Medios de Cultivo

Preparación y Control de Calidad

Carlos Gaete – Nicolás Rodríguez

Tecnología Médica – Laboratorio Clínico, Hematología y Banco de Sangre
Microbiología Médica I – Sección 32
22 de abril de 2014
Introducción
Un agar medio de cultivo desde un punto de vista físico, abarca los de tipo líquido
o caldos, semisólidos o sólidos, quienes cuentan con los componentes necesarios,
factores de crecimiento y nutrientes, para el desarrollo de microorganismos
considerando un pH optimo y una temperatura especifica.
Antes de ser preparados, estos se pueden encontrar en forma desecada, dentro
de estos, Agar Lisina Hierro (LIA), Agar Hierro Triple Azúcar (TSI) y Agar Mac
Conkey son algunos de los ejemplos.

El Agar es un polisacárido sulfatado normalmente extraído de las algas rojas

compuestas principalmente por D-galactosa, 3,6-anhidro-L-galactosa y ácido
D-glucurónico. Es un muy buen agente solidificante, se licua a temperatura de
ebullición y se solidifica al enfriarse a 40°C, se endurece y no se fundirá de nuevo
hasta que no alcance una temperatura de 80 a 90°C. Sus propiedades hacen que
la mayoría de los microorganismos no puedan degradarlo y no modifica el pH de
las soluciones con las cuales se mezcla.

Para su preparación y Control de Calidad se pasan por distintos procesos, que nos
permiten asegurarnos que el medio de cultivo es óptimo para el desarrollo de los
microorganismos, en estos el proceso comienza desde la preparación y a los que
nos llevara una vez terminado. Por su parte el Control de Calidad, mide pH,
esterilidad, crecimiento y así distintos parámetros que se registran y califican para
el previo cultivo.

Existen diversos medios de cultivos utilizados en bacteriología, como lo son el

Agar Sangre, Agar Chocolate, Agar Mac Conkey, entre otros, quienes desde el
punto de vista práctico son específicos dependiendo del trabajo que se desea
realizar, como lo hacen los medios fundamentales, enriquecidos, diferenciales o
selectivos.

Si se extiende una mezcla de células sobre una superficie de Agar, cada célula
aislada se multiplicara formando una colonia independiente, formación o
agrupación macroscópicamente visible de microorganismos sobre un medio
sólido. Las colonias aisladas se pueden obtener mediante la siembra por estrías.
Se inocula la mezcla microbiana sobre un extremo de la placa de agar con un asa
de siembra, y se extiende formado estrías sobre la superficie en uno o varios
sentidos. Las células individuales se irán desprendiendo del asa al frotarla sobre la
superficie y desarrollarán colonias aisladas.

Por objetivo, se pretende realizar en paso práctico, la preparación de distintos

medios de cultivo desde su base, hasta medir en sus distintos controles la calidad
del trabajo con el fin de adquirir el conocimiento necesario para luego determinar
si estos son efectivamente fiables para los distintos usos que se les aplicaran.
Preparación

Control de Calidad

pH
Durante el proceso de preparación, se tomó una pequeña cantidad del líquido, que
se depositó en una placa, con el fin de medir su pH, para esto se debe esperar a
que la mezcla se encuentre fría, ya que su temperatura puede interferir en el
resultado de la medición. Se pueden utilizar diferentes formas para medir el pH,
para este caso, la ayuda de papel pH, que corresponden a bandas reactivas …
Para dicho parámetro el pH para el medio LIA arrojo un pH neutro de 7.0

Esterilidad
Una vez que el medio fue preparado, por personal autorizado, se pasa al
autoclave para que este sea esterilizado…