VACUNAS VIRALES virus cuando son abundantes, pues producen alteraciones
alostéricas que impiden unión del virus a su receptor,
Para esta clase tienen que recordar lo que vimos de
respuesta inmune a los virus y qué es la inmunidad innata y
adaptativa.
¿Qué es la inmunidad innata? (estudiante responde pero
no es muy claro) es la primera respuesta, está implicada la
barrera epitelial que secreta defensinas, implicados los
neutrófilos, dice algo como que los epitelios solo sirven de
barrera... profe continúa y corrige dice que algunos
epitelios sí funcionan como respuesta inmune, por
ejemplo la mucosa gastrointestinal secreta citoquinas,
censa microbios y funciona un poco diferente a los demás
epitelios.
¿Qué más pueden decirme? Estudiante dice que es la una
respuesta de rápida acción, profesora insiste en ¿cómo es,
¿cuáles son las moléculas y células implicadas?
Estudiante responde: está implicada varios componentes,
las barreras epiteliales, péptidos antimicrobianos y también
hay un componente celular que está conformado por
células que se encuentran en los tejidos o llegan en
respuesta a citoquinas, como lo son neutrófilos,
macrófagos, eosinófilos, para los virus son importantes las
Natural Killer, hay una importante que no nombraron, las
células dendríticas que son importantes porque están allí y
van a capturar esos antígenos y luego estimularan la
respuesta adaptativa, además estas células dendríticas
secretan IFN tipo 1 que será como una citoquina antiviral
por excelencia.
La adquirida ¿cuál es? mediada por linfocitos T y B, ¿para
los virus cuáles son importantes? Grupo dice que LTCD8
pero profe enfatiza que son las dos porque los LTCD4
también van a producir IFN-gamma respuesta celular para
proteger de una infección nueva o ya establecida, pero la
respuesta humoral también nos ayuda para proteger de las
re-infecciones a través de los anticuerpos que son
neutralizantes, que son de los isotipos IgG, pero también
IgA en mucosas, IgM IgE, y ¿cuál es la especificidad de esos
anticuerpos neutralizantes? proteínas virales de superficie
que utilizan como receptor para unirse a la célula
hospedera y facilita la infección, pero también esos
anticuerpos pueden unirse a otros sitios diferentes en el
evitando así la infección.
¿Cuáles otros anticuerpos antivirales son importantes? los
anticuerpos que median la citotoxicidad, es decir la
citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos, ese es
un tipo de citotoxicidad; para los virus no es muy claro el
mecanismo cómo funciona. El otro mecanismo que hemos
visto que funciona muy bien mediada por Ac, ¿cuál es?
Cuando un Ac está unido a un virus ¿qué puede suceder?
Fija el complemento y ahora esa célula o partícula viral se
puede destruir por esas partículas del complemento,
entonces será también un mecanismo muy importante. Eso
resume más o menos la respuesta inmune a los virus.
La respuesta inmune adaptativa entonces la podemos
dividir en activa y pasiva, entonces ¿a qué se refiere eso?
Esos términos se refieren a la forma como se estimula o se
adquiere. En general la inmunidad pasiva, se refiere
prácticamente a anticuerpos porque se adquieren ya sea de
una forma natural: que la mamá se lo transfiere al feto, o
de una forma artificial: porque se la hemos inyectado con
sueros hiperinmunes, que es lo que se denomina
específicos a esos virus.
En general inmunidad pasiva qué otra característica
tiene? que no hay memoria, como no se adquirió
activamente, no se desarrolló en el organismo, en órganos
linfoides no hubo presentación antigénica, pues no hay una
memoria, entonces ¿qué creen que va a pasar con esa
inmunoglobulina que se inyectaron o se adquirieron
pasivamente? tienen un periodo de vida, o sea las
moléculas son proteínas y se van a degradar o se van a
excretar, ellas son temporales, son una protección
temporal, cortica, transitoria; tanto la artificial como la
natural van a tener un tiempo de vida corta, de pronto la
artificial un poco menos semanas que la natural: la madre
transfiere las inmunoglobulinas a el feto, principalmente en
el segundo trimestre del embarazo, cuando los receptores
Fc de las inmunoglobulinas que les permiten endocitar en la
placenta esas inmunoglobulinas, los expresa a través del
segundo trimestre del embarazo, ahí es cuando empieza el
niño o el feto los adquiere y son abundantes, entonces
esos anticuerpos van a permanecer en el organismo
después de que nace unos 4,5,6 meses, si son muy
abundantes probablemente 7 , 8 meses. Después esos
anticuerpos decaen y si el niño no ha formado sus propios
anticuerpos entonces va a estar desprotegido, puede haber
un período ventana en el que el niño esté desprotegido,
por eso hay que aplicarle las vacunas para que empiece a
desarrollar su respuesta inmune activa.
