AMILASA MEDIANTE ASPERGILLUS NIGER

Esguerra Hernandez, Nicolas Herrera Gonzalez, Lina M .Pineda Beltran, Jerson A .Unriza García,
1 2 3

Lina M  . 4

nicolas.esguerrah@utadeo.edu.co linam.herrerag@utadeo.edu.co  jersona.pinedab@utadeo.edu.co

1 2 3

linam.unrizag@utadeo.edu.co

A. Selección de un proceso, para la obtención de un metabolito de interés cosmético, farmacológico, para

industria de alimentos, industria de combustibles

Fermentación.

B. Contextualización (usos y aplicaciones industriales, impactos, tipos de proceso para su obtención, valor
en el mercado, compañías que lo producen)

Los organismos fúngicos sintetizan una amplia gama de metabolitos secundarios de gran importancia
económica, comercial y biotecnológica, como los antibióticos ciclosporinas, ácidos mevínicos, alcaloides y
estatinas, entre otros. La generación de metabolitos secundarios y las propiedades químico-biológicas que
presentan son un campo interesante para diversas industrias, ya que se les puede considerar como opciones de
uso en áreas del procesamiento e inocuidad de los alimentos, control y sanidad agronómica, procesos de
remoción del petróleo y cuidados del medio ambiente, y por supuesto la farmacéutica debido no sólo a su
actividad antibiótica, sino también por la presencia de propiedades anticolesterolémicas, antiinflamatorias y
antihiperglucémicas que normalmente muestran una elevada potencia y selectividad en diferentes sistemas
biológicos. Hasta ahora la complejidad estructural, generalmente no permite su síntesis química en el
laboratorio, de tal manera que se reemplace la fermentación como medio de obtención, por lo que los
organismos fúngicos siguen siendo la ruta más práctica de obtención, enfocándose además la atención en la
modificación y/o búsqueda de nuevos sistemas biológicos generadores, así como de condiciones óptimas de
cultivo para la producción y sobreproducción (1).

El microorganismo aspergullus niger obtiene el producto de acido cítrico brindando la utilidad para productos
alimenticios y medicinales. [1]

C. Estado del arte (mínimo 5 referencias) haciendo énfasis en la producción del metabolito

1. BIOSINTESIS DE LAS ENZIMAS PECTOLITICAS A PARTIR DE HONGOS ASPERGILLUS NIGER Y ASPERGILLUS

FOETIDUS PARA APLICACIOON EN INDUSTRIA DE ALIMENTOS. (BOGOTA D.C)

Un primer paso fue la activación y mantenimiento del metabolismo microbiano de los hongos A. niger Y A.
foetidus con la técnica de choque térmico luego se separaron y se optimizaron los medios de cultivo, teniendo
en cuenta las materias primas como zanahoria, remolacha, piña, manzana, mora y críticos. La biosíntesis de la
enzima se realizo a nivel de laboratorio, realizando experimentos de fermentación en condiciones de cultivo
sumergido, para la activación de los mecanismos de la biosíntesis de las enzimas se preparó una solución
acuosa de sales minerales (NaCl 0.85g, CaCL2 0.05g), se sembraron en cajas de Petri con agar (sabourud)
(OXOID) a temperatura de 28°C. y pH de 4,5 y 5,5. Las enzimas se utilizan para la transformación y producción
de aromas y producto intermedios. [2]
 2. CARACTERIZACIÓN DE ADITIVOS ENZIMÁTICOS OBTENIDOS POR MONOCULTIVO (ASPERGILLUS NIGER)
Y COCULTIVO (ASPERGILLUS NIGER-SACCHAROMYCES CEREVISIAE) Y SU EFECTO SOBRE EL
COMPORTAMIENTO PRODUCTIVO DE POLLOS DE ENGORDE (Venezuela).

Se obtuvieron y caracterizaron las propiedades nutricionales, enzimáticas y ocratoxigénicas de aditivos

enzimáticos obtenidos de residuos húmedos del procesamiento de la pasta alimenticia, fermentados mediante
el monocultivo de Aspergillus niger (A1) y el cultivo de Aspergillus niger - Saccharomyces cerevisiae (A2). Se
utilizaron 150 pollitos raza Cobb-500 para evaluar el efecto de la inclusión de los aditivos A1 y A2 en 30 ppm y
3000 ppm, durante 21 d sobre los parámetros productivos, utilizando un diseño completamente aleatorizado.
Los resultados demuestran que las actividades de las α-amilasas y glucoamilasas en el A2 fueron superiores en
42% y 69% a las del A1, respectivamente. La composición fisicoquímica y las propiedades enzimáticas de los
aditivos, revelaron que éstos están compuestos principalmente por almidón y proteína, con una actividad
amilolítica similar 16020 y 15540 (FAU/g), respectivamente.

El caldo de fermentación fue deshidratado en un secador de bandeja Proctor Schwartz (PhiladelphiaEUA) a

50°C por 8 h. [3]

3. ESTUDIO DE LA PRODUCCION DE ENZIMA AMILASA MEDIANTE ASPERGILLUS NIGER POR

FERMENTACION SOLIDA, CON EL USO DE RESIDUOS AGROINDUSTRIALES. (QUITO)

PROCESO: Fermentación solida con el uso de residuos agroindustriales, como cascara de arroz, papa y trigo.

Imagen 3. Condicione de fermentación de la planta

de producción de amilasa a escala piloto.

