FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD.

CARRERA DE TECNOLOGÍA MÉDICA

ASINATURA QUÍMICA DIAGNÓSTICA

ACTIVIDAD DE LABORATORIO
ANÁLISIS FÍSICO, QUÍMICO Y MICROSCÓPICO DE ORINA 2020
- TEORÍA DEL ANÁLISIS FÍSICO, QUÍMICO Y MICROSCÓPICO DE LA ORINA
- PRESENTACIÓN DE EQUIPAMIENTO PARA ANÁLISIS FÍSICO y QUÍMICO DE ORINA
- OBSERVACIÓN MICROSCÓPICA DE SEDIMENTOS DE ORINA
- ESTANDARIZACIÓN DEL ANÁLISIS DEL SEDIMENTO URINARIO.
- CONTROL DE CALIDAD EN EL ANÁLISIS DE ORINA.

Los estudiantes realizarán las siguientes actividades:

1. Realización de análisis físico y químico de orina

2. Utilización de equipamiento para realización de análisis químico de orina.
3. Realización de sedimentos de orina
4. Observación microscópica e identificación.

ETAPA PREANALÍTICA DEL ANÁLISIS DE ORINA

La etapa pre analítica como en todo examen es una parte importante para una buena realización
del diagnóstico. Las indicaciones previas que se entregan al paciente para el examen de orina son
muy importantes al momento de la obtención de la muestra para evitar pérdidas y contaminación
con microorganismos de la piel o con otros fluidos biológicos. En el caso de la mayoría de las
personas, el análisis de orina se debe realizar en una muestra obtenida a primera hora de la
mañana. En pacientes que se encuentran hospitalizados es responsabilidad del personal del
servicio clínico y de acuerdo con sus manuales de toma de muestra, realizar los procedimientos
necesarios para la obtención de una buena muestra de orina.

Al respecto investigue los diferentes tipos de muestra que se utilizan para realizar el examen de
orina y para qué exámenes se utilizan:

- Orina de primer chorro

- Orina de segundo chorro
- Orina por sonda a permanencia
- Orina por sondeo transitorio
- Orina por punción supra púbica
- Orina por recolector

REALIZACIÓN DE ANÁLISIS FÍSICO Y QUÍMICO DE ORINA:

El análisis físico – químico de la orina, comprende dos etapas una etapa cualitativa y una etapa
semi-cuantitativa.

En la etapa cualitativa, se incluye el aspecto y el color (examen físico)

En la etapa semi-cuantitativa se incluye el examen químico.

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ACTIVIDAD
Los estudiantes realizarán el análisis físico químico de muestras de orina y el examen
microscópico.
Las muestras recolectadas serán analizadas por cada estudiante, realizando el proceso completo
de acuerdo con las instrucciones entregadas.

Procedimiento:
- Se dispone de frascos estériles los cuales serán entregados a cada estudiante para
recolectar muestras de orina. El frasco deberá contener al menos 20 ml de orina.

EXAMEN FÍSICO

- Vaciar 10 ml de orina en un tubo limpio de vidrio, realizar la observación macroscópica

registrando su color y aspecto: ver tabla 3.

El COLOR
Se debe observar en el tubo contrastando con un fondo blanco y se registra en forma
descriptiva. La orina normal tiene un color ámbar (amarillo claro) característico. El color de la
orina depende de los urocromos, que normalmente se encuentran allí presentes, como
porfirinas, bilirrubina y uroeritrina. Colores encontrados en orina, café, anaranjado, pardo,
verde. Es importante destacar que un color diferente al normal no necesariamente indica
enfermedad pues esta situación puede presentarse por algunas drogas o alimentos.

