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Laboratorio de Numero más probable

Objetivos:

 Analizar el estado los estados de turbidez y presencia de coliformes (E. Coli) en los

tubos de ensayo mediante las pruebas dadas.

 Realizar el experimento con éxito, registrando los datos para poder analizar y llegar

a una conclusión sobre presencia de microorganismos en la comida.


Prueba presuntiva y prueba confirmativa

Prueba presuntiva:

Caldo lactosado:

Se utiliza para el cultivo de Salmonella y bacterias coliformes, se utiliza con frecuencia

como un medio de pre-enriquecimiento cuando se analizan alimentos y productos lácteos

para Salmonella spp. En alimentos secos o procesados, las especies de Salmonella pueden

tener lesiones subletales y estar presentes en cantidades bajas.


Materiales

 11 tubos de ensayo

 1 matraz

 1 varilla o mezclador

 Mechero

 Asa

 Lechuga

 Agua Destilada

Diagrama de Flujo

Prueba Presuntiva:

 se escogió un alimento para la prueba de presencias de bacterias coliformes donde el grupo

escogió la lechuga, semi limpia.

 El alimento se puso en un recipiente de agua destilada, donde se tenía que mezclar para que

este disolviera las baterías en el agua.

 así se procedió a hacer la prueba presuntiva.

 donde se tomaron 9 tubos de ensayo donde estos ya tenían 9ml de caldo lacteado

 de la muestra del alimento, se tomaba 1ml y se agregaba a la serie 1 el cual se le llamaba

10^-1, en tres tubos de ensayo, también en un cuarto tubo.

 del cuarto tubo de ensayo de la serie 1, se tomaba 1ml para cada tubo de ensayo de la serie

2 el cual se le llamaban 10^-2, esto en cuatro tubos de ensayo.


 del cuarto tubo de ensayo de la serie número 2 o 10^-2, se tomaron 1ml para tres tubos de

ensayo el cual se les llamaba serie 3 o 10^-3

 Después de este procedimiento se incubaban de 42 a 48 horas, porque son fermentantes.

Prueba confirmativa:

 De la prueba presuntiva se tomaban los tubos de ensayo que dieran positivos, es decir

que había presencia de fermentación y burbujas, las cuales daban la presencia de

coliformes presentes en el ambiente, preferiblemente E. Coli.

De los resultados de la prueba presuntiva dieron positivos:

Serie 1: 10 a la -1: las 3

Serie 2: 10 a la -2: las 3

Serie 3: 10 a la -3: ninguna


 Se procedió a las pruebas positivas

 Transferir de 2 a 3 asadas de cada tubo positivo obtenido durante la prueba presuntiva,

a tubos que contiene caldo de bilis verde brillante (brila), con campana de Durham.

 Agitar suavemente los tubos para su homogeneización

 Incubar a 35  2C durante 24 a 48 h..

 Registrar como positivos aquellos tubos en donde se observe turbidez (crecimiento) y

producción de gas después de un período de incubación de 24 a 48 h.

 De las pruebas que se tomaron solo dos dieron positivas y registraron turbidez, las

cuales fueron dos de 10^-1 el tubo 1 y 3


 Se puede ver la turbidez en el borde de la campana Durham, donde se procedió a

hacer la siembra en agar, para ver la bacteria.

NOTA: Por razones del paro no se pudo observar el resultado de batería en nuestro

laboratorio.

Conclusiones

 Por medio del laboratorio se dio la confirmación de presencia de bacterias en

algunos alimentos, y por medio de este método se es más fácil determinar si hay

presencia de E. coli.

 La lechuga tenía presencia de E. coli, por consiguiente la prueba del numero mas

probable fue un éxito.

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