¿En qué casos aplicamos una inmunoglobulina
hiperinmune? Para neutralizar las toxinas como tétano o
una mordedura de serpientes, ¿y en virus? La rabia, en esas
enfermedades mortales que no pueden esperar a que el
sistema inmune, si le aplicamos una vacuna, obvio hay que
aplicarse pero se va a demorar 5,6,7 días, 1 semana en
formar anticuerpos y en formar células que lleguen allá.
Entonces ese virus es mortal y hay que detenerlo antes de
que se disemine, en ese caso hay que aplicar suero
hiperinmune. En hepatitis B también hay que aplicarla.
Y la inmunidad activa se refiere a la que desarrollamos
porque hay presentación antigénica, el antígeno va a los
nodos linfáticos, se activa esa respuesta inmune, entonces
aquí necesitamos las células dendríticas y el resto de células
del sistema inmune. Pero también tenemos la que
desarrollamos naturalmente que se refiere a cuando
estamos expuestos a una infección viral u de otro
microorganismo, y artificial cuando aplicamos las vacunas.
Para resumir, la inmunidad pasiva es de fuente exógena, ya
sea la mamá o un suero hiperinmune, ofrece una
protección transitoria y está dada por sueros específicos
que pueden ser:
● Globulinas humanas hiperinmunes, es decir que a un
pool de individuos inmunes a una infección le toman
el suero y purifican, le quitan los agentes infecciosos
que conocemos y esas inmunoglobulinas las pueden
aplicar a las personas.
● Sueros heterólogos hiperinmunes, heterólogos se
refieren a que son de otra especie, de caballo o de
otras especies animales; el riesgo que tendrían es que
uno haga una reacción, una enfermedad del suero
contra esos anticuerpos, entonces cada vez se han
dejado más de un lado pero a veces no se pueden
conseguir los hiperinmunes, entonces hay que usar los
otros.
● Hay una tercera categoría que es la más moderna que
es hacer anticuerpos monoclonales ¿quién sabe qué
es la tecnología de anticuerpos monoclonales?
Fusionan un linfocito B con una célula inmortal, el
linfocito B produce los anticuerpos específicos a lo que
queremos desarrollar inmunidad, entonces la fusionan
con ese linfocito B que produce anticuerpos y queda
inmortal, y ¿por qué se llama monoclonal? porque es
una sola clona específica, hay que seleccionarlo con
unas pruebas y debe ser específico a un solo antígeno,
porque podemos tener linfocitos B que son específicos
a una sola proteína, pero van a estar dirigidos contra
varios epítopes en esa proteína o diferentes proteínas
de un mismo bicho; entonces tenemos que escoger en
el laboratorio una sola clona de linfocito que nos
produzca un solo tipo de anticuerpo para un solo
epítope y tenemos que conocer también cuál es el
antígeno que necesitamos neutralizar, porque sí
podemos producir una clona, pero resulta que es para
una proteína dentro de la cápside y el virus es
envuelto, entonces le vamos a dejar que infecte si no
lo bloqueamos, entonces tienen que ser anticuerpos
neutralizantes, o sea que tenemos que conocer cuáles
epítopes son los que necesitamos neutralizar.
Esto de la tecnología de anticuerpos monoclonales se
desarrolla en ratones, donde toda la fracción efectora y la
fracción constante es de ratón, entonces ¿ustedes creen
qué esto funciona en humanos? Esos se desarrollaron para
hacer pruebas de laboratorio y pruebas diagnósticas, son
con los que se hace inmunofluorescencia, Elisa, western
blot, pero inyectándoles a humanos, ¿ustedes creen que
funciona?
Estudiante: Profe lo que yo había leído es que se deja la
fracción Fab que se une a la fracción variable y se modifica
es la otra parte de la cadena.
Profesora: Pero ¿por qué? Por qué si le inyectamos toda la
del ratón, la molécula completa, el anticuerpo monoclonal
específico contra el epítope neutralizante del virus, ¿por
qué?
Estudiante: Porque el Fab ya tiene especificidad por ese
epítope, o sea igual se va a unir y la Fc es el que se
cambiaría para que puedan reconocerla las células de
nuestro sistema inmune, o sea él se cambia (la Fc de
anticuerpo) y el Fab está neutralizando el antígeno.
Resumiendo, el Fab va a reconocer el antígeno que a fin de
cuentas es lo mismo, pero resulta que el anticuerpo tiene
otra parte qué es la parte efectora. Efectora con células
como para ser reconocida, como tú decías, y hacer
citotoxicidad celular o para fijar complemento, o sea que la
porción Fc del ratón no va a ser reconocida por las células
del humano.
Estudiante: ¿Pero serviría como neutralizante?
Profesora: Pues serviría como neutralizante, pero si
solamente usamos el Fab; y al contrario lo que uno podría
hacer es producir anticuerpos contra la porción Fc del ratón
entonces sería contraproducente ¿cierto? Entonces lo
mejor es que haya algún pedacito humano que sea la parte
efectora y eso es lo que se ha construido. Eso es a lo que se
refiere como un anticuerpo monoclonal humanizado: la
fracción variable del ratón que es fácil obtenerla, pues
porque no podemos llegar a inmunizar humanos y sacarles
los anticuerpos, no podemos hacer los monoclonales de esa
manera. Hoy día también se pueden hacer anticuerpos
monoclonales humanos, pero con linfocitos B de individuos
que ya se han infectado y tienen linfocitos B específicos a
los virus. Esos anticuerpos humanizados se utilizan como un
suero hiperinmune, pero no es que sean una vacuna viva,
sino que son anticuerpos simplemente.
