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TRABAJO DE GRADO
BACTERIÓLOGA
2
3
4
5
NOTA DE ADVERTENCIA
6
DEDICATORIA
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7
AGRADECIMIENTOS
8
TABLA DE CONTENIDO
Pág.
1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA 15
2 JUSTIFICACIÓN 16
3 OBJETIVOS 17
4 DISEÑO METODOLÓGICO 18
4.1 DISEÑO DEL ESTUDIO 18
4.2 PREGUNTAS DE INVESTIGACIÓN 18
4.3 DEFINICIÓN DE SUJETOS DEL ESTUDIO 18
4.3.1 Población 18
4.3.2 Muestra 18
4.3.3 Criterios de inclusión 19
4.3.4 Criterios de exclusión 19
4.4 VARIABLES Y DEFINICIONES 19
5 MARCO TEÓRICO 24
5.1 ETIOLOGÍA DE LA ENFERMEDAD 24
5.1.1 Género: Candida 24
5.1.2 Estructura antigénica 24
5.2 RESPUESTA INMUNE FRENTE A LOS 26
HONGOS
5.3 CANDIDIASIS INVASIVAS (CI) 28
5.4 INCIDENCIA DE LAS CANDIDIASIS EN EL INC 28
5.5 DIAGNÓSTICO 32
5.5.1 Técnica de ELISA para la detección de antígenos 38
de Manano de Candida spp
5.6 PROTEÍNA C REACTIVA 36
5.7 CRITERIOS EORTC-MSG 39
6 METODOLOGÍA 41
6.1 TABULACIÓN 41
6.2 ANÁLISIS ESTADÍSTICO 41
6.3 DESCRIPCIÓN DE LAS TÉCNICAS DE 41
LABORATORIO
9
6.3.1 Detección del antígeno Manano 41
6.3.2 Detección de la Proteína C Reactiva 41
6.4 PROCEDIMIENTOS DEL ESTUDIO 41
6.4.1 Captación del paciente para el estudio 41
7 RESULTADOS 43
7.1 VARIABLES DEMOGRÁFICAS 43
7.2 VARIABLES CLÍNICAS 43
7.2.1 Estado de enfermedad del paciente 43
7.2.2 Uso de antibióticos y antifungicos en los pacientes 44
del estudio.
7.2.3 Análisis de otras variables clínicas: cirugía, 44
catéter, hiperalimentación y corticoides.
7.3 VARIABLES DIAGNÓSTICAS 46
7.3.1 Cultivos y agentes etiológicos aislados 46
7.3.2 Proteína C-Reactiva 46
7.3.3 Prueba antigénica de Manano para Candida spp 47
7.3.3.1 Asociación títulos la prueba antigénica de de 48
Manano para Candida spp y PCR.
7.3.3.2 Asociación títulos de Manano, cultivo 48
microbiológico, histopatológica e imágenes
diagnósticas
7.4 Supervivencia de los pacientes del estudio 49
durante la estancia hospitalaria
7.4.1 Supervivencia durante la estancia hospitalaria 49
7.4.2 Función de supervivencia de Kaplan – Meier 49
7.5 Diagnóstico de infección fúngica invasiva según 50
los criterios de la EORTC-MSG
8 DISCUSIÓN DE RESULTADOS 52
9 CONCLUSIONES 56
10 RECOMENDACIONES 57
REFERENCIAS 58
ANEXOS 64
10
TABLA DE TABLAS
Pág.
Tabla 1 Lista de variables y sus definiciones. 19
Tabla 2 Características de las principales especies de 26
Candida diferentes a C. albicans causantes de
IFI.
Tabla 3 Criterios de selección en los pacientes con riesgo 40
de IFI tipo Candidiasis.
Tabla 4 Variables demográficas de los pacientes del 43
estudio.
Tabla 5 Variables clínicas de los pacientes del estudio. 44
Tabla 6 Uso de Antibióticos y antifungicos en los 45
pacientes del estudio
Tabla 7 Asociación causal entre las variables: cirugía, 45
catéter, hiperalimentación, corticoterapia y la
supervivencia de los pacientes del estudio al día
30.
Tabla 8 Agentes etiológicos aislados, cultivos 46
microbiológicos y su frecuencia en los pacientes
del estudio.
Tabla 9 Determinación de títulos antigénicos de Manano 47
11
y su frecuencia en los pacientes del estudio.
