Introducción

El metabolismo involucra una serie de procesos o rutas metabólicas que se complementan para
obtener la energía necesaria para el funcionamiento de nuestro organismo, cada uno de los pasos
de estas rutas ocasiona un pequeño cambio químico específico: eliminación, transferencia o
adicción de un átomo o grupo funcional determinado; esto permite la transformación de
macronutrientes y micronutrientes en ATP.
Esta energía es obtenida de los alimentos, específicamente de un grupo de macronutrientes
(Carbohidratos, proteínas y lípidos) y micronutrientes (vitaminas, entre otros).

Los carbohidratos son polihidroxialdehidos o cetonas, o bien sustancias cuya hidrólisis da lugar
a esto compuestos, en general poseen una formula empírica (CH2O)n, algunos poseen en su
estructura nitrógeno, fosforo o azufre.
Es importante señalar que existen 3 clases principales: monosacáridos, oligosacaridos y
polisacáridos, los monosacáridos son azucares simples que consisten en una sola unidad de
cetona, dentro de sus características: son sólidos, incoloros y cristalinos, solubles en agua e
insolubles en disolvente no polares. Uno de los más abundantes es la d-glucosa de 6 átomos de
carbono.
Los oligosacaridos consisten en cadenas cortas de unidades de monosacáridos (unidos por
enlaces glucosídicos), los mas abundantes son los disacáridos, dentro de los mas conocidos se
puede mencionar la sacarosa.
Los polisacáridos son polímeros que contienen mas de 20 unidades de monosacáridos, entre el
mas conocido se encuentra la celulosa (lineales) y el glicógeno (ramificado).
Los carbohidratos se pueden encontrar de distintas formas en el organismo, utilizado como
fuente de energía a través de la glicolisis, almacenada en forma de glicógeno (El glicógeno
hepático puede formarse a expensas de glucosa y otros monosacáridos, glicogénesis), se
encuentra en la membrana de las células y algunas bacterias como glicoproteínas y glicolipidos
En laboratorio se estudio la glicogenólisis incubando cortes de hígado en solución de Krebs y se
midió la desaparición del glicógeno del tejido y la aparición de glucosa en el medio de
incubación. La concentración del glicógeno se determino usando el método de yodo, y la
glucosa formada se medio con el método God-Pap.

Los lípidos son un grupo químico muy diverso, una de sus principales características es que son
poco solubles o insolubles en agua, por el contrario, se disuelven fácilmente en solventes
orgánicos.
Dentro de sus funciones biológicas podemos encontrar: almacenamiento energético, algunos de
ellos forman parte de la estructura de la membrana (fosfolipidos y esteroles), actuando como
cofactores enzimáticos, entre otras.

Los lípidos podemos clasificarlos en dos grupos saponificables y no saponificables, este es un

proceso en el cual reacciona un acido graso y una base fuerte (NaOH o KOH) en la cual se
obtiene como producto principal una sal del acido graso y de dicha base. Los compuestos
formados se llaman jabones (anfipáticos). No todos los lípidos pueden llevar a cabo esta
reacción, esto nos permite diferéncialos.
Dentro de los lípidos saponificables podemos encontrar:

- Ac. Grasos saturados

- Ac. Insaturados
- Fosfolipidos
Dentro de los Lípidos no saponificables podemos encontrar:

- Terpenos
- Esteroides
- Eicosanoides
 Objetivos
Generales:

- Estudiar glicogenólisis.
- Medir niveles de glucosa y glicógeno.
- Reconocer principales características de los lípidos.
- Extracción y reconocimiento de lípidos.
- Diseñar una curva de calibración.

Específicos:

- Medición de glicógeno en los cortes de hígado, utilizando método de yodo.

- Medición de glucosa en el líquido de incubación, utilizando método de GOD-PAP.
- Observar producto de la saponificación de los lípidos.
- Diseñar una curva de glucosa.
- Diseñar una curva de caroteno..

Carbohidratos y lípidos

Los materiales y reactivos utilizados en las técnicas que se realizaron en laboratorio se

encuentran descritos en las guías de laboratorio de proteínas 2010.
A continuación se mencionan solo los cambios realizados en los procedimientos descritos en la
guía correspondiente y los resultados de los procedimientos realizados en el laboratorio para
cada experimento.
 Carbohidratos
Practico I:
Estudio de la glicogenólisis en cortes de hígado

Resultados:

Medición de glicógeno:
Tubo Cortes de Tiempo Absorbancia
hígado (gr) (minuto) (460nm)
1 0.16 0 1.250
2 0.24 10 1.090
3 0.27 20 0.744
4 0.27 30 0.590
5 0.32 40 0.580
(*) Absorbancia leída por el método de yodo.

Medición de glucosa:
Tubo Cortes de Tiempo Absorbancia
hígado (gr) (minuto) (546nm)
1 0.16 0 0.014
2 0.24 10 0.129
3 0.27 20 0.210
4 0.27 30 0.301
5 0.32 40 0.221
(*) Absorbancia leída por el método de GOD-PAP.

Practico II:
Digestión enzimática del almidón

Resultado:
 Tubo Absorbancia (660 nm)
5 minutos 10 minutos 15 minutos 20 minutos
1 0.160 0.166 0.245 0.099
2 0.394 0.085 0.033 0.037
3 0.820 0.475 0.486 0.360
4 0.746 0.905 0.448 1.190

Lípidos
Practico I:

Saponificación
Resultados:

Solubilidad
Resultados:

Tinción de lípidos
Resultados:

Extracción de lípidos de yema de huevo

Resultados:

Determinación enzimática de colesterol total

Resultados:

Practico II:

Curva de calibración caroteno

Resultados:
Tubo St. Caroteno Agua destilada Concentración Absorbancia
 (ug/ml) ml (ml) (ug/ml) (420nm)
blanco --- 10 --- ---
1 0.62 9.38 0.56 0.264
2 1.2 8.8 1.07 0.432
3 2.4 7.6 2.15 0.810
4 4.8 5.2 4.30 1.600
5 10 --- 8.96 ---
Suero H. --- --- 0.20 0.037
Zanahoria --- --- 4.33 0.784

Calculo Coeficiente de Extinción: C= A

ε

Tubo 1 ε1 = 0.264 ε1 = 0.47 ml/ug cm

0.56 ug/ml

Tubo 2 ε2 = 0.432 ε2 = 0.40 ml/ug cm

1.07 ug/ml ε = 0.37ml/ug cm

Tubo 3 ε3 = 0.810 ε3 = 0.38ml/ug cm

2.15 ug/ml

Tubo 4 ε4 = 1.600 ε4 = 0.33ml/ug cm

4.30 ug/ml

(*) Se elimino el primer tubo.