INFORME DE PRUEBAS ISTA DE LA ESPECIE Pittospurum undulatum Vent.

JUAN FELIPE SOLORZANO GUTIERREZ 20092010055

SEBASTIAN SUAREZ DIAZ 20092010056

SILVICULTURA DE PLANTACIONES

LUIS JAIRO SILVA HERRERA

UNIVERSIDAD DISTRITAL FRANCISCO JOSE DE CALDAS

FACULTAD DE MEDIO AMBIENTE Y RECURSOS NATURALES
INGENIERIA FORESTAL
BOGOTA D.C.
2012
INTRODUCCION

La semilla se define como un óvulo fecundado y maduro es decir, es una estructura reproductiva
fundamental para la propagación sexual de las especies vegetales, está se encarga básicamente de
la transmisión de las características genéticas de las plantas, las cuales inciden de manera
directa, junto con el ambiente, en el fenotipo, es decir, en las características externas de los
individuos, en su apariencia, las cuales son tenidas en cuenta para la selección de individuos en
el proceso de mejoramiento genético de especies, de igual manera se tiene en cuenta el estado y
manejo de las semillas a la hora de establecer plantaciones, o programas de reforestación,
motivos por los que se habla de la calidad y certificación de las semillas (Becerra J. & Silva J.
2010).

Para la determinación de calidad de la semilla, se sigue la metodología propuesta por ISTA

(International Seed Testing Asociation), las cuales son una serie de pruebas donde se evalúan
características tanto físicas como fisiológicas, estas consisten en: Porcentaje de pureza, Número
de semillas puras por gramo, Número de semillas puras más (+) impurezas por kilogramo,
Contenido de humedad, Viabilidad y Porcentaje de germinación; las cuales son de gran
importancia a la hora de comercialización de las mismas, ya que actúan como herramienta
indicativa y garantizadora por ejemplo del número aproximado de semillas que van a germinar;
de igual manera, estas pruebas brindan una posibilidad de planeamiento ante el desarrollo de
programas de reforestación en especial para la fase de vivero, por ejemplo con el contenido de
humedad que da indicios de cómo deben ser almacenadas las semillas en un determinado tiempo
o el porcentaje de pureza de las mismas.

En el siguiente laboratorio se muestra el desarrollo y resultados de diferentes pruebas ISTA para

la determinación de calidad de la semilla en la especie Pittosporum undulatum conocida por su
nombre vernáculo como Jazmin Huesito.
OBJETIVO GENERAL

Determinar la calidad de la semilla de Pittosporum undulatum Vent. mediante la realización de

las pruebas ISTA.

OBJETIVO ESPECIFICO

 Reconocer la importancia que tienen las pruebas ISTA para el análisis de las semillas de
cualquier especie.

 Determinar el número de semillas por Kg de la especie Pittosporum undulatum.

 Cuantificar el contenido de humedad presente en la semilla de Pittosporum undulatum

 Determinar la viabilidad de las semillas de Pittosporum undulatum.

 Aportar y aplicar de manera correcta las pruebas ISTA para la especie Pittosporum
undulatum.

 Determinar la composición por peso de la semilla de Pittosporum undulatum.

 Establecer el numero máximo de semillas que puedan germinar bajo condiciones optimas
de luz, humedad y temperatura.
MATERIALES

Los siguientes materiales fueron utilizados durante la realización de cada una de las pruebas:

1. Estereoscopio 2. Cajas de Petri 3. Equipo de Disección

4. Semillas de la Especie Pittosporum undulatum 5. Balanza

6. Estufa 7. Sal de Tetrazolio

METODOLOGIA

1. Porcentaje de Pureza

Para el porcentaje de pureza se tiene la siguiente ecuación:

Para esta prueba las semillas fueron separadas en dos grupos, el primero constaba de semillas
puras, refriéndose estas, al retiro del mucilago propio de la especie Pittosporum undulatum con
ayuda de agua y jabón; el segundo grupo correspondía a las semillas con mucilago, que es
tomado como el peso total de la muestra.

Se tomaron ocho muestras de 50 semillas para cada grupo que posteriormente fueron pesadas en
una balanza electrónica. Una vez tomados los datos, se obtiene la media de las muestras tanto de
las semillas puras como de las semillas con mucilago, obteniendo los dos valores necesarios para
hallar el % de pureza de las semillas.

Otra manera de hallar este porcentaje es mediante la aplicación de la misma fórmula pero ya
estrictamente sobre cada muestra, donde se obtendrán ocho resultados, dando como respuesta la
media de cada muestra que serán sumadas y promediadas para obtener el valor total.

Según ISTA (1993) para la determinación de la pureza se divide la muestra de trabajo en semilla
pura, otra semilla y materia inerte, calculando par a cada una el porcentaje por peso. Se
recomienda trabajar la muestra con 2500 semillas. Esta prueba es la primera que se debe realizar.