El ASPECTO
Debe observarse contra un fondo negro y opaco, a contraluz. Esto permite iluminar y
contrastar los elementos disueltos o suspendidos que confieran turbidez a la muestra. El
aspecto normal de la orina es transparente o límpido y cualquier variación a este criterio debe
ser analizado y comprobado por estudios complementarios, incluido el examen microscópico.
Muchas causas pueden ser responsables de orinas turbias, ante este hallazgo debe
investigarse la posibilidad de que esté causado por el uso de medios de contraste utilizados en
radiología, de lociones, de talcos y de cremas o estar en presencia de células epiteliales,
mucus, espermatozoides, líquido prostático, materia fecal o menstruación. También se puede
tornar turbia cuando la orina se guarda bajo refrigeración, por precipitación de uratos
amorfos, con una precipitación rosada o con una turbidez blanquecina por fosfatos. La
formación de una pequeña cantidad de espuma, al emitir la orina o sacudir la muestra en un
recipiente, es normal, pero cuando ésta es abundante y persistente se debe sospechar una
proteinuria o la existencia de sales biliares que modifican la tensión superficial. Si en la
muestra existe bilirrubina, la espuma será amarillo verdosa o parda, en tanto que en su
ausencia será ligeramente amarilla. El aspecto turbio (turbidez de la orina) también puede
estar relacionado con piuria, en infecciones masivas bacterianas o por hongos (recuento
microbiano >107/mL), o con lipiduria (lípidos en la orina) en presencia de síndrome nefrótico o
en caso de proteinuria masiva.

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EXAMEN QUÍMICO

El examen químico de la orina se realiza utilizando las cintas de orina suministradas, de acuerdo
con el siguiente procedimiento. Este procedimiento siempre se realiza en una muestra de orina sin
centrifugar. Usted realizará dos lecturas; una lectura visual y una lectura con el equipamiento
disponible.

LECTURA VISUAL
- Vacíe 10 ml de orina en un tubo de centrífuga
- Introduzca la cinta de orina por unos segundos
- Retire la cinta y estile sobre un papel absorbente sin tocar la superficie de la almohadilla
con el papel, evitando que se seque completamente.
- Realice la lectura comparando visualmente cada parámetro con los colores
correspondientes a las almohadillas de la tira reactiva
- Registre sus resultados.
- Repita este procedimiento con cada una de las muestras de orina asignadas.

LECTURA CON EQUIPAMIENTO

Verificación de la calibración:
Con la ayuda del docente realice la verificación de la calibración del equipo lector de cintas
de orina:
Procedimiento:
Encienda el equipo
Espere 10 minutos para que el equipo estabilice temperatura
Extraiga de su envase la cinta de calibración sin tocar sus almohadillas de lectura
Realice la lectura de la cinta de acuerdo a las instrucciones del equipo
Espere la verificación en pantalla y la impresión de la aceptación de la calibración.
Si la calibración no es satisfactoria repita el procedimiento
Si la calibración es aceptada, proceda a analizar las orinas de pacientes
Registre la calibración realizada.

Realización Control de calidad

Procedimiento:
Se dispone de dos controles de calidad para las cintas de orina
Analícelos de acuerdo al procedimiento de las muestras y registre sus resultados.
Evalúe los resultados del control de acuerdo con lo aprendido.

Procesamiento de muestras:
Procedimiento
- Vacíe 10 ml de orina en un tubo de centrífuga
- Introduzca la cinta de orina por unos segundos

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- Retire la cinta y estile sobre un papel absorbente sin tocar la superficie de la almohadilla
con el papel, evitando que se seque completamente.
- Ingrese la identificación del paciente en el equipo
- Coloque, la cinta en el equipo y espere la realización de la lectura automática.
- Registre sus resultados en hoja entregada
- Repita este procedimiento con cada una de las muestras de orina asignadas.

Valores esperados en un paciente sin enfermedad renal:

PRINCIPIO DE LECTURA CINTAS DE ORINA

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EXAMEN MICROSCÓPICO

Centrifugación de la orina:
Para la observación microscópica de la muestra de orina, es necesario centrifugar la muestra a
baja velocidad para conservar la integridad de los elementos figurados presentes en el sedimento
para que no sufran alteraciones debido al aumento de la velocidad de centrifugación. La orina se
debe centrifugar a 400 G, esto es alrededor de 1500 – 2000 rpm por 5 minutos.

