ANEXO 3

Curso: Cromatografía
Código: 401542
Nombre de la Tarea: Tarea 3 – Técnicas específicas

Temáticas a desarrollar:
- Cromatografía iónica: generalidades, equilibrios en el intercambio
iónico, intercambiadores iónicos y aplicaciones.
- Cromatografía de fluidos supercríticos: generalidades, fase
estacionaria, fase móvil, instrumentación: sistemas de muestreo,
condiciones, detectores; eficiencia, resolución y aplicaciones.

Fecha de desarrollo: 31 de octubre al 27 de noviembre de 2019

Nombre del estudiante: Jhonn Freyman Garzon Vallejo

Código:81754429
Programa: Ingeniería de Alimentos

EJERCICIO 1 – CROMATOGRAFÍA IÓNICA

Tabla 1. Ejercicio 1.1 – Generalidades de la cromatografía iónica

Oraciones
a. Cromatografía de intercambio aniónico.
b. Cromatografía de intercambio catiónico.
c. Intercambiadores iónicos.
d. La relación carga y fuerza del soluto es mayor.
e. Matriz aniónica.
f. Matriz catiónica.
g. Resina.
h. Solución amortiguadora de pH.

Mapa conceptual

Solución amortiguadora de pH Estructura porosa e

insoluble (resinas)

intercambiadores
iónicos

Matriz negativamente Matriz positivamente

Su relación
carga/masa es mayor Cromatografía de Cromatografía
intercambio catiónico Intercambio aniónico
 Tabla 2. Ejercicio 1.1 – Generalidades de la cromatografía iónica
Afirmación
Según la influencia del pH, los
intercambiadores iónicos
pueden ser débiles o fuertes.
La cromatografía iónica se
caracteriza por su
reversibilidad.
F V Argumento
Respuesta:
Fuertes: sus grupos están totalmente
ionizados en un amplio rango de pH
(más básico en catiónicos y más ácido
en aniónicos), de forma que su
actividad o capacidad de intercambio
V
se mantiene al máximo en todo ese r
Débiles: sus grupos están ionizados
en un rango de pH más estrecho. La
disociación, que define su carga y por
tanto su capacidad de intercambio,
varía mucho con el pH.
Respuesta:
Están asociados a iones de carga
opuesta o contraiones (A-); la
asociación reversible de éstos se
V intercambia y está en equilibrio con la
de moléculas de los solutos de su
misma carga presentes en la muestra
(B-)
La reacción que representa el Respuesta:
equilibrio en cromatografía de
intercambio aniónico es:
Ecuación
R+A- + B+  R+B- + A+
La reacción que representa el
equilibrio en cromatografía de F Res+A- + B-  Res+B- + A-
intercambio aniónico es:
R+C- + B+  R+B- + C+
La fase estacionaria consta de
intercambiadores iónicos (Res+), que
son grupos cargados unidos
Donde, R representa la
covalentemente a un soporte o
resina, A y C el ion de la fase
matriz.
móvil, y B la carga del soluto.
Referencias bibliográficas:
- Doria, G. (2013). Introducción general a la Cromatografía. En Módulo
Cromatografía (pp. 47-49). Bogotá, Colombia. UNAD - Universidad Nacional
Abierta y a Distancia. Recuperado el 23 de mayo de 2019 de
http://hdl.handle.net/10596/9904

Tabla 3. Ejercicio 1.2 – Análisis de nitritos y nitratos

Pregunta Respuesta
¿Por qué para la muestra del Respuesta:
Jamón no se logró obtener
Para la muestra de jamón no dio
una concentración de nitrato y
niveles de nitritos y nitratos que se
nitrito?
aproximaran a los máximos
permitidos.
Muestra Nivel permisible
NO−¿¿
2 NO−¿¿
3
 Salami 3,7 mg por kg de 0,06 mg por kg
peso corporal por de peso corporal
día. por día
Cábano
Jamón

EJERCICIO 2 – CROMATOGRAFÍA DE FLUIDOS SUPERCRÍTICOS

Tabla 4. Ejercicio 2.1 – Fluidos supercríticos

Pregunta Respuesta
Respuesta:

¿Por qué la cromatografía de La extracción se realiza sin cambios de

fluidos supercríticos es un fase, simplemente variando de las
técnica en fase normal? condiciones de presión y/o temperatura de
los fluidos súper críticos.
 Respuesta:

¿Qué es temperatura crítica? Es aquella a partir de la cual una sustancia

¿Qué es presión crítica?
no puede existir en fase líquida,
independientemente de la presión.
Respuesta:
Máxima presión a la cual un líquido puede
ser convertido en un gas por incremento de
la temperatura.