El objetivo de hallar el porcentaje de pureza es que nos permite determinar la composición por
peso de la muestra.

Semilla Pura 8 muestras con 50 semillas

2. Numero de Semillas Puras por Gramo

Para determinar el número de semillas puras por gramo, se realizaron dos métodos en el cual se
calculo dicho valor. El primero se trata de una simple regla de tres, donde gracias al porcentaje
de pureza se tiene el promedio del peso de las ocho muestras de semilla pura (0.39 g)
equivalentes a 50 semillas. Conociendo este valor se aplica la regla de tres para saber cuántas
semillas puras equivalen a 1 g.

La otra manera es llevar un numero de semillas puras hasta que pesen un gramo y así poder
contar exactamente cuántas semillas equivalen a 1 g.

3. Nº de Semillas puras + impurezas x Kg

Se tiene que para esta prueba la ecuación correspondiente es:

Donde el cálculo del peso de 1.000 semillas puras se obtiene nuevamente desde el promedio
obtenido en la prueba de porcentaje de pureza. Mediante regla de tres se plantea la relación de
que 50 semillas equivalen a 0.39 g, entonces se haya el valor del peso de mil semillas de la
multiplicación de 1.000 semillas por 0.39 g, dividido entre 50 semillas.

Una vez obtenido el valor del peso de mil semillas (7.8 g), se halla el valor de las impurezas de la
resta del peso de las semillas con mucilago (0.61 g) menos el peso de semillas puras (0.39 g). Se
debe tener en cuenta que el resultado de impurezas es de 50 semillas por tanto es necesario
extrapolar a 1.000 semillas para poder sumar los denominadores de la ecuación en los mismos
términos. Por último se reemplaza en la ecuación y se tiene el valor del numero de semillas puras
junto con impurezas por Kg.

4. Contenido de Humedad

El contenido de humedad esta dado por la formula:

Para este contenido se tomaron cinco muestras cada una con veinte semillas recién sacadas del
fruto, se pesaron y previamente fueron colocadas en estufa por 48 horas en cajas de petri. Estas
muestras corresponden al peso en húmedo. Luego de las 48 horas las muestras son retiradas de la
estufa y nuevamente pesadas, obteniendo el peso en seco de las muestras.
Tanto para el peso en húmedo como para el peso en seco se promedian los resultados de cada
muestra y así tener un valor final. Por último se remplazan los resultados en la formula y de esta
forma tenemos el contenido de humedad.
Según Grabe 1989, citado por Poulsen K., se dice que existen dos métodos para medir la
humedad de las semillas: los métodos directos, en donde se elimina el agua y se cuantifica la
cantidad y el método indirecto, en el que se utilizan parámetros eléctricos. El método directo
incluye secado al horno, destilación, extracción, mientras que el método indirecto incluye por
ejemplo, medidas de conductividad e higrometría.

El contenido de humedad va a ser importante en la medida que va ser determinante en la

actividad fisiológica y bioquímica de la semilla. Motivo por el cual se convierte en factor
importante para su debido manejo. (Stubsgaard 1990)

5. Viabilidad

El propósito de esta prueba, es mostrar que una semilla viable tiene la capacidad y el potencial de
producir una plántula normal. La prueba se fundamenta en una solución incolora de la sal de
cloruro de 2,3,5 Trifenil Tetrazolio, indicador de procesos de reducción que suceden en las
células vivas.
Para esta prueba se tomaron cinco muestras cada una de 20 semillas, las cuales fueron cortadas
por la mitad con el fin de que al momento de la aplicación, la solución fuera absorbida y se
pudiera observar la tinción. Claro está que después de un tiempo de 12 a 48 horas, se puede
observar al estereoscopio si hubo algún resultado o no.

Una vez que la sal de Tetrazolio es embebida por la semilla, los tejidos vivos de la célula llevan a
cabo un proceso de oxido reducción en la que participan enzimas deshidrogenasas que se
encuentran en las células vivas. En la reacción los protones hidrogeno que fueron liberados en el
proceso de respiración reducen la sal de Tetrazolio a formazan, una sustancia de coloración
rojiza que permite ver la diferenciación de las áreas vivas de las semillas.

6. Porcentaje de Germinación

De acuerdo a las normas ISTA (1993) la germinación se prueba sobre la fracción de semilla
pura. Normalmente una prueba consiste de cuatro replicas de 100 semillas al azar de semilla
pura.

