ELECTIVA DE PREPARACIÓN DE MUESTRAS PARA ANÁLISIS

QUIMICOS

DESCRIPCION DE LAS TECNICAS DE EXTRACCION SOXHLET Y DE LA MICROEXTRACCION EN FASE

SOLIDA

Buelvas Kelly 1; Jaramillo Beatriz 2.

1. Estudiante de la facultad de ciencias exactas y naturales.

2. Docente de la facultad de ciencias exactas y naturales.

13 de septiembre del 2016

Resumen: En esta práctica se realizó una descripción procedimental de la técnica de extracción de

analitos soxhlet, y de la técnica de microextracción en fase solida (SPME) resaltando la
importancia de estas a la hora de extraer analitos y las ventajas y desventajas que conlleva la
utilización de las mismas en el campo del análisis de muestras. Para la extracción de carácter
demostrativo de la extracción soxhlet, se utilizó de 7-10 g de sedimento (peso estándar) la cual fue
desecada con sulfato anhidro de sodio previamente y fue colocada en un bolsillo dentro del
soxhlet, utilizando como solvente hexano -acetona (4:1).por otro lado, para la micro extracción en
fase solida se utilizó un montaje previamente realizado por el docente a cargo, donde se resaltó
las fases o etapas del mismo.

Palabras claves: muestras, analito, extracción, sedimento.

Abstract: In this practice a procedural description of the technique soxhlet extraction analytes was
performed, and the technique of micro solid phase extraction (SPME) highlighting the importance
of these techniques when extracting analyses and the advantages and disadvantages involved in
use thereof in the field of sample analysis. For extraction demonstrative of soxhlet extraction, it
was used 7-10 g pellet (standard weight) which was dried with anhydrous sulfate previously
sodium was placed in a pocket in the soxhlet, using as solvent acetone- hexane (4: 1) .On the other
hand, for solid phase micro extraction assembly previously done by the teacher in charge, where
the phases or stages of the highlighted was used.

Keywords: samples, analyte, extraction, sediment.

Introducción
En el campo de la química la extracción se
define como la acción de separar con un
solvente una fracción especifica de una
muestra. Esta extracción puede realizarse en
las siguientes condiciones: Extracción solido-
liquido, extracción liquido-líquido y
extracción gas-liquido, siendo la primera
extracción una de las técnicas más utilizadas
en el ámbito químico [1].
La extracción soxhlet es una técnica de
separación solido-liquido comúnmente
utilizada para la determinación de los
contenidos grasos de una muestra de
carácter natural, también para las
obtenciones de principios activos vegetales,
así como para ser utilizada como una técnica
preparativa de una muestra cuya función, es
el paso previo al análisis de otra técnica de
carácter instrumental [2].
En este procedimiento la muestra solida
debe ser pulverizada finamente y debe ser
colocada en un cartucho, se calienta el
disolvente extractante, se condensa sus
vapores que caen gota a gota, sobre el
cartucho que contiene la muestra,
extrayendo de esta manera analitos solubles.
La extracción soxhlet se fundamenta en los
siguientes pasos:
1. la realización del cartucho/bolsillo en el
cual va el analito que está en la muestra a
extraer: estos pueden ser de diferentes
materiales, sin perder de vista la debida
limpieza y purga de los mismos con el
solvente, estos puedes ser tapados con
algodón u porcelana porosa, entre otros.
2. la colocación del solvente en el balón
redondo.
3. la ebullición del solvente que se evapora
hasta un condensador a reflujo.
4. el condensado cae sobre el cartucho que
contiene la muestra.
5. ascenso del nivel del solvente cubriendo el
pequeño cartucho/bolsillo hasta el punto en
el que se produce reflujo en el que vuelve el
solvente con el material extraido hacia el
balón.
6. se reproduce este proceso el número de
veces necesaria hasta que la muestra quede
agotada.
Para el caso especial de la naturaleza de la
muestra, estas deben cumplir con estar en
un estado óptimo para su análisis, en el caso
de las maderas y plantas deben estar
debidamente molidas; por otro lado en el
caso de las tierras esta deben ser desecadas
con un reactivo como el sulfato anhidro de
sodio, que deseca las humedades en los
suelos.
En el caso de la cantidad o colocación del
solvente, este debe estar a una cantidad en
exceso tal, la cual al evaporarse (la T° de
ebullición debe ser de acuerdo a las mezclas
que se realizó para el solvente utilizado) y
hacer la sifonada clásica de la técnica, el
solvente pueda ascender hasta el cartucho,
evaporarse y descender sin secarse, porque
este al recalentarse romperse. El solvente se
carga desde arriba lentamente par que vaya
cubriendo el cartucho lentamente con el
solvente utilizado [1].
Siguiendo con los puntos clave para tener en
cuenta con esta técnica, la elección del
solvente es de mucha importancia, por lo
general se recurre a una estandarización del
procedimiento previo, para corroborar la
efectividad sobre la muestra a analizar. Uno
de los solventes mas utilizados en los
laboratorios de análisis es el diclorometano,
debido a las características y propiedades
químicas que posee [3].
Por otra parte cuando hablamos de las
técnicas de extracción, estas abarcan un
amplio rango de clases de técnicas y de tipos
procedimientos, por tanto ahora nos
enfocaremos en la micro extracción en fase
sólida, la cual tiene una importancia tal, en el
análisis de muestras.
La microextracción en fase sólida, es una
técnica nueva, no utiliza disolventes, es
rápida, económica y versátil, esta técnica
consiste en una técnica utilizada en la
química analítica para extraer compuestos
químicos, para un posterior análisis [4].
Esta técnica puede ser descrita de una
manera simple, es decir, con una columna
capilar de cromatografía de gases muy corta
o abierta al exterior.
este caso en la mayoría de los casos se utiliza
cromatografía de gases, en algunas
ocasiones se usa el GC acoplado al
espectrómetro de masas) por tanto esta
muestra puede ser inyectada directamente
luego de la micro extracción realizada ,
donde los analitos adsorbidos son
térmicamente desorbidos y llevados a la
columna GC, o hacia la interface SPME/HPLC.
Los resultados se comparan muy
favorablemente a los resultados de otras
metodologías de preparación de muestras
[5].
Existen dos maneras de realizar esta técnica
versátil para los analistas, una que es
teniendo contacto directo con la muestra y la
otra, la técnica llamada “Head space” la cual
describe simplemente que la aguja que se
inserta en el vial con el polímero
simplemente está un poco alejada de la
muestra.