Tabla 10 Asociación entre títulos del Antígeno Manano y 48
PCR en los pacientes del estudio.
Tabla 11 Supervivencia de los pacientes durante la 49
estancia hospitalaria.
Tabla 12 Variables de los pacientes del estudio con títulos 51
antigénicos de manano de Candida positivos
TABLA DE FIGURAS
Pág.
12
TABLA DE GRÁFICOS
Pág.
13
LISTA DE ANEXOS
Pág.
14
1. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
área clínica, sobre todo en aquellos pacientes que tienen como factor de
15
El diagnóstico temprano de las CI ofrece muchas dificultades; lo cierto es
hematolinfoides.
2. JUSTIFICACIÓN
16
investigación y desarrollo de diversas maneras de detección serológica
una prueba que sirve como guía para el diagnóstico de la infección sobre
3. OBJETIVOS
GENERAL
17
ESPECÍFICOS.
4. DISEÑO METODOLÓGICO
18
4.2 PREGUNTAS DE INVESTIGACIÓN
4.3.1 Población
4.3.2 Muestra
19
Pacientes que ingresen al servicio de hematología y oncología del INC con
la siguiente condición: Diagnóstico de una neoplasia hematolinfoide, con
neutropenia y con riesgo de infección fúngica invasiva (IFI) según los
criterios de la EORTC-MSG.
20
Infección Fúngica Se presentan en individuos Nominal Tumor solidó
Invasiva inmunocomprometidos. En Leucemia
la mayoría de los casos el Linfoma
SEGÚN CRITERIO hongo ingresa por Otros tumores
EORTC inhalación y desde el
pulmón, se disemina por
vía hemática a cualquier
otro órgano o sistema.
Nominal Oncologia y
Infección Fúngica Hallazgo de hongos en Hematologica
Probada sangre o en un sitio normal- hospitalizados
mente estéril con un cultivo
SEGÚN o examen directo;
CRITERIO Independiente de factores
EORTC predisponentes en el
hospedero o elementos
clínico-radiológicos.
Nominal Oncologia y
Infección Fúngica Debe presentar al menos Hematologica
Probable un criterio de cada uno de hospitalizados
los factores como son:
SEGÚN
CRITERIO • Factores
EORTC predisponentes en
el hospedero
• Elementos clínicos
sugerentes, un
estudio micológico
positivo no
definitorio.
• Cultivo positivo de
sitio no estéril.
Nominal Oncologia y
Infección Fúngica Debe presentar al menos Hematologica
Posible un criterio de los factores, hospitalizados
ya sean factores
SEGÚN CRITERIO predisponentes ó
EORTC elementos clínico-
radiológicos ó la micología.
21
Nominal Presente (1)
NEUTROPENIA Paciente con conteo de Ausente (0)
FEBRIL neutrófilos < a 500 x mm3
PROLONGADA con persistencia de fiebre >
38,3 °C por más de 96
horas después de iniciado
cubrimiento antibiótico de
amplio espectro en el que
se espera > de 10 días de
neutropenia.
22
Nominal Presente (1)
TRANSPLANTE DE Procedimiento realizado Ausente (0)
MEDULA ÓSEA por el servicio de
hematología que introduce
células con potencial de
repoblar medula ósea tras
una terapia ablativa
quimioterapéutica.
Nominal Citarabina
ANTIFÚNGICOS Medicamentos Fluconazol
antimicrobianos con efecto Anfotericina B
terapéutico sobre hongos Itraconazol
Voriconazol
Caspofungina
Otros
23
Nominal Presente (1)
CIRUGIA Antecedente de Ausente (0)
ABDOMINAL procedimiento quirúrgico o
reciente que compromete el
tracto gastrointestinal.
Nominal (mg/dl)
PROTEINA C Proteína de fase aguda que
REACTIVA se sintetiza en el hígado, la
cual es un marcador
inespecífico que se eleva
durante la respuesta
inmune a infecciones,
daños a tejidos o necrosis
celular
5. MARCO TEÓRICO.
24
5.1.1 Género: Candida
En el género Candida hay muchas especies que pueden causar
Candidasis, estas son flora normal en el hombre ya que se encuentran en
la piel, las mucosas y el aparato gastrointestinal; pueden colonizar al
hombre poco después del nacimiento aunque hay registros de que
también en el periodo de gestación se puede presentar la infección por
este género. Las Candidiasis son las micosis sistémicas en el hombre y
los agentes mas comunes involucrados en la infección son: C albicans, C.
tropicalis, C.parapsilosis, C. glabrata, C. guillermondii y C. dubliniensis.