La transferencia transplacentaria es mediada por IgG y la
calostral, que es la de la leche, en la que vamos a tener una
gran cantidad de IgA.
Entonces las ventajas de la inmunidad pasiva es que dan
una protección inmediata, y especialmente es muy
importante para los grupos a riesgo, para los virus que son
mortales, entre estos el virus de la Rabia, para los
individuos a riesgo como los VIH positivos o las mujeres
embarazadas que se exponen a varicela, al recién nacido
que nació de la mama con Hepatitis B; a estas personas hay
que inmediatamente bloquearles ese inóculo de virus
porque puede ocurrir un desastre y también se le aplica la
vacuna, pero primero hay que neutralizar ese inóculo de
virus.
Y las desventajas es que son de duración es corta, una vez
se degradan esos anticuerpos el individuo queda sin
protección y además posiblemente no formó respuesta
inmune, se bloqueó la formación de la respuesta inmune
activa.
Estudiante: ¿el suero hiperinmune también puede formar
depósito de inmunocomplejos?
Profesora: Pues esperas qué no porque no hay demasiado
antígeno, lo que uno busca es bloquear el inóculo inicial. Si
uno ya aplica el suero cuando ya está invadido, ya no sirve
para nada, ya se diseminó el virus. El propósito es que sea
rápidamente por eso no se puede esperar a que pasen tres
días, sino que uno quiere es aplicar inmediatamente para
que el inóculo que entró se bloquee y no se disemine, que
ni siquiera se multiplique en el sitio de entrada. Entonces
no hay ni siquiera chance de que se formen complejos
inmunes.

¿Qué ejemplos tenemos de vacunas con inmunidad pasiva?
● Virus de la Varicela Zoster
● Virus de la Rabia
● Virus de la Hepatitis B
● Virus Respiratorio Sincitial
Estos son los virus principales en los cuales después de la
exposición es importante aplicar un suero hiperinmune o
tener esa inmunidad pasiva. En el caso de Varicela Zoster
hay un suero hiperinmune qué se denomina VARIZIG qué es
IgG qué es específica al virus de la varicela, y se aplica
principalmente en chiquitos o en personas
inmunodeficientes que se han expuesto al virus de la
varicela. Ese suero hiperinmune debe de aplicarse muy
temprano después de la exposición; se le aplica a mujeres
embarazadas que han estado expuestas, porque la vacuna
viva o activa que existe de varicela es una vacuna de virus
vivo, atenuado, que no se la podemos aplicar a personas
con inmunodeficiencias. La única opción que existe es la de
aplicar el suero hiperinmune, ¿por qué? Porque en
embarazadas es mejor que no tenga varicela, en las
personas inmunodeficientes si no tienen inmunidad celular
se van a morir con un Herpes.
El virus de la Rabia es 100% mortal si llega a cerebro,
entonces no podemos correr el riesgo, el protocolo de
accidente rábico exige que se ponga las dos, la vacuna, pero
también el suero hiperinmune. Entonces hay un suero
hiperinmune y se aplica post-exposición.
El virus de la Hepatitis B también, un ejemplo es en el
momento del nacimiento: cuando nace un chiquito que
sabemos que la mamá tiene Hepatitis B (a todos los chicos
cuando nacen hoy en dia les aplican la vacuna) lo mejor es
ponerle también el suero hiperinmune. Si nació también
por vía vaginal, porque está expuesto a toda la sangre.
Entonces también es post-exposición.
El Virus Respiratorio Sincitial es el principal patógeno
respiratorio de niños menores de 2 años, es mortal en
niños que tienen patologías de base como enfermedades
congénitas, cardiacas, los que han nacido prematuramente
(menos de 34 semanas), esos chiquitos tienen el riesgo en
el resto de sus meses después de haber nacido, de adquirir
el virus y de su enfermedad ser mucho más grave. A esos
prematuros a riesgo se les aplica esa vacuna del Virus
Respiratorio Sincitial. La vacuna del VRS se le llama vacuna,
pero es un monoclonal humanizado que se llama
PALIVIZUMAB, costosísimo, mil dólares al mes. Se aplica en
los prematuros, en los niños con enfermedad pulmonar de
base.
En cuanto a la inmunidad activa, se refiere a las vacunas.
Para los virus tenemos unas que se llaman atenuadas y
otras que se llaman inactivadas. ¿Qué se necesita para que
las vacunas sean efectivas?:
● Por un lado, que no ocasione enfermedad, o sea que
sea segura.