Esta consiste en una fibra cubierta con una

fase que sirve para la extracción, la cual
puede estar constituida por un polímero o
solvente líquido determinado.

Su metodología consiste en extraer

diferentes tipos de moléculas (volátiles o no
volátiles) de diferentes tipos de ambientes
(ya sea fase liquida o gaseosa), partiendo del
hecho de que la cantidad de moléculas
extraídas es proporcional a su concentración
en la muestra. En esta caso agitar la muestra
solo acelera el proceso de extracción.

Luego de realizar el debido proceso del micro

extracción, estos analitos extraídos deben
ser analizados de acuerdo con la técnica de Imagen 1. Los tipos de montaje que se pueden
separación estandarizada previamente (en realizar en la (SPME).
También existen tipos de fibras utilizadas en analitos son absorbidos, esta una alternativa
la microextracción, asociadas al tipo de a la SBSE mucho más económica, debido a
analito a extraer y la polaridad de esta. que el precio del polímero de PDMS es
menor que el de las barras comerciales.
-microextracción en fase solida con barra
agitadora (SBME), surge a partir de una de
las principales limitaciones de este tipo de
técnica es su moderada capacidad de
extraer, debido a la poca cantidad de
material extractante es bastante baja, por
ejemplo para una fibra de polidimetilsiloxano
de 100 µm de espesor de fase, el volumen
total del polímero es de solo unos 0.5 µL, lo
que provoca que la utilización del SPME, no
sea cuantitativa, por ello en 1999 se
desarrolló una nueva tecnica basada en los
mismos principios anterior mente
mencionados, pero que utiliza como medio
de extracción una barra agitadora magnética,
recubierta de polidimetilsiloxano, en este Figura 1. Tabla de los recubrimientos especiales
caso la cantidad de absorbente es mucho de la fibra.
más elevada, y por tanto se genera gran
sensibilidad cuando la desorción se realiza Por otro lado cabe resaltar, que factores
térmicamente; este tipo de fibras posee una variables, como tiempo de calentamiento,
limitación especifica: su uso se restringe a la temperatura, agitación entre otras, deben
extracción de compuestos apolares o ser previamente estandarizadas o
medianamente polares, que tengan afinidad normalizadas de acuerdo al tipo de muestra.
por el polidimetilsiloxano.
El tiempo de extracción está determinado
Sin embargo recientemente se ha trabajado por la cantidad de tiempo requerida para
con unos nuevos tipos de fibras las cuales obtener extracciones precisas para los
poseen dos tipos de polímeros son los analitos con las más altas constantes de
denominados “dual-phase twisters”, no distribución. La constante de distribución
obstante esta última modalidad no ha sido generalmente incrementa a la par que
comercializada. aumenta el peso molecular y el punto de
ebullición del analito. La selectividad puede
- Microextracción en fase sólida con PDMS ser alterada al cambiar el tipo de polímero
en formatos no comerciales; esta Se trata de que recubre la fibra, o el grosor del
una modalidad de la SBSE, en la que en lugar recubrimiento, para corresponder con las
de una barra agitadora comercial recubierta características de los analitos de interés. En
de PDMS, se utiliza directamente un trozo o general, los compuestos volátiles requieren
lámina de polímero orgánico, que es puesto un recubrimiento grueso, mientras que un
en contacto con la muestra y sobre el que los
recubrimiento delgado es más efectivo para
adsorber/desorber analitos semivolatiles.
Para recubrimientos poliméricos SPME
liquidos, la cantidad de analito adsorbida por
el recubrimiento en el equilibrio está
directamente relacionada con la
concentración del analito en la muestra:
