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TESIS DE MAGISTER
VALDIVIA - CHILE
2013
DÉFICIT DE PRESIÓN DE VAPOR (DPV) Y FACTORES
MICROCLIMÁTICOS COMO HERRAMIENTAS DE PRONÓSTICO
DE Botrytis cinerea Pers. ex Fr., EN Lactuca sativa L. BAJO
INVERNADERO
por
Valdivia - Chile
2013
I
INDICE DE CONTENIDOS
Capitulo Página
RESUMEN 1
ABSTRACT 2
1 INTRODUCCION 3
1.1 Procesos físicos en invernaderos: radiación solar como fuente de 3
energía.
1.1.1 Clima y microclima. 3
1.1.1.1 Temperatura 4
1.1.1.2 Sicrometría y Humedad Relativa. 4
1.1.1.2.1 Temperatura de Bulbo Húmedo. 5
1.1.2 Presión de vapor. 7
1.1.2.1 Presión de saturación de vapor. 8
1.1.2.2 Presión real de vapor. 8
1.1.2.3 Déficit de Presión de Vapor (DPV). 9
1.2 Botrytis cinerea Pers. ex Fr. 10
1.2.1 Descripción y morfología. 10
1.2.2 Biología de B. cinerea. 10
1.2.3 Pudriciones causadas por B. cinerea. 11
1.2.3.1 Síntomas, signos y daños en cultivos. 11
1.2.4 Influencia ambiental sobre el desarrollo de B. cinerea. 11
1.2.4.1 Factor temperatura. 11
1.2.4.2 Factor humedad relativa (HR). 11
1.2.4.3 Factor precipitación. 13
1.2.4.4 Factor viento. 13
1.2.5 Necesidad de manejo de la enfermedad. 14
II
2 MATERIAL Y MÉTODO 22
2.1 Ubicación del ensayo. 22
2.2 Duración de los ensayos. 22
2.3 Características del lugar del ensayo. 22
2.3.1 Clima. 22
2.3.2 Suelo. 23
2.4 Infraestructura a utilizar. 23
2.4.1 Características principales de los invernaderos. 23
2.4.2 Capacidad ventilatoria. 24
2.5 Material vegetal. 25
2.6 Material fúngico. 26
2.7 Labores culturales y establecimiento del ensayo. 26
2.7.2 Control de malezas y plagas. 26
2.7.3 Riego. 27
2.8 Diseño experimental. 28
2.8.1 Tratamientos a evaluar. 29
2.8.2 Marco de plantación. 30
2.8.3 Parámetros climáticos registrados. 30
2.8.4 Parámetros a calcular. 30
2.8.4.1 Tiempo térmico. 30
2.8.4.2 Déficit de presión de vapor (DPV). 32
2.8.5 Parámetros a evaluar. 32
III
3 RESULTADOS Y DISCUSIÓN 38
3.1 Características microclimáticas registradas durante las temporadas 38
productivas.
3.2 Incidencia de B. cinerea y su relación con el DPV. 42
3.2.1 Modificación tabla de umbrales de ataque de B. cinerea (Argus, 44
2009).
3.3 Incidencia de B. cinerea y su relación con la temperatura. 47
3.4 Incidencia de B. cinerea y su relación con la humedad relativa. 49
3.5 Comparación de predicción de modelos de incidencia relativa para 53
DPV, temperatura y humedad relativa.
3.6 Incidencia total y relativa de B. cinerea y su relación con la 55
fenología del cultivo de lechuga.
3.7 Influencia microclimática sobre la esporulación de B. cinerea. 63
3.8 Influencia microclimática sobre la severidad de las infecciones 68
causadas por B. cinerea.
4 CONCLUSIONES 72
5 BIBLIOGRAFIA 73
ANEXOS 86
IV
INDICE DE CUADROS
Cuadro Página
1 Medias de temperatura (°C), humedad relativa (%) y DPV (kPa), para 40
el tratamiento de 25 y 75% de ventilación, para la temporada otoño-
invernal y estival.
2 Número total de horas con humedad relativa por sobre el 90%, según 53
la incidencia total en invernadero, por cada tratamiento y temporada
productiva.
3 Comparación de valores de r2, obtenidos de regresiones polinómicas 54
entre incidencia relativa y DPV, temperatura y humedad relativa, para
temporada otoño-invernal y estival, según tratamiento de 25 y 75% de
ventilación
4 Medias de DPV, temperatura y humedad relativa (promedio de ambos 70
tratamientos), para las etapas fenológicas de pre-roseta, roseta y
madurez de cosecha, para la temporada otoño-invernal y estival.
