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Sistemas tampón fisiológicos

Q.F. JORGE ESTRADA RODRÍGUEZ


Niveles de pH en el cuerpo humano
Muchas biomoléculas actúan a un determinado valor de pH y sólo
toleran fluctuaciones mínimas en él. Dado el bajo grado de ionización
del agua (H2O), cuando añadimos en ésta una pequeña cantidad de
ácido o de base, el pH varía en mucha cantidad, llegando a niveles de
pH en los cuales las biomoléculas no podrían cumplir sus funciones.
Por esta razón los líquidos fisiológicos contienen tampones que, a
diferencia del agua, mantienen el pH constante.
Los tampones mantienen la cantidad de ácidos y de bases en
equilibrio en un determinado pH en el cual la actividad biológica de
las proteínas, hormonas, enzimas, bombas de iones... sea óptima. En
humanos, los valores compatibles con el mantenimiento de funciones
vitales son de pH entre 6,8 y 7,8; siendo el intervalo de 7,35 a 7,45 el
de normalidad. En concreto, podemos decir que cada líquido
fisiológico tiene un nivel característico normal de pH:

 Sangre arterial: pH= 7,4


 Sangre venosa: pH= 7,35
 Líquido intersticial: pH= 7,35
 Líquido intracelular: pH= 6 - 7,4
 Orina: pH= 4,5 - 8
 HCl gástrico: pH= 0,8
Los tampones son los primeros responsables de mantener estos
niveles de pH constantes aunque en el organismo se produzcan altas
cantidades de ácidos debido al metabolismo. Así, los tampones son el
primer nivel de defensa contra los cambios de pH. También
contribuyen al equilibrio la regulación respiratoria (segunda línea de
defensa) y la regulación renal (tercera línea de defensa). Cuando hay
alteraciones debidas a enfermedades de los riñones, pulmones o por
diabetes mellitus, el pH se ve alterado y se padece acidosis(pH<7,37)
o alcalosis (pH>7,43).
Las causas principales de acidosis son: insuficiencia renal, acidosis
tubulorrenal, cetoacidosis diabética, acidosis láctica, sustáncias
tóxicas (etilenglicol, salicilato (en
sobredosis), metanol, paraldehido, acetazolamida o cloruro de amonio.
Las causas principales de alcalosis son: uso
de diuréticos (tiacidas, furosemida, ácido etacrínico), pérdida de ácido
causada por vómitos o aspiración del contenido
del estómago, glándulas suprarrenales hiperactivas (síndrome de
Cushing o utilización de corticosteroides).
Estas alteraciones pueden rendir su efecto en la primera, la segunda o
la tercera línea de defensa; impidiendo así el funcionamiento de todos
los mecanismos complejos que mantienen los niveles de pH a niveles
adecuados.
Sistemas tampón en el organismo
Existen tampones de gran importancia en el organismo:
Inorgánicos:
Tampón bicarbonato:
CO2 + H2O  H2CO3  HCO3 - + H+
Tampón fosfato:
H2PO4-  HPO42- + H+
Orgánicos:
Tampón hemoglobina:
HHbO2  HbO2- / HbH  Hb- + H+
Aminoácidos y proteínas
Tampón bicarbonato
Tal y como se ha comentado anteriormente, el
tampón bicarbonato está compuesto por ácido
carbónico (H2CO3) y bicarbonato (HCO3-) y el valor
de su pKa es de 6,1. Es el tampón más importante
de la sangre (pH=7,4), representa el 75 % de la
capacidad buffer total de la sangre. También está
presente en el líquido intersticial. Es un tampón muy
eficaz porque la relación HCO3-/ H2CO3 es muy
alta, lo que supone una alta capacidad para
amortiguar los ácidos. Supone una ventaja el hecho
que se trata de un sistema abierto ya que el
CO2 puede ser eliminado en la respiración muy
rápidamente, los H+ se pueden eliminar por vía
renal y el HCO3- puede reemplazarse en la orina.
En realidad, este tampón está compuesto por dos
equilibrios, pues el ácido carbónico forma CO 2,
generando una molécula de H2O.