(4)(11)(32)(37)
25
asimilación de carbohidratos para confirmar la identidad de la especie.
(32)
Figura 1. Principales componentes del micelio (A) y la levadura (B) de C. albicans de utilidad en el diagnóstico
26
serológico de las Candidiasis Invasoras. (Jose Pontón. Microbiological non-culture methods for the diagnosis of
invasive cadidiasis: usefulness of surrogate markers. Rev Iberoamericana Micología. 2006)
27
conocimientos se debe en parte a la escasez de modelos animales de
micosis y en parte al hecho de que estas infecciones afectan a pacientes
incapaces de desarrollar una respuesta inmune adecuada en contra de
estos agentes patógenos. (3)(32)(33)(40)
Los principales mediadores de la inmunidad innata frente a los hongos
son los neutrófilos y los macrófagos. Los pacientes con neutropenia son
muy susceptibles a las infecciones micóticas oportunistas. Es probable
que los neutrófilos liberen sustancias fungicidas, tales como los
intermediarios reactivos del oxigeno durante el estallido respiratorio y
enzimas lisosómicas para que pueda desarrollarse si descomposición
intracelular y de esta manera tener el antígeno preparado para su
posterior presentación. La inmunidad celular es el mecanismo más
importante de la inmunidad adaptativa frente a las infecciones por hongos.
(3)(32)(40)
28
candidiasis sistémica. (3)(32) (40)
Figura 2. Balance, protección e inmunopatología en las infecciones fúngicas: cooperación entre la inmunidad
innata y adaptativa. Luigina Romani.Nature Reviews. Immunology. Volumen 4. Enero 2004
29
diferentes especies del género Cándida, la afección puede ser aguda o
crónica, superficial o profunda y presenta diferentes manifestaciones
clínicas. Algunas especies de Cándida forman parte de la flora normal de
la mucosa del tracto gastrointestinal y genito urinario del hombre y
animales de sangre caliente C. albicans es la más frecuente, pero en
menor proporción otras especies tales como C. tropicalis, C. parapsilosis,
C. krusei, y C. guillermondii, se han aislado en procesos patológicos; la
fuente principal de la infección es el paciente mismo (endógeno) (1-4)
(11) (Anexo 1).
30
• C. parapsilosis: Alimentación parenteral = intrahospitalarias
• C. krusei y C. lusitaneae y otras especies, en lesiones graves
asociadas a infecciones oncohematológicas
31
que es indistinguible de una bacteriemia pero también puede manifestar
una fiebre de origen indefinido, el mayor factor de riesgo para una CI
incluye los catéteres intravasculares, alimentación parenteral,
inmunodeficiencias, pacientes en periodos muy largos de hospitalización,
pacientes en la Unidad de Cuidados Intensivos o pacientes con
tratamiento inmunosupresivo por transplante o con una enfermedad
autoinmune o inmunodeficiente de base.(3)(40)
32
tratamiento que puede durar mucho tiempo lo que representa para el
hospital un aumento en el gasto económico para el tratamiento. (7)(19)
33
ocupa el primer puesto), después de los cocos Gram positivos y de los
bacilos Gram negativos y las infecciones asociadas a los miceliales aun
sigue siendo pobremente diagnosticadas, según datos epidemiológicos
obtenidos de los grupos de infectología y microbiología. (Informe verbal
Dra Pilar Rivas).
34
actualidad incluye también la determinación de la sensibilidad in-vitro a los
antimicrobianos y la utilización de métodos de tipificación que permitan la
diferenciación específica de los aislamientos, siempre que sea posible la
identificación de los aislamientos fúngicos debe realizarse a nivel se
especie, ya que esta información puede se muy importante para orientar
el tratamiento antifúngico hasta que se dispongan los resultados de
sensibilidad invitro. (2)(4)
35
respuesta de anticuerpos que se producen durante el desarrollo de la
micosis y aunque normalmente se utilizan de forma independiente existen
evidencias recientes de que su utilización combinada puede aumentar la
sensibilidad del diagnóstico de las CI.