V
INDICE DE FIGURAS
Figura Página
1 Variables incidentes en el control microclimático en invernaderos. 4
2 Bulbo seco y Bulbo húmedo. 6
3 Carta psicrométrica a temperaturas normales y presión barométrica de 7
101.325 kPa (nivel del mar). En esta carta, la presión parcial del vapor
de agua está en la abscisa (izquierda) medida en g kg-1aire seco. Otra
forma de expresión sería en kPa, desde donde pueden obtenerse los
diferenciales de presión de saturación de vapor de agua. Si se trabaja
a mayores alturas, se debe utilizar un diagrama diferente.
4 Presión de saturación de vapor (e°) en función de la temperatura (°C). 8
5 Efecto de temperatura y tiempo de incubación en el desarrollo de B. 12
cinerea en flores de vid.
6 Efecto de la humedad relativa sobre la germinación de conidias de B. 13
cinerea incubadas en papel celofán sobre placa Petri (C) y en papel
celofán sobre agar agua (C-AA), después de 24 horas.
7 Efecto del tiempo de exposición a humedad relativa de 100% post 14
inoculación de conidias de B. cinerea sobre partes de flores de
geranios incubadas a 25°C.
8 Efecto del DPV sobre la transpiración de la soja a 30°C. 17
9 Invernaderos a utilizar, invernadero 1 e invernadero 2. 23
10 Dimensiones de los invernaderos utilizados. 24
11 Plántulas con siete días de emergidas (izquierda) y plántulas con tres 25
semanas después de la siembra en bandejas (derecha).
12 Preparación del suelo (A, B), bandejas con plántulas de lechuga (C), 27
instalación tensiómetro (D), cultivo con una semana después del
trasplante (E) y cultivo con un mes después del trasplante.
VI
INDICE DE ANEXOS
Anexo Página
1 Solución nutritiva aplicada. 86
2 Preparación medio ASB. 87
3 Evolución diaria de la temperatura (°C) del aire dentro de los 88
invernaderos, durante la temporada otoño-invernal (1°) y estival (2°),
para tratamientos de 25% y 75% de ventilación.
4 Evolución diaria de la humedad relativa (%) del aire dentro de los 89
invernaderos, durante la temporada otoño-invernal (1°) y estival (2°),
para tratamientos de 25% y 75% de ventilación.
5 Evolución diaria del DPV (kPa) del aire dentro de los invernaderos, 90
durante la temporada otoño-invernal (1°) y estival (2°), para
tratamientos de 25% y 75% de ventilación.
6 Análisis de incidencia relativa: ANDEVA. 91
7 Análisis ANDEVA para incidencia acumulada (muestreo 10) para 94
temporada otoño-invernal y prueba de normalidad.
8 Análisis ANDEVA para incidencia acumulada (muestreo 8) para 94
temporada estival y prueba de normalidad.
9 Análisis de regresión polinómica temporada otoño-invernal: 95
Temperatura, humedad relativa y DPV, para 25 y 75% de ventilación.
10 Análisis de regresión polinómica temporada estival: temperatura, 96
humedad relativa y DPV, para 25 y 75% de ventilación.
11 Análisis de regresión polinómica para UFC: temperatura, humedad 99
relativa y DPV, para 25 y 75% de ventilación.
12 Análisis de severidad temporada otoño-invernal: ANDEVA. 101
13 Análisis de severidad temporada estival: ANDEVA. 101
1
RESUMEN
ABSTRACT
1 INTRODUCCION
Los invernaderos tienen como principal característica el ser capaces de aislar las
condiciones climáticas del exterior y de esta forma, crear un microclima interior
modificando los parámetros anteriores. Según Barnes y col. (1998), citado por Promis y
col. (2010), el microclima define el conjunto de condiciones climáticas propias de un área
reducida y representa una modificación local del clima general, debido a distintos factores,
entre los que se pueden nombrar: temperatura (T°), humedad (H), radiación y
concentración de CO2. Esta última no se considera en los invernaderos pasivos (Guzmán
y col. 2005). En la FIGURA 1, se muestra esquemáticamente, las principales variables
componentes del microclima dentro de los invernaderos.
4
PPA
HR (%) = [ ] ∗ 100 Ec. (1)
PPS
Utilizando esta carta o los datos propiamente que de esta se derivan, se pueden
tomar decisiones sobre cuánta es la magnitud energética de la que debemos disponer
para promover las condiciones de máximo confort posible en relación al objetivo buscado.
