CARRERA: BIOQUIMICA Y FARMACIA

MATERIA: CONTROL DE CALIDAD

DOCENTE: DR. MILTIN APUMAITA

ESTUDIANTE: SHIRLEY CHURA CUENTAS

SEMESTRE: 6° SEM.

GESTION: 1/2020
 INTRODUCCIÓN

Ya se sabe muchos aspectos acerca del coronavirus, pero aún no es suficiente ya

que aún es un problema mundial. Muchos pacientes de edad avanzada que tenían
enfermedades previas, como alta presión arterial crónica, otras deficiencias
cardiovasculares o respiratorias, entran en un curso grave y potencialmente mortal
de la enfermedad de COVID-19, pero no están claras las razones para explicar
cómo jóvenes que estaban anteriormente sanos a veces mueren por las
consecuencias de la infección.

Según varios reportes, la causa de muertes en pacientes con COVID-19. no es sólo

el llamado “shock pulmonar” causado por, El síndrome de dificultad respiratoria aguda
(SDRA), sino más bien la embolia pulmonar, la obstrucción de los vasos pulmonares
vitales con coágulos de sangre.

Una reciente publicación de la revista científica británica The Lancet, resalta que “los
médicos están recibiendo una gran cantidad de información sobre cómo cuidar a los
pacientes con enfermedad por coronavirus”, en especial sobre el uso hospitalario del
trombo profilaxis, más considerada al tratar a pacientes diagnosticados con una
infección con Sars-CoV-2. Este punto centra la controversia sobre una muerte, no por
neumonía, sino por una coagulación intravascular diseminada (CID).
Por lo mismo está en proceso de investigación y estudio el uso de “las heparinas de
bajo peso molecular, que pueden ser muy útiles tanto para la profilaxis como para el
tratamiento de los estados más avanzados de la enfermedad, y en el caso de
pacientes de COVID-19.
HEPARINA SODICA
La heparina sódica pertenece a un grupo de medicamentos llamados antitrombóticos
que posee acción anticoagulante. Está indicada en la prevención y tratamiento de la
enfermedad tromboembólica venosa y del tromboembolismo arterial periférico, en
otras enfermedades cardiovasculares, así como en la prevención de la formación de
coágulos en pacientes sometidos a una intervención quirúrgica del corazón o a
hemodiálisis.
Heparina Sódica es la sal sódica de un glucosaminoglicano sulfatado presente en los
tejidos de mamíferos. Se obtiene a partir de pulmón del ganado bovino o de la mucosa
intestinal del ganado bovino o porcino. Se produce de manera de minimizar o eliminar
la contaminación microbiana y las sustancias hipotensoras. Presenta la propiedad
característica de retrasar la coagulación de la sangre recientemente extraída. La
actividad de la Heparina Sódica destinada a la administración parenteral no debe ser
menor de 150 UI por miligramo, calculada sobre la sustancia seca. La actividad de la
Heparina Sódica no destinada a la administración parenteral no debe ser menor de
120 UI por miligramo, calculada sobre la sustancia seca.
CARACTERISTICAS DEL FARMACO
Polvo blanco o casi blanco. Moderadamente higroscópico. Fácilmente soluble en
agua.
CONCERVACION
Se deben de conservar en envases herméticos de cierre inviolable.
Su proceso de manufactura deberá estar validado para demostrar la apropiada
inactivación o remoción de cualquier contaminación por virus u otro agente infeccioso.

ENSAYOS
Identificación
Debe retrasar la coagulación de sangre recientemente extraída.
Examinar por electroforesis de zona.
El residuo obtenido en el ensayo de Determinación del residuo de ignición
debe responder a la reacción de identificación para Sodio.
Determinación de la rotación óptica
Rotación específica: No menos de +35° determinada a 20 °C sobre la sustancia seca.
Solución muestra: 40 mg por ml, en agua.
Determinación del pH
Debe ser entre 5,5 y 8,0, determinado sobre una solución de Heparina Sódica de
aproximadamente 10 mg por ml en agua libre de dióxido de carbono.
Impurezas proteicas y nucleotídicas
Debemos disolver 40 mg de Heparina Sódica en agua, transferir a un matraz aforado
de 10 ml, completar a volumen con el mismo solvente y mezclar. La absorbancia de
esta solución, determinada a 260 y 280 nm, no debe ser mayor de 0,20 y 0,15,
respectivamente.
Determinación de Nitrógeno
No más de 2,5 %, con respecto a la sustancia seca; determinado sobre 100 mg.
Sodio
Determinar por espectrofotometría de absorción atómica
Determinación del residuo de ignición
Entre 30,0 y 43,0 %, con respecto a la sustancia seca; determinado sobre 200 mg.
Límite de metales pesados
No más de 0,003 %, determinado sobre 500 mg. Preparar la solución estándar
empleando 1,5 ml de solución estándar de plomo (10 ppm).
Pérdida por secado
Secar 1,0 g de Heparina Sódica sobre pentóxido de fósforo a una presión no mayor
de 5 mmHg, a 60 ºC durante 3 horas: no debe perder más de 8,0 % de su peso.
Ensayo de endotoxinas bacterianas
Cuando en el rótulo se indique que la Heparina Sódica se destine a la preparación de
formas farmacéuticas inyectables que no deben someterse a un tratamiento posterior
de eliminación de endotoxinas bacterianas, no debe contener más de 0,01 Unidades
de Endotoxina por UI de Heparina.
Ensayos de esterilidad
Cuando en el rótulo se indique que la Heparina Sódica es estéril, debe cumplir con los
requisitos.