● Que sea efectiva ¿a qué se refiere con que sea
efectiva? Que sí yo vacuno al 100 personas, 90 de ellas
queden vacunadas, que queden protegidas, tengan
respuesta inmune y no les de la enfermedad cuando
se infecten en la naturaleza, y que produzca memoria
inmunológica de larga duración, entonces a las
vacunas atenuadas vivas que son las que más se
parecen a una respuesta inmune natural a los virus,
estas vacunas tienen memoria de larga, de años, y las
vacunas que son inactivadas tienen una memoria un
poco más corta, por eso hay que aplicar muchos
refuerzos para que la memoria sea un poco más
duradera.
● Que la vacuna tenga pocos refuerzos porque a la
gente se le olvida ir, o se aplica la primera pero no la
tercera, entonces entre menos refuerzos tenga mejor,
porque va ser tener una mejor memoria.
● Que no sea costosa para que se pueda incluir en los
sistemas de salud ¿de qué depende de que sea
costosa? del tipo de vacuna, y de la forma como la
producen.
● Que sea de fácil administración.
● Que tenga pocos efectos secundarios: que no se
indure, que no produzca tanta fiebre, adenopatías,
porque la gente cuando las vacunas son así, a la gente
le da miedo, de hecho, hay mitos alrededor de ciertas
vacunas, entonces entre menos efectos secundarios
tenga más fácil que una mama la aplique a sus hijos.
En los virus es muy importante que una vacuna pueda
inducir respuesta inmune humoral y celular ¿cierto? ya
vimos que la respuesta protectora hacia los virus es de las
dos:
1. la celular es importantísima porque le permite
eliminar el virus cuando ya se ha metido a la célula y
las está infectando.
2. y la humoral de anticuerpos es muy importante para
evitar que el virus infecte la célula o infecte el
organismo, entonces eso es lo que buscamos primero
en una vacuna, evitar que infecte, pero si ya infectó
pues que lo elimine.
Recordemos que, en la respuesta inmune a los virus, en una
infección viral aguda, cuando un virus se ha establecido y se
está replicando en el organismo, el virus en la infección
viral aguda se replica en la primera semana, la segunda
semana es de síntomas, tenemos una respuesta
inflamatoria natural y después tenemos la respuesta
inmune de linfocitos T y los anticuerpos, entonces esto es lo
que necesitamos saber cuando vamos a diseñar una vacuna
para saber cómo funcionan las vacunas.
VACUNA VIVA O ATENUADA
Las vacunas vivas o atenuadas, se llaman vivas, aunque
sabemos que los virus no son seres vivos, pero se llaman así
para facilitar el entendimiento y la alerta que es una vacuna
que se puede replicar, entonces una característica de las
vacunas vivas o atenuadas es que se pueden replicar, ese
virus que es replicante y una vez que se lo aplique se va
replicar. Pero se llama atenuada porque no tiene virulencia,
¿qué significa que no tiene virulencia? que no le va a causar
la enfermedad a la persona; se puede replicar, pero no
causa enfermedad, eso significa atenuada.
VACUNA INACTIVADA
La vacuna inactivada no se puede replicar, tampoco debe
de causar enfermedad, pero puede ser el virus completo
inactivado, o pueden ser pedazos del virus, pueden ser las
proteínas que uno sabe que son inmunogénicas, entonces
para eso debe de haberse hecho una investigación previa
de conocer cuál es la respuesta principal de inmunidad
contra ese virus que protege. También pueden ser
proteínas recombinantes.
VACUNA VLP
También hay otras vacunas que son intermedias, y ¿por
qué son intermedias? porque parecen una partícula viral
viva, aunque no se pueden replicar, pero cuando uno las
inyecta el sistema inmune cree que sí son partículas virales,
es decir que deben entrar a la célula dendrítica (muy similar
a como la vacuna viva entra que es entrando por
endocitosis, cruzando los receptores, entonces desde allí es
que empiezan las células a pensar que se trata de un virus
vivo), pero cuando entra a esa célula dendrítica el virus ya
no se va a poder replicar porque no tiene genoma, y la
respuesta inmune que uno estimula va a ser una
combinación entre la que se estimula con virus activado e
inactivado, se llaman las vacunas VLP, por la siglas en
inglés: Virus Like-Particules, que significa partículas
parecidas a los virus, y se refiere a cápsides virales vacías.
Son como las cápsides del virus, pero por dentro no tienen
genoma, así que van a entrar a la célula como si se tratara
de un virus que la está infectando, pero cuando entra lo
único que se van a utilizar son las proteínas que ya estaban
ahí formadas en esa cápside, y ahí va a funcionar como si
fuera una vacuna inactivada.
