INTRODUCCIÓN

I. INTRODUCCIÓN

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Introducción

La espectroscopia UV-vis es el estudio de cómo una muestra responde a la luz. Cuando

un haz de luz pasa a través de una sustancia o de una solución, parte de la luz puede ser
absorbida y el resto transmite a través de la muestra. La relación de la intensidad de la luz
que entra en la muestra (I0) y la que sale de la muestra (It) a una longitud de onda
particular se define como la transmitancia (T). Esto a menudo se expresa como el
porcentaje de transmitancia (%T), que es la transmitancia multiplicado por 100:
%T=(I0/It)* 100. El rango del espectro electromagnético UV-vis cubre el rango de 190-
700nm (la mayoría de los instrumentos son capaces de medir a longitudes de onda más
largas que esto, dependiendo de su tipo de detector). La reflectancia espectral de un
componente químico cromático se caracteriza generalmente por un máximo significativo
(e.g., violeta, azul, verde) o una fuerte subida para longitudes de onda superiores (e.g.,
amarillo, naranja, rojo) en el rango de longitud de onda del color complementario. Existe
la absorción máxima en un rango de longitud de onda de un mínimo de reflexión distinta;
retro dispersión. Sin embargo, domina en el intervalo de reflexión máxima o la región de
la meseta del componente químico cromático correspondiente. En contraste, un color
acromático muestra una reflectancia espectral casi constante (Klein, 2010). Los
componentes químicos cromáticos se componen de compuestos inorgánicos y orgánicos
que, en cualquier caso, se forman cristalitos a veces de diferentes tipos. Las dimensiones
de cristalitos son típicamente del mismo orden de magnitud menor que las longitudes de
onda de la luz. Debido a las separaciones de carga en multipolos, los cristalitos
morfológicos no uniformes a veces conglomerado para formar partículas de forma
diferente con tamaños de 10 nm como 1 μm de tamaño. Se puede observar en la Tabla 1
que la luz y los colores complementarios invierten sus papeles en una longitud de onda
de aproximadamente 560 nm (Sahin y Sumnu, 2006).

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Las ondas electromagnéticas viajan a la velocidad de la luz y se caracterizan por su
frecuencia (f) y la longitud de onda (λ). En un medio, estas dos propiedades están
relacionadas por: c= ƒλ. donde c es la velocidad de la luz en el vacío (3.0x108m/s). La
radiación puede exhibir propiedades de ambas ondas y partículas. La luz visible actúa
como si se realiza en unidades discretas llamadas fotones. Cada fotón tiene una energía,
E, que se puede calcular por: E=Hƒ donde H es la constante de Planck (6.626x10-34J.s)
(Allen,2008).

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II. OBJETIVO

 Conocer el comportamiento de los perfiles de espectro electromagnético de

diferentes componentes químicos cromáticos.

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 III. MARCO TEÓRICO

Espectro electromagnético

Según (Skoog,2001) Flujo saliente de energía de una fuente en forma de ondas

electromagnéticas se le denomina radiación electromagnética. Esta radiación puede ser
de origen natural o artificial. El espectro electromagnético es el conjunto de todas las
frecuencias (número de ciclos de la onda por unidad de tiempo) posibles a las que se
produce radiación electromagnética.

División del espectro electromagnético

Según (Gonzales,2004) No todas las ondas electromagnéticas tienen el mismo

comportamiento en el medio de propagación, la misma procedencia o la misma forma de
interacción con la materia. Por ello, el espectro electromagnético se divide
convencionalmente en segmentos o bandas de frecuencia.

La clasificación más típica del espectro electromagnético establece las siguientes

categorías de radiación electromagnética:

 Ondas subradio.
 Ondas radioeléctricas.
 Microondas.
 Rayos T.
 Rayos infrarrojos.
 Luz visible.
 Rayos ultravioleta.
 Rayos X.
 Rayos gamma.
 Rayos cósmicos.

Espectrofotómetro

El espectrofotómetro es un instrumento usado en la física óptica que sirve para medir, en

función de la longitud de onda, la relación entre valores de una misma magnitud
fotométrica relativos a dos haces de radiaciones. También es utilizado en los laboratorios
de química para la cuantificación de sustancias y microorganismos.

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Absorbancia

Según (Nieves, 2010) Medida de la cantidad de luz absorbida por una solución. Se mide
con un colorímetro o con un espectrómetro. Los valores de la absorbancia se usan para
detectar el crecimiento de bacterias en cultivos en suspensión y para determinar la
concentración de moléculas en solución.