7
1.1.2.3 Déficit de Presión de Vapor (DPV). El Déficit de Presión de Vapor (DPV), es una
medida de valor, que puede ser expresada tanto en kPa u otra medida de presión. Este
valor se obtiene mediante la diferencia entre la presión saturación de vapor y la presión
real de vapor. El DPV permite relacionar la tensión actual a la que se hallan sometidas
las partículas de agua en el aire (vapor) con respecto a las condiciones térmicas en donde
este se saturaría, produciendo la condensación (punto de rocío donde se produce la HR
100%) y permite caracterizar el clima. Puede utilizarse para prevención de enfermedades,
determinar si hay riesgo de condensación (agua libre) y necesidades de riego y/o
necesidad de aumentar la humedad en el ambiente, controlar la conductancia estomática
permitiendo de esta forma controlar la fotosíntesis (Grange y Hand, 1987). También
permite caracterizar y controlar microclimas, representando una herramienta útil para
controlar desordenes fisiológicos (Prenger y Ling, 2001).
Como la planta está inmersa en una atmósfera en particular que limita su potencial
de transpiración por la cantidad de vapor que puede contener antes de llegar a 100% HR,
se pueden hacer algunas consideraciones desde el punto de vista fisiológico. Un aumento
en el DPV aumentaría la transpiración y viceversa, pero no necesariamente aumentando
la eficiencia fotosintética (Azcón-Bieto y Talón, 2000; Salisbury y Ross, 2000). Esto se
debe principalmente a la respuesta de los estomas frente al estrés hídrico modificando así
la conductancia estomática o transpiración (Hernández y col., 1989).
Para entender como éste patógeno ataca a las plantas produciendo infecciones,
es necesario conocer aspectos de su morfología y fisiología, detallados a continuación.
1.2.1 Descripción y morfología. El micelio se caracteriza por ser hialino con tabiques
transversales y conidióforos ramificados, los que al madurar se tornan grisáceos (Latorre
y Rioja, 2002; Barnett y Hunter, 2006). Las conidias son hialinas, unicelulares y de forma
ovoide o esféricas (10-12 x 8-10 µm), diseminadas por el viento y se producen en masas
abundantes sobre el hospedero (Latorre, 2007). Como estructura de resistencia, forma
esclerocios, los que son globosos y de corteza negra, al germinar originan micelio, que
formará conidióforos (Messiaen y col. 1995; Sandoval, 2004; Elad y col. 2007).
Con humedad relativa cercana al 100%, se liberan las conidias, que son
dispersadas por el viento; al tomar contacto con un hospedero susceptible, germinan,
formando un tubo germinativo con una estructura especializada denominada apresorio,
que con la hifa de penetración ingresa en los tejidos de la planta (Agrios, 1998; Ciampi,
2002; Elad y col., 2007). Posteriormente, las hifas se extienden intracelularmente
utilizando enzimas que degradan la pared celular, macerando los tejidos y generando una
pudrición blanda (Moore-landecker, (1972); citado por Milanca, 2001).
11
1.2.3 Pudriciones causadas por B. cinerea. Según Agrios (2005), este hongo genera
patologías en el cultivo, afectando a todos los órganos verdes de las plantas hospederas y
también problemas en pos cosecha, como pudriciones acuosas de frutos y hortalizas
(Morales, 1972; García y col., 2007).
1.2.4.2 Factor humedad relativa (HR). Las conidias de B. cinerea germinan entre 93 y
100% de humedad relativa (Blackeman, 1981; Salinas y col., 1989; Williamson y col.,
1995). Resultados obtenidos por Latorre y Rioja (2002) (FIGURA 6), indican que el 80%
de las conidias incubadas en placas Petri, germinan con 85% de humedad relativa,
variando la respuesta conforme al tiempo de exposición. La incidencia de la esporulación
de B. cinerea, afectará en forma diferencial según distintos tiempos de exposición a 100%
de humedad relativa y también de manera diferencial a los órganos de las plantas (Bulger
12
y col., 1987; Nair y Allen, 1993; Zhang y Sutton, 1994; Sirjunsingh y Sutton, 1996;
Shtienberg y col., 1998) (FIGURA 7). Para O’neill y col. (1997), la incidencia de tejido en
descomposición no difiere significativamente cuando la infección es incubada en alta o a
baja humedad relativa, pero la intensidad de esporulación aumenta cuando la humedad
se incrementa.
Van Den Berg y Lentz (1968), sostienen que el micelio de B. cinerea puede
sobrevivir hasta un año a baja temperatura con 90% de humedad relativa. Según Raposo
y col. (2001), con la misma humedad y temperatura de 40°C, el micelio pierde viabilidad
en condiciones controladas. Por el contrario Holz y col. (2007), establecen que los
esclerocios requieren para su conservación y sobrevivencia una condición de baja
humedad relativa (sequedad).
