TINCIÓN DE GRAM

Es la tinción universal, única para diferenciar a las bacterias, menos

Micoplasma y Ureaplasma que no se poseen pared celular.

Fue desarrollada por Hans Crhistian Gram a fines del siglo XIX y puede
utilizarse para separar las mayorías de las especies bacterianas en dos
grandes grupos, según si captan el colorante básico, violeta cristal
(bacterias Gram positivas), o pierden este colorante por lavado con el
decolorante alcohol-cetona (es decir Gram negativas).

El fundamento está en la composición de la pared celular:

La estructura de la pared celular tiene una importancia directa y práctica
para los microbiólogos debido a que el tipo de estructura de la pared
celular es responsable de la reacción frente a la coloración de Gram.

En las bacterias Gram positivas, el cristal violeta se fija a la pared celular y

con la adición de licor de Gram se produce un complejo cristal violeta-
yodo que es retenido dentro de la célula y es resistente a la decoloración
de alcohol cetona, este produce una deshidratación de las paredes
gruesas de peptidoglicano y provoca que se cierren los poros de la pared
celular impidiendo que este complejo cristal violeta-yodo salga de la célula
bacteriana.
La capa de peptidoglicano en estas bacterias es gruesa

En las bacterias Gram negativas, el complejo cristal violeta-yodo es

eliminado de la célula por el decolorante que actúa como solvente de
lípidos presente en la membrana externa y la fina capa de peptidoglicano
no evita el pasaje del alcohol-cetona, los poros de la pared aumenta de
tamaño y el complejo cristal violeta-yodo es eliminado, estas decoloradas
se tiñen con el colorante de contraste safranina