Para el proceso fermentativo se inoculo el hongo en un sistema de biorreactores de lecho empacado, a cada
uno de ellos ingreso un flujo de aire húmedo de 4 l/h, la actividad enzimática de la amilas se midió con el
método DNS. [4]
 Imagen 1. Esquema del sistema de producción de amilasa por fermentación
solida a escala piloto

4. ALFA-AMILASA DE ASPERGILLUS ORYZAE : ESTUDIOS DE PRODUCCIÓN POR FERMENTACIÓN EN

SUSTRATO SÓLIDO, PURIFICACIÓN Y ESTABILIZACIÓN (Buenos Aires).

Las condiciones de fermentación para obtener una máxima producción de o. amilasa utilizando salvado de
trigo como sustrato de la FES resultaron: humedad inicial58% (bh). temperatura 35°C. pH inicial6,2-6,5. En
estas condiciones el máximo de producción de enzima es alcanzado entre las 36 y 48 h, de fermentación.

Para La obtención del inóculo se empleó el siguiente procedimiento: agar-salvado 5%: agar-agar 1.5 g salvado
de trigo (molido fino) 5 g agua destilada 100 mL. [5]

5. PRODUCCION DE a AMILASA MEDIANTE LA FERMENTACION SUBMERSA DE ASPERGILLUS NIGER PARA

SU EMPLEO EN PROCESO DE PANIFICACION.

El presente estudio se realizó la producción y caracterización de a amilasa a partir de la fermentación submersa

de aspergillus de a amilasa en almidón de trigo como sustrato , se optimizo las condiciones de cultivo mediante
la variación de fuente de nitrógeno y su concentración para alcanzar el rendimiento máximo de la enzima , se
registró la mayor producción de biomasa (10.57 g/L ) y actividad enzimática luego de 7 días de incubación a
25°c y 160rpm, con el método de superficie de respuesta (MRS) para mirar que tipo de fuente de nitrógeno
generaba la mayor concentración de biomasa y actividad de la enzima, entre las diferentes fuentes de
nitrógeno utilizadas ( extracto de levadura , peptona y caseína ) , la adición de un activador (CaCl2 6.36mM) y
la purificación enzimática mediante ultrafiltración y precipitación con sulfato de amonio la a- amilasa
purificadas y empleadas en la elaboración del pan de yema mejoraron las características organolépticas.[6]
 Imagen n. diagrama de proceso de elaboración del pan.

D. Definición de las etapas del proceso biotecnológico (diagrama propio) y explicación de cada una de
ellas

1. Material vegetal en proceso de descomposición como lechuga, tomate, acelga y limón.

2. La enzima se produce por la fermentación del microorganismo en medio compuesto por dextrina 1%
peptona 1% y mezcla de salvado de trigo y arroz

Purificación enzimática

1.1 El caldo de fermentación de centrifugo a 1000rpm a T 4°c durante 20 minutos, sobrenadante se

trató con sulfato de amonio y se recolectaron las proteínas.

1.2 Reactor durante 2 días con capacidad de 20 Litros.

E. Condiciones de operación del proceso (basado en la caracterización fisiológica y metabólica del

microorganismo o célula productora)

Temperatura 27°C
pH 5.5

F. Tipo de metabolito (primario o secundario)

Los organismos fúngicos sintetizan una amplia gama de metabolitos secundarios de gran importancia
económica, comercial y biotecnológica.

G. Medio de cultivo empleado y sustratos (debidamente referenciados)

La enzima se produce por la fermentación del microorganismo en medio compuesto por dextrina 1%
peptona 1% y mezcla de material vegetal en proceso de descomposición como lechuga, tomate, acelga

Bibliografía

[1] A. P. A. Tayupanta, «Estudio de la producción de enzima amilasa mediante Aspergillus Niger Por
fermentacion Solida , Con el uso de residuos Agroindustriales,» Quito , 2014.

[2] M. R. Terebiznik, «Alfa-amilasa de Aspergillus oryzae : estudios de producción por fermentación en

sustrato sólido,purificación y estabilización,» Buenos Aires , 1998.

[3] 1. G. d. J. D. A. d. B. C. B. M. d. V. L. H. T. Annalisse Bertsch*, «Caracterización de Aditivos Enzimáticos

Obtenidos por Monocultivo (Aspergillus niger) y Cocultivo (Aspergillus niger-Saccharomyces cerevisiae) y
su Efecto sobre el Comportamiento Productivo de Pollos de Engorde,» Venezuela , 2010.

[4] P. C. L. Grebechova Renata, «Biosistesis de alas enzimas pectoliticas a partir de hongos aspergillus niger y
aspergillus foetidus para aplicación en la industria de alimentos,» Bogota Colombia , 2006.

[5] A. D. J. Cortés-Sánchez y T. Mosqueda-Olivares, «Una mirada a los organismos fúngicos: Fábricas versátiles
de diversos,» México , 2013.

[6] Y. M. C. Calva, «Producción de a- amilas mediante fermentación submersa de aspergillus niger para su
empleo en procesos de panificación,» 2017.

[7] Y. Ric, «PRODUCCIÓN, PURIFICACIÓN Y CARACTERIZACIÓN PARCIAL DE UNA GLUCOAMILASA DE

Aspergillus niger.,» Departamento de Química, Universidad Nacional de Colombia. Bogotá. , colombia,
Bogota , 1990.