Ejemplos de vacuna virales atenuadas tenemos el
sarampión, las paperas, rubeola, polio, viruela (esta ya está
erradicada) varicela, fiebre amarilla. Por ejemplo, para el
virus de polio hay dos versiones está la vacuna atenuada,
pero también tenemos una inactivada. Para otras no se ha
podido tener las dos versiones: para sarampión sólo hay
atenuada, no tenemos inactivada porque una vez se intentó
hacer una vacuna inactivada y ocurrió un desastre, esa
vacuna inactivada estimuló una respuesta celular de
hipersensibilidad retardada en lugar de estimular la
respuesta inmune adecuada que uno espera, entonces
cuando esos chiquitos se infectaron naturalmente con esa
vacuna les dio una hiperreactividad bronquial horrible y
hubo hasta muertos. Esa vacuna la tuvieron que sacar del
mercado, jamás en la vida podemos hacer una vacuna
inactivada con sarampión toca hacerla viva; eso mismo
ocurrió con el Virus Respiratoria Sincitial, hoy en día
todavía no hemos podido diseñar una vacuna contra el
virus respiratorio atenuada. Afortunadamente para
sarampión se logró hacer una atenuada.
Si les pregunto en el examen que es una vacuna atenuada entonces si no me contestan que es
que son virus replicantes, pero que no causan enfermedad les queda mal, ya saben por qué.
Las vacunas virales atenuadas ¿cómo se obtienen? ¿Cómo
construyo una vacuna que se replique pero que no me
cause enfermedad? tiene que ser muy difícil ¿cierto?
algunas veces por pura suerte encuentran una cepa que no
causa enfermedad. Por ejemplo, en polio: estaban
investigando polio en chimpancés, eso es importante en
modelos animales porque de las ventajas que ha habido es
que, por ejemplo, si el virus es capaz de infectar a
chimpancés y causar la misma enfermedad que en
humanos entonces se empieza a investigar en ellos, y así
encontraron una cepa que se replicaba pero que no
causaba polio ni causaba enfermedad neurológica; esa cepa
la cogieron y la propagaron y la están utilizando todavía
como la cepa vacunal.
Pero no todas las veces tenemos esa oportunidad, que se
logre encontrar una cepa naturalmente atenuada, que no
cause enfermedad. Cuando eso no sucede hay que hacerla
¿y cómo se hace? entonces una de las formas con las cuales
se hace, y por ejemplo el sarampión, las paperas, rubéola
se ha hecho de esta manera, es cultivarla in vitro, pero se
cultivan primero en células de otra especie. Cuando vimos
la primera clase hablábamos que los virus son especie-
específicos y que los de humanos son de humanos, los de
animales son de animales, que hay excepciones, pero
principalmente lo general es que sea especie-específico y
eso depende de los receptores celulares, de que las células
tengan receptores, pero además que dentro de ese tejido
haya factores de transcripción que le permitan la
replicación a ese virus.
Entonces cuando los virus se cambian de especie, en la
zoonosis, a veces es lo contrario, o sea cuando llegan e
infectan al humano son peores, más virulentas; pero
nosotros lo podemos manipular in vitro y hacer que lo
hagan y no van a ser tan malas cuando realmente ese virus
no es específico por las células de otras especies. Entonces
uno toma células in vitro de otra especie y adapta el virus a
crecer allí, el virus se adapta a crecer y en esa adaptación a
crecer genera mutaciones y se vuelve menos virulento para
los humanos, después se ensaya en chimpancés o en
animales primero y ya el virus pierde como el tropismo por
ese órgano blanco, se replica en unas células, pero ya no en
el órgano blanco, y esa cepa va a ser la que uno utiliza
después como una vacuna.
Genética reversa
Otra manera de hacer una vacuna atenuada es lo que se ha
denominado genética reversa, y es construirla en el
laboratorio. Ya que es difícil hacerla a través de subcultivos
y fases celulares en otras especies, lo que uno hace en el
laboratorio es hacerla, crearla genéticamente. Se llama
genética reversa porque se utiliza para los virus que son
genoma RNA, y genética reversa significa que yo tengo que,
con esa molécula de RNA, hacer una molécula de ADN para
trabajar la ingeniería genética y poder después con ese
ADN meterlo a una célula y que se haga ARN del virus.
El típico ejemplo de la genética reversa es la vacuna del
virus de influenza, para este virus tenemos una vacuna
inactivada que es la que todo el mundo conoce que se hizo
desde hace muchos años, pero tenemos una viva que se
llama FluMist que se aplica por aerosol a las personas que
no son a riesgo. Esa vacuna se construye porque tenemos
una cepa ya vacunal que no es virulenta, y lo que nosotros
queremos cuando aparece una nueva cepa de influenza,
que es aquella que tiene sobre su superficie las proteínas
hemaglutinina y neuroaminidasa distintas de la cepa
anterior para las cuales nadie tiene respuesta inmune, es
generar anticuerpos neutralizantes que bloqueen esa
superficie viral, para lo cual necesitamos que la cepa
vacunal, que no es virulenta, nos produzca en su superficie
la proteínas del virus que está circulando y que está
causando enfermedad, y eso es lo que vamos a hacer
genéticamente; además aprovechamos que es un virus
segmentado (recuerden que en los genomas segmentados,
como el del virus de influenza, cada segmento del virus
codifica para una proteína distinta) y lo que hacemos es
que a la cepa que es virulenta, que está causando
enfermedad, le sacamos los “pedacitos” de RNA que
codifican para las proteínas de superficie, en esta caso la
morada y la anaranjada (refiriéndose al color de las
proteínas en la imagen de la diapositiva).