Cálculo de la velocidad de centrifugación.

Esta se calcula disponiendo de los datos de Fuerza centrífuga relativa (g) y del radio de la
centrífuga. El radio va a depender de la inclinación de los contenedores del rotor de la centrífuga,
los cuales pueden mantener una inclinación fija o extendida en 180 grados, dependiendo de la
centrífuga, ver figura.
2
Fórmula: G (rcf) = 0.00001118 x radio (cm) x rpm

2. OBSERVACIÓN MICROSCÓPICA

La observación del sedimento urinario puede realizarse de dos maneras:

- Observación entre porta objetos y cubre objetos, de esta forma las células y eritrocitos
observados de informan por campo de mayor aumento, las células y cilindros se informan
por campo de menor aumento.
- Observación por recuento en cámara de neubauer. De esta forma es posible cuantificar
3
los eritrocitos y leucocitos por ul o mm .

Observación entre porta objetos y cubreobjetos

- Centrifugue 10 ml de orina
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- Descarte todo el sobrenadante, dejando solo 1 ml de orina
- Re suspenda el sedimento suavemente
- Coloque 10 ml del sedimento sobre un portaobjetos
- Coloque un cubreobjetos y deje reposar 2 minutos
- Observe al microscopio y realice una primera observación con el objetivo de menor
aumento para observar la presencia de células, cilindros y cristales. Observe unos 20
campos microscópicos para realizar el recuento (se define como un campo microscópico a
la obervación realizada por un profesional en un solo campo)
-

- Para cuantificar leucocitos y eritrocitos realice el recuento con el objetivo de mayor

aumento. Observe unos 20 campos microscópicos para realizar el recuento.
- Informe lo observado junto con el examen químico de la orina

Cuantificación del sedimento urinario:

La cuantificación de la observación microscópica es realizada de la siguiente manera:
CON OBJETIVO DE AUMENTO MENOR: 10x
- Cuantifique la presencia de Células descamativas, cristales y cilindros contando la
presencia en cada campo y contando un total de 10 a 20 campos, que en este caso se
denomina CAMPO DE MENOR AUMENTO

CON OBJETIVO DE AUMENTO MAYOR: 40x

- Cuantifique la presencia de células, leucocitos y bacterias contando la presencia en cada
campo y contando un total de 10 a 20 campos, que en este caso se denomina CAMPO DE
MAYOR AUMENTO

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Cristales de oxalato de calcio Cristales de ácido úrico

VALORES OBSERVADOS EN PACIENTE NORMAL:

SEDIMENTO DE ORINA
Cantidad normal por campo Cuantificación
Células descamativas Escasas +, ++, +++, muy abundantes
Leucocitos (glóbulos blancos) Hombres Hasta 1 0 – 1 por campo
+++, muy abundantes
Mujeres de 1 a 2 0 - 3 por campo
+, ++, +++, muy abundantes
Eritrocitos (hematíes) Hasta 2 0 – 2 por campo
+, ++, +++, muy abundantes
Bacterias Normalmente no se observan +, ++, +++, muy abundantes
bacterias
Cilindros Ausencia o presencia de Describir el tipo de cilindro
escasos cilindros hialinos. por campo de menor
aumento (CMA)
Ejemplo: Cilindros hialinos
0 – 2 por CMA
Cristales Ausencia o presencia de Describir el tipo y la
escasos cristales. presencia
Ejemplo: Cristales de oxalato
de calcio, +, ++, +++, muy
abundantes
Mucus Ausencia +, ++, +++, muy abundante
Otros elementos Ausencia Ejemplo Levaduras
+, ++, +++, muy abundantes
Interpretación:
+ Escaso o escasa cantidad
++ Regular o regular cantidad
+++ Abundante o abundante cantidad (cuando se cuantifican más de 100 elementos por
campo microscópico.

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ELEMENTOS OBSERVADOS EN EL SEDIMENTO URINARIO

La observación microscópica del sedimento urinario consiste en la observación de elementos

celulares y no celulares que conforman la orina. Entre ellos podemos encontrar:

Células: eritrocitos, leucocitos, células descamativas, de transición o tubulares.