Para esta prueba se trabajaron cinco muestras en las cuales se pusieron bajo una cama de
algodón, veinte semillas por muestra, se hidrataron y se conservan en condiciones de luz,
humedad y temperatura. Esta prueba solamente podrá evaluarse hasta el final el semestre. La
germinación se define como la emergencia y desarrollo de las plántulas en una fase donde sus
estructuras esenciales señalan si es capaz de desarrollarse en una planta satisfactoria bajo
condiciones favorables del suelo (ISTA 1993).
RESULTADOS

1. % de Pureza
a. Porcentaje Obtenido por medio de la ecuación

b. Porcentaje obtenido por la media de cada muestra

Este porcentaje resulta de la aplicación de la ecuación anterior, pero para cada muestra en
particular
Imágenes:

2. Numero de Semillas Puras por Gramo

a. Promedio mediante regla de 3:

Promedio de 50 semillas 0.39 g, entonces sí:

b. Numero de semillas llevadas hasta pesar 1 g

El numero de semillas llevadas a 1

g es el equivalente a 133 semillas
por peso.

De acuerdo a esto en 1 Kg se
espera encontrar 133.000 semillas.
3. Nº de Semillas puras + impurezas x Kg

- Peso de 1.000 semillas Puras:

Impurezas = Peso Semillas con Mucilago - Peso Semillas Pura

Se extrapola para 1.000 semillas la impureza:

Tenemos que:

4. Contenido de Humedad

Para el contenido de humedad se tuvieron en cuenta cinco muestras de veinte semillas cada una:
5. Viabilidad

Los resultados obtenidos en la prueba de viabilidad fueron positivos como se observa en las
imágenes, en el análisis se explicara porque se tiño la semilla y que resultados se obtendrían en
caso contrario.
Semillas teñidas
con la sal de
Tetrazolio

Tabla de Datos
6. Porcentaje de Germinación

Con este porcentaje se obtendrán los resultados solo hasta el final del semestre, por tanto se
menciona ya que hace parte de una de las pruebas ISTA mas importantes:
ANALISIS DE RESULTADOS

Según las pruebas en el laboratorio el porcentaje de pureza de la semilla del Pittospurum

undulatum Vent es de aproximadamente un 64%, significando esto que la capa mucilaginosa que
cubre la testa de las semillas, que es la principal fuente de impureza en esta especie, es
aproximadamente de un 36 % del peso total, es decir aproximadamente 0.22 gramos para el peso
de 50 semillas. Este resultado es importante en la planeación, ya que el porcentaje de impureza,
aunque no toma un valor muy alto, pero si es determinante y nos da indicio que a la semilla toca
hacerle un lavado para quitarle tales impurezas, que pueden retardar el proceso de germinación o
pueden ser foco para hongos o malezas. No obstante, comparativamente con los resultados
obtenidos por Trujillo en 1986, en donde el promedio de pureza fue de un 96.1%, siendo este un
porcentaje alto, mostrando así que la semilla no tiene casi impurezas y posiblemente pudo ser
debido a la procedencia de las semillas o la metodología seguida, ya que para la realización del
laboratorio se tomaron semillas de frutos que fueron recolectados minutos previos al desarrollo
del mismo, sin dejar las semillas cierto tiempo al aire libre, o haciéndoles un lavado previo con
su debido secado.

Para la prueba del Número de semillas puras por gramo se tomaron como base las observaciones
de las 8 muestras de 50 semillas cada una de la prueba anterior para luego hacer una
extrapolación, paralelamente se realizó otro método que consistió en masar o pesar 1 gramo de
semillas puras y luego hacer el conteo de las mismas. Para el primer método el resultado fue de
128 semillas y para el segundo, el valor que se obtuvo fue de 133 semillas, asumiendo entonces
que el Número de semillas por gramo puede estar en un rango entre 128 y 133 semillas
(aclarando que el segundo valor, correspondiente al segundo método es más acertado ya que la
toma de la medición se hizo directamente), que según con los resultados de Trujillo en 1986, son
similares, ya que para esta prueba, el valor que registra es de 140 semillas puras por gramo, es
decir con una diferencia aproximada de 7 semillas. Este valor se puede decir que es alto, debido
principalmente al tamaño de la semilla, el cual es bajo, (aproximadamente de 3 mm), el mismo
porcentaje de pureza y el contenido de humedad de las semillas, a diferencia de otras especies
como por ejemplo Pinus radiata, Prosopis juliflora y Pseudosamanea guachapele que tienen
valores de 35, 22 y 28 Numero de semillas por gramo correspondientemente. Esta prueba es de
gran utilidad, ya que junto con los resultados de los porcentajes de germinación, se puede hacer
un planeamiento adecuado en el vivero, estableciendo el número de semillas necesarias y así
mismo, el número de semillas que debo utilizar tanto para plantación como de reserva; de esta
manera se podrían reducir costos.

