Morfología microscópica

Técnicas de tinción.
Deiner zubieta1

Resumen:
Introducción Sabemos que el microscopio es una herramienta muy importante para
la observación y la identificación de los microorganismos, las células y las bacterias,
algo que nos es imposible ver a simple vista, por eso este elemento se considera de
gran importancia en el laboratorio, el cual nos permite diferenciar algunas de las
características visuales de las células que en el caso de este laboratorio fueron de
origen animal y vegetal, las cuales tienen como diferencia principal los organelos
encargados de sintetizar azúcares a partir de dióxido de carbono, agua y luz solar
(fotosíntesis) estos organelos son los cloroplastos presentes en la célula vegetal y
ausentes en la célula animal por lo que ésta última no es autótrofa lo cual nos indica
que no produce su propio alimento. También se puede observar la diferencia entre
las bacterias gram positivas y las gram negativas por el color de su tinción.
Objetivos Como objetivos tenemos el reconocimiento de las diferencias visibles en
el microscopio entre las células animales y vegetales, además de algunas bacterias
como bacilos Gram positivos. Materiales y métodos Para el logro de la observación
de las células vegetales (tomate, cebolla y papa) y animales (alas de mosquito) se
realizaron montajes en fresco, con láminas y laminillas. Resultados: Observamos
en las cebollas las células vegetales las cuales cuentan con variados núcleos, con
respecto a la papa se observó el almidón contenido en la muestra. Conclusiones
Tenemos que el microscopio es una herramienta muy importante e indispensable en
el proceso evolutivo de los microorganismos ya que nos permite ver lo que no se
puede observar a simple vista.
Palabras clave:
Células, microscopio, identificación.
diferencias que no son visibles con el
Marco Teórico: microscopio usado en esta práctica.
La identificación de diferentes células Las células animales y vegetales
tienen tantas similitudes como
y microorganismos trabajados en el
diferencias. Por ejemplo, una
laboratorio nos permite, familiarizarnos diferencia es que las células animales
con el mundo microscópico, Es por no tienen una pared celular ni
esto que el microscopio es una de las cloroplastos, mientras que las células
herramientas importantes utilizadas vegetales sí. Las células animales
para este fin. tienen formas redondas e irregulares.
En lo que respecta a las células Por otro lado, las vegetales son de
vegetal y animal podemos decir que forma rectangular.
en el microscopio la diferencia que se
observa se presenta en la célula Como aspectos similares tenemos que
vegetal pues en esta se evidencian ambas células son eucariotas. Gracias
diversos núcleos y sus paredes a esto, comparten, por ejemplo, la
celulares, pero también existen presencia de una membrana celular y

1 ingeniería ambiental y sanitaria/universidad de La Salle

de orgánulos tales como el núcleo, las peptidoglicano y la Gram negativa
mitocondrias y los retículos presenta un color rosa debido que el
endoplásmicos.[ CITATION DIF11 \l cristal violeta hace que pierda su
9226 ]
coloración debido a su delgada capa
de peptidoglucano (Telmeds.org,
En cuanto a las bacterias, tenemos 2019).
que un estudio realizado a los .
diferentes tipos de estas se concluye
que para que puedan tener una mejor MATERIALES Y MÉTODOS:
observación el laboratorio es
necesario realizar la tinción que es Lugol, agua, mecheros, microscopio,
una técnica utilizada para mejorar el aceite de inmersión, papel de arroz,
contraste en la vista del imagen del asa bacteriológica y micológica,
microscopio (Tinción de Gram, 2019) láminas y laminillas.
la cual consiste de cuatro pasos
principalmente primero el cristal violeta Pará la observación de las células de
que es el colorante, el Lugol es el cebolla se colocó una pequeña
mordiente, el alcohol-cetona el cual es muestra de esta en una lámina con
un decolorante y por último la Lugol y encima una laminilla, luego se
safranina que es el colorante que le da observaron en 10x y posteriormente
el contraste a la bacteria en 40x, un método similar se usó para
(Microbiología General y Bucal, 2019), la visualización de la papa, al igual
lo que nos permite en el momento de que el tomate también se realizó con
observarlas en el microscopio si las montaje en fresco, pero este se realizó
bacterias son Gram positivas o Gram con agua.
negativas se tiñen diferente debido a
Para la observación de las bacterias
la pared celular que presenta: la pared
entregadas por el docente únicamente
celular de las Gram positivas
debieron ser observadas en el
presentan una gran capa de
microscopio con aceite de inmersión a
peptidoglicano gruesa y ácidos
4x y 100x las cuales eran bacilos
teicoicos se diferencia de la Gram
Gram positivos y bacterias con
negativa está en la capa de la pared
capsula.
celular debido a que las Gram
negativas presentan dos capas de
membrana y una capa de
peptidoglicano más delgada lo que
Resultados
genera que sean más resistentes a las
Fotografía No 1: Alas de mosquito
tinciones (Tinción de Gram, 2019).
La tinción de Gram se caracteriza por
el color que toman las bacterias; la
Gram positiva presenta coloración
morada debido al cristal violeta y
además su coloración de morado se
debe a la gruesa capa de