Se
toma ese segmento y lo pasamos a ADN y lo insertamos en
unos plásmidos que van a contener, cada uno, un segmento
de la vacuna, y le colocamos la parte que codifica para la
proteína, pero “volteada”, o sea no como RNA sino como
ADN para poderla clonar. Entonces cada plásmido contiene
cada uno de los genomas del virus, los de la cepa de la
vacuna y los dos que queremos de las proteínas de
superficie de la cepa virulenta que está circulando, y esos
pedacitos in-vitro se los transfectamos o los colocamos en
unas células que sean susceptibles de multiplicar el virus de
influenza, pero no le colocamos el virus, le colocamos todos
los 8 segmentos (los DNA codificando los RNA del virus).
Esa célula hace transcripción de esos genomas virales y van
a construir un virus, y se sintetizan las partículas virales y
salen los virus de influenza quimera, que son la vacuna
porque tienen todos los genes de la vacuna de la cepa
vacunal y los únicos 2 genes nuevos que va a tener serán
los de la proteína de superficie del virus salvaje que está
circulando y que es patogénico; a eso se le llama genética
reversa. Así obtenemos el virus quimera que se va a
replicar, va a infectar a través del tracto respiratorio, pero
ya no es virulento, sino que va a estimular anticuerpos
neutralizantes contra las proteínas de superficie del virus
estacional que está causando enfermedad en la naturaleza.
En el caso del virus de influenza se hace contra las dos
proteínas de superficie:
● La hemaglutinina que le sirve para entrar por
endocitosis.
● La neuroaminidasa que es una enzima que al
contrario le permite cortar las uniones del virus a la
célula para que pueda gemar y pueda salir de la célula
y tampoco forme grumos, porque si no tuviera
neuraminidasa ese virus uno con otro se agruparía y
formarían “peloticas” y al formar esos grumos pues no
van a infectar la célula, entonces lo que hace la
neuraminidasa es cortar esas uniones para que el virus
libre vaya e infecte células.
Los anticuerpos neutralizantes que busca la vacuna generar
es que necesitamos bloquear acá o necesitamos bloquear al
final (señala en la diapositiva).
Ventajas vacunas atenuadas
Las vacunas vivas atenuadas tienen la ventaja de tener una
respuesta inmune similar a la infección natural, entonces
estimulan inmunidad celular, inmunidad de anticuerpos,
además podemos tener inmunidad de mucosas con IgA.
Desventajas vacunas atenuadas
 De alguna forma, como el virus se está replicando,
podría generar una mutación y revertirse o
convertirse en una forma virulenta, los que más
tienen chance de que eso pase, aunque de todas
maneras el riesgo es bajo, seria en las personas
inmunosuprimidas, por eso es mejor no aplicárselas a
ellos porque habría reacciones adversa en
inmunocomprometidos.
 Podría haber interferencia con anticuerpos
circulantes, esto se refiere a que si una persona ha
tenido inmunidad previa, ha tenido anticuerpos contra
el “bicho”, si le ponen la vacuna puede que esos
anticuerpos neutralicen el inóculo de la vacuna, y
como es una vacuna viva entonces el inóculo o la dosis
es bajita (uno no puede aplicar en una vacuna viva
muchos virus para evitar efectos secundarios); los
inóculos son bajitos porque el cuerpo es la misma
máquina productora de la vacuna: cuando se la
aplican a uno se reproduce y se aumenta y por eso el
inóculo de las vacunas vivas es poquito. Entonces
poquito virus y si uno ya tiene anticuerpos se bloquea,
se neutraliza ese inóculo y no queda vacunado; o hay
algunos virus que tienen primos hermanos, por
ejemplo los enterovirus, todos estamos infectados con
enterovirus y estamos expuestos a enterovirus,
entonces por ejemplo en la vacuna de polio, que es de
 la misma familia del enterovirus, si nos aplican la
vacuna de polio y uno ya tiene anticuerpos contra los
enterovirus, estos anticuerpos podrían neutralizar la
vacuna del polio, ya que cuando uno tiene bastantes
anticuerpos que se unen encima del virus, así no sea a
la proteína que le sirve para infectar las células, pues
las van a bloquear. A eso se refiere el hecho de que
podría haber un riesgo si uno tiene anticuerpos
circulantes que bloqueen esa vacuna, y se va a quedar
sin vacuna.
 Son inestables, por eso necesitan cadenas de frío, ya
que como el virus es replicante, si calentamos la
vacuna, infectividad se va a perder, y más aún si es un
virus envuelto pues será una bicapa lipídica que se va
a degradar y no habrá infectividad de esa vacuna.
Pregunta: No me quedaron claras las reacciones adversas.
Profesora: Que puede causar enfermedad, no igual a la
vacuna del virus virulento, pero sí puede dar.