Cilindros: hialinos, granulosos, celulares, céreos.
Cristales: de orinas ácidas y alcalinas.
Organismos: parásitos, bacterias, levaduras.
Artefactos: fibras, almidón.

Células del Epitelio Urinario

Células descamativas

Células del epitelio transicional

Células tubulares

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Eritrocitos y leucocitos

Los eritrocitos y leucocitos se informan en número por campo, con aumento 40x, considerando el
rango obtenido en la totalidad de los campos observados (al menos 40). Ej.: 0 a 3, 4 a 7, 30 a 35,
etc.
En hematuria mayor a 0-4 x CAM, se debe observar la muestra con contraste de fases para
determinar el % de dismorfia (N° de eritrocitos dismórficos en 100 eritrocitos totales).

Cilindros:

Cilindros hialinos

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Cilindros eritrocitarios

Cilindros leucocitarios

Cilindros epiteliales

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Cilindros granulosos gruesos y finos

Cilindro granuloso grueso Cilindro granuloso fino

________________________________________________________________________________

Cilindros céreos

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Cilindros grasos o con inclusiones lipídicas – observado con luz polarizada.

ESTANDARIZACIÓN DEL SEDIMENTO URINARIO

Una forma de estandarizar el sedimento urinario es realizar su recuento contando en una cámara
de neubauer los mismos elementos observados en el sedimento.

Observación por recuento en cámara de Neubauer

- Centrifugue 12 ml de orina, retire suavemente el tubo desde la centrífuga, sin mezclar.

- Descarte todo el sobrenadante, dejando solo 1 ml de orina
- Re suspenda el sedimento suavemente
- Arme una cámara de Neubauer colocando un cubre cámara sobre ella.
- Coloque 10 ul del sedimento en el espacio destinado para recuento. Deje reposar unos 2
minutos.
- Observe al microscopio y realice una primera observación con el objetivo de menor
aumento para cuantificar las células y cilindros presentes.
- Para cuantificar leucocitos y eritrocitos realice el recuento con el objetivo de mayor
aumento en los cuadrados externos de la cámara.
- Cuente todos los leucocitos presentes en todos los cuadrados en los 4 extremos del
cuadriculado de la cámara de Neubauer, realice un promedio, multiplique por el factor 10
y divida el resultado obtenido por los ml de orina centrifugada.
- Cuente los eritrocitos presentes en el retículo central del cuadriculado de la cámara de
Neubauer, multiplique por el factor 10 y divida el resultado obtenido por los ml de orina
centrifugada.
- Informe lo observado junto con el examen químico de la orina.

Carga de la cámara de Neubauer:

Se utilizan 10 ul de orina centrifugada.

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PREGUNTAS A DESARROLLAR:

Trabajo en grupo de 2 estudiantes:

- En base a lo aprendido, realice una propuesta de estandarización del sedimento urinario.

- Para lo anterior debe tomar en cuenta todas las fases del análisis del sedimento de orina.
- ¿Cómo realizaría usted el control de calidad del análisis físico químico y microscópico de la
orina?

¿Qué tipo de muestras se pueden utilizar para el examen de orina y cuáles son las condiciones de
la toma de muestra?

¿Qué tipo de examen microbiológico se puede realizar con una muestra de orina?

¿Por qué es importante realizar el control de calidad en el análisis de orina?

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INFORME ANÁLISIS FÍSICO QUÍMICO Y MICROSCÓPICO DE ORINA Y
SEDIMENTO URINARIO
Nombre:

Edad Fecha de nacimiento Rut

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Color: Aspecto Densidad

Resultado Interpretación
pH

Leucocitos

Nitritos

Proteínas

Glucosa

Cetonas

Urobilinógeno

Bilirrubina

Sangre

Análisis microscópico Resultado por campo RESULTADO por ul

Células descamativas

Leucocitos

Eritrocitos

Bacterias

Cilindros

Otros

Nombre y firma docente Nombre y firma responsable

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