(Ecu 1)
Donde n = masa del analito adsorbida por el
recubrimiento
C0 = concentración inicial del analito en la
muestra
Kfs = Coeficiente de partición para el analito
entre el recubrimiento y la matriz de la
muestra
Vf = volumen de recubrimiento
Vs = volumen de la muestra
Esta ecuación muestra que la relación entre
la concentración inicial de analito en la
muestra y la cantidad de analito adsorbida
por el recubrimiento es lineal.
Debido a que los recubrimientos utilizados
en SPME son seleccionados para tener
fuertes afinidades por los compuestos
orgánicos que se supone que extraigan, los
valores de Kfs para estos analitos son altos.
Consecuentemente, SPME tiene un muy
buen efecto concentrador y conduce a una
buena sensibilidad. Sin embargo, los valores
de Kfs usualmente no son suficientemente
grandes para extraer exhaustivamente los
analitos de la matriz; por tanto la afirmación
de que SPME es un método de muestreo de
equilibrio. A través de una calibración
apropiada, el SPME puede ser utilizado para
determinar precisamente las
concentraciones de los analitos de interés en
una muestra [6].
En adición a lo que ya se ha dicho, se puede
mejorar la recuperación de analitos, o alterar
la selectividad en favor de compuestos más
volátiles o menos volátiles, al cambiar las
condiciones analíticas: añadiendo un
electrolito a la muestra, cambiando el pH, o
muestreando el “headspace” en lugar de la
muestra (o viceversa).
Con base al estudio del procedimiento de la
técnica de extracción soxhlet, asi como al
estudio de la microextraccion en fase sólida,
el objetivo de esta práctica es conocer de
manera puntual, el procedimiento e
instrumentación de las técnicas de
extracción más utilizadas en el campo de la
química.
1.1 Materiales que se utilizaron para la
demostración procedimental de la técnica
soxhlet.
Para realizar la extracción de carácter
demostrativo se utilizó los siguientes
materiales:
Materiales Reactivos
Balón redondo de Sulfato anhidro
100 ml de sodio
(Na2SO4)
Estufa o placa de Hexano-
calentamiento acetona (4:1)
Condensador. 7-10 g de
sedimento.
 Soxhlet

Mortero de
maceración.

Papel filtro para el

bolsillo

Tabla 1. Materiales y reactivos utilizados en la

demostración.

1.2 Procedimiento de la técnica de

extracción soxhlet.
Imagen 2. Montaje de la técnica de extracción.
En esta práctica se realizó, la descripción y
reconocimiento de la técnica de extracción
soxhlet de manera demostrativa, para esto 2.1 Materiales que se utilizaron para la
se realizó lo siguiente: demostración procedimental de la técnica.
1. se realizó el montaje oportuno (véase
imagen 1), con un balón de 100ml.
Fibras para la microextraccion
2. se procedió a desecar la muestra para la
demostración, en este caso particular la Agitador magnético
muestra a analizar eran sedimentos, por
Placa de calentamiento o estufa
tanto en un mortero se agregó una cantidad
de sulfato anhidro de sodio, proporcional a la Vial con tapa recubierta del polímero
cantidad de la muestra (7-10 g) y se maceró
Tabla 2. Materiales de la técnica de
hasta que quedo completamente seco. microextraccion

3. la muestra ya seca, se colocó en el

cartucho/bolsillo y se introdujo en el soxhlet.
4. se procedió a terminar el montaje
colocando por encima del soxhlet el
condensado, y las respectivas fuentes de
refrigeración.
5. se colocó a una temperatura determinada
por un intervalo de tiempo de 1 a 2 horas.
2.2 Procedimiento para la técnica de
microextraccion es fase sólida.
En esta práctica se realizó, la descripción y
reconocimiento de la técnica de
microextracción de manera demostrativa,
para esto se realizó lo siguiente:
1. primero escogemos la fibra de acuerdo al
analito a extraer.

