Universidad Autónoma de Chihuahua

Facultad de medicina y ciencias biomédicas

Medicina Genómica

Tarea 1.- Electroforesis

Alumno: David Orlando Chávez Sotelo

Matrícula: 309383
Grupo: 6-1
Docente: Dra. Irene Leal Solis
Viernes 24 de abril de 2020
Actividades relativas a análisis de ADN, ARN y proteínas (Electroforesis)
 1.- Electroforesis

Es una técnica utilizada para fraccionar proteínas que depende de la capacidad de

moléculas cargadas para migrar cuando se colocan en un campo eléctrico. También
se utiliza para separar ácidos nucleicos con masa molecular diferente (longitud del
nucleótido). Básicamente es una técnica que separa moléculas de una mezcla
haciéndolas migrar bajo la influencia de un campo eléctrico.

2.- Tipo de soporte utilizado en la electroforesis y origen

- Los diferentes tipos de soportes se clasifican en dos grupos

● Soportes no restrictivos (Tipo I): El tamaño de poro no opone

impedimento al paso de las moléculas. El agar es el ejemplo más
representativo y se obtiene a partir de algas marinas y está formado por dos
tipos de polisacáridos: la agarosa y la agaropectina; ésta última posee varios
grupos cargados (grupos carboxilo y sulfato), lo que la hacen inadecuada
como soporte electroforético por el efecto electroendosmótico que produce.
● Soportes restrictivos (Tipo II): El tamaño de poro opone resistencia al paso
de las moléculas. El ejemplo característico son los geles de poliacrilamida,
que no sólo evitan la convección y minimizan la difusión, sino que además
participan en el proceso de separación. Estos geles son medios porosos en
los que el tamaño de poro es similar al de las proteínas, de tal modo que
existe un efecto de tamizado molecular y la separación electroforética
depende de la densidad de carga de las moléculas y de su tamaño.

Soportes:

1.- Gel de poliacrilamida: Compuesto por polímeros de una pequeña molécula

orgánica (acrilamida) que establece enlaces cruzados para formar un tamiz
molecular.

2.- Gel de poliacrilamida (PAGE) en presencia del detergente con carga

negativa sulfato de dodecilo sódico (SDS): Es un detergente aniónico que se
une a las proteínas, desnaturalizándolas en una conformación extendida recubierta
de moléculas de SDS. Como consecuencia, el tamaño de la molécula de proteína es
directamente proporcional a su longitud en aminoácidos y su carga queda
enmascarada por la mayor carga del SDS que la recubre, que es también
proporcional a la longitud. Por lo tanto, la movilidad electroforética de la proteína
depende exclusivamente de su masa molecular.

3.- Agarosa: Es un polisacárido, producto purificado de algas (composición similar

al agar-agar). Se disuelve a temperaturas de 50-60°C y al enfriar solidifica formando
un gel, de alta porosidad.

Otros:

1.- Papel: Sencillo, pero con elevada adsorción debido a los grupos hidroxilo (OH)
de la celulosa.

2.- Acetato de celulosa: Los grupos –OH están acetilados, lo que reduce la
adsorción; baja tinción de fondo; es posible transparentarla o disolverla para
detectar y recuperar, respectivamente, los componentes separados.

3.- Almidón: Pasta de almidón cuyos granos se han disgregado en un tampón

caliente (se hinchan). Actualmente se utiliza poco y ha sido sustituido por la
poliacrilamida.

3.- Esquema del desplazamiento de las macromoléculas en un gel, señalando

los polos (cátodo y ánodo).

4.- Tipos de membranas utilizadas en el análisis de ADN

 ● Membrana de nitrocelulosa
● Membrana de nylon
● Matriz porosa: electroforesis en gel
● En disolución: electroforesis libre

Bibliografía:

● Flash Card Machine, LLC. (2011). Biología Celular y Molecular. Recuperado:

24 de abril de 2020, de Facultad de Medicina, Universidad de Antioquia Sitio
web: https://www.flashcardmachine.com/biolog-a-celularymolecular.html
● Ana María M. A., Jesus V. J. N. (2016). Electroforesis desnaturalizante en
geles de poliacrilamida. Análisis de proteínas de hojas de Arabidopsis
thaliana. Recuperado: 24 de abril de 2020, de Departamento de Bioquímica y
Biología Molecular, Campus Universitario de Rabanales Sitio web:
https://www.uco.es/dptos/bioquimica-biol-
mol/pdfs/16%20ELECTROFORESIS%20GELES%20PAA.pdf
● Daniela M. S., Lilí Esmeralda G. R. (2006). “Métodos Físico-Químicos en
Biotecnología”. Recuperado: 24 de abril de 2020, de Instituto de
Biotecnología, Universidad Nacional Autónoma de México Sitio web:
http://www.ibt.unam.mx/computo/pdfs/met/plataformas_de_proteomica.pdf