UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA I

NOMBRES Y CARRERA: FECHA DE ELABORACIÓN DE

APELLIDOS Bioquímica Clínica PRÁCTICA: 24-10-2019
Bautista Bryan FECHA DE ENTREGA DE INFORME: 03-
GRUPO: 5
García Byron 11-2019
Gusqui Cristhian
López Lenin DÍA/ HORA: Jueves / 7:00 a 9:00 am
Orozco Richard

Tema: Necropsia

Objetivos:

 Realizar la necropsia del ratón mediante incisiones primarias para conocer las
cavidades internas y su contenido.
 Utilizar biomarcadores (determinación de peso de órganos, características
macroscópicas) para datos cuantitativos.
 Identificar órganos afectados por posibles patologías o tratamientos experimentales.

1. ¿Qué significa las 3R en manejo de animales de experimentación?

Se basa en 3 principios que fue implantado casi hace 60 años en post del cuidado de los
animales de experimentación, los cuales son: reemplazo, reducción y refinamiento.

Reemplazo: Se toma en consideración el uso de otros métodos de experimentación que no

involucren a animales en el campo de la investigación, esto provoca que la tecnología avance,
un ejemplo de ello es el uso de la ingeniería tisular, pero existe un inconveniente, al no tener
un organismo completo para realizar un determinado estudio, existen solo pocos resultados
favorables que dan el resultado que se quiso obtener desde un principio (Mrad de Osorio,
2006).
Reducción: Se enfoca en reducir el número o utilizar la misma cantidad de animales de
experimentación que se utiliza para la investigación, para que suceda esto es también hay que
considerar formar un buen marco de experimentación, utilizando previas investigaciones
hechas y corregir errores sistemáticos con el fin de tener una conclusión olida en el ámbito
investigativo (Mrad de Osorio, 2006).

Refinamiento: Se centra en el tratado de los especímenes de laboratorio y el mejoramiento

de su estancia en las instalaciones, así abogando por un trato humanitario, de ser el caso en
el que el animal en cuestión sufra de alguna enfermedad crónica proporcionar a brevedad la
eutanasia. Estos especímenes viven la mayor parte de su vida encerrados en instalaciones
aisladas para su crianza y reproducción, luego se los usa como parte de un experimento, por
lo cual, mejorar su calidad de vida es más un derecho inalienable, lo cual se consideraría
como un enriquecimiento medioambiental (Mrad de Osorio, 2006).

2. Describa en que consiste el enriquecimiento para animales de experimentación,

indique las usadas en ratones.

El enriquecimiento consiste en una manera en la cual se provee un desarrollo normal y una

mejora del bienestar del animal que va a ser utilizado durante una experimentación o
sometido a cautiverio, al cual se brinda todos los parámetros que el necesita tanto físicos
como psicológicos siendo algunas de estos, el lugar donde se van a alojar ,su nutrición ,su
interacción social, su actividad física evitando de esta manera que el animal se estrese o surja
algún problema en su salud , un enriquecimiento de estos factores mejora los resultados de
las investigaciones experimentales , ya que un animal criado en condiciones estándar no se
desarrolla mucho a diferencia de otro con el enriquecimiento ambiental y social que necesita,
casi la mayoría de animales utilizados en las investigaciones son roedores y estos necesitan
de ciertos parámetros para poder desarrollarse, los ratones soy animales con gran energía e
inteligentes debido a esto los enriquecimientos para ellos empiezan desde el lugar donde se
van a alojarse el cual debe cumplir ciertas condiciones como el tamaño siendo proporcional
a la cantidad de ratones ,la implementación de buenos lugares donde él pueda dormir ,la
colocación de juguetes para distracción y actividad física , el lugar de alimentación, el suelo
de la jaula, y la limpieza continua de ella, también se debe cumplir otros parámetros para el
bienestar del ratón como una alimentación buena y variada, su desarrollo social donde estos
requieren de familiarizarse con el entorno para sentirse seguros y volverse amistosos con las
personas .(Fischer, Aguero, Rodrigues, Simão-silva, & Moser, 2016; Ministerio de salud,
2010; Reptiles & Conejos, 2015)