36
La detección del antígeno en pacientes con CI continúa en desarrollo y se
ha comercializado un ELISA para la detección de Manano que presenta
una buena especificidad pero una baja sensibilidad. Un aumento de la
sensibilidad puede lograrse mediante la detección combinada de Manano
y anticuerpos anti-Manano. El D-arabinitol es un metabolito producido por
Candida albicans, Candida tropicalis, Candida parapsilosis y Candida
kefyr que puede ser detectado en pacientes con Candidiasis Invasiva
mediante cromatografía de gases o mediante un método enzimático
comercializado. (4)
37
debido a la corta duración de la mananemia (hasta 2 semanas). La
mayoría de los trabajos se han realizado en pacientes neutropenicos con
enfermedades hematológicas o en grupos mixtos que incluyen pacientes
hematológicos y pacientes quirúrgicos. Recientemente se ha publicado
que la detección de Manano en LCR puede ser útil en el diagnóstico de la
meningitis por Candida. (4).
38
renal y el D-arabinitol se aclara por los riñones al mismo ritmo que la
creatinina, la proporción arabinitol/creatinina corrige las variaciones en el
suero de D-arabinitol debidas a la función renal. Es posible diferenciar el
arabinitol producido por Candida del arabinitol generalmente encontrado
en humanos, ya que Candida produce solamente D-arabinitol, mientras
que los humanos producen sólo L-arabinitol, por lo que la proporción D-
arabinitol / L-arabinitol es útil para diferenciar pacientes con CI de los que
tienen fallo renal. La proporción D-arabinitol / L-arabinitol en orina puede
ser un marcador temprano de las CI.
39
disminuido notablemente la sensibilidad de la prueba y algunos de los
subgrupos de pacientes eran demasiado pequeños para obtener
conclusiones significativas. La detección de (1→3)-b-D-glucano se ha
utilizado también para seleccionar pacientes quirúrgicos con colonización
por Candida que podrían beneficiarse de un tratamiento antifúngico
empírico. (4)
Figura 3. Esquema de acción de la prueba de ELISA para la detección del antígeno Manano de
Candida spp. Platelia™ Candida Ag. BIO RAD.
40
de que se aumente la velocidad de sedimentación globular VSG que es
otro indicativo de infección e inflamación, a menudo entre las 24 a 48
horas siguientes al comienzo de la inflamación. Esta es asociada por
medio de su elevación en el suero a infecciones tanto bacterianas como
micóticas en pacientes con neoplasias, trastornos inmunológicos y
pacientes con tratamientos para transplantes. (34) (39)
41
medios de cultivo que permita la identificación del agente etiológico, junto
a los criterios de riesgo que presente el paciente. (Ver anexo 1) (11).
Criterios clínicos
Mayor: TAC ó Rx: infiltrados ó erosión + y + ó + solo
extensión de las paredes sinusales +
evidentes de infección.
Menor: tos, dolor de pecho disnea, +
congestión nasal, ulceraciones
nasales, epistaxis, hinchazón peri
orbital, lesiones necróticas o
perforación del paladar.
Criterios microbiológicos
urocultivo positivos para Candida + y +ó + solo
Hemocultivo positivo para Candida + +
Criterios de alto riesgo
Neutropenia < de 500 cel/mm³ + y + + solo
Fiebre >38°C 96h + +
Inmunosupresores > 30 días + + ó
Corticosteroides > 3 semanas + +
Antibióticos de amplio espectro + +
Tabla. 3 Criterios de selección en los pacientes con riesgo de IFI tipo Candidiasis. S. Ascioglu, J. H. Rex, B. De
Pauw. Defining Opportunistic Invasive Fungal Infections in Immunocompromised Patients with Cancer and
Hematopoietic Stem Cell Transplants: An International Consensus. 2002. Clinical Infectious Diseases; 34:7–14.
(EORTC)
42
6. METODOLOGÍA
6.1 TABULACIÓN
Los datos que fueron recogidos durante el periodo de estudio se
registraron teniendo en cuenta cada una de las variables que se requería
en un formato diseñado especialmente para el estudio. Después de tener
la base de datos completa, se procedió a grabarla en un formato Access
del cual fue tomado para su posterior análisis estadístico.
43
6.4.1 Captación de Pacientes
Los pacientes que ingresaron al estudio fueron seleccionados de manera
estricta de manera que corrieran el riesgo de Infección Fúngica Invasiva
utilizando como herramienta para esta selección los criterios de la
EORTC/MSG.