Para la prueba de Número de semillas puras más impurezas por kilogramo, primero se calculo
mediante extrapolación el peso de mil semillas puras, el cual dio un valor de 7.8 gramos, que
comparativamente con el resultado de Trujillo, se asimilan, ya que el valor para este último fue
de 7.12 gramos, mostrando un diferencia de 0.68 gramos; luego se obtuvo el valor del peso de las
impurezas para las mil semillas, el cual fue de 4.4 gramos, siendo este un valor alto, porque
representa más de la mitad del peso de semillas puras. Una vez teniendo estos valores, se calculo
el valor para la prueba, el cual dio de 81967 gr, que a diferencia de los resultados obtenidos por
Trujillo es inferior, puesto que el valor promedio que registra es de 140875 semillas puras más
impurezas por Kg; donde se ve que los dos valores se alejan mucho a pesar de que el peso de las
mil semillas puras en ambos casos son similares; por tanto, tal diferencia se debe posiblemente a
la variación en el porcentaje de pureza, ya que en nuestro caso, fue de 64 % y en el de Trujillo de
96.1%, significando esto que las impurezas en este caso es mayor (aproximadamente de 36%), lo
que se ve reflejado en alto valor del peso de las mil semillas puras (4.4 gramos).
Esta prueba con semejanza al anterior nos va determinar la planificación en vivero, arrojándonos
el numero de semillas aproximadamente que encontramos en un Kg.

En la prueba de contenido de humedad el valor obtenido fue de 21%, lo que indica que es una
semilla ortodoxa, afirmación que concuerda con el semillero y semicol. Este tipo de semillas se
caracterizan por tener altos contenidos de carbohidratos y almidones, un bajo contenido de
humedad para su almacenamiento entre 4 y 8%. El contenido de humedad va ser importante
junto con la temperatura ya que son factores determinantes en el almacenamiento y manejo de
semillas debido a que estos indican la actividad fisiológica y bioquímica. A demás que si
pensamos a gran escala, el conocimiento de esta prueba va a ser fundamental al momento de
tener una plantación que al final se buscara una productividad que empieza con el cuidado de la
semilla.

En la prueba de viabilidad se determino que el 67% de las semillas son totalmente viables, el
20% se catalogaron como de mediana viabilidad y el 13% como baja viabilidad, indicándonos
esto, que la especie Pittosporum undulatum presenta relativamente un alto porcentaje de
viabilidad, lo que quiere decir que en condiciones optimas de temperatura, humedad y un
adecuado manejo de la semilla, la posibilidad tanto de germinación como la capacidad de
producción de plántulas normales es alta. Según Trujillo.
CONCLUSIONES

 Las pruebas ISTA son de gran importancia ya que con estas se determinan características
tanto físicas como fisiológicas propias de las semillas, las cuales son indispensables para
la calidad y la certificación de las mismas, teniendo presente los requerimientos
necesarios para la comercialización y manipulación de la semilla.

 El contenido de humedad de la semilla de Pittosporum undulatum fue de 21%,

clasificándose como una semilla ortodoxa, motivo por el cual no es requerimiento
indispensable el realizar un tratamiento pregerminativo, sin embargo estos pueden
provocar un aceleramiento en la germinación de las semillas.

 El porcentaje de pureza de la especie P. undulatum fue de 64%, indicándonos que el

contenido de impurezas es relativamente significativo, cualidad que constituirá un grado
de afectación para las demás pruebas. Se debe tener en cuenta que la principal fuente de
impureza es la capa mucilaginosa, razón por la cual se recomienda realizar tratamientos
especiales para tratar el mucilago.

 Con la prueba de viabilidad se pudo determinar que las semillas presentan un porcentaje
de 67% el cual es un porcentaje alto, el cual va a influir en el porcentaje de germinación;
cabe aclarar que en esta prueba puede influir la subjetividad de la persona, por tal motivo
se recomienda realizar varias observaciones para disminuir una posible fuente de error.
BIBLIOGRAFIA

 CATIE (1999). Técnicas para la Escarificación de Semillas Forestales. Centro

Agronómico Tropical de Investigación y Enseñanza. Proyecto de Semillas Forestales-
Turrialba C.R. Serie Técnica / CATIE nº 36.

 Análisis de Semillas. Disponible en la página: http://www.analisisdesemillas.com.ar.

Citado el día 15 de Mayo de 2012.

 Instituto Nacional de los Recursos Naturales Renovables y del Ambiente. Investigaciones

Forestales (1983). Respuesta de las semillas de 16 especies forestales a diferentes
tratamientos pre germinativos

 Trujillo E.,(1986).Manual General sobre uso de Semillas Forestales. INDERENA.

Ministerio de Agricultura.

 Becerra J & Silva J. 2010. Silvicultura de Plantaciones Forestales y Mejoramiento

Genético. Universidad Distrital Francisco José de Caldas: Facultad del medio Ambiente y
Recursos Naturales.

 Rojas M. Guía Para Análisis de Calidades Físicas y Fisiológicas en Semillas. Universidad

Distrital Francisco José de Caldas Facultad del Medio Ambiente y Recursos Naturales.