El ejemplo es la vacuna de la fiebre amarilla que es una
cepa atenuada naturalmente y se cultiva en embrión de
pollo, entonces las personas alérgicas al huevo no pueden
recibir esta vacuna. La inmunidad es efectiva en el 95% de
los recipientes, es segura aunque se ha visto 1/116 mil
dosis que podría causar efectos secundarios (anafilaxis), es
un virus que se ha asociado con daño neurológico.
Tiene más de 60 años esta vacuna de encontrada y se
conocen solo 21 casos de encefalitis que haya causado la
vacuna, pero precisamente por estos riesgos que son
bajitos, es mejor no aplicarla a los más susceptibles como
los menores de 6 meses o mayores de 65 años, mujeres
embarazadas; cuando estas personas van a ir a zonas de
riesgo de fiebre amarilla es mejor que no vayan a que se
apliquen la vacuna.
La varicela también es atenuada (lo veremos cuando
veamos Varicela, no entraré en detalles), hay dos: Varivax,
Proquad, esta última se aplica con la triple viral MMR
(sarampión, rubeola y paperas), y pues ahora hay MMRV
que es la tetravalente que incluye la Varicela. Hay una para
prevenir el Herpes zoster que es la Zostavax, que es igualito
el antígeno, el virus es el mismo de la vacuna normal de
Varicela, pero tiene unas dosis mucho más altas del virus
para que se estimule la respuesta inmune, y se aplica en
personas que tienen el virus de la Varicela latente; lo que
queremos con esta vacuna es que no se reactive como
zoster.
La vacuna se utiliza como una profilaxis post-exposición, se
acuerdan que en Varicela había una que se llamaba VariZIG
que eran sueros hiperinmunes ¿cierto?, también la vacuna
activa se puede aplicar post-exposición, es decir que si una
persona que no esté a riesgo (que no esté embarazada, no
sea inmunocomprometidos) se expone a alguien infectado
con Varicela, si se aplica antes de 3 días de haber tenido el
contacto con la persona infectada la eficacia es más de
90%, pero si ya va a ir después de un poco de días de
haberse expuesto pues la eficacia empieza a disminuir.
La vacuna del Zoster es la misma cepa de la Varicela, pero
disminuye la incidencia de reactivación, o sea la
enfermedad de Zoster, que es la reactivación del virus de la
Varicela. Se aplica principalmente en los ancianos porque la
principal secuela del Herpes Zoster es una neuralgia post-
herpética que es supremamente dolorosa, la persona dice
que se quiere morir del dolor, entonces hay que evitar la
reactivación para que no quede esa secuela. Se debe aplicar
principalmente a los viejitos o a las personas con cáncer.
Ventajas vacunas inactivadas:
 No se puede replicar.
 Interferencia mínima con anticuerpos circulantes,
porque las dosis son altísimas; en las vacunas
inactivadas, a diferencia de las atenuadas, hay que
poner bastante antígeno y por eso es más costoso
producirlas, porque el cuerpo ya no las va a replicar
como si fuera la fábrica de virus.
Desventajas
 Requieren varias dosis porque la inmunidad ya no es
como si fuera la inmunidad natural. La vacuna atenuada
infecta la célula dendrítica, la vacuna inactivada no
puede infectar la célula dendrítica, y recuerden que en
la respuesta inmune a los virus vimos que para que se
genere una respuesta inmune potente se necesitaba
que el virus infecte la célula dendrítica, pues aquí no va
a poder hacerlo. Entonces la estimulación del LTCD8+ se
tiene que dar es por presentación cruzada, porque el
antígeno viral se adquiere exógenamente, por eso
necesitamos presentación cruzada, en fin, un poco de
cosas, y además la memoria que se va a generar…
¿recuerdan cuál es la característica que se necesitaba en
la activación inmunológica para que la memoria
inmunológica sea de larga vida? ¿recuerdan qué les dije
al principio en la clase de respuesta inmune a los virus?
que se necesitaba una tercera señal que está dada por
IFN tipo 1 que la producen las células dendríticas
plasmocitoides. La activación inmunológica y la
presentación antigénica va a ser mejor cuando el virus
puede infectar la célula dendrítica, si aquí la vacuna no
puede infectar la célula dendrítica pues entonces la
memoria inmunológica ocurre, pero va a ser más corta,
por eso necesitamos meterle muchos refuerzos para
que la memoria inmunológica sea de más largo plazo.
Pregunta: ¿Por qué es una ventaja que no se pueda
replicar?
Respuesta: Pues porque no causaría enfermedad. La
desventaja sería que no va a generar una respuesta
inmunológica larga, la inmunidad va a ser de anticuerpos y
de LTCD4+, aunque por presentación cruzada se tiene
inmunidad de LTCD8+.
 Otra cosa es que no se genera IgA en mucosas
porque como el virus no infecta por mucosa,
entonces no vamos a tener una respuesta inmune
de mucosa adecuada. Vamos a tener muchos
anticuerpos neutralizantes en el suero y LTCD8+
que se van a activar días después de la infección.
Ejemplos de las vacunas inactivadas:
● El virus del polio inyectable.