44
7. RESULTADOS
45
Tabla 4. Variables demográficas de los pacientes del estudio.
Quimioterapia
HyperCVAD 13 37.14%
CODOX-M 3 8.57 %
RCFM 2 5.71%
Otros 17 48.58%
46
presentándose solo un caso.
47
Variable Frecuencia Porcentaje
Tabla 7. Asociación causal entre las variables: cirugía, catéter, Hiperalimentación, corticoterapia y
supervivencia de los pacientes del estudio al día 30. * OR de tendencia NO significativo.
Cultivos microbiológicos
Hemocultivo + urocultivo 16 45.7%
Hemocultivo 9 25.7%
Urocultivo 5 14.2%
Otros * 4 8.57%
48
Microorganismos aislados
Candida spp 1 2.86%
Aspergillus spp 2 5.71%
Gérmenes comunes ° 15 42.85%
Sin aislamiento 17 48.57%
Tabla 8. Agentes etiológicos aislados, cultivos microbiológicos y su frecuencia en los pacientes del estudio.
* Líquido pleural, punta de catéter. ° S. aureus, S. epidermidis, S pneumoniae
La PCR que se tomó en este estudio como valor diagnóstico fue > a 9
mg/dl; 29 pacientes presentaron un aumento de la PCR por encima de 9
mg/dl (83%) y 17% un valor < a 9 mg/dl (n =6) como se puede observar
en el gráfico 1.
6; 17%
PCR >9mg/dl
PCR < 9mg/dl
29; 83%
49
la supervivencia de los pacientes. (Tabla 9) (Figura 4)
Negativo 20 57.15 %
Positivo 9 25.71%
Intermedio 6 17.14%
Total 35 100 %
Tabla 9. Determinación de títulos antigénicos de Manano y su frecuencia en los pacientes del estudio.
Figura 4. Función de supervivencia según los resultados de títulos antigénicos de Manano.
Negativo 3 17 20
Positivo 2 7 9
Total 7 28 35
Tabla 10. Asociación entre títulos del Antígeno Manano y PCR en los pacientes del estudio.
50
*OR de tendencia NO significativo chi2.= 1.006 P=0.604
51
Tabla 11. Supervivencia de los pacientes durante la estancia hospitalaria.
52
Realizando una correlación entre los títulos antigénicos de manano y los
criterios de la EORTC-MSG, se observo que los pacientes con títulos
positivos para manano de Candida (n=9), 55.5% (n=5) se clasificaron
como IFI Probables, presentando todos un valor de PCR mayor a 9 mg/dl.
(Tabla 10). Se presento el caso de un paciente al cual se le aisló Candida
albicans de un urocultivo, la muestra se considera como no estéril lo que
la descarta de una IFI probada y lo clasifica como una IFI probable; el
titulo antigénico fue menor de 0.25 ng/ml.
Probada; 0; 0%
Grafico 2. Porcentaje de criterios diagnósticos según la EORTC en los pacientes del estudio.
Del total de los pacientes clasificados con IFI probable el 25% tuvieron
títulos de manano positivos y el 87% con valores de PCR mayores a 9
mg/dl; de las clasificaciones posibles según los criterios de la EORTC, el
26% presentaron títulos antigénicos positivos para manano, de los cuales
el 80% presentaron títulos de PCR mayor a 9 mg/dl.
53
fúngico
Tabla 12. Variables de los pacientes del estudio con títulos antigénicos de manano de Candida positivos.
LLA Leucemia Linfoide Aguda
LMA Leucemia Mielodie Aguda
AM Aplasia Medular
LNH-B Linfoma No Hodgkin Burkitt
LCP Leucemia de Células Peludas
A.E Agente Etiológico
54
8. DISCUSIÓN DE RESULTADOS
55
tipo linfoide, que disminuyen de la población mieloide (en especial los
fagocitos, importantes células del sistema de defensa de primer orden)
haciendo al sistema inmune incapaz de responder contra los hongos además
de otros microorganismos, desarrollándose con mayor facilidad la infección
fúngica volviéndose invasiva. (1,3, 6, 8, 11, 17)
56
además de servir como un economizador de recursos en la entidad donde el
paciente es tratado. (1-19).