Cuando un haz de luz incide sobre un cuerpo traslúcido, una parte de esta luz es absorbida
por el cuerpo, y el haz de luz restante atraviesa dicho cuerpo. A mayor cantidad de luz
absorbida, mayor será la absorbancia del cuerpo, y menor cantidad de luz será transmitida
por dicho cuerpo. Como se ve, la absorbancia y la transmitancia son dos aspectos del
mismo fenómeno. La absorbancia, a una determinada longitud de onda lambda, se define
como:

Transmitancia

La transmitancia se define como la cantidad de energía que atraviesa un cuerpo en

determinada cantidad de tiempo.Existen varios tipos de transmitancia, dependiendo de
qué tipo de energía consideremos.

La transmitancia óptica se refiere a la cantidad de luz que atraviesa un cuerpo, en una

determinada longitud de onda. Cuando un haz de luz incide sobre un cuerpo traslúcido,
una parte de esa luz es absorbida por el mismo, y otra fracción de ese haz de luz
atraversará el cuerpo, según su transmitancia. El valor de la transmitancia óptica de un
objeto se puede determinar según la siguiente expresión:

Espectrofotometría UV visible

Según (Brunatti,S/A) La espectrofotometría uv-visible (UV-VIS) es una práctica

analítica que permite determinar la concentración de un compuesto en solución. Se basa
en la medición de absorción de radiación UV o visible por determinadas moléculas, la
radiación correspondiente a estas regiones del espectro electromagnético causa

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transiciones electrónicas a longitudes de onda característica de la estructura molecular de
un compuesto.

El espectrofotómetro uv-visible es un instrumento óptico que tiene la capacidad de

resolver radiaciones de diferentes longitudes de onda dentro del rango ultravioleta y
visible (por lo general este rango se encuentra dentro de los valores de 190 a 1,100 nm).
En espectrofotometría de absorbancia se utilizan las regiones del ultravioleta (UV
cercano, de 195-400 nm) y el visible (400-780 nm). La región UV se define como el rango
de longitudes de onda de 195 a 400 nm. Es una región de energía muy alta.

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IV. MATERIALES Y EQUIPOS

Espectrofotómetro Etanol al 50%.

Pipetas de plástico Vasos de precipitación de 50 mL.

Componentes químicos cromáticos: tartrazina (C16H9N4Na3O9S2), rojo allura

AC (C18H4N2Na2O8S2) y azul brillante FCP (C37H34N2Na209S3)

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 V. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

PASO 1: Se hace uso de los vasos de precipitación para recoger las muestras (tartrazina,
rojo allura AC y azul brillante FCP) y disolvente necesario para obtener una solución.

PASO 2: Para las soluciones se mezclaron cada colorante con el etanol y se virtieron
cantidades pequeñas en las celdas de plástico que se colocarán en el espectrofotómetro
para calcular cada absorbancia y longitud de onda.

PASO 3: Se coloca un “blanco” (celda de plástico que contiene agua o etanol en nuestro
laboratorio) para obtener 0 de absorbancia.

PASO 4: Una vez el equipo muestre 0 de absorbancia, se procede a realizar las lecturas
de absorbancia de nuestras mezclas (mediante la celda de plástico que contiene las tres
muestras) en diferentes longitudes de onda desde 375nm hasta 750 nm incrementando la
longitud de onda en 50nm por cada medida.

PASO 5: Para cada medición en diferentes longitudes de onda, primero se debe colocar
el “blanco” y poner en 0 la absorbancia, luego realizar la medición de absorbancia en la
longitud de onda deseada.

PASO 6: Tomar nota de las distintas absorbancias de cada muestra a una determinada
longitud de onda, para luego poder graficar.