● Hepatitis A.
● Rabia.
● Influenza.
Antígenos purificados tenemos:
● Influenza.
Vacunas recombinantes tenemos:
● Hepatitis B.
Las vacunas virales inactivadas estimulan principalmente
anticuerpos neutralizantes y LTCD8+ (lo hacen por
presentación cruzada) y se basa en que, para hacer la
presentación antigénica, el antígeno se tiene que
endocitar y se presenta a los LTCD4+, se activan las células
B y se producen anticuerpos, pero también por
presentación cruzada se pueden presentar a los LTCD8+.
Un ejemplo de la vacuna inactivada es la vacuna de polio de
Salk que hay que aplicarla intramuscularmente o
intradérmicamente, no genera IgA en mucosas y hay que
aplicar varias dosis.
Hay una vacuna de influenza que también es inactivada (ya
vimos la FluMist que es la viva que se aplica por aerosol a
personas inmunocompetentes, no se puede aplicar a niños,
a menores de 5 años ni a mayores de 60 años). La influenza
inactivada se aplica a todas las personas a riesgo de
adquirir influenza, incluidos los ancianos, personal de salud
que tenga algún riesgo y que no pueda recibir la vacuna
viva atenuada; está conformada por virus inactivados o
también subunidades fragmentadas, y debe contener las
cepas de influenza A que estén circulando, hay dos
estacionales, o la cepa de influenza B que esté circulando.
Se aplica a embarazadas, a las personas en los extremos de
la vida o con comorbilidades o a contactos de individuos a
riesgo, porque si uno es un cuidador de una persona a
riesgo, de un inmunocomprometido o de un anciano, y uno
recibe una vacuna viva, si la vacuna se está replicando en
uno se puede excretar, sobre todo una de virus
respiratorio, y entonces uno podría infectar con la cepa
vacunal a la persona a riesgo.
La vacuna del virus de la Hepatitis A que es un picornavirus,
es una vacuna inactivada, la producen como Havrix o
Avaxim, la produce GlaxoSmithKline o Sanofi Pasteur MSD,
y se aplica en los mayores de un año, se hace un refuerzo a
los 6 meses y tiene un 95% de probabilidad de que se
estimulen anticuerpos protectores. Pero hay un problema,
en individuos inmunosuprimidos, como VIH +, si no se les
aplica la vacuna con el refuerzo, si solo le da una dosis, se
ha encontrado que hay mayor probabilidad de que escape
a la respuesta inmune cuando se infecte por Hepatitis A, o
sea que el virus de la Hepatitis A haga mutaciones y escape
a estos anticuerpos neutralizantes que generó la vacuna
con una sola dosis.
Por ejemplo, lo que se ha visto es que hay mutaciones de
ciertos aminoácidos más frecuentes en el virus de la
Hepatitis A que se escapan de la vacuna, de la
neutralización de la vacuna, en individuos homosexuales
VIH +, entonces siempre lo mejor es aplicar dos dosis.
Las vacunas VLPs o Virus-Like Particle, decíamos que son
cápsides vacías, son proteína viral, cápsides, pero por
dentro no tienen genoma. ¿Cómo se producen esas
cápsides? se utiliza generalmente un sistema que se llama
el sistema de baculovirus, baculovirus es un virus de
insectos y hay unas células de insectos que lo producen,
en donde se replica; esos no le hacen nada al humano. Lo
que se hace es que se clonan en ese baculovirus, se utiliza
como vector, y se le clona el fragmento de DNA que
codifica para la proteína del virus del que queremos hacer
las cápsides, entonces se mete en las células de ese
insecto, esa célula de insecto va a producir la proteína que
le colocamos del virus y va a formar cápsides, entonces
salen las cápsides, se purifican y son las que vamos a
utilizar porque son huecas, no tienen genoma, ¿por qué?
porque las proteínas del virus que se generaron se
organizan como cápsides pero no entra ningún genoma
porque el del baculovirus no viene allí metido, entonces se
queda lo de afuera con las proteínas, o los virus que tienen
bicapa lipídica, y a esos se les llama VLPs. Esas partículas
son las que se inoculan y ¿cómo se van a adquirir? como la
proteína de la cápside tiene afinidad por ciertos
receptores en la célula dendrítica, puede entrar como si
fuera un virus que la fuera a infectar, pero cuando está
adentro no hay genoma para replicarse, entonces se
procesa como si fuera una proteína o un virus muerto, por
eso estimula principalmente la respuesta que estimulan
las vacunas inactivadas, que son anticuerpos
neutralizantes, LTCD8+ por presentación cruzada, y así la
principal inmunidad va a ser de anticuerpos neutralizantes.
Un ejemplo es el del virus del papiloma, ese virus no es
vivo, sino que son cápsides vacías; otro ejemplo de vacuna
VLP que tenemos es la del virus de Hepatitis B, es una
proteína recombinante y se generan partículas como si
fueran virus pero no tienen el genoma, se aplica también
para estimular principalmente respuesta de anticuerpos
neutralizantes.