13
1.2.4.3 Factor precipitación. Agrios (2005), señala que las precipitaciones son una vía de
transporte de esporas de hongos, lo que podría aumentar la incidencia de infecciones,
efecto que se incrementa cuando van acompañadas de viento. En los casos de
precipitaciones intensas, se forman micro heridas o heridas de mayor nivel que generan
“puertas de entrada” a patógenos. Estudios realizados por Hunter y Rohrbach (1969),
citados por Milanca (2001), establecen que repetidos eventos de lluvias, contrarrestarían
la incidencia de pudrición gris en arándanos, debido al efecto de arrastre de inóculo que
generan las precipitaciones constantes.
una nueva búsqueda de métodos preventivos o alternativas de control, los que se basan
en un manejo integrado de la enfermedad (Elad y col. 1996; Latorre, 1997).
donde el DPV toma una ventaja comparativa con respecto al de humedad relativa
(Martínez y col. 2002; Argus, 2009).
1.2.6.1 Ventajas del DPV. Según Dik y Wubben (2007), este concepto es útil para el
manejo climático de invernaderos, al representar un valor integrativo de las variables
climáticas del invernadero como la temperatura y la humedad ambiental actuales,
integrándolas en un solo valor.
Según Ford y Thorne (1974); Grange y Hand (1987); Assmann y Grantz (1990);
Cartagena (2004), la pérdida de agua por parte de la planta, es dependiente del DPV, al
aumentar el DPV, el ambiente se seca, la planta comienza a transpirar, hasta llegar a 2
kPa, posteriormente se detiene la transpiración, cerrando sus estomas, para no perder
agua que podría plasmolizar sus células e interferir en su crecimiento (FIGURA 8). Por lo
anterior, Argus (2009), señala que el DPV podría ser usado como indicador (de manera
indirecta) de un grado de estrés hídrico en el cultivo, ya que cuando el valor del DPV es
alto, existe una baja presión de vapor(planta requiere de agua), siendo necesaria la
humidificación del ambiente, para evitar daños por falta de agua.
Entre otros factores que influyen en el crecimiento y desarrollo de los cultivos, por
ejemplo, el DPV interviene en la polinización. En el cultivo de tomate, valores inferiores a
0,2 kPa, el polen no es capaz de desprenderse de las anteras de las flores, y cuando éste
es superior a 1 kPa, no logra adherirse al estigma de la flor (Van Koot y Van Ravestun
(1963), citados por Grange y Hand, 1987).
1.2.6.2 Cálculo del DPV. Según FAO (2006), el déficit de presión de vapor se calcula
como la diferencia entre el valor de la presión de vapor de saturación (PV sat) (4) y la
presión de vapor real del aire (PV air) (5). Según Howell y Dusek (1995), para este cálculo
existen variados métodos, pero es recomendada (por su exactitud) la ecuación de
Penman-Monteith (3), utilizada ampliamente en agroclimatología.
17,27 ∗T(°C)
[237,3 +T(°C)]
PVsat = 0,61078 ∗ 𝑒 Ec. (4)
HR
PVair = [ ] ∗ PVsat Ec. (5)
100
Los valores entregados por determinación del DPV pueden ser referencias
importantes para el manejo de enfermedades. Argus (2009) describió a groso modo que
valores inferiores a 0,46 kPa, indican que hay excesiva humedad ambiental, poniendo en
riesgo al cultivo por infecciones causadas por microrganismos, por lo que es necesario
aumentar (en valor absoluto) este valor, por ejemplo ventilando para llegar a valores
ideales (0,8 a 1 kPa) según su descripción, donde no existe riesgo de infecciones para
muchos fitopatógeneos, entre ellos, B. cinerea. Valores absolutos, ≥ 1,25 kPa, indican
que la humedad ambiental está por debajo de los requerimientos vitales del desarrollo del
hongo , siendo desde este punto de vista positivo, sin embargo esto puede conducir a un
colapso estomático , siendo necesario humedecer el ambiente. Cuando el DPV se
encuentra en el rango ideal, la planta absorbe agua normalmente, evitando el estrés
19
hídrico (en términos generales, considerando que los valores cambian de acuerdo a la
fenología y tipo de cultivo) (Prenger y Ling, 2001; Argus, 2009).
1.2.6.3 Aplicaciones del DPV en invernadero. Según Prenger y Ling (2001), las
aplicaciones del DPV son múltiples, representando una herramienta de manejo climático,
hídrico y de enfermedades dentro de un invernadero.
agua libre es un factor predisponente para infecciones. De la misma forma, este autor
señala que DPV sobre 1,25 kPa, genera una alta tasa de transpiración en la planta,
pudiendo provocar plasmólisis celular, generando micro heridas que representan una vía
de ingreso a bacterias, fitoplasmas y algunos hongos fitopatógenos. Como ejemplo,
Kerssies (1994), estudió el efecto de distintos DPV en invernadero, sobre la
susceptibilidad de flores de gerbera a B. cinerea. La infectividad de las conidias, se vio
afectada por la desecación que se desencadenó por el almacenamiento de flores a un
DPV de 0,8 kPa, generando un menor número de lesiones en pétalos, sumado a la
disminución de azucares (utilizados por el hongo para maduración de conidias) de la flor,
por evaporarse rápidamente. Por el contrario, a 0,2 kPa de DPV, aumentaron su
infectividad. Estos resultados apuntan a que la humedad ambiental es fundamental para
el desarrollo de infecciones en invernadero (Kerssies y col. 1995; Shtienberg, 2007). Por
lo anterior es que Morgan (1984); Abreu y Meneses (1994); Meneses y col. (1994);
Baptista y col. (2012), establecen que la ventilación en invernaderos, reduce la humedad
relativa, aumentando el DPV, restringiendo el número de infecciones por B. cinerea.