1 ingeniería ambiental y sanitaria/universidad de La Salle

 Fotografía No 3: Evidencia del
almidón en la papa

fuente: Autores

En la presente imagen se puede fuente: Autores

observar parte de las alas de un
mosquito, en la cual se evidencia gran
parte de las pequeñas vellosidades
con las que cuenta, además de una
pequeña parte del cuerpo la cual se ve
de color café, para la visualización de
esta imagen fue necesario realizar un
montaje en fresco.
Fotografía No 2: Células vegetales de
la cebolla
Esta otra imagen corresponde a la
papa y nos permite visualizar el
almidón contenido allí el cual esta
representado por las formas “ovaladas
de color morado”, para este montaje
se uso Lugol.
Fotografía N 4: Bacteria con Capsula

Fuente: Autores
En la presente imagen observamos las
bacterias con capsula que son
Fuente: Autores diferenciables en el microscopio
En esta otra fotografía las pequeñas porque alrededor de ellas hay un
formas como redondeadas de color contorneado de color blanco, para la
verde son los diferentes núcleos de la visualización adecuada de este fue
célula vegetal, además de que necesario agregar aceite de inmersión
también se puede observar las formas pues luego de usar el testigo de 10x
de “celdas” que se dibujan en ella, las se usó el de 100x.
cuales corresponden a las paredes
celulares. Fotografía No 5: Bacilos gram
positivos

1 ingeniería ambiental y sanitaria/universidad de La Salle

 para la diferenciación entre bacterias
gram negativas y gram positivas

Bibliografía:
●  http://importancia.de/bacteria/#i
xzz5yDqtNwCL
● PARA TÉCNICOS DE
LABORATORIO. (22 de 02 de
2020). Obtenido de
http://paratecnicosdelaboratorio.
Fuente: Autores blogspot.com.co/2014/10/tincio
Esta foto nos brinda la imagen de los n-azul-de-lactofenol-o-azul.html
bacilos gram positivos, pues poseen
forma como de “bastones” además de
teñir de color lila, característica ● Telmeds.org. (22 de 02 de
importante de las bacterias gram 2020). Obtenido de
positivas. http://www.telmeds.org/atlas/ba
cteriologia/tecnicas-
CONCLUSIONES: bacteriologicas/tinciones-
El uso del microscopio permitió la simples-y-especiales/tincion-de-
observación e identificación de las gram/
imágenes mostradas anteriormente, lo
cual nos permite resaltar la
importancia que tiene el enfoque
correcto.
La observación cercana de los
microrganismos nos permite
concientizarnos de la relevancia que
tienen en nuestro diario vivir, los
cuales nos dan características
importantes, por ejemplo: lo
cloroplastos a las plantas, pues ellos
son los encargados de la fotosíntesis
proceso mediante el cual las plantas
obtienen su alimento.
Tenemos que la tinción usada en las
laminillas permitió la identificación de
los bacilos gram positivos, razón por la
cual es una herramienta adecuada

1 ingeniería ambiental y sanitaria/universidad de La Salle

 ● DIFIERE. (02 de 2011). DIFIERE. Obtenido de https://difiere.com/diferencia-celula-
animal-vegetal/

1 ingeniería ambiental y sanitaria/universidad de La Salle