ESPECTROFOTOMETRIA

UV-VIS
 Fundamento
Las ondas electromagnéticas
se propagan en una dirección teniendo un campo magnético y uno
eléctrico que conforman la onda.
 Luz visible
La luz del sol (blanca) está compuesta por una gama de radiación en las
zonas del ultravioleta, visible e infrarojo

ángulo de
dispersión
luz blanca

a
colores
 Interacción materia - energía
Se produce cambio de energía

Espectroscopias

No se produce cambio de energía

En las tánicas donde transfiere energía entre un fotón (REM) y el analito,

se produce cambio de energía.

En la espectroscopia de absorción, el analito absorbe la energía del fotón y

pasa de un estado de baja energía a un estado excitado de alta energía.

La intensidad de fotones que pasan a través de una muestra que contiene

el analito se atenúa debido a la absorción y la medida de esta atenuación se
le llama transmitancia o absorbancia.
donde:
h=6.626 X 10–34 Js
ν= frecuencia
ν=c/λ
c= 3 X 108 m/s
Para fines más prácticos:

Espctroscopía UV: Espectroscopía IR:

cromóforos grupos funcionales

rayos γ rayos x UV VIS IR m-ondas radio

10-10 10-8 10-6 10-4 10-2 100 102

longitud de onda (cm)

Espectroscopía RMN: átomos

individuales y su entorno
 Espectro Visible
mayor ν y menor ν y
mayor E menor E Violeta: 400-420 nm
Indigo: 420-440 nm
Azul: 440 -490 nm
Verde: 490-570 nm
Amarillo: 570-585 nm
Naranja: 585-620 nm
Rojo: 620-780 nm:
λ (nm)

La pregunta obligada es:

¿Porqué algunas sustancias se ven coloreadas (ej: clorofila) y
otras se ven blancas (aspirina)?

Una primera respuesta es:

Parte del espectro visible es absorbido y otra parte reflejado (color
complementario)
 Colores complementarios:
Absorción a 420-430 nm: se ve
amarillo
Absorción a 500-520 nm: se ve rojo.
Absorción total: se ve negro
Reflexión total: se ve blanco

La composición química muestra que ”Todas las

sustancias coloreadas tienen un sistema de enlaces π
conjugados”.
En la espectroscopía UV-Vis se irradia con luz de energía
suficiente como para provocar transiciones electrónicas, es
decir promover un electrón desde un orbital de baja energía
a uno vacante de alta energía (ABSORCIÓN).

Cuando un analito en estado de mayor energía regresa a uno

de menor energía, tiene lugar la EMISIÓN de un fotón. Los
estados de más alta energía se logran a partir de energía
térmica, radiante o reacción química

La emisión que sigue a la absorción de un fotón recibe el

nombre de FOTOLUMINISENCIA.
La que se origina por tras una reacción química se denomina
QUIMIOLUMINISENCIA
 Transiciones electrónicas posibles entre orbitales

n: orbital que contiene par de electrones no compartidos (ej en O, N, Cl)

En UV- Vis la
energía solo
alcanza para las
transiciones
n→π* y π→π*

Las transiciones más favorecidas son entre el orbital ocupado de

energía más alta (HOMO) y el orbital desocupado de energía más
baja (LUMO)
 DETECTOR
Po Ps

REM UV-VIS Cubeta +

muestra (en solución)

A la atenuación de la REM a medida

que pasa a través de una muestra se
le describe cuantitativamente
mediante 2 términos.
TRANSMITANCIA
100% de T 0% de T
Ausencia de Absorción
absorción completa
ABSORBANCIA
Multiplicando T por 100 sería %T
El espectrómetro UV-Vis registra las longitudes de onda
donde se registra absorción y cuantifica la absorción

Se registra como Absorbancia (A) vs. longitud de onda (λ)

Las bandas del espectro UV son

anchas porque incluyen la estructura
fina de transiciones vibracionales y
rotacionales de menor energía

El encontrar la absorbancia máxima

que es propia de cada analito implica
una relación cualitativa

Espectro de absorbancia
También llamado BARRIDO
Cuando el registro se hace de Absorbancia (A) vs. Concentración [A]
Entonces la relación es cuantitativa.

Curva de patrones Curva de adición de

externos para Cu2+ estándar para Mn2+
Ley de Beer: Permite cuantificar la concentración de una muestra

A = a b c
A = ε b c
A: Absorbancia
a: Absortividad o coeficiente de extinción ε:Absortividad molar
(característico de cada sustancia) (uso de soluciones Molares)
b: largo del paso de la celda (cm)
c: concentración (moles/l)

Permite cuantificar la concentración de varios componentes

cromóforos, siempre que entre ellos no haya interacciones.
La Ley de Beer es limitante para concentraciones de analito bajas.

Abs

2
Relación lineal

[A]
 La zona de longitudes de onda que se registra en
un espectro UV- Vis es entre 200 y 800 nm
En esta zona no absorben dobles ni triples ENLACES AISLADOS

Solo van a absorber enlaces π conjugados y heteroátomos

con pares de electrones no compartidos (O, N)

Grupos que absorben luz = CROMÓFOROS

 Otros Cromóforos

Compuestos aromáticos y
Grupos carbonilo conjugados
heteroaromáticos
La conjugación acerca al HOMO y al LUMO del sistema
disminuye ΔE de la transición, ésta ocurre a λ menor
A medida que aumenta
la conjugación, el
sistema absorbe a λ
mayores , o sea más
hacia el visible
Ejercicios:
1. El porcentaje de transmitancia de una muestra es de 50%
¿Cuál es su absorbancia?
(Si lo que necesitas solo es T, entonces divide entre 100)
2. Una solución de 0.0005M se introduce en una celda de 1 cm
de paso de luz. Cuando se mide a la longitud de onda de 490
nm, la absorbancia de la solución es de 0.388, ¿Cuál es la
absortividad molar del analito en esta longitud.
3. Encuentra los valores que faltan en la tabla
Continuara…