ROTULADO
Indicar en el rótulo de Heparina Sódica el número de Unidades Internacionales por
miligramo; el tejido y las especies animales de las cuales fue obtenida; el nombre y la
cantidad de cualquier sustancia agregada; y si corresponde, que la Heparina Sódica
es estéril y apirógena.
ANALISIS DE CONTROL DE CALIDAD
OBJETIVO
Valoración de heparina por pruebas in vitro.

FUNDAMENTO TEORICO
La heparina se debe determinar por pruebas in vitro, por comparación de su
capacidad, en condiciones dadas, para retrasar la coagulación de plasma sustrato
citratado y recalcificado, con la de una preparación de referencia de heparina calibrada
en Unidades Internacionales.

FUNDAMENTO QUIMICO
La estructura química de la heparina (C26H41N=34S4), la misma está compuesta por
una cadena de gluscosamino glucanos altamente sulfatados con alternancia de
moléculas de ácido urónico y glucosamina.

MATERIALES Y REACTIVOS
• Heparina bovina o porcina
• Plasma sustrato
• 285 ml de sangre de cordero
• 15 ml de solución anticoagulante
• Reactivo de cefalina
• Equipo hidrofóbico (plástico o vidrio siliconado)
• Tubos de hemolisis

PROCEDIMIENTO Y CALCULOS

VALORACION DE HEPARINA SODICA

FORMA FARMACEUTICA: ampollas, inyectables de 1 ml.
FORMULA DECLARADA: 1.000-5.000 UI.
PESO MOLECULAR : 12000-15000 g/mol.
METODO: valoración in vitro

PROCEDIMIENTO
Para la valoración se realizan métodos que determinan el comienzo de la coagulación,
empleando los tubos y el equipo apropiados al método elegido.
a) observación visual directa, preferiblemente empleando una iluminación indirecta y
observando contra un fondo negro no brillante.
b) registro espectrofotométrico de la variación de absorbancia a una longitud de onda
de 600 nm aproximadamente.
c) detección visual del cambio en la fluidez, inclinando los tubos manualmente.
d) registro mecánico del cambio de fluidez al agitar, teniendo cuidado de causar la
mínima perturbación de la solución durante la fase inicial de la coagulación.
Empleando solución fisiológica (SR) y a partir de la preparación estándar y la
preparación muestra, preparar una serie de diluciones en progresión geométrica, cuya
concentración sea tal que el tiempo de coagulación obtenido con la concentración más
baja sea mayor a 1,5 veces el tiempo de recalcificación del blanco y que el obtenido
con la concentración más alta sea tal que la curva logaritmo dosis - respuesta sea
satisfactoria, tal como se determina en un ensayo preliminar.
Colocar doce tubos en un baño de hielo, rotulándolos por duplicado, como M1, M2 y
M3 para las diluciones de la preparación muestra y E1, E2 y E3 para las diluciones de
la preparación estándar.
Agregar a cada tubo 1,0 ml de plasma sustrato descongelado y 1,0 ml de la dilución
apropiada de la preparación muestra o la preparación estándar, según corresponda.
Mezclar luego de cada adición, evitando la formación de espuma.
Tratar los tubos según el orden, E1, E2, E3, M1, M2, M3 y transferir cada tubo a un
baño de agua a 37 ºC, dejar que la temperatura se equilibre durante aproximadamente
15 minutos y agregar a cada tubo 1 ml de una dilución de reactivo de cefalina al que
se le ha agregado un activador, como caolín, de modo que se obtenga un tiempo de
recalcificación adecuado.
Exactamente después de 2 minutos agregar 1 ml de una solución de cloruro de calcio
al 0,37 % y registrar como tiempo de coagulación el intervalo en segundos entre esta
última adición y el comienzo de la coagulación, medido según el método elegido.
Al principio y al final del procedimiento, determinar el tiempo de recalcificación del
blanco de la misma manera, empleando 1 ml de solución fisiológica (SR) en lugar de
una de las diluciones de heparina.
Los dos valores obtenidos para el blanco no deben diferir significativamente y este no
debe ser mayor de 60 segundos.
Transformar los tiempos de coagulación en sus logaritmos, tomando el valor medio de
los tubos duplicados.
Repetir el proceso empleando nuevas diluciones y realizando la incubación en el
orden M1, M2, M3, E1, E2, E3.
Calcular los resultados según los métodos estadísticos habituales.
Efectuar no menos de tres valoraciones independientes.
Para cada una de ellas preparar diluciones nuevas de la preparación estándar y la
preparación muestra y una fracción distinta de Plasma sustrato, descongelado
inmediatamente antes de su uso.

Preparación muestra. La actividad estimada no debe ser menor de 90 % ni mayor de

111 % de la potencia declarada. Los límites de confianza del error de la potencia
estimada (P = 0,95) no deben ser menor de 80 % ni mayor de 125 % de la potencia
declarada

CALCULOS
DATOS:
n = 24
x =110
Ds = 10

Error = Ds/raiz cuadra de n =

10/raíz cuadrada de 24=2
Limite de confianza

90% x= (110 +- 2*2)

90% = 108 a 144

CONCLUSION
En el caso de la Heparina Sódica, tomando en cuenta que la práctica solo fue teórica
se obtuvo los datos de actividad del 90 % y con un límite de confianza de error de 108
a 114%, lo obtuvimos indica que estaría en el rango de aceptación de la valoración de
la Heparina sódica según la Farmacopea Argentina.