TECNOLOGICO NACIONAL DE MEXICO

INSTITUTO TECNOLOGICO DE TEHUACAN

INGENIERIA BIOQUIMICA
MICROBIOLOGIA
PRACTICA 8. DIFERENTES TIPOS DE
SIEMBRA
EQUIPO 3
 ESPINOZA MONGE BRAYAN ALDAIR
 HERNANDEZ CASTILLO MARIA DEL
PILAR
 HERRERA RENDON LUIS ANGEL
 OROZCO VIDAL GRACIELA MICHELLE
 ROJAS NEGRELLOS PABLO DANIEL
DOCENTE:
MEJIA ARRUEL LUZ ROSALIA
DICIEMBRE 2019
 ÍNDICE
OBJETIVO............................................................................................................... 3
INTRODUCCIÓN .................................................................................................... 3
PROCEDIMIENTO .................................................................................................. 3
CUESTIONARIO ..................................................................................................... 6
RESULTADOS ........................................................................................................ 8
OBSERVACIONES ................................................................................................. 8
 OBJETIVO
El alumno debe saber hacer los diferentes tipos de siembra en un medio de cultivo
y los lleve a cabo para dominarlos.

INTRODUCCIÓN
Sembrar o inocular es introducir una porción de muestra en un medio adecuado,
con el fin de iniciar un cultivo microbiano, para su desarrollo y multiplicación. Una
vez sembrado, el medio de cultivo se incuba a una temperatura adecuada para el
crecimiento.
Las reglas fundamentales para efectuar la siembra exigen:
 Que se efectúen asépticamente
 Que los medios de cultivo y el instrumental a utilizar estén esterilizados
 Que se realicen solo los manipuleos indispensables
 Que se trabaje fuera de toda corriente de aire.
 De ser posible utilizar un mechero o bien Flujo laminar.
Existen diferentes tipos de siembra de acuerdo al medio utilizado y los
requerimientos del microorganismo a estudiar.
Las siembras pueden ser:
Primarias: cuando el material es inoculado en los medios por primera vez
Secundarias: cuando el material a inocular procede de una siembra primaria.

PROCEDIMIENTO
De los siguientes métodos generales de siembra practicar primeramente con
gelatina y posteriormente en medio de cultivo bacteriológico con muestra problema
Métodos Generales:
1. SIEMBRA CON DILUCIÓN POR VACIADO EN PLACA
Se toma el tubo de ensayo con medio líquido, como el caldo simple. Se toma el
material a diluir y se siembra en el tubo con el uso del asa cargada con el material
bacteriológico, se agita, con movimientos moderados.
Medio de cultivo: Liquido
Instrumento: Asa
Finalidad: poner la bacteria en suspensión.
 2. SIEMBRA POR ESTRÍAS EN SUPERFICIE

Se siembra el material en la superficie del agar inclinado en un tubo de ensayo, allí

se extiende por toda la superficie con el asa bacteriológica, previamente esterilizada
y cargada con el material a sembrar, haciendo estrías no muy amplias, pero
tampoco muy estrechas. Se inicia por la parte más profunda de la superficie
inclinada y se termina la estría en la parte más cerca de la boca del tubo.
Medio de cultivo: agar base inclinado
Instrumento: asa o aguja bacteriológica

3. SIEMBRA POR ESTRÍA POR AGOTAMIENTO:

Con éste procedimiento se puede conseguir una buena separación de las colonias
y aislarlas fácilmente.
Para ello se funde el medio de cultivo, se vuelca en caja de Petri y se deja solidificar.
Con el asa previamente esterilizada se toma material de un cultivo heterogéneo y
se descarga sobre la superficie del medio formando estrías.

4. POR PICADURA O PUNCIÓN:

Con una aguja se toma el material que se quiere sembrar y se lo introduce en el
tubo, con medio semisólido.
Introducir la aguja hasta el fondo, formando un canal de punción, trayecto por el cual
la retiraremos luego.
Este método se utiliza para estudiar la movilidad de las bacterias.
Medio de cultivo. Semisólido
Instrumento: aguja bacteriológica
Finalidad: Estudiar la movilidad de las bacterias

5. TÉCNICA DE LOS CUATRO CUADRANTES:

1. Se divide la placa en cuatro cuadrantes.
2. Se toma el inóculo y se siembra consecutivamente en 1-2-3-4.Incubar.
3. En el cuarto cuadrante, al menos, obtendríamos colonias aisladas.
 6. SIEMBRA POR EXTENSIÓN

En la siembra por extensión se utiliza si se quiere obtener un crecimiento

homogéneo de los microorganismos y consta de los siguientes pasos:
 Pipetear de forma más o menos uniforme la cantidad del inóculo con
nuestros microorganismos en una placa de Petri en la que se haya dispuesto
anteriormente un medio de cultivo que dependerá de los requerimientos
energéticos del microorganismo que queramos cultivar.
 Usar un tubo de vidrio en forma de “ele” y extender la muestra por toda la
placa de Petri dejando la superficie lo más homogénea posible.

