FORMATO GUÍA

PRÁCTICA DE LABORATORIO

Fecha___________________________________ Inscripción No: __________________________

Escuela: Ingeniería Ambiental y de Saneamiento Programa: Ingeniería Ambiental y de Saneamiento

Docente: Karol Ibeth Meza Acosta Asignatura: Microbiología Ambiental

1. NOMBRE DE LA PRÁCTICA:
Preparación de medios de cultivo
2. OBJETIVO:

Adquirir destreza en la preparación de diferentes medios de cultivo para el crecimiento de microorganismos.

3. FUNDAMENTO TEORICO DE LA PRÁCTICA

En las muestras ambientales es casi imposible encontrar un solo tipo de microorganismo, pero cuando se quiere
aislar o conocer la microbiota de determinada muestra es muy importante darles las condiciones que reflejen el
medio en el que los microorganismos deseados se encuentran, es decir, se debe tener en cuenta la temperatura,
humedad, pH, tipo de nutrientes, consistencia adecuada del medio, presencia o ausencia de gases, luz, etc., de tal
manera que las condiciones de laboratorio imiten el estado ideal del microorganismo en la naturaleza y limite el
crecimiento de aquellas especies que no se quieren estudiar.

Uno de los métodos más usados para aislar microorganismos ambientales son los medios de cultivo, éstos pueden
ser sólidos, semi-sólidos o líquidos y deben otorgarle todas las condiciones nutricionales y ambientales para que
se dé el crecimiento microbiano. Es importante resaltar que no todos los microorganismos pueden cultivarse en el
laboratorio, por ejemplo, archaeas presentes en ambientes con temperaturas extremas. En estos casos los
conocimientos de la biología molecular y la biotecnología han sido clave para poder conocer parte de este tipo de
organismos extremófilos.

Existen varios tipos de medios de cultivo, entre ellos medios definidos, medios complejos, medios selectivos,
medios diferenciales, medios de enriquecimiento.

3.1 REACCIONES OBTENIDAS Y CÁLCULOS APLICADOS

Los cálculos se realizarán de acuerdo a las indicaciones establecidas en la etiqueta del medio y volumen a preparar.
La cantidad de medio necesaria para cada caja de petri es de 20 mililitros.

3.2 MATERIALES Y REACTIVOS (Para el total de estudiantes):

CANT MATERIALES REACTIVOS CONCENTRACIÓN

Erlenmeyers Agar Plate count

Plancha de calentamiento Agar EMB
Agitador
Vaso de precipitado
Balanza
Cajas de petri

GFOR-ESC-F32 Versión 3 Fecha de aprobación: 15-09-2016 1(2)

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PRÁCTICA DE LABORATORIO

Autoclave
Probetas
Agua destilada
Mecheros
Autoclave

3.3 PROCEDIMIENTO:

1. Pesar cuidadosamente la cantidad de medio de cultivo que indica la etiqueta del envase para preparar la
cantidad requerida.
2. Colocar el medio en un Erlenmeyer o matraz con el doble del volumen y adicionarle el agua necesaria. Calentar
suavemente hasta disolución completa
3. Tapar el matraz con un tapón de algodón – gasa y gorro de papel Kraft.
4. Esterilizar en autoclave a la temperatura y tiempo que indica la etiqueta del envase (121°C durante 15 min y
15 libras de presión). Dejar enfriar la autoclave y enfriar a 45°C.
5. En condiciones asépticas transferir de 15 a 20 mL de cada medio en cajas de Petri estériles y dejar que
solidifiquen a la temperatura ambiente.

3.4 CUESTIONARIO

1) Investigue las características de los siguientes medios de cultivo:

a) Medios naturales
b) Medios sintéticos
c) Medios definidos
d) Medios complejos
e) Medios selectivos
f) Medios diferenciales
g) Medios de enriquecimiento

4. BIBLIOGRAFIA
Benson, H. (1998). Microbiological applications: Laboratory Manual in General Microbiology. McGraw–Hill.
U.S.A.
Garcìa, D. (2013). Microbiología Ambiental. UNAD: Bogotá
Juarez, M. (2011). Manual de Laboratorio de Microbiología ambiental. Instituto Politécnico Nacional: México.

Firma Coor. Laboratorios

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