2. se estandarizan las variables como

temperatura, agitación etc. previamente.
3. la muestra se coloca en el vial cuya tapa 4. Discusión
está recubierta de un polímero.
De acuerdo con la experiencia la técnica de
4. se inyecta el vial y se deja pasar un extracción solido –líquido soxhlet, esta es
tiempo, el cual esta previamente una de las técnicas más utilizados en el
estandarizado. campo de la química, para la obtención de
analitos solubles de muestras sólidas,
contando con una amplia gama de ventajas y
desventajas que influyen en aspectos como:
la economía, la reproducibilidad, y otros
aspectos más.

Las ventajas de esta técnica, son las

siguientes:

-La muestra está en contacto repetidas veces

con porciones del solvente.

- La extracción se realiza con el solvente

caliente, así es más efectiva la solubilidad de
los analitos.

Imagen 3. Procedimiento que se realiza para el -La metodología es bastante simple.

(SPME).
-No es necesaria la filtración después de la
extracción [1].

3. Resultados Por otro lado las desventajas son:

Debido al carácter demostrativo del -El tiempo requerido normalmente esta

procedimiento de la técnica soxhlet no se entre 6-2 horas.
arrojó con pericia datos con los cuales se
-La cantidad que se utiliza como solvente es
pudiese realizar cálculos de rendimiento. Sin
demasiado grande (de 50-300 ml).
embargo a nivel cualitativo la coloración del
solvente con la extracción de la muestra -No es posible la agitación del sistema la cual
pasado un tiempo determinado podría acelerar el proceso de extracción.
(aproximadamente 2 horas), si tomó una
coloración parda transparente, indicando -La descomposición térmica de los
cierta concentración de la muestra en el compuestos termolábiles, ya que la
solvente, por otro lado con la técnica de temperatura del disolvente orgánico, puede
microextraccion, se realizó una demostración estar próxima a su ebullición.
netamente descriptiva, y al igual que en la
-la técnica es difícil de automatizar [1].
extracción soxhlet, no se arrojaron datos con
los cuales se pudiesen realizar cálculos.
Por otro lado las ventajas de la [3] Manual práctico para extracciones de
microextraccion en fase sólida, ponen en aceites esenciales, aromas y perfumes (2006)
apuros la técnica soxhlet, por las siguientes Aiyana ediciones.
características.
[4] Toxicología fundamental Manuel Repetto
- el tamaño de la muestra puede ser variable. Jiménez, Guillermo Repetto Kuhn .Ediciones
Díaz de Santos, (2009 - 620 pág).
-el volumen de elución es pequeño.
[5] Analytical solutions from SPME, Sigma-
-tiene pocas limitaciones en la utilización de
Aldrich S.A
disolventes.
[6] Universidad Santiago de Compostela,
- también produce un bajo consumo,
facultad de química; Instituto de
disminuyendo la contaminación
investigación de análisis químico y
- es una técnica que es reproducible, y alimentario “Avances en técnicas de
genera pocos costos en reactivos y solventes microextraccion para la determinación de
[7]. compuestos traza en muestras
medioambientales y alimentarias” (Tesis
A partir de esto podemos realizar doctoral; (2009).
distinciones entre la técnica soxhlet y la
otra, dándole crédito a la microextraccion en [7] Teknokroma Analítica, S.A. (Empresa
fase sólida, por la disminución de costos en comercializadora de equipos para el análisis
químico).
reactivos y, por qué es reproducible en
mayor proporción que la otro técnica
mencionada, por otra parte la
microextracccion, después de realizada
puede ser directamente inyectada en el
cromatógrafo, mientras que la extracción
soxhlet, se requiere de otros procedimientos
previos antes de la inyección.

Bibliografía

[1] Técnicas analíticas de separación Escrito

por M. Valcárcel Cases A. Gómez Hens
(1988).

[2] Prácticas de laboratorio de química

orgánica Escrito por E. Solano Oria, E. Pérez
Pardo, F. Tomás Alonso (1991).