Por otra parte, el DPV también ha sido evaluado como una herramienta
complementaria al control biológico. Estudios realizados por Mangini y Hain (1991),
evaluaron dos insectos predadores (Metaseiulus occidentallis y Neoseiulus fallacis) del
ácaro araña del abeto (Oligonychus ununguis), encontrando respuestas opuestas para
ambos biocontroladores. A DPV inferiores a 0,4 kPa, N. fallacis aumenta su población,
mientras que M. occidentallis, disminuye. Estos resultados establecen la existencia de
21
rangos de DPV en los que ambas especies biocontrolan, por lo que pueden ser emitidos
de manera diferencial, de acuerdo a DPV óptimos para cada predador.
El objetivo general de éste estudio fue determinar el efecto del DPV y los
principales factores microclimáticos, influyentes en el agroecosistema invernadero, sobre
la incidencia de pudrición gris en lechuga.
2 MATERIAL Y MÉTODO
2.3.1 Clima. Valdivia presenta un clima templado lluvioso, con influencia mediterránea,
con precipitaciones de 1871 mm anuales (Dirección Meteorológica de Chile (DMCh),
2013). La temperatura en invierno, alcanza una máxima de 10,8°C, y en verano, un valor
máximo promedio de 22,9°C (DMCh, 2008)
23
2.3.2 Suelo. La serie Valdivia presenta suelos trumaos, caracterizados por ser
profundos, de color pardo, textura moderadamente fina y pH fuertemente ácido en
superficie y ligeramente ácido en profundidad (Chile, Instituto Nacional de Investigación
de Recursos Naturales (CIREN), Corporación de Fomento a la Producción (CORFO) Y
Universidad Austral de Chile (UACh), 1978).
2.4.1 Características principales de los invernaderos. Los invernaderos son del tipo
túnel simple. Cada invernadero está compuesto por una unidad de 100 m2 de superficie
cultivable, la estructura está hecha de hierro galvanizado y cubierta de polietileno tricapa
de 180 µm de espesor. Las dimensiones son 8 m de ancho, 3,5 m de alto y 12,5 m de
largo. Los invernaderos se encuentran orientados de Este a Oeste. Cada invernadero
posee características idénticas en cuanto a estructura y almacenamiento de energía
(FIGURA 10).
24
Se utilizó lechuga (Lactuca sativa L.) cv. Justine, tipo mantecosa. El criterio de
selección de esta variedad se basó en el desempeño positivo comprobado durante tres
temporadas previas, en la zona de Valdivia. Además, su condición de “mantecosa”,
promueve tipología celular carnosa y hábitos de crecimiento que normalmente
favorecerían un nivel de infección y consecuentemente, problemas por pudrición por parte
de B. cinerea.
FIGURA 11 Plántulas con siete días de emergidas (izquierda) y plántulas con tres
semanas después de la siembra en bandejas (derecha).
26
Una vez emergidas, las plántulas fueron regadas día por medio con solución
nutritiva (ANEXO 1), hasta el día del trasplante, de acuerdo a las normas de producción
de plantines utilizadas en la industria especializada (Fundación para la Investigación
Agraria de la Provincia de Almería (FIAPA) 2005).
FIGURA 12 Preparación del suelo (A, B), bandejas con plántulas de lechuga (C),
instalación tensiómetro (D), cultivo con una semana después del
trasplante (E) y cultivo con un mes después del trasplante.
2.7.3 Riego. Se utilizó un sistema de riego por cinta de 4 Lh-1m-1, regados por un
cabezal automático. Debido a las diferencias en el manejo de la ventilación de los
invernaderos para ambos tratamientos, se establecieron manejo de riegos diferenciados
de acuerdo al uso de tensiómetros (Igrometer, mod. LT 12”, CA., USA), según la curva
PF (FIGURA 13) del suelo perteneciente a la serie Valdivia.
2.8.4 Parámetros a calcular. Los datos de temperatura (°C) y humedad relativa (%)
registrados por el datalogger, fueron ocupados por sí solos y para el cálculo de los
siguientes parámetros.