57
De acuerdo al criterio EORTC/MSG el titulo antigénico positivo de manano
para Candida es indicativo de una infección fúngica posible y en el caso de
nuestro estudio se presentaron 16 probabilidades, como se describió
anteriormente la gran mayoría de los pacientes presentaron también
variables criticas para poder diagnosticar una CI. En los pacientes a quienes
los resultados antigénicos de manano para Candida dieron positivos no hubo
una recuperación del agente etiológico que puede deberse a que la
recuperación del agente etiológico es muy baja (< del 60%). (1-32)
58
9. CONCLUSIONES
Los pacientes que tuvieron el riesgo de presentar una IFI eran en su mayoría
pacientes con patologías onco-hematológicas de tipo Leucemia y Linfoma,
estas variable son muy importantes ya que el paciente se encuentra con un
mayor riesgo de infección debido a la falla del sistema inmune por la
patología de base, además de generarse una inmunodeficiencia por el uso
de agentes quimioterapéuticos como el Hyper CVAD.
Se observo que puede haber una relación entre los títulos antigénicos de
manano de Candida y la mortalidad de los pacientes y aunque esta no haya
sido estadísticamente significativa es un factor que debe ser prescindible
analizar en el estudio de patologías relacionadas en pacientes con
malignidades hemato-oncológicas.
Aunque la PCR no presento una mayor asociación con los títulos antigénicos
de manano de Candida en los pacientes a los cuales se les hizo seguimiento,
este puede ser un marcador de la respuesta del paciente frente al agente
infeccioso, puede ayudar a evaluar la respuesta inmune y el
desencadenamiento de la IFI por medio de su medición seriada y
acompañada de otras pruebas diagnósticas.
59
10. RECOMENDACIONES
Para que todas las variables puedan ser estudiadas de manera que se
obtengan datos con niveles de confianza óptimos se sugiere que se aumente
el número de pacientes teniendo en cuenta las variables de este estudio ya
que permiten limitar muchos sesgos que se puedan presentar y así poder
hallar una relación significativa entre las variables propuestas y el desarrollo
del paciente en su estado vital.
60
11. REFERENCIAS
61
systemic infection caused by pathogenic Candida species.
J.Med.Microbiology. vol 51 (2002) 433-442.
62
of having Candida meningitis. Journal of Clinical Microbiology, Feb.
2004, p. 867-870.
20. M.G. Shepherd, R.T.M Poulter, and P.A Sullivan. Candida albicans:
biology, genetics and pathogenicity. Ann. Rev. Microbiol. 1985. 39:
579-614.
63
from endogenus flora or reactivation. Ann. Rev. Microbiol, 1988. 42:
517-545.
24. Jo- Anne H. van Buril and Paul T. Magee. Aspects of fungal
pathogenesis in humans. Ann. Rev. Microbiol. 2001. 55: 743-772.
64
29. P. Lewis White et all. Comparison of Non-culture-based methods
for detection of systemic fungal infections, with and enphasis on
invasive candida infections. Journal of Clinical Microbiology, May
2005, p. 2181-2187.
65
38. Nina Singh. Jhon R Perfect. Immune reconstitution syndrome
associated with opportunistic mycoses. Lancet Infect Dis. 7 (2007)
395-401
66
ANEXOS
Fungemia
1
Miceliales Hemocultivo positivo, acompañado de signos y
síntomas clínicos compatibles con la revelación
del microorganismo.
1
Levaduriformes Hemocultivo positivo para Candida u otras
levaduras, acompañado de signos y síntomas
clínicos compatibles con la revelación del
microorganismo.
2
Infección fúngica endemica
Cultivo probado del sitio afectado con síntomas
atribuidos a la infección fúngica, cultivo con
resultado negativo, en examen histopatológico
evidencia microscópica de hongos dimórficos
(Blastomyces, Coccidioides y especies de
Paracoccidioides)
Infección fúngica invasiva probable Por lo menos 1 criterio de alto riesgo (Tabla 2);
1 criterio microbiológico y 1 criterio clínico mayor
(o menor) anormal, consistente con la infección.
67
Infección fúngica posible Por lo menos 1 criterio de alto riesgo; 1 criterio
Microbiológico ó 1 criterio clínico mayor o
Menor anormal, consistente con la infección.
1.
Identificación del género y especie por medio del cultivo.
2.
Histoplasmosis, blastomycosis, coccidioidomycosis, y paracoccidioidomycosis.