CUESTIONARIO
1. Describa que es una siembra de microorganismos en el área de
microbiología.
Una siembra en microbiología, es un método para la multiplicación de
microorganismos tales como lo son bacterias en el que se prepara un medio óptimo
para favorecer el proceso deseado. Es empleado como un método fundamental
para el estudio de las bacterias y otros microorganismos.
 2. Por medio de un diagrama describa la siembra de estría por dilución
señalando los puntos importantes.

3. ¿Qué tipo de siembra y medio realizara para ver la movilidad de los

microorganismos?
Se utiliza la siembra por asa que otorga movilidad a las bacterias.
4. ¿Cómo sembraría los microorganismos anaeróbicos?
El metabolismo anaeróbico es menos eficiente que el aeróbico para la obtención de
energía, por lo tanto los medios de cultivo deben ser más ricos que los de uso común
para aerobios o anaerobios facultativos, además requieren una incubación más
prolongada.
Los medios empleados para la recuperación de anaerobios deben incluir tipos no
selectivos y enriquecidos.
Por lo general los anaerobios son bacterias muy exigentes. Se emplean medios
complejos que llevan: hidrolizados de carne, peptonas, extracto de levadura,
hemina, vitaminas, etc.
El medio requiere sustancias reductoras como tioglicolato, glucosa, ácido ascórbico,
cisteína, hierro, etc.
Por lo general las muestras a procesar para el aislamiento de microorganismos
anaerobios contienen mezclas de anaerobios obligados, facultativos y/o aerobios.
Las especies presentes en pequeñas cantidades pueden pasar inadvertidas si se
usan medios no selectivos.
Incorporando distintas sustancias a los medios mencionados anteriormente se
obtienen diferentes medios selectivos.
5. ¿Qué técnica de sembrado utilizaría para conservación de una cepa?
La resiembra periódica es una técnica que permite la supervivencia de los cultivos
en cortos períodos de tiempo, por eso se reconoce como un método de
conservación a corto plazo. Se basa en transferir el cultivo del medio seco o viejo a
uno fresco proporcionándole las condiciones óptimas de crecimiento, lo que
condiciona el elevado riesgo de contaminación y variabilidad de las características
de las cepas, las cuales constituyen sus principales desventajas.
6. ¿Qué finalidad tiene utilizar un medio en forma de pico de flauta?
Los tubos inclinados son muy buenos para almacenar cultivos puros.
 7. ¿Cuál es la finalidad de conocer los diferentes tipos de sembrado?
Su finalidad es que podamos conocer los tipos de sembrado para poder utilizarlos
en cualquier momento que se requiera ya que todos los microorganismos para un
mayor crecimiento y para una mejor observación al microscopio se necesita de
diferentes tipos de métodos de siembra.
8. Haga un cuadro de todos los tipos de sembrado tipo de medio su
aplicación de cada una.

TIPO DE SIEMBRA. TIPO DE MEDIO. FINALIDAD.

Dilución por vaciado en Poner la bacteria en
Liquido.
placa. suspensión.
Estrías en superficie. Agar.
Conseguir una buena
Estría y agotamiento. Liquido. separación de las
colonias y aislarlas.
Por picadura o punción Semisólido. Estudia la movilidad.
Se consigue un
Siembra por extensión. Liquido. crecimiento homogéneo
en los microorganismos.
Obtener colonias
Siembra por cuadrantes. Liquido. aisladas en el cuarto
cuadrante.

RESULTADOS
Cada siembra se utilizara para diferentes tipos de organismo o para poder aislar
colonias en lo más posible. Cada siembra tiene una finalidad y está ligada con el
microorganismo con el que se trabajara, los resultados que tendremos dependerán
de la práctica que tengamos con cada forma de sembrado.

OBSERVACIONES
SIEMBRA POR DILUCIÓN

 En este tipo de siembra se debe utilizar diferentes pipetas para cada dilución.
 Es recomendable seguir los pasos de la norma 110.
 Entre más diluciones se hagan más aisladas tendremos las colonias.

SIEMBRA POR ESTRÍAS EN SUPERFICIE

 Se debe realizar cuidadosamente y de una manera muy suave ya que ciertos

medios no son tan sólidos y tienden a cortarse fácilmente.
  Las estrías deben realizarse en formando un pentágono en la caja.

SIEMBRA POR EXTENSIÓN

 En este tipo de extensión se debe tener cuidado con el manejo de las pipetas
y el uso de las diferentes para cada dilución.
 Se debe cuidar que al momento de homogenizar no derramar medio.

CONCLUSIONES.