2.8.4.1 Tiempo térmico. Para el cálculo del tiempo térmico, se consideraron las
mediciones de temperatura desde el establecimiento del cultivo (26 de Abril de 2012 para
la temporada otoño-invernal y 27 de diciembre de 2012 para la temporada estival), para
ambos ensayos, hasta que finalizaron (9 de julio de 2012 para la temporada otoño-
31
𝐷í𝑎=𝑖
2.8.4.2 Déficit de presión de vapor (DPV). Para el cálculo del DPV, se consideró las
mediciones de temperatura (°C) y humedad relativa (%) desde el establecimiento del
cultivo para ambos ensayos, hasta la finalización de éstos. Los cálculos se hicieron en
base a las ecuaciones 3, 4 y 5.
N° Plantas enfermas
Incidencia de 𝐵. 𝑐𝑖𝑛𝑒𝑟𝑒𝑎 (%) = ∗ 100 Ec. (7)
N° Total de plantas
(*) Una vez elaborado el medio y puesto en las placas Petri, se realizaron pruebas
previas al montaje en las trampas de esporas, donde se evaluó el medio selectivo frente a
cuatro hongos de carácter cosmopolita: Penicillium sp., Asperguillus sp. y Trichoderma
sp., donde se observó su comportamiento posterior a 72 h de incubación en estufa a 20
°C ± 2 °C en oscuridad.
35
FUENTE: Adaptado de Great Britain, Ministry of Agriculture, Fisheries and Food (1976).
Para este tipo de análisis paramétrico, se requiere que los datos cumplan con las
siguientes condiciones en orden de importancia: independencia de residuos,
homogeneidad de varianza y normalidad de residuos. La normalidad de datos fue
evaluada mediante la prueba de Shapiro-Wilk.
Los análisis de regresión y los ANDEVA, fueron realizados por medio del programa
estadístico STATGRAPHICS CENTURION XV.II. y graficados mediante el programa
MICROSOFT OFFICE EXCEL 2013.
38
3 RESULTADOS Y DISCUSIÓN
CUADRO 1 Medias de temperatura (°C), humedad relativa (%) y DPV (kPa), para el
tratamiento de 25 y 75% de ventilación, para la temporada otoño-
invernal y estival.
Finalmente, cabe considerar que aunque las diferencias pueden ser menores, sólo
deben ser tomadas como referenciales, pues el efecto final esta normado además por el
segmento en donde se producen estas variabilidades en las escalas de valor.
41
por Harrison (1984); Wei (1995, citado por Baptista, 2007). Posterior a esto, se generó un
punto de inflexión aproximadamente a los 0,11 kPa para ambos tratamientos, hasta llegar
al valor máximo de incidencia a 0,12 y 0,13 kPa para el tratamiento de 25 y 75% de
ventilación, respectivamente. Sobre este valor, comienza a descender el porcentaje de
infección hasta 0,15 y 0,16 kPa para el tratamiento de 25 y 75% de ventilación,
respectivamente, para caer hasta 0,18 y 0,19 kPa, para el tratamiento de 25 y 75% de
ventilación, respectivamente, finalmente, sobre 0,19 y 0,20 kPa, para el tratamiento de 25
y 75% de ventilación, respectivamente, no se expresarían infecciones causadas por el
moho gris.
Si bien, la tabla de DPV propuesta por Argus (2009), es general para el manejo
microclimático dentro de un invernadero, incorporó el manejo fitosanitario de manera
preventiva al ataque de patógenos cuando el valor del DPV fuese inferior a 0,46 kPa, pero
entregando un umbral de ataque amplio en valor de DPV y especificidad de patógeno. Por
la razón anterior, al establecer los rangos de DPV que generan patologías significativas
45
en invernadero (que para este estudio se basó en el DPV que generó una inflexión en el
incremento de la incidencia relativa de B. cinerea), se logró establecer para un sólo
patógeno específicamente, ampliamente distribuido (Agrios, 2005) y con significancia de
ataque importante dentro de una cosecha de productos vegetales (Latorre, 2007), como
los del área forestal, hortícola (Abreu y col., 1999) y frutícola, un rango acotado de DPV y
para una zona específica (Valdivia, con un clima templado marítimo lluvioso), la cual
muestra una potencialidad en la producción hortícola bajo invernadero.
Los rangos descritos por Argus (2009), expuestos en la FIGURA 20, establecen
que todo DPV que se encuentre por debajo de los 0,46 kPa, son predisponentes para
ataque de patógenos generando algún tipo de problema fitosanitario. Prenger y Ling
(2001), coinciden con este valor, pero no logra determinar un porcentaje de incidencia que
podría considerarse significativo, por lo que pierde valor la cifra.