Referencias bibliográficas:
- Santamaría, M. R. (2003). Extracción con fluidos supercríticos. En
Industria alimentaria: tecnologías emergentes. (pp. 129-136;140-141;
162-163) Barcelona, ES: Universitat Politécnica de Catalunya.
- LIDIA CON LA QUÍMICA. (octubre de 2019). Obtenido de
https://lidiaconlaquimica.wordpress.com/tag/cromatografia-de-fluidos-
supercriticos/

Relación de conceptos
Cuando en la fase móvil está compuesta por un fluido supercrítico que está
por debajo de su ____ presión crítica y por encima de su ___ _____
temperatura crítica _____, actúa como un líquido.

Cuando en la fase móvil está compuesta por un fluido supercrítico que está
por encima de su ______temperatura crítica________ y por debajo de
su _____presión critica _________, actúa como un gas.
 Tabla 5. Ejercicio 2.1 – Tipos de columna en cromatografía de fluidos
supercríticos
Tipos de Longitud Material Características
columna
Respuesta: Respuesta: Respuesta:
Recubrimientos
internos (de un
10 a los 20 m y Sílice fundida
espesor de 0’05 a
diámetros
1 μm) de varios
Capilar o internos que
tipos de siloxanos
tubular oscilan entre
enlazados o
50 y 100 μm.
entrecruzados,
similares a las
empleadas en
cromatografía de
gases.
Respuesta: Respuesta: Respuesta:
Son semejantes a
las empleadas en
10 a 25 cm de Acero inoxidable
cromatografía de
largo,
reparto y
diámetros que
De relleno o proporcionan más
varían entre
empaquetada platos teóricos
0’5 y 5 mm y
s (más de 100.000)
cuyas
y manejan
partículas
volúmenes más
tienen un
grandes de
diámetro que
muestra que las
oscila entre 3 y
columnas capilares.
10 μm
Referencias bibliográficas:
- LIDIA CON LA QUÍMICA. (noviembre de 2019). Obtenido de
https://lidiaconlaquimica.wordpress.com/tag/cromatografia-de-fluidos-
supercriticos/

Tabla 6. Ejercicio 2.1 – Detectores

Tipo de muestra para
Detectores Características
analizar
Respuesta: Respuesta:
Suele utilizar una llama de Petroquímicos,
aire o hidrógeno por la cual farmacéuticos y de gas
se pasa la muestra para natural.
oxidar las moléculas
Ionización de Compuestos orgánicos, de
orgánicas y que produce
llama elevada sensibilidad
partículas con carga
eléctrica (iones). Los iones
se recogen y se produce
una señal eléctrica.

Respuesta: Respuesta:
El flujo de líquido que sale
de la columna pasa a través
Grupos funcionales de
de una pequeña celda, de
moléculas.
pequeño volumen (entre 1
a 10 μL), para minimizar el
Absorción
ensanchamiento de banda.
visible- UV Determina la fuerza en una
La medida de la
sustancia.
absorbancia del líquido que
la atraviesa en función del
tiempo constituye el
Cromatograma.
 Respuesta: Respuesta:
Es una técnica de utilidad
en la identificación de todo
Poliméricos, combustibles,
tipo de compuestos
Espectrometría minerales,
orgánicos e inorgánicos, en
infrarroja la determinación de grupos
funcionales en matrices
orgánicas, así como en el
estudio de la composición
molecular de superficies
Respuesta: Respuesta:
Permite estudiar Compuestos orgánicos y
compuestos de naturaleza organometálicos,
diversa: orgánica, biopolímeros y
inorgánica o biológica macromoléculas orgánicas.
(incluyendo biopolímeros y
macromoléculas naturales o
artificiales) y obtener
información cualitativa o
Espectrometría cuantitativa. Mediante el
de masas análisis por Espectrometría
de masas es posible
obtener información de la
masa molecular del
compuesto analizado así
como obtener información
estructural del mismo, o
simplemente detectar su
presencia y/o cuantificar su
concentración.
Referencias bibliográficas:
- ESPECTROFOTOMETRÍA INFRARROJA. (noviembre de 2019). Obtenido de
https://www.upct.es/sait/es/tecnicas-espectrometricas-y-
afines/espectrofotometro-infrarrojo////
Espectrometría de masas. (noviembre de 2019). Obtenido de
http://laboratoriotecnicasinstrumentales.es/analisis-
qumicos/espectrometra-de-masas

