EL LARGO CAMINO QUE

NOS TRAJO HASTA

AQUÍ.
Un breve esquema de los principales experimentos que dieron como resultado que el
ADN era el material hereditario y no las proteínas como tal.
En 1928, Frederick Griffith describió el llamado fenómeno de transformación
por neumococos. Se distinguen dos tipos de neumococos:
• Los neumococos de tipo R (rugoso) forman colonias de aspecto rugoso
sobre un medio sólido, y son poco virulentos.
• Los neumococos de tipo S (liso) forman colonias aspecto liso y brillante
sobre un medio sólido. Se caracterizan por poseer una cápsula de
polisacáridos en la superficie celular que las protege del sistema
inmunitario del huésped y provocan infecciones que matan al animal en
3 ó 4 días.

Los neumococos de tipo R

(rugoso) forman colonias de
aspecto rugoso sobre un medio
sólido, y son poco virulentos.

Los neumococos de tipo S (liso)

forman colonias de aspecto liso
y brillante sobre un medio
sólido, y provocan infecciones
letales.

Los neumococos de tipo S (liso)

provocan infecciones letales,
pero son sensibles al calor. Si
se inyectan al ratón
neumococos de tipo S que han
sido calentados, el animal
sobrevive.

Si se inyectan a un ratón
neumococos vivos de tipo R y
neumococos muertos de tipo S
(ninguno de los dos es letal por
separado) se produce la muerte
del ratón. En los ratones
muertos se encontraron
neumococos vivos del tipo S
que, a su vez, eran capaces de
infectar a otros ratones: el
cambio que se había producido
era estable y era heredado por la
descendencia

Griffith concluyó que un "FACTOR DE TRANSFORMACIÓN" había sido

transferido desde los neumococos S muertos a los neumococos R vivos. Este
factor de transformación convirtió a los neumococos R en neumococos S con la
cápsula de polisacáridos que les hace letales.
 En 1944, Oswald Avery, Colin McLeod y Maclyn McCarty trataron de identificar
el factor de transformación (FT), que debía encontrarse en los neumococos S
muertos por el calor.

Para ello:
• Trataron los pneumococos S muertos por calentamiento con detergente
para obtener un lisado celular (un extracto libre de células que contenía
el FT). Este lisado contiene (entre otras cosas) el polisacárido de la
superficie celular, las proteínas, el ARN y el ADN de los neumococos S.
• Sometieron al lisado a diversos tratamientos enzimáticos.
• Inyectaron en ratones los neumococos de tipo R vivos junto con una
fracción del lisado modificada enzimáticamente.

Los resultados de sus experimentos se reflejan en la siguiente tabla:

Tratamiento realizado sobre el lisado Resultado Conclusión

El FT está presente en
Ninguno
el lisado

El FT no era el
Se añadió la enzima SIII,que degrada la polisacárido que
cápsula de polisacárido estaba presente en el
lisado

El FT no era una
Se añadieron al lisado anterior (con el
proteína. Debía ser un
polisacárido degradado) las enzimas
ácido nucleico (ARN o
proteolíticas tripsina y quimiotripsina
ADN)

Se extrajeron los ácidos nucleicos del

lisado anterior y se añadió la enzima El FT no era el ARN
ARNasa (que degrada el ARN)

Al extracto de ácidos nucleicos anterior

se le añadió la enzima ADNasa (que FT = ADN
degrada el ADN)

Esta serie de experimentos demostró que la naturaleza química del factor de

transformación (la información genética capaz de convertir neumococos R en
nuemococos S) era un DNA y no una proteína como se sospechaba en aquella
época.
En 1952, Alfred Hershey y Martha Chase diseñaron un sistema para averiguar
si la herencia era comunicada por el DNA o por las proteínas. Utilizaron
técnicas de marcaje radioactivo para construir dos tipos de fagos distintos. Una
población de fagos creció en un medio que contenía 35S. El 35S marca a las
proteínas que contienen residuos de Cys o Met y por lo tanto, esta población
contiene proteínas radioactivas y DNA no radioactivo, ya que el DNA no
contiene S. La segunda población de virus creció en un medio que contenía
32
P. El 32P marca los ácidos nucleicos, pero no a las proteínas, de forma que
esta población contiene DNA radioactivo y proteínas no radioactivas. Ambos
tipos de virus fueron utilizados por separado para infectar a células de E. coli
susceptibles.

Población de Proteína: radioactiva (en

fagos que ha rojo)
crecido en un DNA: no radioactivo (en
medio con 35S negro)

Población de Proteína: no radioactiva

fagos que ha (en negro)
crecido en un DNA: radioactivo (en
medio con 32P rojo)

Después de la infección, y antes de que se completara el ciclo lítico sometían a

las células a una fuerte agitación mecánica para desprender de la superfice de
la célula a todos los virus que pudiesen estar adheridos, y después, por
centrifugación separaban las células de las partículas víricas: Las células se
acumulan en el sedimento, y los fagos perrmanecen en el sobrenadante.

Cultivo de las Separación fagos- Centrifugación: las células

bacterias con los bacterias sedimentan y los fagos no
 fagos

Población de
fagos que ha
crecido en un
medio con 35S

Población de
fagos que ha
crecido en un
medio con 32P

A continuación medían la radioactividad asociada a las células. Las células

presentaban radioactividad únicamente cuando se hacía el experimento con
virus 32P. Cuando se realizaba el experimento con virus 35S, las células no
contenían radioactividad. Como los virus que surgen de ambos ciclos líticos
son absolutamente normales, este experimento indica que las características
genéticas del virus han sido comunicadas a la progenie mediante el DNA,
no mediante la proteína.