Para la modificación del cuadro propuesto por Argus (2009), se tomó en cuenta los
siguientes rangos, establecidos en la FIGURA 19, para el tratamiento de 75% de
ventilación, ya que este fue el que presentó un valor reducido de incidencia relativa en
comparación al tratamiento de 25% de ventilación. Por lo anterior y según la FIGURA 20,
se establecieron los siguientes umbrales de daño por la incidencia relativa de B. cinerea:
0,00 - 0,11 kPa, donde ocurre un incremento rápido de la incidencia relativa, por lo que la
planta se encuentra altamente susceptible a la infección. Entre 0,12 - 0,13 kPa el
incremento es cada vez menor, por lo que la planta es medianamente susceptible a la
infección. Cuando el DPV está entre 0,14 - 0,16 kPa, comienza a decrecer lentamente la
incidencia, por lo que en ese momento la planta resiste el posible riesgo de infección.
Finalmente, entre los 0,17 - 0,19 kPa, el decrecimiento de la incidencia es rápido, por lo
que el riesgo por infección es mínimo. No se registró incidencia relativa por sobre los 0,20
kPa, por lo que la planta se encuentra no susceptible a la infección. En el establecimiento
de estos nuevos rangos de ataque de B. cinerea, otros autores como Broome y col.
(1995), fijaron un valor superior de prevención para ataques por B. cinerea, estableciendo
un valor de DPV por sobre los 0,5 kPa, garantiza una mínima incidencia de este
patógeno, lo que concuerda con esta investigación, ya que sobre este valor (0,5 kPa en la
temporada estival), la incidencia del hongo fue inferior al 5%.
46
FIGURA 20 Umbrales de DPV, según incidencia relativa de B. cinerea. A la izquierda, el cuadro descrito por
Argus (2009), donde el color rojo supone riesgo por infecciones; amarillo: alerta a los posibles
cambios del DPV; verde: sin riesgo por infecciones y celeste: es necesario humedecer el ambiente.
A la derecha, la nueva propuesta (en base al tratamiento de 75% de ventilación), donde el rojo:
incremento rápido de incidencia; amarillo: incremento lento de incidencia; verde: decrecimiento
lento de incidencia; celeste: decrecimiento rápido de incidencia y naranjo: sin incidencia.
47
compartidos por Bulger y col. (1987), quienes establecieron que con 8 h sobre el 90% de
humedad relativa, B. cinerea alcanzó menos del 10% de incidencia en flores de frutillas.
Con valores similares, Sirjunsingh y Sutton (1996), indicaron que la incidencia de
esporulación a esta misma cantidad y duración de humedad relativa, fue de 70% en
pétalos de geranio.
FIGURA 23 Número de horas por día con humedad relativa sobre el 90%, durante
la temporada otoño-invernal (1°) y estival (2°), según tratamiento.
Líneas perpendiculares a las barras, indican media de la temporada.
53
El número de horas total con humedad relativa sobre el 90% para la temporada
otoño-invernal y estival, se observan en el CUADRO 2, donde se señala la diferencia en
unidades, que provocaron los diferentes manejos de la ventilación.
CUADRO 2 Número total de horas con humedad relativa por sobre el 90%, según
la incidencia total en invernadero, por cada tratamiento y temporada
productiva.
Tratamiento Temporada otoño-invernal Temporada estival
N° h totales Inc. total (%) N° h totales Inc. total (%)
25% ventilación 1510 71 380 19
75% ventilación 1422 64 293 16
Diferencia 94 7 87 3
en la temporada estival, donde posterior a los 40 días después del trasplante, la tasa de
incidencia se vio incrementada, con respecto a los días anteriores.
superiores. Este paso del aire, según Savage y Sall (1984); Gubler y col. (1987); Thomas
y col. (1988); Ellis y col. (1991); Elmer y Michailides (2007), es fundamental para el
secado de las hojas posteriores a un riego en invernadero o precipitaciones en campo
abierto, lo que estaría actuando como factor de disminución de riesgo de infección en esta
etapa. Finalmente la incidencia aumentó nuevamente, con valores sobre el 10%, durante
el sexto y octavo estado fenológico, (60 días después del trasplante), que comprenden la
formación de la cabeza (FIGURA 25).
FIGURA 28 Pruebas previas en medio ASB. Placas Petri con B. cinerea (A),
Aspergillus sp. (B), Penicillium sp. (C) y Trichoderma sp. (D), luego de
ser incubadas a 20 °C +/- 2 °C, durante 72 h en oscuridad.
Penicillium sp. y Trichoderma sp. (FIGURA 28), fueron diferentes, estos hongos
lograron crecer en la placa Petri, pero se observó que fueron incapaces de generar el
cambio en la coloración de medio, cambio que según Kerssies (1990), es fundamental
para la identificación de B. cinerea en este medio, ya que este hongo produce la enzima
polifenoloxidasa (PPO), que reacciona con el ácido tánico del medio diferencial,
produciendo el cambió de coloración a marrón oscuro (existen otros hongos que producen
la PPO, pero fueron inhibidos por el fungicida y el antibiótico adicionado).