Clínicos
Infección del tracto respiratorio bajo
Mayor Nuevos infiltrados observados en la Tomografía
Axial Computarizada.
68
Menor Síntomas indicativos de infección en el tracto
respiratorio bajo, (tos, dolor en el pecho, disnea)
Menor
Signos y sintomatología menor de foco
Neurológico, cambio mental, irritación
Meníngea, anormalidades en la bioquímica
y celularidad del LCR (con cultivo negativo en
LCR y negativo para malignidades).
69
ANEXO 2. INFORMACIÓN KITS DETERMINACIÓN DEL ANTÍGENO
MANANO DE Candida spp BIORAD
• Reactivos y material
Además de los reactivos proporcionados con la prueba, se necesitan los
siguientes materiales:
• Pipetas de 50, 100, 300 y 1.000 µl.
• Tubos Eppendorf o similares de 1,5 ml con tapones herméticos que resistan
el calentamiento a 100 °C.
• Centrífuga para tubos de 1,5 ml que permita la centrifugación a 10.000 g.
• Agitador para tubos.
• Baño para hervir las muestras.
• Baño o estufa para incubar las muestras a 37 ÞC.
• Lavador de microplacas.
• Lector de microplacas equipado con filtros de 450 y 620 nm.
70
1. Procesamiento en menos de 24 h: refrigerar a 2-8 °C.
2. Procesamiento después de 24 h: congelar a –80 °C . No congelar y
descongelar innecesariamente.
71
ANEXO 3 MEDIOS DE CULTIVO COMPONENTES Y PREPARACIÓN.
AGAR SABOREAUD
Medio de cultivo semisintético; se utiliza de manera universal para la
identificación sistémica de los diferentes agentes fúngicos.
FÓRMULA:
Glucosa 20 g
Peptona 10 g
Agar agar 20 g
Agua destilada 1000 mL
PREPARACIÓN:
Disolver el medio de cultivo con agua destilada (por cada 1000 mL de agua
destilada se agregan 35 g de medio de cultivo), en un Erlenmeyer.
Posteriormente se coloca en la autoclave a 121 ºC durante 15 a 20 minutos,
luego debe servirse en cajas de Petri.
FORMULA
Infusión de papa 200g
D (+) – glucosa 20g
Agar-agar 15g
Agua destilada 1000 mL.
PREPARACION
72
ANEXO 4 FORMATO DE RECOLECCIÓN DE DATOS DE LOS PACIENTES
DEL ESTUDIO.
Valor diagnóstico del título serológico del Manano de candida y la Proteína C-Reactiva
en pacientes con neoplasias hematolinfoides y neutropenia con factor de riesgo de
Candidiasis Invasivas. Instituto Nacional de Cancerología. Bogotá, Colombia 2007.
Servicio:
Piso 3_______ Piso 5_______ 5 TAMO _____
Estancia Hospitalaria ______días
Condiciones del egreso Vivo □ Muerto □
1. Patologías de base
Leucemia Mieloide Aguda presente □ ausente □
Leucemia Linfoide Aguda presente □ ausente □
Linfoma de Burkitt presente □ ausente □
Linfoma Hodgkin presente □ ausente □
Linfoma no Hodgkin presente □ ausente □
Transplante de medula ósea presente □ ausente □
Mieloma Multiple presente □ ausente □
Mielodisplasia presente □ ausente □
2. Otras Patologías
HIV presente □ ausente □
Diabetes presente □ ausente □
Otra _______________________________________________________
3. Quimioterapia Si □ No □
Tipo de tratamiento ___________________________________________
Inducción Si □ No □
Remisión Si □ No □
Otro _______________________________________________________
5. Tratamiento Antibiótico
Antibiótico presente □ ausente □
Tipo de Antibiótico __________________________________________
Duración (días) ______________________________________________
73
6. Tratamiento Antimicótico
Antimicótico presente □ ausente □
Tipo de Antimicótico ________________________________________
Dosis _____________________________________________________
7. Neutropenia febril Si □ No □
Recuento de Leucocitos: ____________________________________
Neutrófilos absolutos: ______________________________________
Duración de la neutropenia (días) _____________________________
Fecha de recuperación ______________________________________
Otro: _____________________________________________________
11. Histopatología: Si □ No □
Diagnostico histopatológico ___________________________________
16. Observaciones:
__________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________
74
75