografía de gases capilar-espectrometría de
masas (GC-MS),3,11,13 cromatografía de líquidos de La metodología utilizada para el análisis de la mues-
alta resolución-espectrometría de masas (HPLC/ tra fue desarrollada en cooperación con la empre-
MS)12 y la cromatografía de exclusión iónica (IEC),4-7 sa Proquimsa.8
entre otras, constituyen una herramienta muy Para el análisis se requiere aplicar la técnica
poderosa en la caracterización y cuantificación de
mezclas de compuestos orgánicos en diferentes
matrices. *Facultad de Ciencias Químicas, UANL.
diciones óptimas de operación (como se muestra El análisis cromatográfico mostró una separa-
en la tabla I), obteniéndose una separación com- ción completa de todos los picos generados por los
pleta. ácidos carboxílicos y carbohidratos en menos de
De los datos experimentales obtenidos por cro- 32 minutos. Los tiempos de retención son mostra-
matografía se calcularon los factores de respuesta dos en la tabla II.
de cada uno de los compuestos, relacionando la Para comprobar la separación de cada uno de
altura de cada pico con el estándar interno para los componentes se usaron los espectros de masas
determinar las concentraciones de los analitos pre- de la biblioteca NBS con el método TIC (Tentatively
sentes en la muestra. Identified Compound).
Para la identificación de ácido glicólico, ácido
Resultados y discusión glicérico, ácido glutárico, arabinosa, xilosa, ácido
xilárico, manosa, galactosa y glucosa se utilizaron
La concentración de cada uno de los compuestos estándares; y para el ácido xilónico y ácido
en la solución patrón se estableció en base a las arabónico se utilizó la biblioteca NBS con TIC
concentraciones esperadas de los analitos en la (Tentatively Identified Compound), comparando los
muestra, de acuerdo con el análisis previo realiza- espectros de masas obtenidos. En la figura 1 se
do por Proquimsa.8 muestra el espectro de masas del ácido xilárico, uno
La separación de los seis ácidos carboxílicos, de los compuestos analizados.
cinco carbohidratos y dos estándares internos se El análisis del hidrolizado de la cáscara de arroz
logró bajo las condiciones óptimas de operación, se realizó cinco veces (N=5), los resultados se mues-
mismas que se muestran en la tabla I. tran en la tabla III.
Al ser comparados los cromatogramas de los En los cromatogramas obtenidos de la muestra
estándares puros con los del hidrolizado de la cás- no se observaron las señales correspondientes a los
cara de arroz, se observó la influencia de la matriz, ácidos xilónico y arabónico, por lo que se asume
por lo que fue necesario mezclarlos con la muestra que su concentración se encuentra por debajo de
antes de ser derivatizados. 0.01% P/V, de acuerdo a los estándares prepara-
Conclusiones
Tabla III. Resultados del análisis del hidrolizado de Los ácidos α-hidroxicarboxílicos y carbohidratos son
cáscara de arroz. compuestos que se encuentran en la naturaleza, o
que se pueden generar durante procesos como la
Compuesto Concentración Desviación hidrólisis o fermentación de productos de origen
natural. En este trabajo se presenta un método para
(% P/V) estándar relativa
el análisis de seis ácidos carboxílicos y cinco carbo-
*LC del 95% para N=5 hidratos en un hidrolizado de cáscara de arroz,
mediante cromatografía de gases capilar con de-
tector de espectrometría de masas (GC/MS). Se es-
Ácido glicólico 0.099±0.006 0.0054
tablecieron las condiciones óptimas de operación
Ácido glicérico 0.11±0.02 0.0191 del equipo para una separación completa de los
Ácido glutárico 0.27±0.05 0.0473 compuestos en el menor tiempo posible, permitién-
donos su cuantificación mediante la técnica de adi-
Arabinosa 0.60±0.08 0.0707
ción de estándar-estándar interno. Los estándares y
Xilosa 2.84±0.13 0.1058 muestra fueron derivatizados para poder ser anali-
—
zados por GC/MS, se obtuvieron concentraciones
Ácido xilónico < 0.01
que fluctúan entre los 0.099 y 2.84% P/V.
Ácido arabónico < 0.01 —
found in natural products, or generated through pro- Anal. Chem. 357, 321-325 (1997).
cesses such as the hydrolysis or fermentation of natu- 5. Isher, K., Chodura, A., Kotalik, J., Bieniek, D.,
ral products. This work presents an analytical method Kettrup,A. Analysis of aliphatic carboxylic acids
for carboxylic acid and carbohydrates on rice peel and amino acids in effluents of landfills,
via Capillary Gas Chromatography coupled Mass composition plants and fermentation plants by
Spectrometry (GC/MS). Optimal GC/MS operational ion-exclusion and ion exchange
conditions were established for a complete com- chromatography. J. Chromatogr. A 770, 229-
pound separation in the least possible time, allow- 241 (1997).
ing quantitative measurements using the standard 6. Ewa Dabek, Katherine Keppel Jones. The
addition-internal technique. The standards and Analysis of Low Molecular Weight Carboxylic
samples were analyzed by CGC/MS and the results Acids by CE with Indirect UV Detection. LC-GC
are presented, following the analytical technique 18(9), 950-967, (2000).
developed. 7. Mongay, C., Pastor, A., Olmos, C.
Determination of carboxylic acids and inorganic
Keywords: α-Carboxylic acids, Carbohydrates, anions in wines by ion exchange
Silanytation, Peel rice, GC/MS. chromatography. J. Chromatog. 736(1-2),
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