64
4 CONCLUSIONES
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ANEXOS
Para la preparación del medio ASB, formulado por Kerssies (1994), se siguieron
los siguientes pasos:
ANEXO 4 Evolución diaria de la humedad relativa (%) del aire dentro de los
invernaderos, durante la temporada otoño-invernal (1°) y estival (2°),
para tratamientos de 25% y 75% de ventilación.
90
ANEXO 5 Evolución diaria del DPV (kPa) del aire dentro de los invernaderos,
durante la temporada otoño-invernal (1°) y estival (2°), para tratamientos
de 25% y 75% de ventilación.
91
2° estado fenológico
Suma de Cuadrados Tipo III
Fuente Suma de Cuadrados Gl Cuadrado Medio Razón-F Valor-P
Temporada 5,97841 1 5,97841 1,91 0,3988 NS
ventilación 3,13141 1 3,13141 1,00 0,5000 NS
Temporada*ventilación 3,13141 1 3,13141 2,34 0,1644 NS
Residuo 10,6921 8 1,33651
Total (corregido) 22,9333 11
3° estado fenológico
Suma de Cuadrados Tipo III
Fuente Suma de Cuadrados Gl Cuadrado Medio Razón-F Valor-P
Temporada 163,762 1 163,762 338,35 0,0346 *
ventilación 0,533408 1 0,533408 1,10 0,4845 NS
Temporada*ventilación 0,484008 1 0,484008 0,05 0,8303 NS
Residuo 78,9724 8 9,87155
Total (corregido) 243,752 11
4° estado fenológico
Suma de Cuadrados Tipo III
Fuente Suma de Cuadrados Gl Cuadrado Medio Razón-F Valor-P
Temporada 0,0833333 1 0,0833333 0,03 0,8949 NS
ventilación 3,4347 1 3,4347 1,14 0,4785 NS
Temporada*ventilación 3,0 1 3,0 2,06 0,1894 NS
Residuo 11,6667 8 1,45833
Total (corregido) 18,1847 11
5° estado fenológico
Suma de Cuadrados Tipo III
Fuente Suma de Cuadrados Gl Cuadrado Medio Razón-F Valor-P
Temporada 14,279 1 14,279 16,02 0,1558 NS
ventilación 0,468075 1 0,468075 0,53 0,6007 NS
Temporada*ventilación 0,891075 1 0,891075 0,53 0,4882 NS
Residuo 13,5029 8 1,68786
Total (corregido) 29,141 11
92
6° estado fenológico
Suma de Cuadrados Tipo III
Fuente Suma de Cuadrados Gl Cuadrado Medio Razón-F Valor-P
Temporada 334,541 1 334,541 16,41 0,1541 NS
ventilación 18,6501 1 18,6501 0,91 0,5141 NS
Temporada*ventilación 20,3841 1 20,3841 1,57 0,2456 NS
Residuo 103,879 8 12,9848
Total (corregido) 477,454 11
7° estado fenológico
Suma de Cuadrados Tipo III
Fuente Suma de Cuadrados Gl Cuadrado Medio Razón-F Valor-P
Temporada 7,26963 1 7,26963 0,57 0,5885 NS
ventilación 8,5683 1 8,5683 0,67 0,5631 NS
Temporada*ventilación 12,772 1 12,772 2,14 0,1820 NS
Residuo 47,8364 8 5,97955
Total (corregido) 76,4464 11
8° estado fenológico
Suma de Cuadrados Tipo III
Fuente Suma de Cuadrados Gl Cuadrado Medio Razón-F Valor-P
Temporada 158,341 1 158,341 21,55 0,1351 NS
ventilación 0,0990083 1 0,0990083 0,01 0,9264 NS
Temporada*ventilación 7,34767 1 7,34767 1,05 0,3347 NS
Residuo 55,7985 8 6,97482
Total (corregido) 221,586 11
Tabla ANDEVA para Otoño_invernal por ventilación (datos transformados con arcsen ((√x)/100))
Fuente Suma de Cuadrados Gl Cuadrado Medio Razón-F Valor-P
Entre grupos 0,0000166667 1 0,0000166667 0,14 0,7247 NS
Intra grupos 0,000466667 4 0,000116667
Total (Corr.) 0,000483333 5
Tabla ANDEVA para Estival por ventilación (datos transformados con Ln(x))
Fuente Suma de Cuadrados Gl Cuadrado Medio Razón-F Valor-P
Entre grupos 0,0640667 1 0,0640667 0,85 0,4079 NS
Intra grupos 0,300333 4 0,0750833
Total (Corr.) 0,3644 5