3. Describir los estudios realizados por 5 premios nobel en los cuales se haya
utilizado animales de experimentación.

Tabla 1
Estudios realizados con la utilización de animales de experimentación

ESPECIE DE
CIENTÍFICO
AÑO ANIMAL CONTRIBUCION DEL ESTUDIO
(s)
UTILIZADO
En 1890 al trabajar con kitasato shibasaburo,
realizaron un estudio en el cual demostraron
que al inyectar suero de un animal que este
Dr. emil adolf conejillo de
1890 infectado por tétano a uno que no le este, este
von behring indias
desarrollaría inmunidad, así se abrió un nuevo
camino para la prevención y tratamiento de
enfermedades infecciosas.
al extraer un páncreas atrófico, logró extraer
el contenido glandular para usarlo
intravenosamente, así después de aplicárselo
a un perro la glucosa bajó de nivel, siguió
frederick grant experimentando con varios perros mejorando
1921 perros
banting los niveles de glucosa, posterior a eso lo
experimentó en bovinos y el 11 de enero de
1922 se la utilizó en el primer ser humano, los
efectos fueron eliminación de la glucosuria,
disminución de glucosa.
en 1887, el dr. christiaan eijkman regresó a los
christiaan
1887 gallinas países bajos, en batavia dirigió un laboratorio
eijkman
en la escuela de medicina de batavia, sus
 esfuerzos por transmitir la enfermedad de
beriberi a animales fracaso, pero al ocurrir un
estallido del gallinero del laboratorio, este las
examinó y encontró que padecían de
polineuritis gallinarum, lo cual era idéntico a
la polineuritis endémica perniciosa o beriberi
humano, así al observar la alimentación de
estas aves, concluyo que la causa de beriberi
no era una infección por alguna toxina sino la
deficiencia de un nutriente, al cabo de un
tiempo se descubrió la importancia de las
vitaminas en la diet.
george h. whipple y sus colegas, realizaron
estudios al provocar anemia artificial por
sangrados a canes, a estos se los alimentaba
con hígado crudo con lo que observaron un
mejor manejo de la enfermedad a diferencia
de los otros canes que se les administraba otro
george h.
1920 perros tipo de dieta, whipple detallo que la anemia
whipple
perniciosa disminuía la cantidad de glóbulos
rojos y aumentaban sus dimensiones, por
esto, junto con sus colegas idearon un método
para combatirla y consistía en alimentar a
personas que sufrían de esta enfermedad con
250 g de hígado al día .
se interesó sobre el problema de la fiebre
amarilla, el cual demostraron que era causado
1927 max theiler ratones por un virus mas no por una bacteria,
demostró que la enfermedad se transmitía con
facilidad a los ratones.
Fuente: (Enke & Ishihara, 2017; Gutiérrez-meza et al., 2017; Martínez-Mier & Toledo-Pereyra, 2000; Merritt
& Tan, 2011; Mrad de Osorio, 2006)
 4. Describir los siguientes métodos de eutanasia, indique que especies se usa

Se tiene diferentes métodos de eutanasia entre los cuales se menciona a la irradiación por
microonda (método físico de eutanasia) que es un método muy rápido de eutanasia (< 1 seg)
para animales pequeños como ratones, conejos, pequeñas aves y anfibios menores a 300
gramos donde se dirige un has de microondas a una temperatura determinada (47°C) en un
lugar específico del cerebro del animal para lo cual se debe direccionar bien el rayo teniendo
en cuenta diferentes medidas de seguridad ya que este método es peligro para el operador
(Close et al., 1997).

● Aturdimiento eléctrico
Entre los métodos físicos de eutanasia de tienen el aturdimiento por electrocución que se
realizan preferentemente en animales grandes como vacas, ovejas o cerdos donde se coloca
electrodos en áreas específicas de la cabeza para que la electricidad pase por el cerebro
(electrocución del corazón no se recomienda) logrando aturdimiento en el animal para
después utilizar otro método como el desangramiento para matar al animal que comúnmente
se usa para matar a gran número de animales rápidamente sin embargo con este método se
debe usar un equipo especifico de protección y responsables capacitados en la técnica para
evitar sufrimiento al animal (Centro De Investigación. & Hospital Genera Universitario De
Valencia, 1990).