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 VI. CÁLCULOS Y RESULTADOS

Tabla N° 1. Tabla de absorbancias a una respectiva longitud de onda

ABSORBANCIA (nm)
MUESTRA 1 MUESTRA2 MUESTRA 3
LONGITUD DE
ROJO AZUL
ONDA (𝝀) TARTRAZINA
ALLURA BRILLANTE
375 0.209 0.566 0.325
400 0.331 0.585 0.335
425 0.379 0.569 0.274
450 0.323 0.612 0.241
475 0.167 0.852 0.245
500 0.022 1.059 0.270
525 0.006 0.937 0.166
550 0.011 0.613 0.183
575 0.066 0.260 0.229
600 0.002 0.160 0.296
625 0.003 0.141 0.517
650 0.004 0.135 0.333
675 0.004 0.136 0.110
700 -0.001 0.107 0.081
725 -0.005 -0.110 0.079
750 -0.007 0.082 0.066
Fuente: Elaboración propia

Gráfico N° 1: Comportamiento de las concentraciones a distintas longitudes de honda

1.2

0.8
Absorbancia (nm)

0.6 Series1
Series2
0.4
Series3
0.2

0
0 100 200 300 400 500 600 700 800
-0.2
Longitud de honda (𝜆)

Fuente: Elaboración propia

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 VII. DISCUSIÓN DE RESULTADOS

De acuerdo con la Gráfico N°1, se han registrado la máxima longitud de onda y su

absorbancia, son los siguientes:

 TARTRAZINA: Longitud de Honda (λ): 425, Absorbancia (nm): 0,379.

 ROJO ALLURA: Longitud de Honda (λ): 500, Absorbancia (nm): 1.059.
 AZUL BRILLANTE: Longitud de Honda (λ): 625, Absorbancia (nm): 0,517.

 A través de los resultados en la tabla 1 podemos observar que la muestra 2 (rojo

allura), presenta una mayor absorbancia de 1.059 nm además, también se puede
observar que la muestra 1 (tartrazina) presenta una menor absorbancia de
0.379nm.
 En la muestra 1 (tartrazina), los datos obtenidos del experimento no son exactos
ya que se utilizó una gaseosa (inka cola) yaqué, posiblemente no se le haya quitado
todo el gas al momento de realizar el experimento a comparación del rojo allura
o azul brillante (sporade) que eran muestras sin gas.

VIII. CONCLUSIONES

 De este laboratorio podemos inferir que cada color a diferentes longitudes de onda
tiene una absorbancia diferente o similar a una anterior tal es el caso del rojo allura
que va de una longitud de onda de 375-400nm.
 Luego de haber visto el espectro de absorción de cada una de las sustancias
utilizadas en el laboratorio como tartrazina, rojo allura y azul brillante podemos
observar que es una curva en donde nos mostrara la cantidad de energía absorbida
es decir absorbancia por cada sustancia en una determinada longitud de onda del
espectro magnético entonces podemos interpretar de la siguiente manera, que una
determinada longitud de onda la energía radiante de cada sustancia absorbe una
cantidad de radiación que es distinta a la que absorbe otro compuesto.
 La absorción de las muestras utilizadas se produce en distintas longitudes de onda
por lo que no hay picos bien definidos aún más cuando utilizamos o hacemos
interaccionar con el disolvente como el etanol a una concentración del 50%.

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IX. RECOMENDACIONES
 Tener mucho cuidado al utilizar el espectrofotómetro.
 Las celdas donde colocamos las muestras deben ser colocadas
correctamente en el espectrofotómetro.
 Las celdas con las muestras tienen que estar limpias para que nos de
una absorbancia al 99.9%.
 No olvidar que debemos lavar las celdas con agua destilada después
de cada uso de muestra.
X. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
 Alien, J. P. (2008). Quantum mechanics and spectroscopv. In J. P. Alien (Eds.),
Biophysical chemistry. West Sussex, UK: John Wiley & Sons Ltd. p 292-344.
 Brunatti, C., Martín A. (S/A). Introducción a la Espectroscopia de Absorción
Molecular Ultravioleta, Visible e Infrarrojo Cercano.
 Gonzales,R. (2004) Calibracion de espectofotometro Ultravioleta-visible
 Nieves, A. (2010). Espectrofotometría: espectros de absorción y cuantificación
colorimétrica de biomoleculas. Departamento de Bioquímica y Biología
molecular. Córdoba, España
 Sahin, S. Sumnu, S. G. (2006). Physical properties of foods. New York, USA:
Springer Science+Business Media, LLC.
 Skoog,D.A,Holler, F.J y T.A. Nieman(2001) Principios del análisis instrumental,
5ta edición, Editora I McGraw-Hill,Mexico

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XI. ANEXOS

ANEXO 1: Espectro electromagnético

ANEXO 2: El espectro electromagnético se divide en segmentos o bandas

ANEXO 3: Tipos de espectro

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