Bicarbonat
Cuando el pH disminuye, el bicarbonato toma los
protones libres. Así, el equilibrio se desplaza hacia
el H2CO3, que a su vez, mediante la reacción
catalizada por la anhidrasa carbónica (glóbulos
rojos), cede una molécula de H2O y se convierte en
CO2, el cual se elimina a través de los pulmones.
Por el contrario, si el pH de la sangre aumenta, se
forma HCO3- a partir de H2CO3, lo que conduce a
mayor captación de CO2. Las concentraciones de
HCO3- y de H+ también se pueden controlar por
mecanismos fisiológicos a nivel renal. El riñón
puede eliminar protones uniéndolos a amoníacos o
fosfatos y mantiene la concentración de bicarbonato
mediante reabsorción o regeneración del mismo.
La suma de las formas sal y ácido se llama reserva
alcalina. En condiciones normales, esta suma tiene
el valor 25,2 mEq de CO2 por litro. Como a pH
sanguíneo (pH=7,4), la proporción entre la forma sal
y ácido es de 20, resulta que [HCO3-] es 24 mEq/L y
[CO2] es 1,2 mEq/L.
Así, es importante tener en cuenta que el cuerpo
necesita más bicarbonato que no ácido carbónico
porque el metabolismo produce más ácidos que
bases.
Tampón fosfato
El tampón fosfato está compuesto por el hidrógeno
fosfato (HPO4−2) y el dihidrógeno fosfato (H2PO 4-).
Actúa en el plasma y el líquido intersticial. Este
tampón tiene un pKa de 6,8, el cual está mucho
más cerca del pH plasmático. Esto significaría que
este tampón tendría que ser más útil que el anterior,
pero no es así ya que se encuentra en
concentraciones menores en sangre y la eliminación
del fosfato es mucho más lenta, por vía renal.

Fosfat
A pH fisiológico de 7,4, la relación HPO 4−2/
H2PO4- es igual a 4. Así, se trata de un sistema
eficaz para amortiguar ácidos. Como hemos dicho,
a nivel sanguíneo, el tampón bicarbonato resulta
más útil que el tampón fosfato ya que este último se
encuentra en concentraciones bajas. Ahora bien, a
nivel intracelular, el tampón fosfato tiene
concentraciones elevadas y es más eficiente.
Tampón hemoglobina
La hemoglobina es una proteína globular
multimérica que dispone de cuatro puntos de unión
a ligandos cuyas propiedades de unión están
reguladas alostéricamente. La función principal de
la hemoglobina es el transporte de dioxígeno por la
sangre.
Referente a su estructura, se trata de un
heterotetrámero y consta de dos pares de cadenas
polipeptídicas diferentes. Cada una de las cadenas
lleva un hemo como grupo prostético, donde se
unen las moléculas de O2, por lo que una
hemoglobina puede unir como máximo cuatro
moléculas de O2.
La captación de O2 se ve afectada, entre otros
factores, por los H+ y el CO2. Algunos factores
favorecen el estado T, en el cual la proteína no tiene
O2 unidos, y otros favorecen el estado R, en el cual
la hemoglobina tiene unidas moléculas de O 2. Este
fenómeno se denomina efecto Bohr. Es muy
positivo para remarcar la diferencia entre las
distintas afinidades para el O2; la cual es esencial
para que cumpla su función de transporte.
Cuando el CO2 forma ácido carbónico y protones,
los protones estabilizan el estado T, de descarga de
O2. Así, en los capilares periféricos, dónde
encontramos CO2, la hemoglobina cede las
moléculas de O2. En los capilares de los alvéolos
pulmonares se invierte este efecto.
Así, cuando se unen H+ a la hemoglobina, se
produce un efecto en el equilibrio del tampón
bicarbonato ya que se induce la formación de
bicarbonato.
Es un tampón fisiológico muy eficiente gracias al
cambio de su pK cuando pasa de la forma oxidada
(pK=7.16) a la reducida (pK= 7.71) y a la gran
cantidad que hay en la sangre.
Aminoácidos y proteínas
Los aminoácidos tienen carácter anfótero, es decir,
pueden ceder protones y también captarlos. Esto es
así gracias a dos de los radicales iones comunes en
todos los aminoácidos: el grupo amino (NH 2) y el
grupo carboxili (COOH). Estos radicales, al estar en
contacto con el agua, se presentan ionizados o
protonados; actuando los dos como donantes o
aceptores de protones.
En pH ácidos:

 El NH2 capta un protón: NH3+ (el pKa para este


ion es 9)
En pH básicos:

 El COOH pierde un protón: COO- (el pKa para


este ion es 2)
En el punto de pKa del grupo amino existe el 50 %
de iones amino protonados (NH3+) y el otro 50 % de
radicales amino desprotonados (NH2). En este
punto, la variación de pH, si adicionamos NaOH a
la disolución, es mínima. Por lo tanto, en este punto
la capacidad amortiguadora es máxima.
En el punto de pKa para el grupo carboxilo existe el
50 % de iones carboxilo protonados (COOH) y el
otro 50 % de iones carboxilo desprotonados (COO -).
En este nivel de pH el aminoácido también es buen
amortiguador.
En el punto isoeléctrico de los aminoácidos sin
cadena radical ácida o básica se encuentra a medio
camino entre el pKa del grupo amino y el pKa del
grupo carboxilo. Y encontramos el aminoácido en su
forma zwitterión, con ambos grupos funcionales
ionizados: NH3+ y COO-.
El punto isoeléctrico de los aminoácidos con
cadenas protonables es diferente ya que existe un
tercer pKa, que corresponde al valor de pH en el
cual el protón de la cadena lateral se disocia.
Así, vemos como esta capacidad para captar y
ceder protones convierte a las proteínas y
aminoácidos en amortiguadores del pH, actuando
como ácidos si están protonados, o como bases, si
no lo están.
Muchas proteínas tienen grupos protonables en la
cadena radical variable, así cada proteína o
aminoácido tiene su punto isoeléctrico y su pKa
característico para cada grupo protonable del
radical variable.
Los pKa pueden verse afectados por radicales
próximos y así, puede variar calidad amortiguadora
de los aminoácidos según radicales de su entorno.
Por ejemplo, la histidina, próxima al grupo hemo en
la hemoglobina, tiene pK muy diferentes según si
está unida al oxígeno o no.
Cuando los aminoácidos se unen formando
péptidos mediante enlaces entre el grupo COOH de
un aminoácido y el grupo NH 2 de otro, desaparecen
sus propiedades amortiguadoras. Ahora bien,
siempre existen los grupos terminales y también los
grupos ionizables de las cadenas laterales de los
aminoácidos: ácido aspártico y glutámico, arginina,
lisina, histidina, etc. Así, para determinar su
capacidad amortiguadora, solamente observaremos
los pK de los terminales y de los laterales
ionizables.
Aplicaciones industriales de las disoluciones tampón
Como hemos visto las disoluciones tampón son muy
útiles para el mantenimiento del pH en sistemas
biológicos, como por ejemplo el cuerpo humano,
pero sus propiedades van mucho más lejos y son
ampliamente usadas en las industrias actuales.

 En la industria agrícola, las disoluciones tampón


se usan para la fertirrigación y la agricultura
hidropónica (cultivar plantas usando disoluciones
minerales y no suelo agrícola). Todas las plantas
tienen un intervalo de pH en que las raíces
absorben nutrientes de forma idónea. Una
variación del pH puede afectar al proceso de
absorción de las raíces: disminuyendo la
captación de minerales y aumentando la
permeabilidad a sustancias tóxicas como el
aluminio. A su vez, una variación en el pH afecta
a la solubilidad de la mayoría de minerales.
Existe un pH idóneo para cada planta
dependiendo de su fisiología y de los minerales
que requiere, pero, como norma general,
podemos decir que precisan un pH ligeramente
ácido (5.5-7) salvo excepciones como las habas
con pH un tanto básico (7.4-8.1)

 En la industria alimentaria también son de gran


importancia los parámetros del pH ya que, por
ejemplo, nos indica si la carne es apta para el
consumo humano. Si la carne está entre 5.4 y
7.0 de pH, es apta para el consumo, pero a lo
largo del tiempo el pH disminuye, hecho que
indica que su consumo no es pertinente. En la
industria vinícola, se deben de tener muy en
cuenta las variaciones de pH en la elaboración
del vino. Este debe oscilar entre 2.8 y 3.5, puesto
que a pH superior a 3.5 determinadas bacterias
pueden atacar el vino y producir variaciones en
el sabor.

 Es sin duda alguna en la industria


farmacéutica en la que se debe tener un control y
conocimiento más exhaustivo del pH, por
distintas razones:

1. Primeramente, para el diseño de los


medicamentos es necesario saber el pH de la
zona del cuerpo en la que trabajará el
fármaco, pues si bajo ese pH las proteínas
que queremos usar se desnaturalizan el
medicamento no tendrá efecto alguno.
2. En el proceso de formulación de los fármacos
se usan las propiedades fisicoquímicas del
pKa y el pH para elegir la fórmula óptima del
medicamento.
3. En los ensayos previos a la comercialización
de los medicamentos se requiere un control
del pH para garantizar que los resultados
obtenidos sean reales y ciertos, pues un pH
erróneo podría dar resultados falsos.
Referencias

Volver arriba↑ Morcillo, Jesús (1989). Temas


básicos de química (2.ª edición). Alhambra
Universidad. p. 270-272. ISBN 9788420507828.
2. Werner-Müller 5a edició
3. Lubert Stryer – Biochemistry (5a edició). Acid-
Base Concepts.
4. http://www.ehu.es/biomoleculas/buffers/hh.htm
5. https://www.itescam.edu.mx/principal/sylabus/fpd
b/recursos/r55275.PDF
6. http://es.wikipedia.org/wiki/%C3%81cido_l
%C3%A1ctico
7. http://www.juntadeandalucia.es/averroes/manuale
s/materiales_tic/biomoleculas/selectividad/amortigua
dores.pdf
8. http://www.uco.es/organiza/departamentos/bioqui
mica-biol-mol/pdfs/06%20pH
%20AMORTIGUADORES.pdf
9. http://www.biologia.arizona.edu/biochemistry/prob
lem_sets/medph/02t.html
10. http://todoesquimica.blogia.com/2008/040603-
tampon-fosfato.php

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