 Halotano

Muchos de los métodos químicos de eutanasia se pueden realizar en animales de tamaño

medio como perros o gatos, pero en animales de mayor tamaño (>7 kg) no se utiliza para la
eutanasia. El Halotano (Halothano) así como el sevoflurano se utiliza en analgesia y para la
eutanasia si se administra en grandes cantidades generando un desagradable olor para el
animal el cual puede poner resistencia ya que los vapores son irritantes. Para anestesiar
rápidamente a diferentes animales se prefiere la utilización de Halotano por la rapidez de esta
sustancia (Tasker, 2015).

 Etomidato y Metomidato

Estas sustancias es un método químico que son depresoras del sistema nervioso central ya
que su composición es de imidazol que actúan rápidamente cuando se subministra grandes
cantidades al momento de realizar la eutanasia, pero no se usa en analgesia por su potencia
el cual se usa en peces (Close et al., 1997).

 Inserción de aguja

Se tiene diferentes métodos de eutanasia dependiendo del tamaño y especie del animal a
estudiar. Uno de los métodos de eutanasia en peces, anfibios y reptiles más usados que es la
inserción de una aguja en la parte posterior del cráneo del animal donde existe un agujero
(Foramen magnum o agujero magno) hasta el cerebro para asegurar la destrucción del tejido,
procurando no provocar dolor o angustia en el animal, se debe poner anestesia antes de
realizar este procedimiento ya que es complicado provocar la muerte del animal (Marquardt
et al., 2018).

5. Describa 3 alternativas al uso de animales de experimentación

Un método como alternativa al uso de animales de experimentación es el método in vitro el

cual consiste en estudiar el mecanismo de acción de un tóxico, estos métodos in vitro son
muy fiables, no obstante, solo sirven para determinar o predecir la toxicidad de alguna
sustancia (Hoonakker, Arciniega, & Hendriksen, 2017).

El método “in vivo” es otro de ellos, que en biología nos referimos a una experimentación
celular, como un claro ejemplo es la experimentación de la propagación de plantas (Murgia
et al., 2016)

Finalmente tenemos el método “in silico” es un método que al igual que el “in vitro” predice
y valida las pruebas toxicológicas, es decir, predice los efectos sobre la salud humana por lo
general son usadas en biología de sistemas, haciendo referencia a experimentos hechos en
organismos vivos o fuera de organismos (Hoonakker et al., 2017).

6. Describa en una tabla los tamaños de las agujas (inyecciones) y de códigos de

color medidas en gauges y su equivalencia en milímetros.

Tabla 2
Código de colores (agujas hipodérmicas)

REF./Gauge (G) CÓDIGOS DE COLOR DIÁMETRO/mm

 31 celeste 0,25
30 amarillo claro 0,30
29 rojo 0,33
28 azul turquesa 0,36
27 gris 0,40
26 marrón 0,45
25 naranja 0,50
24 púrpura 0,55
23 azul 0,60
22 negro 0,70
21 verde 0,80
20 amarillo 0,90
19 crema 1,10
18 rosa 1,20
17 rojo púrpura 1,40
16 blanco 1,60
15 azul gris 1,80
14 verde claro 2,10
Fuente: (García, 2015)

Conclusión:

Se logró realizar la necropsia un ratón anteriormente sometido a un método de eutanasia ,

para luego mediante incisiones primarias lograr conocer y observar las cavidades internas
y el contenido intestinal de este animal, utilizando también ciertos análisis cuantitativos y
cualitativos como es la medición del peso de sus órganos y las características físicas con los
cual se determinó que el ratón analizado no presentaba algo inusual como patologías o
problemas en sus mediciones del peso y observaciones de las características de sus órganos.

Bibliografía:

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Fischer, M. L., Aguero, W. P., Rodrigues, G. S., Simão-silva, D. P., & Moser, A. M.
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Gutiérrez-meza, R., Fregoso-caro, S. C., García-huerta, L. G., Murillo-bonilla, L. M.,

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https://asanda.org/documentos/animales-
domesticos/MethodsEuthanasiaDogsCatsSpanish.pdf

Captura de pantalla mendeley

Anexos

Anexo 1: Foto ficha de Necropsia

Realizado por: Bautista B, Gusqui A, García B, López L, Orozco R.

Anexo 2: Fotos de su ratón con identificaciones correspondientes a los órganos en digital

por grupo.

Realizado por: Bautista B, Gusqui A, García B, López L, Orozco R.