Tabla 7. Ejercicio 2.1 – Tipos de cromatógrafos de fluidos supercríticos

Cromatógrafo A Cromatógrafo B

Figura 1. Cromatógrafo A Figura 2. Cromatógrafo B

(Zambrano, M. 2019) (Zambrano, M. 2019)
Componentes
A: Fase móvil A: Registrador
B: Regulador B: Detector
C: Bomba de jeringa C: Región supercrítica
D: Columna de relleno o D: Bomba reciprocante
empaquetadura
E: Flujo modificador
E: Flujo modificador
F: Sistema de inyección
F: Sistema inyección
G: Regulador de presión
G: Detector
H: Columna capilar o tubular
H: Registrador
I: Fase Móvil
I: Horno termostatizado
J: Bomba de jeringa
J: Región supercrítica
K: Horno termostatizado
K: Bomba reciprocante

Lista de componentes
Bomba de jeringa. Flujo modificador.
Bomba reciprocante. Horno termostatizado.
Columna capilar o tubular. Región supercrítica.
Columna de relleno o empaquetada. Regulador de presión.
Detector. Sistema de inyección.
Fase móvil.

Tabla 8. Ejercicio 2.2 – Diagrama de fases

 Diagrama Fases Dioxido carbono
120
f(x) = 10.57 x + 611.79
R² = 0.98
100

80
Presion (bar)

60

40

20
f(x) = 0.19 x + 15.79
R² = 1
f(x) = 0.24 x
0 R² = 0.06
-80 -60 -40 -20 0 20 40

Temperatura K

Análisis
Respuesta:
El punto 0 es el punto triple donde se tienen los valores de presión y
temperatura únicos a los que coexisten las tres fases sólido, liquido, y el
gas, como lo indican los siguientes valores.
Presión triple (bar): 5 Presión crítica (bar): 101
Temperatura triple (K): -57 Temperatura crítica (K): -48

Tabla 9. Ejercicio 2.3 – Purificación de EPA y DHA en muestras de aceites

 Análisis comparativo
EPA
Respuesta:
Uso de temperatura moderada
Extracción de lípidos de baja Extracción
polaridad.
La fase móvil utilizando agua, su
presión generada para las diferentes
muestras oscilo de 50 – 250 con
temperaturas desde 150 -267,
siendo la de mayor concentración
con un 88% este resultado se logra
por mantener una presión entre los
100-200 y una temperatura de 234,
según los resultados entregados por
los estudiantes arrojan para una
muestra 0 concentración de aceite
EPA esto se originó por no cumplir
con los valores correspondientes a
presión y temperatura.
La utilización CO2 parte desde una
temperatura de 80 – 200 para todas
la muestras EPA, sus temperaturas
oscilan entre 313 – 338, las
concentraciones significativas
resultan de no aumentar su
temperatura a los 338, la
concentración mínima del 50% se
origina por el aumento en su
DHA
Respuesta:
Uso de temperatura moderada
de lípidos de baja
polaridad.
La fase móvil utilizando agua tuvo
un mejor comportamiento en la
concentración de DHA factor
importante la temperatura la cual no
superó los 234 con concentraciones
entre los 79% y 90%.
La utilización de CO2 para las
muestras DHA depende del manejo
de su temperatura para una mayor
concentración dependiendo de las
muestras ya que para algunas su
presión debe disminuir pero la
temperatura debe estar por encima
de 338 logrando un 90% de
concentración, con una presión de
entre 100-150 y una temperatura
entre 313-333 se pierde la
concentración de la muestra debido
a las fluctuaciones de los valores a
no ser constantes.
temperatura la presión fue
constante.